Name: In Vitro H5N1e Özgü Ördek T Hücreleri için Kültür ve İntrahücre İçi Sitokin Boyama Yöntemi ile İmmün Yanıtların Saptanması (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-30T14:50:00.000+00:00
Duration: 6 min 57 s
Description: Öğrenin, H5N1'e özgü ördek T hücrelerini in vitro kültürlemek ve intrahücre içi sitokin boyama ile IFN-γ salınımını nicelendirmek için bu yöntemi. Akış sitometrisi analizi, uyarılmış kültürlerde IFN-γ-pozitif T hücrelerinin oranının arttığını göstermiştir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<ol><li>Almeida, L., Lochner, M., Berod, L., Sparwasser, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+pathways+in+T+cell+activation+and+lineage+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Immunol%22%5BJournal%5D)">Metabolic pathways in T cell activation and lineage differentiation.</a> Semin Immunol. 28 (5), 514-524 (2016).</li>
<li>Weidle, U. H., Georges, G., Tiefenthaler, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TCR-MHC%2Fpeptide+interaction%3A+prospects+for+new+anti-tumoral+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Genom+Proteom%22%5BJournal%5D)">TCR-MHC/peptide interaction: prospects for new anti-tumoral agents.</a> Cancer Genom Proteom. 11 (6), 267-277 (2014).</li>
<li>Mazza, C., Malissen, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+guides+MHC-restricted+TCR+recognition%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Immunol%22%5BJournal%5D)">What guides MHC-restricted TCR recognition.</a> Semin Immunol. 19 (4), 225-235 (2007).</li>
<li>Nel, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((T-cell+activation+through+the+antigen+receptor.+Part+1%3A+signaling+components%2C+signaling+pathways%2C+and+signal+integration+at+the+T-cell+antigen+receptor+synapse%5BTitle%5D)+AND+%22J+Allergy+Clin+Immunol%22%5BJournal%5D)">T-cell activation through the antigen receptor. Part 1: signaling components, signaling pathways, and signal integration at the T-cell antigen receptor synapse.</a> J Allergy Clin Immunol. 109 (5), 758-770 (2002).</li>
<li>Dai, M., Xu, C., Chen, W., Liao, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progress+on+chicken+T+cell+immunity+to+viruses%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Progress on chicken T cell immunity to viruses.</a> Cell Mol Life Sci. 76 (14), 2779-2788 (2019).</li>
<li>Deng, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+and+therapeutic+strategies+for+tissue-resident+memory+T+cells%2C+central+memory+T+cells%2C+and+effector+memory+T+cells+in+psoriasis%5BTitle%5D)+AND+%22Immunology%22%5BJournal%5D)">The role and therapeutic strategies for tissue-resident memory T cells, central memory T cells, and effector memory T cells in psoriasis.</a> Immunology. 173 (3), 470-480 (2024).</li>
<li>Corrado, M., Pearce, E. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+memory+T+cell+metabolism+to+improve+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Targeting memory T cell metabolism to improve immunity.</a> J Clin Invest. 132 (1), 148546(2022).</li>
<li>Liu, X., Li, H., Li, S., Yuan, J., Pang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maintenance+and+recall+of+memory+T+cell+populations+against+tuberculosis%3A+Implications+for+vaccine+design%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Maintenance and recall of memory T cell populations against tuberculosis: Implications for vaccine design.</a> Front Immunol. 14, 1100741(2023).</li>
<li>Zanker, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+optimized+method+for+establishing+high+purity+murine+CD8%2B+T+cell+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol+Methods%22%5BJournal%5D)">An optimized method for establishing high purity murine CD8+ T cell cultures.</a> J Immunol Methods. 387 (1-2), 173-180 (2013).</li>
