Name: Moleküler ve Hesaplamalı Çalışmalar için Araçlar Olarak Fare Meme Tümörlerinden Kanserle İlişkili Fibroblastlar (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-03T13:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 1 s
Description: Keşfedin meme kanserinde kanserle ilişkili fibroblastların rolünü moleküler ve hesaplamalı yöntemlerle. Transkriptomik analiz ve tümör organoidleri kullanılarak STAT3 faktörü ve tedavi hedefleri belirlenmiştir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

<table><tbody><tr><td>1Kb artı DNA merdiveni</td><td>ThermoFisher Bilimsel</td><td>10787018</td><td></td></tr><tr><td>24 kuyucuklu plaka</td><td>Sarstedt</td><td>833922</td><td></td></tr><tr><td>96 kuyucuklu plaka</td><td>Sarstedt</td><td>833924</td><td></td></tr><tr><td>Asetik asit</td><td>Sigma Aldirch</td><td>695092</td><td></td></tr><tr><td>Yaş I-HF</td><td>New England Biyolaboratuvarları</td><td>R3552 Serisi</td><td>-20 &deg'de saklayın; C</td></tr><tr><td>Betadin</td><td>Meda İlaç</td><td>23907076</td><td></td></tr><tr><td>B&uuml; rker Sayım odası&nbsp;</td><td>VWR</td><td>40443703</td><td></td></tr><tr><td>Düşük Sıcaklık Koter FineTip Disp</td><td>Kartaltepe</td><td>AX10339KL</td><td></td></tr><tr><td>Merkezkaç</td><td>Eppendorf Belediyesi</td><td>5810R Serisi</td><td></td></tr><tr><td>Konik tüp 15 mL</td><td>Sarstedt</td><td>62554502</td><td></td></tr><tr><td>Konik tüp 50 mL</td><td>Sarstedt</td><td>62547254</td><td></td></tr><tr><td>Cryopure 2 mL mikrotüpler</td><td>Sarstedt</td><td>72380992</td><td></td></tr><tr><td>Kristal menekşe</td><td>Sigma Aldirch</td><td>C0775 (İngilizce)</td><td>RT'de saklayın, bir Ocak&nbsp;</td></tr><tr><td>Kültür tabağı 100 mm çapında&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>833902</td><td></td></tr><tr><td>Kültür tabağı 60 mm çapında&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>833920</td><td></td></tr><tr><td>ddH20</td><td>Ev yapımı</td><td></td><td>RT'de saklayın, Biyolojik başlıkta kullanın</td></tr><tr><td>Dijital Kumpas</td><td>Preciva</td><td>02-301-2</td><td></td></tr><tr><td>Dijital Mikroskop</td><td>Leica</td><td>DM6B</td><td></td></tr><tr><td>Dimetil sülfoksit</td><td>Sigma Aldirch</td><td>D8418 Serisi</td><td>Biyolojik başlıkta kullanım</td></tr><tr><td>Dulbecco' s Modifiye Kartal' s Orta (DMEM)</td><td>Gibco</td><td>11965092</td><td>4 &deg; C, Biyolojik başlıkta kullanın</td></tr><tr><td>EcoRI-HF Serisi</td><td>New England Biyolaboratuvarları</td><td>R3101 Serisi</td><td>-20 &deg'de saklayın; C</td></tr><tr><td>Etilendiamintetraasetik asit (EDTA)</td><td>Sigma Aldirch</td><td>E6758 (İngilizce)</td><td>RT'de saklayın, Biyolojik başlıkta kullanın</td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu (FBS)</td><td>Gibco</td><td>16000044</td><td>4 &deg; C, Biyolojik başlıkta kullanın</td></tr><tr><td>Filtrelenmiş uçlar 10 &micro; L</td><td>Sarstedt</td><td>703010255</td><td></td></tr><tr><td>Filtrelenmiş uçlar 100 &mikro; L</td><td>Sarstedt</td><td>703030255</td><td></td></tr><tr><td>Filtrelenmiş uçlar 1000 &micro; L</td><td>Sarstedt</td><td>703060255</td><td></td></tr><tr><td>Filtrelenmiş uçlar 20 &micro; L</td><td>Sarstedt</td><td>703030265</td><td></td></tr><tr><td>Filtrelenmiş uçlar 200 &mikro; L</td><td>Sarstedt</td><td>703031255</td><td></td></tr><tr><td>Filtropur S Plus 0,20 &micro; m&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>831826102</td><td></td></tr><tr><td>Filtropur S Plus 0,45 &micro; m&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>831826</td><td></td></tr><tr><td>İnce makas</td><td>2Biol</td><td>1406009</td><td></td></tr><tr><td>Forceps</td><td>2Biol</td><td>1102412</td><td></td></tr><tr><td>Genetik</td><td>Gibco</td><td>10131035</td><td>4 &deg; C, Biyolojik başlıkta kullanın</td></tr><tr><td>Lipofectamine 2000 