Name: Değiştirilmiş İsviçre Roll Tekniği Kullanarak Fare Mide Kası Katmanlarının Geliştirilmiş Mekansal Haritalanması (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-25T14:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 18 s
Description: Öğrenin fare mide dokusunun İsviçre Roll tekniğiyle hazırlanması ve tüm bölgelerin tek kesitte görüntülenmesi. Bu yöntem histolojik analizde uzamsal oryantasyonu korur ve tekrarlanabilirliği artırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Chaudhry, S. R., Liman, M. N. P., Omole, A. E., Peterson, D. C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aChaudhry%2C+SR+%22Anatomy%2C+abdomen+and+pelvis%3A+Stomach%22">Anatomy, abdomen and pelvis: Stomach</a>. , StatPearls. (2025).</li>
<li>Sanders, K. M., Drumm, B. T., Cobine, C. A., Baker, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ca%282%2B%29+dynamics+in+interstitial+cells%3A+Foundational+mechanisms+for+the+motor+patterns+in+the+gastrointestinal+tract%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Ca(2+) dynamics in interstitial cells: Foundational mechanisms for the motor patterns in the gastrointestinal tract.</a> Physiol Rev. 104 (1), 329-398 (2024).</li>
<li>Moolenbeek, C., Ruitenberg, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+%26%2334%3BSwiss+roll%26%2334%3B%3A+A+simple+technique+for+histological+studies+of+the+rodent+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">The &#34;Swiss roll&#34;: A simple technique for histological studies of the rodent intestine.</a> Lab Anim. 15 (1), 57-59 (1981).</li>
<li>Li, S., You, S., Mao, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protocol+for+multiplex+immunofluorescence+imaging+of+mouse+intestinal+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Protocol for multiplex immunofluorescence imaging of mouse intestinal tumors.</a> STAR Protoc. 6 (2), 103776(2025).</li>
<li>Bialkowska, A. B., Ghaleb, A. M., Nandan, M. O., Yang, V. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+Swiss-rolling+technique+for+intestinal+tissue+preparation+for+immunohistochemical+and+immunofluorescent+analyses%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Improved Swiss-rolling technique for intestinal tissue preparation for immunohistochemical and immunofluorescent analyses.</a> J Vis Exp. (113), e54161(2016).</li>
<li>Dooley, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimized+protocol+for+intestinal+Swiss+rolls+and+immunofluorescent+staining+of+paraffin-embedded+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Optimized protocol for intestinal Swiss rolls and immunofluorescent staining of paraffin-embedded tissue.</a> J Vis Exp. (209), e66977(2024).</li>
<li>Hayashi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet-derived+growth+factor+receptor-alpha+regulates+proliferation+of+gastrointestinal+stromal+tumor+cells+with+mutations+in+KIT+by+stabilizing+ETV1%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Platelet-derived growth factor receptor-alpha regulates proliferation of gastrointestinal stromal tumor cells with mutations in KIT by stabilizing ETV1.</a> Gastroenterology. 149 (2), 420-432.e16 (2015).</li>
<li>Hayashi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TRP53-mediated+cell+cycle+arrest+of+precursors+underlies+interstitial+cell+of+Cajal+depletion+during+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Gastroenterol+Hepatol%22%5BJournal%5D)">TRP53-mediated cell cycle arrest of precursors underlies interstitial cell of Cajal depletion during aging.</a> Cell Mol Gastroenterol Hepatol. 11 (1), 117-145 (2021).</li>
<li>Rothenberg, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+a+cKit%28%2B%29+colonic+crypt+base+secretory+cell+that+supports+Lgr5%28%2B%29+stem+cells+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Identification of a cKit(+) colonic crypt base secretory cell that supports Lgr5(+) stem cells in mice.</a> Gastroenterology. 142 (5), 1195-1205 (2012).</li>