<li>Yang, W., Chen, X., Hu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD4%28%2B%29+T-Cell+Differentiation+In+Vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">CD4(+) T-Cell Differentiation In Vitro.</a> Methods Mol Biol. 2111, 91-99 (2020).</li>
<li>Jiao, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revealing+novel+CD8%28%2B%29+T-cell+epitopes+from+the+H5N1+avian+influenza+virus+in+HBW%2FB1+haplotype+ducks%5BTitle%5D)+AND+%22Vet+Res%22%5BJournal%5D)">Revealing novel CD8(+) T-cell epitopes from the H5N1 avian influenza virus in HBW/B1 haplotype ducks.</a> Vet Res. 55 (1), 169(2024).</li>
<li>Faulkner, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+development+of+in+vitro+culture+methods+to+characterize+primary+T-cell+responses+to+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Sci%22%5BJournal%5D)">The development of in vitro culture methods to characterize primary T-cell responses to drugs.</a> Toxicol Sci. 127 (1), 150-158 (2012).</li>
<li>Cimen Bozkus, C., Blazquez, A. B., Enokida, T., Bhardwaj, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+T-cell-based+immunogenicity+protocol+for+evaluating+human+antigen-specific+responses%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">A T-cell-based immunogenicity protocol for evaluating human antigen-specific responses.</a> STAR Protoc. 2 (3), 100758(2021).</li>
<li>Masuda, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+effects+of+chicken+type+III+interferon+on+expression+of+interferon-stimulated+genes+in+chickens%3A+comparison+with+type+I+and+type+II+interferons%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vet+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Biological effects of chicken type III interferon on expression of interferon-stimulated genes in chickens: comparison with type I and type II interferons.</a> J Vet Med Sci. 74 (11), 1381-1386 (2012).</li>
<li>Ding, H., Wang, G., Yu, Z., Sun, H., Wang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+interferon-gamma+%28IFN-%CE%B3%29+and+IFN-%CE%B3+receptor+1%2F2+%28IFN%CE%B3R1%2F2%29+in+regulation+of+immunity%2C+infection%2C+and+cancer+development%3A+IFN-%CE%B3-dependent+or+independent+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Role of interferon-gamma (IFN-γ) and IFN-γ receptor 1/2 (IFNγR1/2) in regulation of immunity, infection, and cancer development: IFN-γ-dependent or independent pathway.</a> Biomed Pharmacother. 155, 113683(2022).</li>
<li>Gong, Z., Li, Q., Shi, J., Ren, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Artifact+in+Intracellular+Cytokine+Staining+for+Studying+T+Cell+Responses+and+Its+Alleviation%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">An Artifact in Intracellular Cytokine Staining for Studying T Cell Responses and Its Alleviation.</a> Front Immunol. 13, 759188(2022).</li>
<li>Yu, E. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ex+vivo+assays+show+human+gamma-delta+T+cells+specific+for+common+allergens+are+Th1-polarized+in+allergic+donors%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Rep+Methods%22%5BJournal%5D)">Ex vivo assays show human gamma-delta T cells specific for common allergens are Th1-polarized in allergic donors.</a> Cell Rep Methods. 2 (12), 100350(2022).</li>
<li>Grant, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Broad+CD8%28%2B%29+T+cell+cross-recognition+of+distinct+influenza+A+strains+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Broad CD8(+) T cell cross-recognition of distinct influenza A strains in humans.</a> Nat Commun. 9 (1), 5427(2018).</li>
