Pulmoner Arteriyel Hipertansiyonun Deneysel Modellerinde Sağ Ventrikül Fonksiyonunun Değerlendirilmesi

Deneysel pulmoner arteriyel hipertansiyonda vasküler yeniden şekillenmeyi tersine çevirmek ve kardiyopulmoner fonksiyonu iyileştirmek için rejeneratif tedavileri, özellikle mezenkimal kök hücreleri ve mitokondriyi araştırıyoruz. Sağ ventrikül ponksiyonu ve kalp diseksiyonu gibi invaziv prosedürlerin her ikisi de terminaldir ve boylamsal çalışmaları sınırlar. Ek olarak, ekokardiyografik ölçümlerdeki değişkenlik, farklı operatörler ve zaman noktaları arasında tekrarlanabilirliği etkileyebilir. Protokolümüz, non-invaziv ekokardiyografiyi invaziv hemodinamik ölçümler ve postmortem analiz ile birleştirerek, sıçanlarda pulmoner hipertansiyon ilerlemesinin ve sağ ventrikül yeniden şekillenmesinin kapsamlı bir değerlendirmesini sağlar. Bu entegre yaklaşım, veri güvenilirliğini artırır ve ihtiyaç duyulan hayvan miktarını azaltır. Gelecekte, pulmoner arteriyel hipertansiyonu olan hastalarda beyin-kalp-akciğer etkileşimini ve bilişsel eksiklikleri daha iyi anlamayı, klinik önemi ve altta yatan potansiyel mekanizmaları anlamayı amaçlıyoruz.

[Öğretim Görevlisi] Başlamak için, anestezi uygulanmış hayvanın göğsündeki kürkü ıslatmak için deterjan ve suya batırılmış gazlı bez kullanın. Kelly forsepslerine bağlı bir tıraş bıçağı ile hayvanın göğsünden kürkü tıraş edin. Hayvanın göğsüne bol miktarda iletken jel sürün. Kontrol panelindeki 2D düğmesine basın. Kısa bir eksen görünümü elde etmek için dönüştürücüyü üçüncü ve beşinci interkostal boşluk arasına yerleştirin. Ardından, sağ ventrikül, aort kapağı, pulmoner kapak ve sol atriyumu gösteren kalbin tabanının kesitsel bir görüntüsünü yakalamak için dönüştürücüyü sternuma göre 90 derecelik bir açıyla hayvanın sol omzuna doğru yönlendirin. Görüntüyü dondurmak için kontrol panelindeki dondur düğmesine basın, ardından görüntüyü kaydetmek için kontrol panelindeki kaydet düğmesine basın. Doğru açı bulunduğunda, bu konumu koruyun ve darbe dalgası spektral doppler modunu etkinleştirmek için PW darbe dalgası düğmesine basın. Sarı imleci ekranda herhangi bir yönde hareket ettirmek ve pulmoner kapağın üzerine yerleştirmek için kontrol panelindeki iztopunu kullanın. Pulmoner kapak boyunca kan akış eğrisini elde etmek için kontrol panelindeki beş düğmesine basın. Şimdi, uzun bir eksen görünümü elde etmek için dönüştürücüyü üçüncü ve beşinci interkostal boşluk arasına yerleştirin. Dönüştürücüyü, sternuma göre 45 ila 60 derecelik bir açıyla hayvanın sağ omzuna doğru yönlendirin ve sol ventrikül, sağ ventrikül, sol atriyum, mitral kapak ve aort kapağını gösteren uzunlamasına bir kesit yakalayın. Görüntüyü dondurmak için kontrol panelindeki dondur düğmesine basın, ardından görüntüyü kaydetmek için kontrol panelindeki kaydet düğmesine basın. Görüntüleme oturumunu sonlandırmak ve görüntüleri hasta veri tabanında saklamak için kontrol panelindeki muayeneyi sonlandır düğmesine basın. Ekokardiyografi için ekranda aramayı seçin ve analize başlamak için veritabanından uygun hayvan kimliğini seçin. Kontrol panelindeki SonoView düğmesine basın. Analizi başlatmak için ekrandaki görüntü alanının içine bir kez tıklayın. Darbeli dalga spektral doppler modunda kısa eksen görüntüsünü seçmek için hareket topunu kullanın. Şimdi, hesap makinesi düğmesine basın ve ekranda kalp atış hızı HR'yi seçin. İki eğrinin tepeden tepeye imleç çizgileri çizmek için hareket topunu kullanın. Ortalamayı elde etmek için bunu üç kez tekrarlayın. Hesap makinesi düğmesine tekrar basın ve ekranda pulmoner kapak, PV ve ardından PV hızlanma süresi/ejeksiyon süresini seçin. İmleci aynı eğrinin başından tepesine ve ardından başından sonuna doğru yerleştirmek için hareket topunu kullanın. Ortalamayı elde etmek için üç kez tekrarlayın. Sonuçları kaydetmek için kontrol panelindeki kaydet düğmesine basın. Hareket topunu kullanarak ekranın sağ üst kısmından uzun eksen görüntüsünü seçin. Kontrol panelindeki hesap makinesi düğmesine basın