Name: Laboratuvar Farelerinden Süt Örneklemesi için Verimli Bir Tek Kişilik Teknik (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-03-28T13:45:00.000+00:00
Duration: 4 min 56 s
Description: Öğrenin, laboratuvar farelerinden tek kişilik vakum cihazıyla süt örnekleme yöntemini. Bu teknik, 10 dakikada 0,1-0,5 mL süt toplar ve laktasyon araştırmalarında veri doğruluğunu artırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Tüm hayvan bakımı ve deneysel prosedürler federal yönergeleri takip etti ve Rutgers Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi'nden onay aldı. Dişi fareler (C57BL / 6 arka plan) 8 haftalıkken çiftleştirildi. Standart bir damızlık chow ad libitum ile beslendiler ve düzenli bir 12:12 h aydınlık:karanlık döngüsü altında tutuldular. Teslimat günü, teslimat sonrası 1. gün (PD1) olarak sayıldı. PD2 (erken laktasyon) ve PD10'da (pik laktasyon), süt aşağıda tarif edildiği gibi örneklendi.
1. Bir sağım cihazının montajı 
<ol>
	<li>5/32" iç çaplı (ID) polivinil klorür (PVC) borunun bir ucunu vakum pompasına takın ve eki sabitlemek için bant kullanın (Şekil 1A'da a olarak etiketlenmiştir). NOT: Vakum pompası, laboratuvarda bulunan herhangi bir uygun pompa veya merkezi bir vakumla (bazen "ev vakumu" olarak da adlandırılır) değiştirilebilir.</li>
	<li>5/32" ID PVC borunun diğer ucunu dikenli düz bir konektör aracılığıyla 1/8" ID PVC boruya takın.</li>
	<li>1/8" ID PVC borunun diğer ucunu bir konektör aracılığıyla 18G hipodermik iğneye takın (Şekil 1A'da b olarak etiketlenmiştir).</li>
	<li>Daha büyük bir açıklık oluşturmak için P200 pipet ucunun ucunu ~0,2 cm kesin. P200 pipet ucunu, uç yukarı bakacak şekilde septum durdurucunun açıklığından geçirin (Şekil 1B). NOT: Pipet uçlarını hayvanlar arasında değiştirin.</li>
	<li>Septum durdurucuyu steril bir toplama tüpüne takın. 18 G hipodermik iğne ile septum durdurucudan bir delik açın.</li>
	<li>Vakum pompasını açarak ve bir parmağınızı (laboratuvar eldiveni ile kaplı) pipet ucu açıklığına dayayarak emme basıncını kontrol edin. NOT: Doğru şekilde monte edilmişse hafif bir emiş hissetmelisiniz. Toplama tüpü, 18 G hipodermik iğne ve P200 pipet uçları steril olmalıdır.</li>
</ol>
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67669/67669fig1.jpg"> 
Resim 1: Süt sağım cihazı. (A) PVC boru ile 18 G hipodermik iğneye bağlı bir vakum pompalı sağım cihazı. İğne, bir mikrosantrifüj toplama tüpüne bağlı bir septum durdurucudan geçer. Bir emzirden süt çekmek için kullanılan ters çevrilmiş bir P-200 pipet ucu, septum durdurucunun bir açıklığından sokulur. (B) Sağım cihazının kesit diyagramı. (C) Tarif edilen yöntem kullanılarak sağılan bir baraj. (D) En yüksek laktasyonda bir barajdan toplanan sütün temsili bir alikotu (0.3 mL). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67669/67669fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
2. Barajın yavrulardan ayrılması
<ol>
	<li>Sağım gününde, bezlerde süt birikmesine izin vermek için barajı yavrularından ayırın.</li>
	<li>Yavruları bir yuvada sıcak tutun.</li>
	<li>Erken laktasyon sırasında süt toplanırsa 2 saat ayrılmaya izin verin (ör., bu çalışmada PD2).</li>
	<li>En yüksek laktasyon sırasında süt toplanırsa 30-45 dakika ayırmaya izin verin (ör., bu çalışmada PD10).</li>
</ol>
3. Barajın anestezisi
<ol>