Transfeksiyon Reaktifi</td><td>ThermoFisher Bilimsel</td><td>11668019</td><td>4 &deg; C, Biyolojik başlıkta kullanın</td></tr><tr><td>8 &mu ile Matrigel istila odaları; m PET membran&nbsp;</td><td>Corning</td><td>354480</td><td></td></tr><tr><td>Mikroplaka okuyucu (600 nm absorbans)</td><td>Promega</td><td>GM3500 Serisi</td><td></td></tr><tr><td>Mikrotüpler 1.5 mL&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>7269001</td><td></td></tr><tr><td>Optimem</td><td>Gibco</td><td>31985047</td><td>4 &deg; C, Biyolojik başlıkta kullanın</td></tr><tr><td>Paraformaldehit (PFA)</td><td>Sigma Aldirch</td><td>158127</td><td>RT'de saklayın, çeker ocakta kullanın</td></tr><tr><td>pBABE-neo büyükTcDNA&nbsp;</td><td>Addgene</td><td>1780</td><td>-20 &deg'de saklayın; C, Biyolojik başlıkta kullanın</td></tr><tr><td>pCL-Ampho</td><td>Novus Biyolojik&nbsp;</td><td>18746853</td><td>-20 &deg'de saklayın; C, Biyolojik başlıkta kullanın</td></tr><tr><td>pCMV-R8.74</td><td>Addgene</td><td>22036</td><td>-20 &deg'de saklayın; C, Biyolojik başlıkta kullanın</td></tr><tr><td>pCMV-VSVG&nbsp;</td><td>Addgene</td><td>8454</td><td>-20 &deg'de saklayın; C, Biyolojik başlıkta kullanın</td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin (Pen Strepto, 10,000 &mu; g/mL)&nbsp;</td><td>Gibco</td><td>15140122</td><td>4 &deg; C, Biyolojik başlıkta kullanın</td></tr><tr><td>Faz kontrast mikroskobu&nbsp;</td><td>Olympus&nbsp;</td><td>BX42 Serisi</td><td></td></tr><tr><td>Fosfat Tamponlu Salin&nbsp; (PBS)</td><td>Ev yapımı</td><td></td><td>RT'de saklayın, Biyolojik başlıkta kullanın</td></tr><tr><td>pLKO.1-Puro&nbsp;</td><td>Addgene</td><td>10878</td><td>-20 &deg'de saklayın; C, Biyolojik başlıkta kullanın</td></tr><tr><td>Poli-L-lizin çözeltisi</td><td>Sigma Aldirch</td><td>P8920</td><td>4 &deg; C, Biyolojik başlıkta kullanın</td></tr><tr><td>Puromisin dihidroklorür from&nbsp; Streptomyces alboniger</td><td>Sigma Aldirch</td><td>P8833</td><td></td></tr><tr><td>rCutSmart Tampon&nbsp;</td><td>New England Biyolaboratuvarları</td><td>B6004</td><td>-20 &deg'de saklayın; C</td></tr><tr><td>Kemirgen tıraş makinesi</td><td>Aesculap</td><td>GT416 Serisi</td><td></td></tr><tr><td>Roswell Park Anıt Enstitüsü (RPMI)</td><td>Gibco</td><td>61870010</td><td>4 &deg; C, Biyolojik başlıkta kullanın</td></tr><tr><td>Yuvarlak Uçlu Susamış Swablar</td><td>Sigma Aldirch</td><td>Z744127</td><td></td></tr><tr><td>Neşter</td><td>Gima</td><td>27041</td><td></td></tr><tr><td>Secura Yarı Mikro Terazi</td><td>Sartorius</td><td>SECURA125-1S</td><td></td></tr><tr><td>Serolojik pipet 10 mL&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>861254001</td><td></td></tr><tr><td>Serolojik pipet 2 mL&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>861252001</td><td></td></tr><tr><td>Serolojik pipet 25 mL&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>861256001</td><td></td></tr><tr><td>Serolojik pipet 5 mL&nbsp;</td><td>Sarstedt</td><td>861253001</td><td></td></tr><tr><td>Dikişler 5-0</td><td>Etik Simge</td><td>1866G</td><td></td></tr><tr><td>Şırınga 10 mL</td><td>Pentafert</td><td>00202250E14</td><td></td></tr><tr><td>Şırınga 5 mL</td><td>Pentafert</td><td>00202250E12</td><td></td></tr><tr><td>Şırınga Omnican İnsülin 1 mL</td><td>Braun</td><td>9151125S</td><td></td></tr><tr><td>Doku adezifi</td><td>3M Vetbond</td><td>1469SB</td><td></td></tr><tr><td>Transwell ekler 8 &micro; m gözenek&nbsp;</td><td>Doğan</td><td>353097</td><td></td></tr><tr><td>Transwell Matrigel insertler 8 &micro; m gözenek&nbsp;</td><td>Corning</td><td>354480</td><td></td></tr><tr><td>Tripsin-EDTA (%0,5), fenol kırmızısı içermez</td><td>Gibco</td><td>15400054</td><td></td></tr><tr><td>Vivaspin 20 santrifüj konsantratör MWCO 10,000 Da&nbsp;</td><td>Sigma Aldirch</td><td>Z614602</td><td></td></tr></tbody></table>

