Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Kimerik Antijen Reseptörü T-Hücre Tedavisi Araştırmaları için Dolaşımdaki Glioma Modeli

470 görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/68881

⸱

17 Ekim 2025

 ,  ,  ,  , 

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

Bu protokol, kimerik antijen reseptörü T hücresi tedavisinin in vivo terapötik etkisini araştırmak için lateral ventrikül enjeksiyonu ile dolaşımdaki bir glioma modeli oluşturur.

Özet

Beyin omurilik sıvısında (BOS) dolaşan tümör hücreleri, gliomada tümör nüksü ve intrakraniyal metastazda önemli bir faktördür. Birçok çalışma, BOS'ta dolaşımdaki tümörü hedeflemek ve ortadan kaldırmak için etkili stratejiler belirlemeye çalışmaktadır. Kimerik antijen reseptörü (CAR) T hücresi tedavisi, dolaşımdaki çeşitli tümörler için sıklıkla kullanılmaktadır. Bununla birlikte, uygun bir dolaşımdaki glioma modelinin olmaması nedeniyle araştırmalar sınırlıdır. Burada dolaşımdaki bir glioma modeli geliştirildi ve CAR T hücresi tedavisi araştırmalarında uygulandı. Bu model, intrakraniyal hastalığın lokal tedavisinde yaygın olarak kullanılan lateral ventrikül enjeksiyonu kullanılarak oluşturulmuştur. Glioma hücreleri, intrakraniyal primer tümörü oluşturmak için lateral ventriküle enjekte edildi. Lateral ventrikülden dökülen tümörler BOS'ta dolaşımdaki tümörü belirtmek için kullanıldı. Modelin oluşturulması kolaydır ve dolaşımdaki gliomanın CAR T hücresi tedavisi üzerine çeşitli çalışmalarda uygulanabilir. Sonuç olarak, dolaşımdaki glioma modeli, dolaşımdaki tümörün etkili CAR T hücresi tedavisi çalışmaları için benzersiz bir glioma metastaz modeli sağlar.

Giriş

Gliom erişkinlerde en sık görülen primer malign beyin tümörüdür 1,2. Cerrahi, radyoterapi ve kemoterapi dahil olmak üzere mevcut tedaviler, sadece 14-15 aylık medyan sağkalım ile sınırlı etkinlik göstermektedir 3,4,5. BOS'ta dolaşan glioma hücreleri, tümör nüksü ve intrakraniyal metastazda çok önemli bir rol oynar 6,7. Bu nedenle, dolaşımdaki glioma hücrelerini ortadan kaldırmak için daha etkili tedavi stratejilerinin geliştir....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Bu çalışmadaki hayvan deneylerinin tümü, Kurumsal İnceleme Kurulu ve Nanjing Tıp Üniversitesi Hayvan Etiği Komitesi (IACUC-1905048) tarafından onaylanmış ve denetlenmiştir. Bu çalışma için 6-8 haftalık C57BL/6J dişi fareler kullanıldı. Kullanılan reaktifler ve ekipman Malzeme Tablosunda listelenmiştir.

1. Hayvan hazırlama

  1. Fareleri bir bariyerde, 12 saat/12 saat aydınlık/karanlık döngüsünde, 24 °C ortam sıcaklığında ve %50 bağıl nemde kafeste barındırın.
  2. Fareleri tartın ve 50 mg / kg pentobarbital sodyum ve 10 mg / kg ksilazin17 intraperitoneal e....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

CAR-T tedavisi için dolaşımdaki glioma modelinin şematik diyagramı Şekil 1'de gösterilmektedir. CAR-T hücreleri, terapötik etkilerini göstermek için bir mikro şırınga kullanılarak lateral ventriküle enjekte edildi. Bu yöntem, dolaşımdaki glioma hücrelerini hedef alarak CAR-T hücrelerinin beyne doğrudan iletilmesini sağlar. Enjeksiyon prosedürü, GL261 hücrelerinin fare lateral ventrikülüne implantasyonunu takiben 11. günde gerçekleştirildi. Çeşitli zaman nokta.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Bu çalışmada lateral ventrikül enjeksiyonu kullanılarak oluşturulan dolaşımdaki glioma modeli, mevcut modellere göre çeşitli avantajlar sunarak önemli bir ilerleme sağlamaktadır. Lateral ventrikül enjeksiyon tekniği yüksek oranda tekrarlanabilir ve nispeten kısa bir zaman diliminde tutarlı tümör modellemesi sağlar. Bu, onu BOS'a tümör hücresi yayılımını araştırmak ve CAR-T hücreleri gibi tedavilerin etkinliğini değerlendirmek isteyen araştırmacılar için değerli bir araç haline getirir. K.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.

Teşekkürler

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (82230059), Çin'in Jiangsu Eyaleti Anahtar Araştırma Geliştirme Programı (BE2022770) tarafından finanse edilmiştir.

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Emilebilir cerrahi sütürŞangay Pudong Jinhuan Tıbbi Ürünler Co, LtdR611 Serisi
CAR-TYaratıcı Biyolaboratuvarlar
D-Luciferin potasyum tuzuMCEHY-12591B
GL261-Luc-GFP SerisiŞangay Zhong Qiao Xin Zhou Biyoteknoloji Co, Ltd.ZQ0932 Serisi
İn vivo biyolüminesans görüntüleme sistemiTanonTanon ABL X6
Laboratuvar hayvanı tıraş makinesiBeyotime BiyoteknolojiFS600 Serisi
FareNanjing Tıp Üniversitesi Hayvan Çekirdeği Tesisi
Mikroenjeksiyon pompasıGeri sarR462 Serisi
Mikro şırıngaHamilton87943
Mini kafatası matkabıGeri sar78001
Pentobarbital sodyum Kimya Kaynağı57-33-0
Stereotaksik aparatGeri sar68043
KsilazinKimya Kaynağı7361-61-7

Kaynaklar

  1. Lim, M., Xia, Y., Bettegowda, C., Weller, M. Current state of immunotherapy for glioblastoma. Nat Rev Clin Oncol. 15 (7), 422-442 (2018).
  2. Weller, M., et al. Glioma. Nat Rev Dis Primers. 10 (1), 33(2024).
  3. Van Den Bent, M. J., et al.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

CAR T-Hücre TedavisiSerebrospinal Sıvı TümörüGlioma MetastazıLateral Ventrikül Enjeksiyonuİntrakraniyal TümörTümör NüksüDolaşımdaki Tümör Hücreleriİntrakraniyal Metastaz