	<li>Baraj sağılmaya hazır olduğunda, 4. ve 5. meme başları arasındaki periton boşluğunun bir tarafına bir ketamin / ksilazin çözeltisi (intraperitoneal, ip) enjeksiyonu uygulayın. NOT: Uygulanacak anestezik solüsyon miktarı barajın ağırlığına göre hesaplanır (Rutgers Üniversitesi IACUC protokolüne göre 80-100 mg / kg ketamin, 5-12 mg / kg ksilazin). Bu doz, bir fareyi 45-60 dakika boyunca sakinleştirir ve süt toplama için yeterli zaman sağlar.</li>
	<li>Hayvanın his ve ağrı algısını test etmek için bir ayağı sıkıca sıkarak, ancak yaralamadan anesteziyi onaylayın. Yeterli anestezi, herhangi bir hareket olmaması ile gösterilir.</li>
	<li>Anestezi altındayken kuruluğu önlemek için barajın gözlerine veteriner oftalmik merhem sürün.</li>
</ol>
4. Süt toplama
<ol>
	<li>Anestezi uygulanmış barajı sırtına sağlam bir çalışma yüzeyine yerleştirin. Sağımdan önce alanı temizlemek için meme bölgesini steril bir alkol hazırlık mendili ile nazikçe silin.</li>
	<li>Periton boşluğunun herhangi bir enjeksiyon yapılmamış tarafındaki 4. ve 5. meme başları çifti arasına 1-2 ünite oksitosin (i.p.) uygulayın. NOT: Oksitosin, hızlı bir şekilde emilemeyen ve kısa bir yarı ömre sahip küçük bir moleküldür 14,15. Sağım, enjeksiyondan bir dakika sonra başlamalıdır.</li>
	<li>Baskın olmayan elinizle boyun bölgesini nazikçe sıkarak barajı tutun.</li>
	<li>Bir meme ucundan elde edilen sütü, meme dokusunu tabandan meme ucuna kadar bir boncuk süt görünene kadar sıkarak manuel olarak ifade edin.</li>
	<li>Güç düğmesini açarak vakum cihazını açın.</li>
	<li>Ters çevrilmiş P200 pipet ucunu bir emziğe nazikçe uygulayarak sağıma başlayın. Sütün çekilmesine yardımcı olmak için hafif bir çekme hareketi kullanın (Şekil 1C).</li>
	<li>Yeterli hacimde süt toplanana kadar tüm meme başlarında 4.4–4.6 adımlarını tekrarlayın. NOT: Sağım sırasında süt yanlışlıkla vakum hattının 18 G hipodermik iğnesine veya PVC borusuna çekilebilir. Bu, bir sonraki hayvanı sağmadan önce iğneyi veya PVC boruyu değiştirerek kolayca giderilebilir.</li>
</ol>
5. Süt toplandıktan sonra barajın geri kazanılması
<ol>
	<li>Anestezi uygulanmış barajı yavrularıyla birlikte kafese geri koyun ve sıcak tutun. Bilinci yerine gelene kadar hayvanı izleyin. NOT: Yavrularına dönmeden önce ayrı bir kafeste kendi başına uyanmasına izin verilirse, baraj tekrar emzirmeyi reddedebilir. Bu, süt toplama erken laktasyon (PD2) sırasında gerçekleştiğinde daha yaygındır.</li>
	<li>Uyanmaya başladığında tamamen iyileşmek için barajların yavrularından uzaklaşmasına izin verin; Bu normal bir davranıştır. NOT: Barajların periyodik olarak yavrularına döndüklerini ve birkaç saat sonra tamamen emzirmeye döndüklerini gözlemliyoruz.</li>
</ol>
6. Süt analizi
<ol>
	<li>Süt laktozunu ölçmek için ticari bir laktoz test kiti ( Malzeme Tablosuna bakınız) kullanın. Sütü 75x steril su ile seyreltin ve testi kit protokolüne göre gerçekleştirin.</li>
	<li>Diğer yayınlarda gösterilen kremaokrit yöntemini kullanarak süt yağını ölçün16,17.</li>
	<li>Bradford protein testini18 standart19 olarak sığır serum albümini ile gerçekleştirerek süt proteinini tahmin edin. Testi gerçekleştirmeden önce sütü 4.000 × g'da 4 °C'de 15 dakika santrifüjleyin. Ekstrakte ederek ekstrakte edin ve tahlilden önce steril su ile 1:10 oranında seyreltin.</li>
	<li>Poliakrilamid jel elektroforezi gerçekleştirin (PAGE); 10 μg proteini, üretici tarafından talimat verildiği şekilde prekast %4-12 Bis-Tris jeli üzerinde ayırın. Proteinleri poliviniliden florür (PVDF) membranlarına aktarın ve bunları Coomassie Blue R-250 ile boyayın.</li>
</ol>

