Name: Canlı Hücrelerde Mitokondriyal Morfolojinin Konfokal Mikroskopi Kullanılarak Belirlenmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 57 s
Description: Öğrenin, canlı SH-SY5Y hücrelerinde mitokondriyal morfolojiyi konfokal mikroskopi ve MitoTracker boyama ile nasıl analiz edeceğinizi. Bu uygun maliyetli yöntem, Parkinson hastalığı modellerinde ilaç tepkilerini incelemeyi kolaylaştırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>von der Malsburg, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+mechanism+of+mitochondrial+membrane+remodelling+by+human+OPA1%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Structural mechanism of mitochondrial membrane remodelling by human OPA1.</a> Nature. 620 (7976), 1101-1108 (2023).</li>
<li>Giacomello, M., Pyakurel, A., Glytsou, C., Scorrano, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cell+biology+of+mitochondrial+membrane+dynamics%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The cell biology of mitochondrial membrane dynamics.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 21 (4), 204-224 (2020).</li>
<li>Kalia, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+basis+of+mitochondrial+receptor+binding+and+constriction+by+DRP1%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Structural basis of mitochondrial receptor binding and constriction by DRP1.</a> Nature. 558 (7710), 401-405 (2018).</li>
<li>Cao, Y. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MFN1+structures+reveal+nucleotide-triggered+dimerization+critical+for+mitochondrial+fusion%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">MFN1 structures reveal nucleotide-triggered dimerization critical for mitochondrial fusion.</a> Nature. 542 (7641), 372-376 (2017).</li>
<li>Chan, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+dynamics+and+its+involvement+in+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Pathol%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial dynamics and its involvement in disease.</a> Annu Rev Pathol. 15, 235-259 (2020).</li>
<li>Solaini, G., Sgarbi, G., Lenaz, G., Baracca, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluating+mitochondrial+membrane+potential+in+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biosci+Rep%22%5BJournal%5D)">Evaluating mitochondrial membrane potential in cells.</a> Biosci Rep. 27 (1-3), 11-21 (2007).</li>
<li>Gan, Z., Audi, S. H., Bongard, R. D., Gauthier, K. M., Merker, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantifying+mitochondrial+and+plasma+membrane+potentials+in+intact+pulmonary+arterial+endothelial+cells+based+on+extracellular+disposition+of+rhodamine+dyes%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol-Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Quantifying mitochondrial and plasma membrane potentials in intact pulmonary arterial endothelial cells based on extracellular disposition of rhodamine dyes.</a> Am J Physiol-Lung Cell Mol Physiol. 300 (5), L762-L772 (2011).</li>
<li>Zhong, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Roflupram+exerts+neuroprotection+via+activation+of+CREB%2FPGC-1%CE%B1+signalling+in+experimental+models+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Roflupram exerts neuroprotection via activation of CREB/PGC-1α signalling in experimental models of Parkinson's disease.</a> Br J Pharmacol. 177 (10), 2333-2350 (2020).</li>
<li>Xu, B. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitofusin-2+mediates+cannabidiol-induced+neuroprotection+against+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Pharmacol+Sin%22%5BJournal%5D)">Mitofusin-2 mediates cannabidiol-induced neuroprotection against cerebral ischemia in rats.</a> Acta Pharmacol Sin. 44 (3), 499-512 (2023).</li>
<li>Hu, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PRDM16+exerts+critical+role+in+myocardial+metabolism+and+energetics+in+type+2+diabetes+induced+cardiomyopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Metabolism%22%5BJournal%5D)">PRDM16 exerts critical role in myocardial metabolism and energetics in type 2 diabetes induced cardiomyopathy.</a> Metabolism. 146, 155658(2023).</li>
<li>Reichardt, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA-binding+protein-A+promotes+kidney+ischemia%2Freperfusion+injury+and+participates+in+mitochondrial+function%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+Int%22%5BJournal%5D)">DNA-binding protein-A promotes kidney ischemia/reperfusion injury and participates in mitochondrial function.</a> Kidney Int. 106 (2), 241-257 (2024).</li>
<li>Ahmad, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Computational+classification+of+mitochondrial+shapes+reflects+stress+and+redox+state%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+Dis%22%5BJournal%5D)">Computational classification of mitochondrial shapes reflects stress and redox state.</a> Cell Death Dis. 4 (1), e461(2013).</li>
<li>Valente, A. J., Maddalena, L. A., Robb, E. L., Moradi, F., Stuart, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+imagej+macro+tool+for+analyzing+mitochondrial+network+morphology+in+mammalian+cell+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Histochem%22%5BJournal%5D)">A simple imagej macro tool for analyzing mitochondrial network morphology in mammalian cell culture.</a> Acta Histochem. 119 (3), 315-326 (2017).</li>
<li>Hemel, I., Engelen, B., Luber, N., Gerards, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+hitchhiker%27s+guide+to+mitochondrial+quantification%5BTitle%5D)+AND+%22Mitochondrion%22%5BJournal%5D)">A hitchhiker's guide to mitochondrial quantification.</a> Mitochondrion. 59, 216-224 (2021).</li>
<li>Vowinckel, J., Hartl, J., Butler, R., Ralser, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitoloc%3A+A+method+for+the+simultaneous+quantification+of+mitochondrial+network+morphology+and+membrane+potential+in+single+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Mitochondrion%22%5BJournal%5D)">Mitoloc: A method for the simultaneous quantification of mitochondrial network morphology and membrane potential in single cells.</a> Mitochondrion. 24, 77-86 (2015).</li>
<li>Dagda, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+PINK1+function+promotes+mitophagy+through+effects+on+oxidative+stress+and+mitochondrial+fission%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Loss of PINK1 function promotes mitophagy through effects on oxidative stress and mitochondrial fission.</a> J Biol Chem. 284 (20), 13843-13855 (2009).</li>
<li>Przedborski, S., Tieu, K., Perier, C., Vila, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MPTP+as+a+mitochondrial+neurotoxic+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bioenerg+Biomembr%22%5BJournal%5D)">MPTP as a mitochondrial neurotoxic model of Parkinson's disease.</a> J Bioenerg Biomembr. 36 (4), 375-379 (2004).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1-metil-4-fenilpiridinyum iyodür (MPP+)</td><td>Macklin Hakkında</td><td>M875357</td><td>Oksidatif stresi indüklemek için kullanılır</td></tr><tr><td>Konfokal çanak</td><td>YUVA</td><td>801001</td><td>Hücreleri kültürlemek için kullanılır</td></tr><tr><td>Konfokal mikroskop</td><td>Nikon</td><td>C2</td><td>Görüntü yakalamak için kullanılır</td></tr><tr><td>Dulbecco'nun Modifiye Kartal Orta/Besin Karışımı F-12</td><td>ThermoFisher Bilimsel</td><td>11320033</td><td>Hücrelere besin sağlamak için kullanılır</td></tr><tr><td>Dimetil sülfoksit (DMSO)</td><td>Beyotime</td><td>ST038 Serisi</td><td>Mitotracker probunu çözmek için kullanılır</td></tr><tr><td>Fetal sığır serumu (FBS)</td><td>ThermoFisher Bilimsel</td><td>A3161001C</td><td>Hücrelere besin sağlamak için kullanılır</td></tr><tr><td>ResimJ</td><td>Ulusal Sağlık Enstitüleri</td><td>ResimJ</td><td>Mitokondriyal morfolojiyi analiz etmek için kullanılır</td></tr><tr><td>MitoTracker Kırmızı CMXRos</td><td>ThermoFisher Bilimsel</td><td>M7512 Serisi</td><td>Mitokondriyi görselleştirmek için kullanılır</td></tr><tr><td>Fosfat Tampon Salin (PBS)</td><td>ThermoFisher Bilimsel</td><td>C10010500BT</td><td>Konfokal bulaşıklardaki hücreleri yıkamak için kullanılır</td></tr><tr><td>SH-SY5Y hücresi</td><td>ATCC</td><td>CRL-2266 (İngilizce)</td><td>Mitokondriyal morfolojiyi analiz etme iş akışını göstermek için kullanılır</td></tr><tr><td>TI-SH-U Sahne Adaptörü</td><td>Nikon</td><td>MEC59110</td><td>Numuneleri sabitlemek için kullanılır</td></tr></tbody></table>