<li>Gomez-Pinilla, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ano1+is+a+selective+marker+of+interstitial+cells+of+Cajal+in+the+human+and+mouse+gastrointestinal+tract%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Gastrointest+Liver+Physiol%22%5BJournal%5D)">Ano1 is a selective marker of interstitial cells of Cajal in the human and mouse gastrointestinal tract.</a> Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 296 (6), G1370-G1381 (2009).</li>
<li>Lee, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anoctamin+1%2FTMEM16A+controls+intestinal+Cl%28-%29+secretion+induced+by+carbachol+and+cholera+toxin%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Anoctamin 1/TMEM16A controls intestinal Cl(-) secretion induced by carbachol and cholera toxin.</a> Exp Mol Med. 51 (8), 1-14 (2019).</li>
<li>Uhlen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue-based+map+of+the+human+proteome%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Tissue-based map of the human proteome.</a> Science. 347 (6220), 1260419(2015).</li>
<li>Uhlen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+human+protein+atlas+for+normal+and+cancer+tissues+based+on+antibody+proteomics%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Proteomics%22%5BJournal%5D)">A human protein atlas for normal and cancer tissues based on antibody proteomics.</a> Mol Cell Proteomics. 4 (12), 1920-1932 (2005).</li>
<li>San Roman, A. K., Jayewickreme, C. D., Murtaugh, L. C., Shivdasani, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wnt+secretion+from+epithelial+cells+and+subepithelial+myofibroblasts+is+not+required+in+the+mouse+intestinal+stem+cell+niche+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Wnt secretion from epithelial cells and subepithelial myofibroblasts is not required in the mouse intestinal stem cell niche in vivo.</a> Stem Cell Reports. 2 (2), 127-134 (2014).</li>
<li>Drokhlyansky, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+human+and+mouse+enteric+nervous+system+at+single-cell+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">The human and mouse enteric nervous system at single-cell resolution.</a> Cell. 182 (6), 1606-1622.e23 (2020).</li>
<li>Jiang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+and+tracing+Grem1%28%2B%29+stromal+cells+in+an+Apc+%28Min%2F%2B%29+mouse+utilizing+cryopreserved+intestinal+sections+prepared+via+modified+Swiss-roll+technique%5BTitle%5D)+AND+%22iScience%22%5BJournal%5D)">Mapping and tracing Grem1(+) stromal cells in an Apc (Min/+) mouse utilizing cryopreserved intestinal sections prepared via modified Swiss-roll technique.</a> iScience. 27 (11), 111173(2024).</li>
<li>Izbeki, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+Kitlow+progenitors%2C+reduced+stem+cell+factor+and+high+oxidative+stress+underlie+gastric+dysfunction+in+progeric+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Loss of Kitlow progenitors, reduced stem cell factor and high oxidative stress underlie gastric dysfunction in progeric mice.</a> J Physiol. 588 (Pt 16), 3101-3117 (2010).</li>
<li>Hayashi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperglycemia+increases+interstitial+cells+of+Cajal+via+MAPK1+and+MAPK3+signaling+to+ETV1+and+KIT%2C+leading+to+rapid+gastric+emptying%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Hyperglycemia increases interstitial cells of Cajal via MAPK1 and MAPK3 signaling to ETV1 and KIT, leading to rapid gastric emptying.</a> Gastroenterology. 153 (2), 521-535.e20 (2017).</li>
<li>Gao, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia-inducible+factor+1alpha+stabilization+restores+epigenetic+control+of+nitric+oxide+synthase+1+expression+and+reverses+gastroparesis+in+female+diabetic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Hypoxia-inducible factor 1alpha stabilization restores epigenetic control of nitric oxide synthase 1 expression and reverses gastroparesis in female diabetic mice.</a> Gastroenterology. 165 (6), 1458-1474 (2023).</li>