<meta charset="utf8"></head><body>Farelerin Laktasyon Çalışmalarında Süt Toplama için Optimize Edilmiş Tek Kişi Yöntemi

<ol><li>Ericsson, A. C., Crim, M. J., Franklin, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+brief+history+of+animal+modeling%5BTitle%5D)+AND+%22Mo+Med%22%5BJournal%5D)">A brief history of animal modeling.</a> Mo Med. 110 (3), 201-205 (2013).</li>
<li>Bryda, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mighty+mouse%3A+The+impact+of+rodents+on+advances+in+biomedical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Mo+Med%22%5BJournal%5D)">The mighty mouse: The impact of rodents on advances in biomedical research.</a> Mo Med. 110 (3), 207-211 (2013).</li>
<li>Watford, M., Erbelding, E. J., Smith, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glutamine+metabolism+in+rat+small+intestine%3A+Response+to+lactation%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+Soc+Trans%22%5BJournal%5D)">Glutamine metabolism in rat small intestine: Response to lactation.</a> Biochem Soc Trans. 14 (6), 1058-1059 (1986).</li>
<li>Robinson, A. M., Williamson, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+glucose+metabolism+in+the+lactating+mammary+gland+of+the+rat+in+vivo+and+in+vitro.+Effects+of+starvation%2C+prolactin+or+insulin+deficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+J%22%5BJournal%5D)">Comparison of glucose metabolism in the lactating mammary gland of the rat in vivo and in vitro. Effects of starvation, prolactin or insulin deficiency.</a> Biochem J. 164 (1), 153-159 (1977).</li>
<li>Kowalski, T. J., Wu, G., Watford, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+adipose+tissue+amino+acid+metabolism+in+vivo+as+assessed+by+microdialysis+and+arteriovenous+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Rat adipose tissue amino acid metabolism in vivo as assessed by microdialysis and arteriovenous techniques.</a> Am J Physiol. 273 (3 Pt 1), E613-E622 (1997).</li>
<li>Ashcroft, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+to+assess+arteriovenous+differences+across+the+liver+and+hindlimb+muscles+in+mice+following+treadmill+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol to assess arteriovenous differences across the liver and hindlimb muscles in mice following treadmill exercise.</a> STAR Protoc. 4 (1), 101985(2023).</li>
<li>Hallemeesch, M. M., Ten Have, G. A., Deutz, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+flux+measurements+across+portal+drained+viscera%2C+liver%2C+kidney+and+hindquarter+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Metabolic flux measurements across portal drained viscera, liver, kidney and hindquarter in mice.</a> Lab Animal. 35 (1), 101-110 (2001).</li>
<li>Le, H., Nguyen, M., Manso, H. E. C., Wang, M. D., Watford, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipocytes+are+the+only+site+of+glutamine+synthetase+expression+within+the+lactating+mouse+mammary+gland%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Dev+Nutr%22%5BJournal%5D)">Adipocytes are the only site of glutamine synthetase expression within the lactating mouse mammary gland.</a> Curr Dev Nutr. 8 (6), 102168(2024).</li>
<li>Giordano, A., Smorlesi, A., Frontini, A., Barbatelli, G., Cinti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((White%2C+brown+and+pink+adipocytes%3A+The+extraordinary+plasticity+of+the+adipose+organ%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">White, brown and pink adipocytes: The extraordinary plasticity of the adipose organ.</a> Eur J Endocrinol. 170 (5), R159-R171 (2014).</li>