moleküler ve hesaplamalı Çalışmalar için araçlar olarak fare meme tümörlerinden kanserle İlişkili fibroblastlar

Cancer-Associated Fibroblasts from Mouse Mammary Tumors as Tools for Molecular and Computational Studies

CAF'ların faaliyetlerinin in vitro değerlendirmesi Meme tümörü kaynaklı kanserle ilişkili fibroblastların (CAF'ler) meme kanserinin (BC) agresif özelliklerine katkısı, adım 3'e göre üretilen ölümsüzleştirilmiş CAF'ler (iCAF'ler) kullanılarak incelenmiştir. iCAF'ler, adım 6'da tarif edildiği gibi süper aktive edildi, daha sonra 4T1 hücrelerini 48 saat boyunca tedavi etmek için kullanılan CM'lerini toplamak için sDMEM'de aç bırakıldı (bkz. adım 7.1). Bu tedaviyi in vitro</...

Moleküler ve Hesaplamalı Çalışmalar için Araçlar Olarak Fare Meme Tümörlerinden Kanserle İlişkili Fibroblastlar

A compelling body of research has confirmed the critical role of the tumor microenvironment (TME) in the growth and aggressiveness of breast cancer (BC). ...

cancer-associated-fibroblasts-from-mouse-mammary-tumors-as-tools-for

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kanser Araştırmaları

Bu raporda, izole etmek için bir sistem ve fare meme bezi kültür donör hücreleri göstermek ve bu hücrelerin orthotopically nakli stromal analiz etmek için alıcı farelerde meme tümör gelişimi sırasında epitelyal etkileşimler.

C57BL/6J Fare Stromal Cells ve Karsinomu Hücreler Meme Nakli

Karsinom ile ilişkili fibroblastlar (CAFs) tümör stroma içinde mevcut miyofibroblastlar zengin, tümör progresyonu sürüş önemli bir rol oynamaktadır. Biz deneysel insan meme fibroblastlar CAFs üretmek için bir coimplantation tümör xengraft modeli geliştirdi. Protokolü tumourigenesis teşvik etmek için bir yeteneği kazandırmak CAF miyofibroblastlar kurmak anlatılmaktadır.

İnsan Meme Fibroblastlar Karsinom İlişkili Fibroblastlar Deneysel Nesil (CAFs)

Kanser İlişkili Fibroblastlar (cafs) proliferasyon, anjiyogenez ve inflamasyon teşvik eden sinyal yoluyla tümör gelişimini, büyüme ve ilerlemesini hızlandırabilir. Burada bir yüzey işaretleyici olarak PDGFRα kullanarak hücre sıralama ile taze fare ve insan dokularında normal fibroblastlar ve cafs saf popülasyonlarının izole etmek için bir yöntem açıklanmaktadır.