<li>Kuro-o, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mutation+of+the+mouse+klotho+gene+leads+to+a+syndrome+resembling+ageing%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Mutation of the mouse klotho gene leads to a syndrome resembling ageing.</a> Nature. 390 (6655), 45-51 (1997).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>#5SF Pensetler</td><td>İYI BILIM ARAÇLARI</td><td>11252-00</td><td></td></tr><tr><td>Sığır serumu albumin&nbsp;</td><td>SIGMA-ALDRICH</td><td>A7906</td><td></td></tr><tr><td>ColdVision MC-LS LED ışık kaynağı</td><td>SCHOTT</td><td>MC-LS</td><td></td></tr><tr><td>Konfokal yazılım&nbsp;</td><td>Nikon</td><td>Nikon NIS-Elements Görüntüleme Yazılımı</td><td></td></tr><tr><td>Cryoseal XYL</td><td>Epredida</td><td>9312-4</td><td></td></tr><tr><td>DAPI (4',6-diamidino-2-fenilindol, dilaktit)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>D3571</td><td></td></tr><tr><td>Büyük Diseksiyon Tabakları</td><td>Yaşayan Sistemler&nbsp; Enstrümantasyon</td><td>SKU: DD-90</td><td></td></tr><tr><td>Eşek anti-keçi AF647 pAb</td><td>Yaşam Teknolojileri</td><td>A21447</td><td>Lot: 1739289 RRID:AB_2535864</td></tr><tr><td>Eşek anti-fare AF555 pAb</td><td>Yaşam Teknolojileri</td><td>A31570</td><td>Lot: 1774719 RRID:AB_2536180</td></tr><tr><td>Eşek anti-tavşan AF488 pAb</td><td>Yaşam Teknolojileri</td><td>A21206</td><td>Lot: 2668665 RRID:AB_2535792</td></tr><tr><td>E-cadharin (1:400 seyreltme)</td><td>BD Bioscience</td><td>610181</td><td>parsel: 25510 RRID:AB_397580</td></tr><tr><td>Eosin</td><td>ELITechGroup</td><td>$SS-071C</td><td></td></tr><tr><td>Epoksi Kaplamalı Pensetler</td><td>İYI BILIM ARAÇLARI</td><td>11210-10</td><td></td></tr><tr><td>Etanol</td><td>SIGMA-ALDRICH</td><td>459828-4L</td><td></td></tr><tr><td>FLEX TUBE 1.5 mL</td><td>Eppendorf</td><td>22364111</td><td></td></tr><tr><td>Gazlı Bez Süngerleri</td><td>Fisherscientific</td><td>22-362-178</td><td></td></tr><tr><td>Sertleştirilmiş İnce Makas</td><td>İYI BILIM ARAÇLARI</td><td>14090-09</td><td></td></tr><tr><td>Hematoksilin</td><td>Epredia</td><td>7211</td><td></td></tr><tr><td>KIT (0.2 & mikro; g/mL; 1:1000 seyreltme)</td><td>R& D Sistemleri</td><td>AF1356</td><td>Lot: IEO0217101 RRID: AB_354750</td></tr><tr><td>LENS TEMİZLEME ÇÖZÜMÜ 1 OZ SPREY ŞIŞESI</td><td>Nikon</td><td>77013066</td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop Kapak Camı</td><td>Fisher Scientific</td><td>12541016</td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop Slaytları</td><td>CardinalHealth</td><td>M6133A</td><td></td></tr><tr><td>Küçük Pinler</td><td>İYI BILIM ARAÇLARI</td><td>26002-20</td><td></td></tr><tr><td>MYH11 (1:400 seyreltme)</td><td>Biyomedikal Teknolojiler</td><td>BT-562</td><td>RRID:AB_10013421</td></tr><tr><td>Oje</td><td>GÜNAHKAR RENKLER</td><td>7.33855E+11</td><td></td></tr><tr><td>İğne 30 G x 1/2 inç;</td><td>BD Bioscience</td><td>305106</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehit</td><td>SIGMA-ALDRICH</td><td>158127-500G</td><td></td></tr><tr><td>Personna Tek Kenarlı Bıçaklar</td><td>Jilet Bıçak Şirketi.</td><td>76247-652</td><td></td></tr><tr><td>ReadyProbes Fare-Üzerinde IgG Engelleme Çözümü (30x)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>R37621</td><td>Lot: 3226230</td></tr><tr><td>SlowFade Diamond Antifade Mountant (Montaj medyası)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>S36972</td><td></td></tr><tr><td>StainTray 10 sürgü boyama sistemi</td><td>Simport Scientific</td><td>M918-2</td><td></td></tr><tr><td>Stereo mikroskop 0.8x-5x</td><td>Nikon</td><td>SMZ645</td><td></td></tr><tr><td>Sucrose&nbsp;</td><td>SIGMA-ALDRICH</td><td>S9378-1KG</td><td></td></tr><tr><td>Yüzey Amplifikatörleri X-100 (Triton X)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>28314</td><td></td></tr><tr><td>TMEM16A (ANO1: 1:400 seyreltme)</td><td>Abcam</td><td>ab53212&nbsp;</td><td>Lot: GP3295656-1 RRID: AB_883075</td></tr><tr><td>Transfer Pipiti</td><td>Falcon</td><td>357575</td><td></td></tr><tr><td>TUBB3 (1:400 seyreltme)</td><td>Hücre sinyal teknolojisi</td><td>4466</td><td>Lot: 5 RRID: AB_1904176</td></tr><tr><td>Xylenes&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>X3P-1GAL</td><td>ÇOK 206238</td></tr></tbody></table>