<li>Knight, C. H., Maltz, E., Docherty, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Milk+yield+and+composition+in+mice%3A+Effects+of+litter+size+and+lactation+number%5BTitle%5D)+AND+%22Comp+Biochem+Physiol+A+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Milk yield and composition in mice: Effects of litter size and lactation number.</a> Comp Biochem Physiol A Comp Physiol. 84 (1), 127-133 (1986).</li>
<li>Willingham, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Milk+collection+methods+for+mice+and+reeves%27+muntjac+deer%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Milk collection methods for mice and reeves' muntjac deer.</a> J Vis Exp. (89), e51007(2014).</li>
<li>Muranishi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+for+collecting+mouse+milk+without+exogenous+oxytocin+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechniques%22%5BJournal%5D)">Method for collecting mouse milk without exogenous oxytocin stimulation.</a> Biotechniques. 60 (1), 47-49 (2016).</li>
<li>Gómez-Gallego, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+to+collect+high+volumes+of+milk+from+mice+%28mus+musculus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Anales+de+Veterinaria+de+Murcia%22%5BJournal%5D)">A method to collect high volumes of milk from mice (mus musculus).</a> Anales de Veterinaria de Murcia. 29, 55-61 (2014).</li>
<li>DePeters, E. J., Hovey, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+collecting+milk+from+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mammary+Gland+Biol+Neoplasia%22%5BJournal%5D)">Methods for collecting milk from mice.</a> J Mammary Gland Biol Neoplasia. 14 (4), 397-400 (2009).</li>
<li>Oxytocin- oxytocin injection. , 
 <a target="_blank" href="https://dailymed.nlm.nih.gov/dailymed/fda/fdaDrugXsl.cfm?setid=a9b62187-4141-487c-a9da-f42ad7f9b408&type=display">https://dailymed.nlm.nih.gov/dailymed/fda/fdaDrugXsl.cfm?setid=a9b62187-4141-487c-a9da-f42ad7f9b408&type=display</a> (2019).</li>
<li>Lucas, A., Gibbs, J. A., Lyster, R. L., Baum, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Creamatocrit%3A+Simple+clinical+technique+for+estimating+fat+concentration+and+energy+value+of+human+milk%5BTitle%5D)+AND+%22Br+Med+J%22%5BJournal%5D)">Creamatocrit: Simple clinical technique for estimating fat concentration and energy value of human milk.</a> Br Med J. 1 (6119), 1018-1020 (1978).</li>
<li>Paul, H. A., Hallam, M. C., Reimer, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Milk+collection+in+the+rat+using+capillary+tubes+and+estimation+of+milk+fat+content+by+creamatocrit%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Milk collection in the rat using capillary tubes and estimation of milk fat content by creamatocrit.</a> J Vis Exp. (106), e53476(2015).</li>
<li>Ernst, O., Zor, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Linearization+of+the+Bradford+protein+assay%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Linearization of the Bradford protein assay.</a> J Vis Exp. (38), e1918(1918).</li>
<li>Hueso, D., Fontecha, J., Gomez-Cortes, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+study+of+the+most+commonly+used+methods+for+total+protein+determination+in+milk+of+different+species+and+their+ultrafiltration+products%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Nutr%22%5BJournal%5D)">Comparative study of the most commonly used methods for total protein determination in milk of different species and their ultrafiltration products.</a> Front Nutr. 9, 925565(2022).</li>