canlı hücrelerde mitokondriyal morfolojinin konfokal mikroskopi kullanılarak belirlenmesi

Determination of Mitochondrial Morphology in Live Cells Using Confocal Microscopy

Bu protokol, birbirine bağlı üç optimizasyon modülü aracılığıyla mitokondriyal morfolojik analiz için ayrıntılı, adım adım bir prosedürü ana hatlarıyla belirtir: numune hazırlama protokollerinin standardizasyonu, konfokal mikroskopi görüntüleme için optik parametrelerin sistematik optimizasyonu ve hesaplamalı görüntü işleme kılavuzları. Optimal numune hazırlama protokolü, güvenilir mitokondriyal görüntüleme verileri elde etmek için kritik öneme sahiptir. MitoTracker Red CMXRos konsantrasyonlarının sistematik değerlendirm...

Canlı Hücrelerde Mitokondriyal Morfolojinin Konfokal Mikroskopi Kullanılarak Belirlenmesi

The dynamic balance of mitochondrial fusion and fission directly contributes to mitochondrial homeostasis, which influences numerous cellular functions in ...

determination-mitochondrial-morphology-live-cells-using-confocal

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Mitokondriyal füzyon zamanla mitokondriyal ağ üzerinden photoconverted matris hedefli YFP dengelenme izleme ölçüldü. Şimdiye kadar, sadece bir hücre bir anda bir saat uzun kinetik analizine tabi olabilir. Biz aynı anda böylece veri toplama işlemini hızlandıracak, birden çok hücre ölçen bir yöntem sunuyoruz.