değiştirilmiş İsviçre roll tekniği kullanarak fare mide kası katmanlarının geliştirilmiş mekansal haritalanması

Enhanced Spatial Mapping of Mouse Gastric Muscle Layers Using a Modified Swiss Roll Technique

Yeni yöntemle, fare mide ruloları midenin üç ana bölgesini de içeriyordu: fundus, korpus ve antrum, ayrıca yemek borusunun küçük bir kısmı ve onikili komi, tek bir bölümde yer alıyordu. Tüm midenin tek bir bölüme dahil edilmesi, kapsamlı bölgesel analizi mümkün kılmaktadır (Şekil 1). Mide rulonlarının tam görüntülerinin hematoksilin ve eozin (H&amp;E) boyaması, tüm bölgelerde iyi korunmuş mide mimarisini göstererek mukozal tabakalar, submukozal ve muscularis katmanlarının net görselleştirilmesini sağlamıştır (Şekil 3). Şekil 4, Cajal (ICC; fazik bağırsak hareketliliğinin altında ritmik yavaş dalgalar üreten kalp pili hücreleri; KIT ve ANO1 ile tanımlanmıştır), enterik nöronların (gastrointestinal hareketliliği koordine eden enterik sinir sistemi nöronları; TUBB3 immünboyama ile tanımlanmıştır) ve çekirdeklerin (DAPI) interstisiel hücrelerinin temsili immünofluoresan boyamasını göstermektedir. Mide mukozasında, KIT, daha öncebildirildiği gibi Paneth ve kadeh hücrelerinde de eksprese edilir 9,10,11. ANO1 ayrıca özellikle fundusun sütunvari epitel hücrelerinde mide epitelinde yüksek derecede ekspreslenir; bu, klorür taşınımı ve mukozal salgılanmadakirolüyle uyumludur 11. Ayrıca, İnsan Protein Atlas12,13 verilerine göre, TUBB3 belirli mide endokrin hücrelerinde ve mukus salgılayan hücrelerde de ekspresyona geçmektedir. Şekil 5, MYH11 ile etiketlenen düz kas hücrelerinin temsil immünofluoresan boyamalarını, E-kadherin ile işaretlenen mide mukoza epitelyal hücrelerini ve KIT ile işaretlenen ICC'yi göstermektedir. MYH11 ayrıca daha önce bildirildiği gibi mide mukozasındaki miyofibroblastlarda da ekspreseedilir 14. Bu immünoflüoresans sonuçları birlikte, protokolümüzün doku mimarisini koruduğunu doğrular.
<img alt="Şekil 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69673/69673fig1.jpg" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="Figure 1"> 
Şekil 1: Fare midesinin kriyobölümleme için "İsviçre rulosu"nun hazırlanması. (A) Tüm mide, doku bütünlüğünü korumak için çıkardıktan hemen sonra soğuk fosfatla tamponlanmış tuzlu (PBS) doldurulmuş siyah silikon kaplı bir diseksiyon kabına yerleştirilir. (B) Mide, onikili çapın ortasında açılır. (C) Karın nazikçe gerilir ve tabakta sabitlenir, böylece aşırı gerginlik uygulanmadan düz yatacaktır. Doku boyunca kırmızı çizgi çizgi çizilir ve yuvarlanmayı kolaylaştırmak için nerede kesilmesi gerektiğini belirtir. (D) Açık ve sabit mide, kompakt bir konfigürasyona dönüşmek üzere PBS nemlendirilmiş filtre kağıdına konur. Kırmızı ok, karnının yuvarlanma yönünü gösterir. (E) Doku parçaları, kriyokesirleme için hazırlanmak üzere optimal kesme sıcaklığı (O.C.T.) bileşiğine gömülür ve kuru buzda dondurulur. (F) Donmuş bloklar −80 °C'de depolanır ve 5 μm kalınlıkta kriyoseksiyon yapılır ve sonraki analiz için yapılır. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69673/69673fig1large.jpg" target="_blank">Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Şekil 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69673/69673fig2.jpg" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="Figure 2"> 