<li>Letsch, A., Scheibenbogen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+and+characterization+of+specific+T-cells+by+antigen-specific+cytokine+production+using+ELISPOT+assay+or+intracellular+cytokine+staining%5BTitle%5D)+AND+%22Methods%22%5BJournal%5D)">Quantification and characterization of specific T-cells by antigen-specific cytokine production using ELISPOT assay or intracellular cytokine staining.</a> Methods. 31 (2), 143-149 (2003).</li>
<li>Dai, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Duck+CD8%28%2B%29+T+Cell+Response+to+H5N1+Highly+Pathogenic+Avian+Influenza+Virus+Infection+In+Vivo+and+In+Vitro%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Duck CD8(+) T Cell Response to H5N1 Highly Pathogenic Avian Influenza Virus Infection In Vivo and In Vitro.</a> J Immunol. 209 (5), 979-990 (2022).</li>
<li>Jabbari, A., Harty, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+generation+and+modulation+of+antigen-specific+memory+CD8+T+cell+responses%5BTitle%5D)+AND+%22J+Leukoc+Biol%22%5BJournal%5D)">The generation and modulation of antigen-specific memory CD8 T cell responses.</a> J Leukoc Biol. 80 (1), 16-23 (2006).</li>
<li>Puleo, A., Carroll, C., Maecker, H. T., Gupta, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+Peripheral+Blood+Mononuclear+Cells+Using+Vacutainer+Cellular+Preparation+Tubes+%28CPT%28TM%29%29%5BTitle%5D)+AND+%22Bio+Protoc%22%5BJournal%5D)">Isolation of Peripheral Blood Mononuclear Cells Using Vacutainer Cellular Preparation Tubes (CPT(TM)).</a> Bio Protoc. 7 (2), e2103(2017).</li>
<li>Chometon, T. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+protocol+for+rapid+monocyte+isolation+and+generation+of+singular+human+monocyte-derived+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A protocol for rapid monocyte isolation and generation of singular human monocyte-derived dendritic cells.</a> PLoS One. 15 (4), e0231132(2020).</li>
<li>Qin, S., Zhang, Y., Tian, Y., Xu, F., Zhang, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subcellular+metabolomics%3A+Isolation%2C+measurement%2C+and+applications%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Biomed+Anal%22%5BJournal%5D)">Subcellular metabolomics: Isolation, measurement, and applications.</a> J Pharm Biomed Anal. 210, 114557(2022).</li>
<li>Pertoft, H., Johnsson, A., Wärmegård, B., Seljelid, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Separation+of+human+monocytes+on+density+gradients+of+Percoll%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol+Methods%22%5BJournal%5D)">Separation of human monocytes on density gradients of Percoll.</a> J Immunol Methods. 33 (3), 221-229 (1980).</li>
<li>Zanker, D., Waithman, J., Yewdell, J. W., Chen, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mixed+proteasomes+function+to+increase+viral+peptide+diversity+and+broaden+antiviral+CD8%2B+T+cell+responses%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Mixed proteasomes function to increase viral peptide diversity and broaden antiviral CD8+ T cell responses.</a> J Immunol. 191 (1), 52-59 (2013).</li>
<li>Chen, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+dominant+CD4%28%2B%29+T-cell+response+to+Helicobacter+pylori+reduces+risk+for+gastric+disease+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">A dominant CD4(+) T-cell response to Helicobacter pylori reduces risk for gastric disease in humans.</a> Gastroenterology. 144 (3), 591-600 (2013).