<li>Anderson, S. M., Rudolph, M. C., Mcmanaman, J. L., Neville, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Key+stages+in+mammary+gland+development.+Secretory+activation+in+the+mammary+gland%3A+It%27s+not+just+about+milk+protein+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22Breast+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Key stages in mammary gland development. Secretory activation in the mammary gland: It's not just about milk protein synthesis.</a> Breast Cancer Res. 9 (1), 204(2007).</li>
<li>Meier, H., Hoag, W. G., Mcburney, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+characterization+of+inbred-strain+mouse+milk.+I.+Gross+composition+and+amino+acid+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nutr%22%5BJournal%5D)">Chemical characterization of inbred-strain mouse milk. I. Gross composition and amino acid analysis.</a> J Nutr. 85 (3), 305-308 (1965).</li>
<li>Hohlbaum, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Severity+classification+of+repeated+isoflurane+anesthesia+in+c57bl%2F6jrj+mice-assessing+the+degree+of+distress%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Severity classification of repeated isoflurane anesthesia in c57bl/6jrj mice-assessing the degree of distress.</a> PLoS One. 12 (6), e0179588(2017).</li>
<li>Weaver, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serotonin+deficiency+rescues+lactation+on+day+1+in+mice+fed+a+high+fat+diet%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Serotonin deficiency rescues lactation on day 1 in mice fed a high fat diet.</a> PLoS One. 11 (9), e0162432(2016).</li>
<li>Statement on resuming breastfeeding after anesthesia. , Committee on Obstetric Anesthesia. 
 <a target="_blank" href="https://www.asahq.org/standards-and-practice-parameters/statement-on-resuming-breastfeeding-after-anesthesia">https://www.asahq.org/standards-and-practice-parameters/statement-on-resuming-breastfeeding-after-anesthesia</a> (2009).</li>
<li>Lee, J. J., Rubin, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breast+feeding+and+anaesthesia%5BTitle%5D)+AND+%22Anaesthesia%22%5BJournal%5D)">Breast feeding and anaesthesia.</a> Anaesthesia. 48 (7), 616-625 (1993).</li>
<li>Reece-Stremtan, S., Campos, M., Kokajko, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Academy+of+Breastfeeding%2C+M.+Abm+clinical+protocol+%2315%3A+Analgesia+and+anesthesia+for+the+breastfeeding+mother%2C+revised+2017%5BTitle%5D)+AND+%22Breastfeed+Med%22%5BJournal%5D)">Academy of Breastfeeding, M. Abm clinical protocol #15: Analgesia and anesthesia for the breastfeeding mother, revised 2017.</a> Breastfeed Med. 12 (9), 500-506 (2017).</li>
<li>Oosting, A., Verkade, H. J., Kegler, D., Van De Heijning, B. J., Van Der Beek, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+and+selective+manipulation+of+milk+fatty+acid+composition+in+mice+through+the+maternal+diet+during+lactation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nutr+Sci%22%5BJournal%5D)">Rapid and selective manipulation of milk fatty acid composition in mice through the maternal diet during lactation.</a> J Nutr Sci. 4, e19(2015).</li>
<li>Silverman, J., Stone, D. W., Powers, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+lipid+composition+of+milk+from+mice+fed+high+or+low+fat+diets%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">The lipid composition of milk from mice fed high or low fat diets.</a> Lab Animal. 26 (2), 127-131 (1992).</li>
<li>Rodgers, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Practical+aspects+of+milk+collection+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Practical aspects of milk collection in the rat.</a> Lab Animal. 29 (4), 450-455 (1995).</li>