Şekil 2: Z-stack görüntüleme sırasında ND Acquisition kurulumu ve doygunluk görselleştirmesi. (A) Çok kanallı spektral görüntüleme için konfokal görüntüleme yazılımında konfigüre edilmiş lazer ve detektör ayarları. Dört florofor kullanılır: 4′,6-diamidino-2-fenilindol (DAPI), Alexa Fluor 488 (AF488), Alexa Fluor 555 (AF555) ve Alexa Fluor 647 (AF647), her biri ilgili uyarılma lazerler ve emisyon dedektörleriyle eşleştirilir. Spektral grafik, uyarılma ve emisyon eğrilerini gösterir; böylece çapraz konuşmayı en aza indirmek ve sinyal algılamayı optimize etmek için ayarlama yapılabilir. (B) Her florofor için pozlama ayarları, piksel doygunluğunu önlemek ve yüksek yoğunluklu bölgelerde detayları korumak için ayrı ayrı ayarlanır. (C) Büyük görüntü alma ayarı (örneğin, 6 × 6 alan) tüm mide rulonunun görselleştirilmesini sağlar; Görüntü alanı boyutu, rulo dokunun boyutuna ve kompaktlığına göre ayarlanmalıdır. (D) Z-stack parametre ayarlarını gösteren ND Acquisition penceresi. Z aralığı, mide kasının üst ve alt pozisyonlarının seçilmesiyle tanımlanır ve dokunun tam derinliğini üç boyutlu (3D) analiz için yakalanacak sekiz adım yapılandırılır. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69673/69673fig2large.jpg" target="_blank">Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Şekil 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69673/69673fig3.jpg" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="Figure 3"> 
Şekil 3: Hematoksilin ve eozin lekeli fare mide rulonunun görüntüsü. Fayans taraması, 8 haftalık bir dişi C57BL/6J farenin tüm mide rulosunu görselleştirme yeteneğini gösteriyor. Ana anatomik bölgeler belirtilmiştir; bunlar arasında özofagus (kırmızı noktalı çizgi), alt özofagus sfinkteri (mor noktalı çizgi), fundus (siyah noktalı çizgi), corpus (mavi noktalı çizgi), antrum (yeşil noktalı çizgi) ve onikili komili (turuncu noktalı çizgi) yer alır. Ölçek çubuğu: 1000 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69673/69673fig3large.jpg" target="_blank">Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Şekil 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69673/69673fig4.jpg" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="Figure 4"> 
Şekil 4: İsviçre rulonunun konfokal görüntüleri: ANO1, KIT, TUBB3. Üst paneller: 8 haftalık dişi C57BL/6J faresinden alınan mide ekilmiş bir Swiss roll'un temsil eden konfokal görüntüleri, ANO1 (yeşil), KIT (mavi), TUBB3 (sarı) ve çekirdekler (mavi) için bağışıklık boyama gösteriliyor. Fundus, korpus ve antrum dahil olmak üzere tüm yuvarlanan mide görselleştirilir. Ölçek çizgileri: 1000 μm. Alt paneller: Üst panellerdeki beyaz çizgi çizgili kutu ile gösterilen bölgenin büyütülmüş görüntüleri, Cajal'ın interstisial hücrelerinin (ANO1+ ve KIT+; sarı oklar) ve enterik nöronların (TUBB3⁺; kırmızı oklar) hücresel detaylarını vurgular. Ölçek çubukları: 100 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69673/69673fig4large.jpg" target="_blank">Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Şekil 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69673/69673fig5.jpg" data-altupdatedat="1783400419000" data-alt="Figure 5"> 
Şekil 5: İsviçre rulonunun konfokal tüm bir fare midesinin görüntüleri: MYH11, KIT, E-cadherin. Üst paneller: 8 haftalık dişi C57BL/6J faresinden alınan mide köklü bir Sviçre rulonunun temsilci dikişli konfokal görüntüleri, MYH11 (yeşil), KIT (siyani), E-kadherin (sarı) ve çekirdekler (mavi) için immünboyama gösteriliyor. Fundus, korpus ve antrum dahil olmak üzere tüm yuvarlanan mide görselleştirilir. Ölçek çubukları: 1000 μm. Alt paneller: Üst panellerdeki beyaz kesik kutu ile sınırlandırılan bölgenin büyütülmüş görüntüleri. Beyaz noktalı çizgiler, mukozal epitelini (E-kadherin) ve kas tabakasını (MYH11) ayırt eder. Beyaz oklar, Cajal'ın KIT+ ara hücrelerini (ICC) gösterir. Ölçek çubukları: 100 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69673/69673fig5large.jpg" target="_blank">Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>