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1.5 mL MİKRO-Santrifüj tüpleri</td><td>Biosharp</td><td>Cat#BS-15-M</td><td></td></tr><tr><td>15 mL Santrifüj tüpleri</td><td>Labselect</td><td>Cat#CT-002-15A</td><td></td></tr><tr><td>2-merkaptoetanol (55 mM)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Cat#M6250-100ML</td><td></td></tr><tr><td>48 Kuyucuklu doku kültürü plakası (İşlem görmemiş, düz tabanlı)</td><td>Biofil</td><td>Cat#TCP000048</td><td></td></tr><tr><td>50 mL Santrifüj tüpleri</td><td>Labselect</td><td>Kedi # CT-002-50A</td><td></td></tr><tr><td>96 kuyulu Eteksiz qPCR Plakaları</td><td>Labselect</td><td>Kedi # PP-96-NS-0100</td><td></td></tr><tr><td>BD Cytofix / Cytoperm kiti</td><td>BD Biyobilim</td><td>Kedi # BD 554714</td><td></td></tr><tr><td>Brefeldin A (BFA)</td> <td>BD Biyobilim</td><td>Kedi # 347688</td><td></td></tr><tr><td>Hücre kültürü CO2 inkübatör</td><td>Thermo Fisher</td><td>Heracell 150i GP</td><td></td></tr><tr><td>Santrifüj</td><td>Eppendorf</td><td>5810R</td><td></td></tr><tr><td>CFSE etiketleme kiti</td><td>Abcam</td><td>Cat#ab113853</td><td></td></tr><tr><td>ChamQ SYBR qPCR Master Mix</td><td>Vazyme</td><td>Cat#Q341-02</td><td></td></tr><tr><td>Ördek periferik kan lenfosit izolasyon kiti</td><td>Tbdscience</td><td>Cat#LTS1090D</td><td></td></tr><tr><td>Evo M-MLV RT Premix</td><td>Doğru Biyoteknoloji</td><td>Cat#AG11706</td><td></td></tr><tr><td>FastPure Hücre/Doku Toplam RNA İzolasyonu Kit V2</td><td>Vazyme</td><td>Kedi # RC112-01</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu</td><td>Gibco</td><td>Kedi # 10437-028</td><td></td></tr><tr><td>Akış sitometresi</td><td>Beckman Coulter</td><td>BA43347</td><td></td></tr><tr><td>Akış Tüpü</td><td>Beyotime</td><td>Kedi # FFC005</td><td></td></tr><tr><td>FlowJo v10.8.1</td><td>Ağaç Yıldız</td><td>https://www.flowjo.com</td><td></td></tr><tr><td>Keçi Anti-Fare 488, 1:50 seyreltme</td><td>Abbkine</td><td>Kedi # A23210</td><td></td></tr><tr><td>Keçi Anti-Fare IgG2b, FITC, 1:50 seyreltme</td><td>Güney Biyoteknoloji</td><td>Kedisi # 1091-31</td><td></td></tr><tr><td>Keçi Anti-Fare IgG3, PE, 1:250 seyreltme</td><td>Güney Biyoteknoloji ve nbsp;</td><td>Kedi # 1100-09S</td><td></td></tr><tr><td>GraphPad prizma 8.0.2</td><td>GraphPad Yazılımı</td><td>https://www.graphpad-prism.cn</td><td></td></tr><tr><td>H5N1 AIV suşu DK383</td><td>Zoonoz Önleme ve Kontrol Medicamen Ulusal ve Bölgesel Ortak Mühendislik Laboratuvarı</td><td>A / Duck / Guangdong / 383/2008</td><td></td></tr><tr><td>L-glutamin (200 mM)</td> <td>Gibco</td><td>Cat # 25030081</td><td></td></tr><tr><td>Mikroskobu</td><td>Motic</td><td>AE2000</td><td></td></tr><tr><td>Fare Anti-Ördek CD4, 1:50 seyreltme</td><td>Bio-Rad</td><td>Cat #MCA2478</td><td></td></tr><tr><td>Fare Anti-Duck CD8&alpha;, 1:50 seyreltme</td><td>GeneTex&nbsp;</td><td>Kedi # GTX41834</td><td></td></tr><tr><td>Fare Anti-Ördek IFN -& gama, 1:10 seyreltme</td><td>Laboratuvarımızda hazırlanmıştır&nbsp;</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>, NanoDrop Bir Spektrofotometre</td>, <td>Thermo Fisher</td><td>, NEAA AZY1603209</td><td></td></tr><tr><td>(gerekli olmayan</td><td>Gibco</td><td>Cat # 11140-050</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Gibco</td><td>Cat # 10010023</td><td></td></tr><tr><td>PCR Termal Döngüleyici</td><td>Biometra Biometra</td><td>Tone 96G</td><td></td></tr><tr><td>Penisilin-streptomisin çözeltisi</td><td>Gibco</td><td>Cat # 15070063</td><td></td></tr><tr><td>Gerçek Zamanlı PCR sistemi</td><td>Uygulanan Biyosistemler</td><td>ABI7500</td><td></td></tr><tr><td>rekombinant insan IL-2 (10 & mu; g)</td><td>USCNK</td><td>Kedi#RPA111Ga01</td><td></td></tr><tr><td>Kırmızı Kan Hücresi Lizis Tamponu</td><td>Tbdscience</td><td>Kedi#NH4CL2009</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640</td><td>Gibco</td><td>Kedisi#11875-119</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum piruvat (100 mM)</td><td>Gibco</td><td>Kedisi#11360-070</td><td></td></tr><tr><td>Tripan Mavi</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Kedisi#93595</td><td></td></tr><tr><td>İki haftalık yeşilbaş ördekler (Sheldrake)</td><td>bir ördek çiftliği Guangzhou</td><td>Kuzey Amerika</td><td></td></tr></tbody></table>