Floresans Aktif Hücre Ayırma (FACS) Taze Dokular Normal ve Kanser ilişkili Fibroblastlar İzolasyonu

Burada, kanser metastazında pulmoner alveoler makrofajların fonksiyonlarını incelemek için model ve yaklaşımı açıklıyoruz. Bu hücrelerin metastazdaki rolünü göstermek için, alveolar makrofajın klodronat lipozomlarla tükenmesi ile birlikte meme kanserinin sinjenik (4T1) modeli kullanıldı.

Meme Kanseri Metastaz alveoler makrofajlar Rolü incelenmesi

Kanser hücrelerini ve fibroblastları birlikte enjekte etmek ve zamanla tümör büyümesini izlemek için bir protokol sağlanır. Bu protokol, fibroblastların tümör büyümesinin düzenleyicileri olarak rolünün moleküler temelini anlamak için kullanılabilir.

Kanserle İlişkili Fibroblastların Tümör Büyümesindeki Rolünü Araştırmak İçin Bir Fare Modeli

Bu makale, üçlü negatif meme kanserinin singeneik bir murine modelinden primer kanser ilişkili fibroblastların izolasyonu ve kültürü ve tümör mikroçevrimini hedeflemek için tasarlanmış yeni nanopartiküllerin preklinik çalışması için uygulanması için bir protokol sağlamayı amaçlamaktadır.

Hedeflenen Nanopartiküllerin Çalışması için Meme Kanserinin Singeneik Murine Modelinden Primer Kanserle İlişkili Fibroblastların İzolasyonu

Çok hücreli 3D tümör sferoidleri, akciğer adenokarsinom hücreleri, fibroblastlar ve monositler ile hazırlandı ve bunu kanserle ilişkili fibroblastların (CAF'lar) bu sferoidlerden izole edilmesi izledi. İzole CAF'lar, mitokondriyal transmembran potansiyelini, reaktif oksijen türlerini ve enzimatik aktiviteleri inceleyerek mitokondriyal sağlığı değerlendirmek için normal fibroblastlarla karşılaştırıldı.

3D Çok Hücreli Akciğer Tümörü Sferoidlerinden İzole Edilen Kanserle İlişkili Fibroblastlarda Mitokondriyal Sağlığın Değerlendirilmesi

Başlangıçta slaytlar üzerinde sabitlenmiş olan meme dokusunu histopatolojik değerlendirme için başarıyla çıkarmak, işlemek, kesmek ve lekelenmek için bir yöntem geliştirdik. Bu yöntem, üreme ve gelişimsel test kılavuz çalışmalarında meme bezlerinin tümünün monte edilmesini ve değerlendirilmesini teşvik edebilir.

Lezyon Tanımlaması için Meme Bandı Bütün Dağılımları

Bu iletişim kuralı periferik kan ve serum/plazma tek nükleotit polimorfizmi (SNP) değerlendirme ve ELISA tahlil gibi aşağı akım analizleri için saklamak için basit ve kullanışlı bir yöntem açıklanır.

Kan ve Serum lekeler kanser biyolojik değerlendirmek örnek depolama için yararlı bir araç olarak kurutulmuş

Bu protokolün amacı, immünofluorescence, transkripsiyon gibi farklı analiz sistemlerinde ele alınabilir bir tümör toplu benzeri ortamda, kanserle ilişkili fibroblastların (CAFs) farklılaşmasını incelemek için bir 3D in vitro modeli kurmaktır analiz ve yaşam hücresi görüntüleme.

Kanser Ilişkili fibroblastlar farklılaşma ve Invazyon In vitro etütler için daha fizyolojik bir sistem olarak bir 3D Küroid modeli

Keşfedin meme kanserinde kanserle ilişkili fibroblastların rolünü moleküler ve hesaplamalı yöntemlerle. Transkriptomik analiz ve tümör organoidleri kullanılarak STAT3 faktörü ve tedavi hedefleri belirlenmiştir.

Moleküler ve Hesaplamalı Çalışmalar için Araçlar Olarak Fare Meme Tümörlerinden Kanserle İlişkili Fibroblastlar

Daha fazla video keşfet