Değiştirilmiş İsviçre Roll Tekniği Kullanarak Fare Mide Kası Katmanlarının Geliştirilmiş Mekansal Haritalanması

Spatial "omics" technologies provide unprecedented opportunities to study the biology and interactions of individual cells of the gastric neuromuscular ...

enhanced-spatial-mapping-mouse-gastric-muscle-layers-using-modified

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Cajal interstisyel hücreler (ICC), gastrointestinal (Gİ) sistem kalp pili hücreleri. Bunlar, düz kas hücreleri ve gastrointestinal kontraktilite düzenlemek için post-ganglion nöronal liflerdir arasındaki karmaşık ağları oluşturmaktadır. Burada, immünofloresan kesitsel yöntemler ve fare ICC ağlarının bütün montaj görselleştirme sunuyoruz.

Farelerde Cajal (ICC) Ağ İnterstisyel Hücreler Görselleştirme

Laboratuvar hayvanlarının gastrointestinal sistemi boyunca düz kas kasılmalarının in vivo ölçümü, yeterince kullanılmasa da güçlü bir teknik olmaya devam etmektedir. Esnek, çift elemanlı gerinim ölçerler ticari olarak mevcut değildir ve üretim gerektirir. Bu protokol, kemirgenlerde akut veya kronik implantasyon için güvenilir, ucuz gerinim ölçerlerin yapımını açıklar.