in vitro h5n1'e Özgü Ördek t hücreleri için kültür ve İntrahücre İçi sitokin boyama yöntemi ile İmmün yanıtların saptanması

In Vitro Culture for H5N1-Specific Duck T Cells and Detection of Immune Responses Using Intracellular Cytokine Staining Method

Bu protokol, ördeklerde antijene özgü T hücresi efektör yanıtlarının tespiti üzerine daha önceki bir çalışmaya dayanarak geliştirilmiştir20. Deneyin ilk adımı, sonraki efektör yanıt çalışmaları için temel teşkil eden virüse özgü T hücrelerinin in vitro kültürünü içerir. Başlangıçta, APC'ler inkübe edildi ve efektör hücrelerle birlikte kültürlendi. Morfolojik gözlemler, proliferasyondan sonra hücrelerin küme büyümesi sergilediğini ortaya koymuştur (Şekil 2A). ...

In Vitro H5N1'e Özgü Ördek T Hücreleri için Kültür ve İntrahücre İçi Sitokin Boyama Yöntemi ile İmmün Yanıtların Saptanması

The in vitro culture of T cells is a critical method for studying immune responses, viral infections, and potential therapeutic strategies. However, no ...

in-vitro-culture-for-h5n1-specific-duck-t-cells-detection-immune

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Hücre içermeyen HİV-1 parçacıklarına farklı olarak, enfekte olmuş CD4 + T hücrelerinin etkili bir plazmasitoid dendritik hücreler (PDC) ile algılanır. Bu yazıda tip I IFN serbest bırakılması ile değerlendirilen periferal kan tek-çekirdekli hücreleri (PBMC) ya da izole edilmiş bir PDC pDC'lerde ile doğuştan gelen algılamayı değerlendirmek için, HIV-1 ile enfekte edilmiş T hücreleri ile birlikte-kültür, bir yöntem tarif eder.

HIV-1 Enfekte CD4 Doğuştan Algılama Değerlendirilmesi<sup&gt; +</sup&gt; Bir kullanılması plazmositoid dendritik hücreler tarafından T Hücreleri<em&gt; Ex vivo</em&gt; Co-kültür sistemi.

In vivo ayrıntılı olarak T hücresi tepkilerini izlemek için yeteneği, bağışıklık tepkisinin anlamamıza geliştirilmesi için önemlidir. Burada akış sitometresi ile eş zamanlı olarak&gt; 250 parametrelerini değerlendiren bir in vivo T hücresi tahlilinde floresan hedef diziler (STA) kullanımını tarif eder.

T hücre yanıtlarının Değerlendirme Floresan hedef Dizilerin Kullanımı<em&gt; In vivo</em

Farelerde Batı Nil virüsü mutant enfeksiyonuna karşı dendritik hücrelerin antijen sunma kapasitesini ve antijene özgü T hücresi yanıtlarını ölçmek için iki akış sitometrisi tabanlı yöntem - bir in vitro T hücre hazırlama testi ve hücre içi sitokin boyama kullanıldı.

Batı Nil Virüsü Mutant Soy Enfeksiyon MyD88-aracılı Hücresel Bağışıklık Tepki Vitro Analizi

Aşıların nasıl çalıştığı hakkında genel bir bilgi eksikliği var. Burada, dendritik hücrelere ve T hücresi bağışıklığına özel olarak odaklanarak, aşılara karşı erken konak bağışıklık tepkileri hakkında fikir edinmek için ters genetik ve kemik iliği kimerik farelerin birlikte kullanılmasını öneriyoruz.

Kimerik fare modellerinde Rekombinant Grip aşıların burun içinde yoluyla mukozal bağışıklık Okumak

Grip A virüs (IAVs) önemli insan solunum patojenler vardır. İnsan fizyolojisi taklit hayvan modelleri IAVs patojenitesi anlamak ve preklinik roman aşı yaklaşımlar sınamasını gerçekleştirmek için gereklidir. Burada, biz IAV Patogenez, humoral yanıt ve enfeksiyon bir fare modeli kullanarak aşı etkinliğini değerlendirmek için teknikler açıklanmaktadır.