Paralel Konfokal Mikroskop kullanarak birden fazla Hücre Kinetik Veri Kazanılması A Daha hızlı, Yüksek Çözünürlük, MTPA-GFP tabanlı Mitokondrial Füzyon Deneyi

Parkinson hastalığı yol açan genlerde mutasyon taşıyan hastaların Fibroblastlar kolay erişilebilir bir...

Parkinson Hastalığı Alanında Mitokondriyal Fenotiplerinin İzleme İlköğretim İnsan Fibroblast Kullanımı

Kaynak: Kennedy, L. H., et. al. Organotipik Beyin Dilimlerinde Oligodendrosit Organellerinin Adeno İlişkili Virüs ve Konfokal Mikroskopi Kullanılarak Görselleştirilmesi ve Canlı Görüntülenmesi. J. Vis. Uzm. (2017)Bu video, organotipik fare beyin dilimlerinde oligodendrosit mitokondrinin görüntülenmesini göstermektedir. Dilim, sürekli sıvı sirkülasyonu ve kontrollü sıcaklığa sahip bir banyo odasının içine yerleştirilir. Konfokal mikroskobun çeşitli parametrelerini ayarladıktan sonra, kırmızı...

Organotipik Beyin Dilimi Kültürlerinde Oligodendrositler İçindeki Mitokondriyal Hareketin Konfokal Görüntülenmesi

Mitokondri onları sitozolik Ca şekillendirmek için 2+ hücre içinde sinyal sağlayan (2+ Ca) kalsiyum tecrit kendi iç zarı (Δ Ψm) arasında elektrokimyasal potansiyeli kullanabilir. Floresan boyalar ve konfokal mikroskopi kullanılarak canlı hücreler eş zamanlı olarak ölçüm mitokondri Ca 2 + alımı ve ΔΨ m için bir yöntem tarif eder.

Floresan Mikroskopi Canlı hücreler Potansiyel Mitokondriyal Kalsiyum ve Mitokondriyal Membran Eşzamanlı Ölçümü

Bu makalede, sabit hücrelerin floresan mikroskopi görüntülerinde mitokondri morfolojisini analiz etmek için simülasyon denetimli makine öğreniminin nasıl kullanılacağı açıklanmaktadır.

Mitokondriyal Morfolojinin Simülasyon Denetimli Öğrenme Yoluyla Analiz Edilmesi

Burada, mitokondriyal ağ taraması için konfokal mikroskopi kullanarak canlı iskelet kası görüntüleme ile mitokondriyal yoğunluk ve uzunlamasına dağılımdaki değişiklikleri analiz etmek için bir protokol sunuyoruz.

Sıçan Canlı İskelet Kası Liflerinde Mitokondriyal Yoğunluk ve Boyuna Dağılımın Konfokal Mikroskopi ile Analizi

Bu protokol, yaşlanma sırasında C. elegans'ın çoklu dokularında mitokondriyal morfolojiyi görüntülemek için standart bir yaklaşım sağlar.

Yaşlanma Sırasında C. elegans'ta Mitokondriyal Morfolojinin Görüntülenmesi ve Ölçülmesi

Burada, zaman içinde mitokondriyal fisyon ve füzyon aktivitesindeki 3 boyutlu değişikliklerin nicelleştirilmesinde yararlı olan bir ImageJ eklentisi olan mitokondriyal olay yerelleştiricisini (MEL) açıklıyoruz. Ayrıca, ImageJ'de analizden önce mikrografların temizlenmesi için yararlı olan bir görüntü işleme hattını da açıklıyoruz.

Mitokondriyal Morfolojideki Değişikliklerin Dinamik ve Üç Boyutlu Floresan Mikrografları ile Anlaşılması

Biz belirli bir uyaran uygulamasından önce ve sonra, TMRM floresan yoğunluğu göreceli değişiklikleri belirlemek için kortikal nöronlarda, floresan gösterge, TMRM uygulama göstermektedir. Ayrıca floresan prob H uygulanmasını...

Mitokondrial Membran Potansiyeli ve Reaktif Oksijen Türleri Canlı Rat Kortikal nöronlar Belirlenmesi

Bu video, canlı hücre görüntüleme asimetrik sağlam duyu organı progenitör hücreleri ve epidermal hücrelerin bölünmesi için bir metodu...

Bozulmamış Duyu Organ Öncü Hücreler Canlı hücre Görüntüleme Drosophila Pupa

Öğrenin, canlı SH-SY5Y hücrelerinde mitokondriyal morfolojiyi konfokal mikroskopi ve MitoTracker boyama ile nasıl analiz edeceğinizi. Bu uygun maliyetli yöntem, Parkinson hastalığı modellerinde ilaç tepkilerini incelemeyi kolaylaştırır.

Canlı Hücrelerde Mitokondriyal Morfolojinin Konfokal Mikroskopi Kullanılarak Belirlenmesi

Daha fazla video keşfet