<li>Chen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+high-fat+diet+on+secreted+milk+transcriptome+in+midlactation+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Genomics%22%5BJournal%5D)">Effect of high-fat diet on secreted milk transcriptome in midlactation mice.</a> Physiol Genomics. 49 (12), 747-762 (2017).</li>
<li>Kucia, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-protein+diet+during+gestation+and+lactation+affects+mammary+gland+mrna+abundance%2C+milk+composition+and+pre-weaning+litter+growth+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Animal%22%5BJournal%5D)">High-protein diet during gestation and lactation affects mammary gland mrna abundance, milk composition and pre-weaning litter growth in mice.</a> Animal. 5 (2), 268-277 (2011).</li>
<li>Ragueneau, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+development+in+mice.+Iv%3A+Quantity+and+gross+composition+of+milk+in+five+inbred+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Early development in mice. Iv: Quantity and gross composition of milk in five inbred strains.</a> Physiol Behav. 40 (4), 431-435 (1987).</li>
<li>Falconer, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Milk+production+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Agric+Sci%22%5BJournal%5D)">Milk production in mice.</a> J Agric Sci. 37 (3), 224-235 (1947).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1 mL kriyojenik şişeler</td><td>Corning</td><td>430658</td><td>Erken süt toplama için tercih edilir</td></tr><tr><td>1 mL şırınga</td><td>Exel</td><td>26048</td><td></td></tr><tr><td>2 mL mikrosantrifüj toplama tüpü</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-681-344</td><td>Pik ve geç süt toplama için tercih edilir</td></tr><tr><td>18 G hipodermik iğne</td><td>BD PrecisionGlide</td><td>305195</td><td></td></tr><tr><td>27 G hipodermik iğne</td><td>BD PrecisionGlide</td><td>305109</td><td></td></tr><tr><td>Alkol hazırlama mendili</td><td>Honeywell</td><td>154818</td><td></td></tr><tr><td>Bio-Rad Protein Testi Boya Reaktif Konsantresi</td><td>Bio-Rad</td><td>5000006</td><td></td></tr><tr><td>Sığır Serumu Albümini</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A2153</td><td></td></tr><tr><td>İmmobilon -P PVDF Membran</td><td>İmmobilon</td><td>IPVH00010</td><td></td></tr><tr><td>Ketamin</td><td>Dechra</td><td>1000001250</td><td>Veteriner Ofisi aracılığıyla satın alındı&nbsp;</td></tr><tr><td>Laboratuvar etiketleme bandı</td><td>VWR International</td><td>89097</td><td></td></tr><tr><td>Laktoz Test Kiti</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>MAK487</td><td></td></tr><tr><td>Mini Dikenli polipropilen bağlantı parçaları</td><td>Cole-Parmer Instrument Company</td><td>6365-90</td><td></td></tr><tr><td>Fare diyeti</td><td>Laboratuvar Diyeti</td><td>5015</td><td></td></tr><tr><td>NuPAGE Bis-Tris Mini Protein Jelleri, 4&ndash; %</td><td>12Invitrogen</td><td>NP0335BOX</td><td></td></tr><tr><td>Optixcare Göz Yağı</td><td>Aventix</td><td>N/A</td><td>Veteriner Ofisi Aracılığıyla Satın Alındı&nbsp;</td></tr><tr><td>Oksitosin</td><td>Bimeda</td><td>1OXY015</td><td>Veteriner Ofisi aracılığıyla satın alındı&nbsp;</td></tr><tr><td>P200 pipet uçları</td><td>Gilson</td><td>F1733001</td><td></td></tr><tr><td>PVC boru: 1/8 '' ID</td><td>VWR Uluslararası</td><td>MFLX07407-75 &</td><td></td></tr><tr><td>PVC boru: 5/32 '' ID</td><td>VWR International</td><td>MFLX07407-77</td><td></td></tr><tr><td>Septum durdurucu</td><td>Chemglass Yaşam Bilimleri</td><td>CG-3022-91</td><td></td></tr><tr><td>Vakum pompası</td><td>Drummond Scientific Co.</td><td>P-103635</td><td></td></tr><tr><td>Xylazine</td><td>Akorn Hayvan Sağlığı</td><td>NDC 59399-110-20</td><td>Veteriner Ofisi aracılığıyla satın alındı&nbsp;</td></tr></tbody></table>