Grip A virüs enfeksiyonu bir fare modeli çalışmalarda

Fc-aracılı efektör fonksiyonları aktivasyonu antikorlar tarafından hedefleyen grip virüsü hemagglutinin ölçmek için bir yöntem açıklanmaktadır. Bu tahlil de Fc-aracılı bağışıklık ikna etmek için monoklonal antikorlar veya poliklonal sera diğer viral yüzey glikoproteinlerin hedefleme yeteneklerini değerlendirmek için adapte edilebilir.

Grip Hemagglutinin özel antikorlar tarafından indüklenen Fc-aracılı efektör fonksiyonları değerlendirmek için bir yöntem

İnterferon-gamma ELISpot tahlil için eskiden şiling şimdi domuz PBMCs gelişimi bulaşıcı hastalıklar çalışmak için son derece alakalı bu modelde T hücreli yanıt karakterizasyonu sağlar. DNA aşıları intradermal teslimatla ilişkili T hücre yanıtları ölçmek için tahlil başvurdum.

En iyi duruma getirilmiş Interferon-gamma ELISpot tahlil ölçü birimi T hücre yanıtları sonrasi hipererjik eskiden şiling şimdi domuz modelinde

Bu makalede, influenza virüs enfeksiyonunun fare modelinde Tfh ve GC B yanıtını değerlendirme protokolleri açıklanmaktadır.

Farelerde grip A Virüs Enfeksiyonu Sırasında T Foliküler Yardımcı Hücrelerin ve Germinal Merkez Yanıtının Değerlendirilmesi

Bu protokol, iki influenza A suşlarından zarf glikoproteinleri ile yüksek titreyen enfeksiyöz viral psödotipli parçacıklar (pp) üretmek için deneysel bir süreci ve bunların enfekteliğini nasıl belirleyeceklerini açıklamaktadır. Bu protokol, farklı zarf glikoproteinleri ile zarflı virüslerin herhangi bir tür pps geliştirmek için son derece uyarlanabilir.

Yüksek Patojenik H5N1 ve Kuş H7N9 Virüslerinden Zarf Glikoproteinleri Ile Yüksek Titer Enfeksiyöz İnfluenza Pseudotyped Partiküllerin Üretimi

Bu protokol, viral olarak enfekte olmuş nazal epitel hücreleri ile doğuştan gelen hücre aktivasyonu arasındaki erken etkileşimlerin araştırılmasını detaylandırır. Bağışıklık hücrelerinin bireysel alt kümeleri, viral enfeksiyonlara yanıt olarak aktivasyonlarına göre ayırt edilebilir. Daha sonra erken antiviral yanıtlar üzerindeki etkilerini belirlemek için daha fazla araştırılabilirler.

Solunum Virüsü Enfeksiyonu Sırasında Doğuştan İmmün Hücre Aktivasyonunun İncelenmesi için Temassız Ko-Kültür Modeli

Burada psödovirüs paketlemesi ve antikor nötralize edici aktivitenin ölçümü için bir protokol açıklanmaktadır.

Psödotip H5 Kuş Gribi Virüslerinin Kalsiyum Fosfat Transfeksiyon Yöntemi ile Hazırlanması ve Antikor Nötralize Edici Aktivitesinin Ölçülmesi

Öğrenin, H5N1'e özgü ördek T hücrelerini in vitro kültürlemek ve intrahücre içi sitokin boyama ile IFN-γ salınımını nicelendirmek için bu yöntemi. Akış sitometrisi analizi, uyarılmış kültürlerde IFN-γ-pozitif T hücrelerinin oranının arttığını göstermiştir.

In Vitro H5N1'e Özgü Ördek T Hücreleri için Kültür ve İntrahücre İçi Sitokin Boyama Yöntemi ile İmmün Yanıtların Saptanması

Daha fazla video keşfet