ve izlenen sağ ventrikül çıkışını, RVOT'u, parametreyi ve ardından ekranda RVOT çapını seçin. Hareket topunu kullanarak, imleci sağ ventrikülün bir duvarından karşı duvara yerleştirin. Ortalamayı elde etmek için bunu üç kez gerçekleştirin. Sağ ventrikül ponksiyonu için önce anestezi uygulanmış bir hayvanı trakeostistize edin. Bilgisayarın açık olduğundan, LabVIEW yazılımının açık olduğundan ve taban çizgisinin sinyal alımı için yapılandırıldığından emin olun. Yazılımda doğru ventrikülü bulduktan sonra, sinyal alımının başladığını doğrulayın. Ekrandaki kaydet düğmesine tıklayın ve hayvanın kimliğini girin. İğneyi çok derine sokmamaya dikkat ederek, anatomik referans noktasının biraz üzerinde delinmek üzere heparinize salin dolgulu 19 gauge kafa derisi damarı kullanın. Basınç değerlerini gözlemleyerek delinmenin doğruluğunu doğrulayın. Veri güvenilirliğini sağlamak için en az 10 kararlı basınç dalgası tepe noktası kaydedin. Sinyal alımının sonunda, sol ventrikül veya abdominal vena kava delinmesi yoluyla kan alımı için heparinize bir şırınga kullanarak heparin uygulayın. Veri analizi için MATLAB programını açın, yapıştır için gözat düğmesine tıklayın ve bilgisayarın dahili sabit diskinde doğru kodu içeren dosyayı seçin. MATLAB ekranının sol tarafında, dönüştürücü tarafından tanınan her kanal için kodlar içeren dosyaların listesini gözlemleyin. Denemede daha önce kullanılan seçili kanal yapılandırmasına karşılık gelen kodu seçin. Çalıştır düğmesine basın ve analiz için harici sabit sürücüdeki .bin dosyasını seçin. Eğrinin en tekdüze bölümünü, başında ve sonunda bir kez tıklatarak, görsel olarak eşit tepe ve çukurlara sahip bölümü belirleyerek seçin. Ardından, sıfır saniyede bir kez ve 10 saniyede bir kez tıklayarak eğrinin on saniyelik bir bölümünü seçin. Komut penceresindeki en düşük çukur değerini çıkararak ve klavyede enter tuşuna basarak taban çizgisini ayarlayın. Yazılım, ilgili tüm verileri otomatik olarak oluşturacaktır. Verileri, zirve zamanı ve basınç değeri olan iki sütunda gözlemleyin. Sistolik basınç değerlerini kopyalayıp bir .txt dosyasına yapıştırın ve zaman değerlerini kaldırın. Ortalamanın hesaplanmasını sağlamak için dosyadaki tüm noktaları virgülle değiştirin. 10 tepe basınç değeri seçin ve ortalamalarını hesaplayın. Sağ ventrikül hipertrofisi indeksi için, deneyin başında hayvanın vücut ağırlığını ölçün ve kaydedin. Sağ ventrikül sistolik basıncını ölçün, ardından torasik organları ötenazi yapın ve çıkarın. Aort, pulmoner arter, vena kava ve pulmoner venleri kalbin tabanından inceleyin, ardından gazlı bez kullanarak tüm kalbi kurutun ve hassas bir terazi kullanarak kuru ağırlığı kaydedin. Atriyumları diseke edip çıkardıktan sonra, sağ ventrikülü septum ile birlikte sol ventrikülden ayırın. Hassas teraziyi kullanarak kurumuş sağ ventrikül ve sol ventrikül artı septumun ağırlıklarını ayrı ayrı kaydedin. Pulmoner arteriyel hipertansiyonu olan hayvanlarda PAT/PET oranı, kontrollere kıyasla önemli ölçüde azalmıştır, bu da pulmoner vasküler direncin arttığını ve pulmoner arterde kan akış paterinin değiştiğini gösterir. Pulmoner arteriyel hipertansiyonu olan hayvanlarda sağ ventrikül çıkış çapı, kontrollere kıyasla artmıştır, bu da ventriküler hipertrofisinin derecesini sağ ventrikülün adaptif bir yanıtı olarak yansıtır ve hastalığın gelişimini destekler. Temsili ekokardiyografi görüntüleri, pulmoner arteriyel hipertansiyonu olan hayvanlarda kontrollere göre gözle görülür şekilde genişlemiş sağ ventrikül çıkış çapları ve değişmiş akış paternleri gösterdi. Pulmoner arteriyel hipertansiyonu olan hayvanlarda sağ ventrikül sistolik basıncı, artmış pulmoner vasküler direnci yansıtacak şekilde kontrollere kıyasla önemli ölçüde artmıştır. Basınç dalga formu kayıtları, pulmoner arteriyel hipertansiyon hayvanlarında yüksek RVSP ile tutarlı olarak daha yüksek zirveler gösterdi. Sağ ventrikül hipertrofisi indeksi, pulmoner arteriyel hipertansiyonu olan hayvanlarda kontrollere göre anlamlı olarak yüksekti.