laboratuvar farelerinden süt Örneklemesi için verimli bir tek kişilik teknik

An Efficient Single-Person Technique for Milk Sampling from Laboratory Mice

Bu tekniği kullanarak, 21 günlük bir laktasyon döneminde farklı zamanlarda yeterli sütü başarıyla örnekledik. Teslimat gününü teslimat sonrası gün 1 (PD1) olarak kabul ediyoruz ve bu çalışmada sütü PD2 (erken laktasyon) ve PD10 (pik laktasyon), her biri n = 4 olarak örnekledik. Her barajdan rahatça 0,1-0,5 mL süt elde ettik (Şekil 1D). Bu yöntemi doğrulamak için, bu süt örneklerinin brüt makro besin bileşimini ölçtük ve Student'ın t-testini kullanarak erken ve en yüksek laktasyonda toplanan süt arasındaki farkları karşılaştırdık.
Süt laktoz konsantrasyonunun PD2'de ortalama 12.3 ± 0.6 g/L ve PD10'± 12.0 0.9 g/L olduğunu bulduk (Tablo 1). Süt yağı yüzdesi PD2 ± PD10'da sırasıyla &amp;.0 3.4 ± %1.5 idi. Yağ konsantrasyonu PD2'de 174.4 ± 7.1 g / L ve PD10'da 224.4 ± 17.1 g / L ile anlamlı derecede yüksekti (Tablo 1). Ortalama protein içeriği PD2'de 70.1 ± 5.2 g / L ve PD10'da 75.1 ± 2.6 g / L idi (Tablo 1). Toplam süt proteini içeriği PD2 ve PD10 arasında farklı olmasa da, bireysel süt proteininin nispi bolluğu farklıydı. Spesifik olarak, αS1-kazein ve peynir altı suyu asidik proteini PD10 sütünde PD2 sütünden daha yüksekti (p &lt; 0.05), β-kazein (p &lt; 0.05) PD2'de PD10'dan daha yüksek bolluk gösterdi (Şekil 2).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67669/67669fig2.jpg"> 
Şekil 2: Süt proteini analizi. (A) PD2 ve PD10'da toplanan sütün Coomassie Mavi lekeli PAGE analizi. Protein tanımlaması daha önce tarif edildiği gibi yapıldı14. (B) Bireysel protein sinyalleri ImageJ'de analiz edildi ve boyanmış toplam proteine normalize edildi. Sonuçlar, standart hata çubukları ve tek tek veri noktaları nokta olarak ortalama olarak ifade edildi. PD2 ve PD10'daki her proteinin ortalama bolluğu, iki kuyruklu bir Student t-testi kullanılarak karşılaştırıldı. *p &lt; 0.05, n = 4 olur. Kısaltmalar: PAGE = poliakrilamid jel elektroforezi; PDn = teslimat sonrası gün n. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67669/67669fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td colspan="2"></td>
			<td>Ortalama</td>
			<td>SEM</td>
			<td>p-değeri</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">Laktoz (g/L)</td>
			<td>PD2 (PD2)</td>
			<td>12.3</td>
			<td>0.6</td>
			<td rowspan="2">0.75</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PD10 Serisi</td>
			<td>12.0</td>
			<td>0.9</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">Yağ (g/L)</td>
			<td>PD2 (PD2)</td>
			<td>174.4</td>
			<td>7.1</td>
			<td rowspan="2">0.04</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PD10 Serisi</td>
			<td>224.4</td>
			<td>17.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td rowspan="2">Protein (g/L)</td>
			<td>PD2 (PD2)</td>
			<td>70.1</td>
			<td>5.2</td>
			<td rowspan="2">0.42</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PD10 Serisi</td>
			<td>75.1</td>
			<td>2.6</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tablo 1: PD2 ve PD10'da toplanan sütün makro besin bileşimi. Ortalamanın (SEM) ortalama ve standart hatası olarak ifade edilen sonuçlar, laktasyon gününün süt bileşimi üzerindeki etkilerini incelemek için iki kuyruklu Student t-testi, n = 4 kullanılarak analiz edildi.

Laboratuvar Farelerinden Süt Örneklemesi için Verimli Bir Tek Kişilik Teknik

Rodent models have been widely used in biology since the early 20th century to study basic physiology and biochemical mechanisms. In lactation and ...

an-efficient-single-person-technique-for-milk-sampling-from

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bu yöntem, farelerde meme bezi gelişimi ve işlevi incelemek ve değerlendirmek anlatılmaktadır. Eksize meme bezleri süt ejeksiyon bir oksitosin tabanlı miyoepitelyal hücre daralma tahlil kullanılarak değerlendirilmiştir ise bütün montaj kullanarak geliştirme derecesi değerlendirilir.

Fare Modeller Meme Bezi Geliştirme ve Fonksiyon Değerlendirme

Hayvan modellerinden süt toplanması çeşitli araştırma yollarını kolaylaştırır: pasif bağışıklığı anlamak, dikey bulaşmadan sorumlu patojenleri tanımlamak ve hatta transgenik farelerin kullanımı yoluyla insan anne sütünde bulunan proteinlerin ticari üretimi. Burada farelerde ve Reeves'in munçak geyiğinde süt toplama için basit bir yöntem gösteriyoruz.

Fareler ve Reeves &#39;munçağı Deer için Süt Toplama Yöntemleri

Süt, yenidoğan için birincil besin kaynağıdır. Süt bileşenlerinin analizi, yavru sağlığını etkileyen anne faktörleri hakkında fikir verebilir. Bu protokol, emziren sıçandan süt numunelerinin toplanması için manuel bir yöntemi tanımlar ve bu daha sonra daha fazla aşağı akış analizi için kullanılabilir.

Kılcal Tüpler ve Creamatocrit Süt Yağ İçeriğinin Tahmin kullanarak Rat Süt Toplama

Meni الرسالة sperm seminal jel--dan özgür olmak için gereklidir. Bu çalışma yordamları kadın üreme sistemi sonrası cinsel birleşme sperm toplama ve meni الرسالة Süre ölçümünü sağlar.

Meni kadın üreme sistemi ve meni الرسالة farelerde ölçümü sonrası çiftleşme koleksiyonu

Tükürük bezi hypofunction otoimmün hastalığı ve radyasyon terapisi sık bir sonucudur. Bu hastalıkların fare modellerinde Tükürük bezi ile tekrarlanabilir değerlendirilmesi teknik bir sorundur. Burada, tükürük üretim farelerde doğru ve tekrarlanabilir ölçüm için basit bir yöntem açıklanmıştır.

Tükürük bezi işlevi farelerde ölçülmesi için bir yöntem

Burada kontrolsüz farelerde sık örnek koleksiyon için bir kuyruk ucu kan örnekleme iletişim kuralı mevcut. Bu yöntem, pulsatil luteinizan hormon salgısı değerlendirilmesi desenleri yararlıdır ve dolaşımdaki diğer faktörleri analiz için adapte.

Pulsatil luteinizan hormon salgısı değerlendirilmesi için kuyruk ucu kan örnekleme farelerde sık

Bu çalışmada kan örnekleme kuyruk ven gözlük büyüteç ile bir vakum ekstraksiyon tüp sistemi kullanan farelerde gelen raporlar. Bizim Yöntem uygulama için kolay ve tekrar kan örnekleme farelerde için kullanılabilir.

Kuyruk damarlar bir vakum kan toplama sistemi ve gözlük büyüteç ile sigara anestezi farelerin koleksiyonundan değiştirilmiş kan

Burada, mikropipet kılavuzluğunda ilaç uygulamasını (MDA), araştırma hayvanını minimum stres ve rahatsızlıkla tedavileri kolayca yutmaya teşvik eden oral gavaja alternatif bir yöntem olarak tanımlıyoruz.

Kemirgen Modellerinde Oral Gavaja Alternatif Bir Yöntem Olarak Mikropipet Kılavuzluğunda İlaç Uygulamasının Kullanımı

Burada, örnek olarak immünofenotipleme için kan örneklemesini kullanarak "Yabani fareler" için bir tesisin mikrobiyal muhafaza önlemleri de dahil olmak üzere yapısını ve işletme prosedürlerini açıklıyoruz.

Doğal Mikrobiyomlu Laboratuvar Fareleri için Bir Tesisin İşletilmesi ve Biyolojik Muhafaza Prosedürleri: İmmünofenotipleme Prosedürü

Burada, bir neşter kullanarak yüz ven damar delinmesi yoluyla murin deneklerinde optimize edilmiş bir kan alma tekniği için bir protokol sunuyoruz. Bu tekniği, transgenik, konjenik ve raportör suşların hücresel fenotiplerini karakterize etmek için akış sitometrik değerlendirmenin yanında kullanıyoruz. Ayrıca serum sitokin analizi ve diyabet çalışmaları için de uygundur.

Murin Kan Alımı için Yüz Ven Damar Delme

Öğrenin, laboratuvar farelerinden tek kişilik vakum cihazıyla süt örnekleme yöntemini. Bu teknik, 10 dakikada 0,1-0,5 mL süt toplar ve laktasyon araştırmalarında veri doğruluğunu artırır.

Laboratuvar Farelerinden Süt Örneklemesi için Verimli Bir Tek Kişilik Teknik

Daha fazla video keşfet