Ölçüm Minyatür Çift elemanlı deformasyon ölçüm aletlerinin imalat ve implantasyon<em&gt; In Vivo</em&gt; Kemirgenler Gastrointestinal Kasılmalar.

Bu makale, fareler üzerinde gastroözofageal reflü cerrahi prosedürlerini gösterir. Bu modeller, gastroözofageal reflü hastalığının ve potansiyel olarak Barrett’s özofagus ve özofagus adenokarsinomunun mekanizmaları ve tedavisi üzerinde araştırmalar için yararlı araçlardır.

Fare ile Gastroözofageal Reflü Cerrahi Modelleri

Tüm montaj preparatlarını hızlı bir şekilde hazırlamak için fare bağırsaklarını kesmek ve 'yuvarlamak' için basit bir cihazın kullanımı açıklanmaktadır.

Basit Aygıt Hızla Fare Bağırsak Tüm Mounts Hazırlanır

Son zamanlarda mevcut olan video kaydı ve uzay-zamansal haritalama (STmap) teknikleri, bağırsak hareketliliğinin hem yayılma hem de karıştırma modellerini görselleştirmeyi ve ölçmeyi mümkün kılar. Bu protokolün amacı, GastroIntestinal Motilite İzleme (GIMM) sistemi kullanılarak STmap'lerin oluşturulmasını ve analizini açıklamaktır.

Hareketliliği zamanmekansal Haritalama içinde<em&gt; Ex Vivo</emBağırsakların&gt; Hazırlıklar

Bu makale, yetişkin farelerde kolonik motilitenin nöral regülasyonundaki değişiklikleri tanımlamak için bir video görüntüleme tekniği ve yüksek çözünürlüklü uzay-zamansal haritalamayı açıklamaktadır. Gastrointestinal (GI) fonksiyon üzerindeki ince etkiler, GI hastalığı hakkındaki anlayışımızı ilerletmek için izole doku preparatlarında bu yaklaşım kullanılarak tespit edilebilir.

Video Görüntüleme ve Spatiotemporal Haritalar Fare Gastrointestinal Motilite Analiz

Doğru kimlik ve bağırsak mukoza zarının üzerinde epitel hücreleri konumu farklı hücre soyları tanımlamak için gereklidir. bağırsak dokuların uygun görüntüleme maksimum çözünürlük ile protein ekspresyonu belirlenmesi için çok önemlidir. Bu çalışma işleme fare bağırsak dokuları için en uygun yöntem ve koşulları belirginleştiren amaçlamaktadır.

Immünohistokimyasal ve immünofloresan Analizleri için Bağırsak Doku Hazırlama için geliştirilmiş Swiss-haddeleme Tekniği

Dikey kol gastrektomi farelerde performansını açıklar. Bu bir mide yaklaşık % 70'i kaldırılmasını içerir kilo kaybı cerrahi türüdür.

Dikey kol gastrektomi fare modeli

Bağırsak, sindirim ve emilim için hayati önem taşır. Her bölge -duodenum, jejunum, ileum, kolon- benzersiz hücresel yapılar nedeniyle farklı işlevlere hizmet eder. Bağırsak fizyolojisini incelemek, titiz bir doku analizi gerektirir. Bu protokol, İsviçre rulo tekniğini kullanarak doku fiksasyonunu ve işlenmesini ana hatlarıyla belirtir ve uygun doku koruması ve oryantasyonu yoluyla doğru immün boyamayı sağlar.

Bağırsak İsviçre ruloları ve parafine gömülü dokunun immünofloresan boyaması için optimize edilmiş protokol

Bu çalışma, salgılanan mukusu ölçmek için tam montajlı bağırsak dokuları ve çoklu foton mikroskobu kullanan bir 3D görüntüleme yöntemi sunarak, karbamoilkolin klorür gibi uyaranlara yanıt olarak mukus dinamiklerinin hassas hacimsel analizini ve görselleştirilmesini sağlar.

Tam Montajlı Doku Görüntüleme Kullanılarak Bağırsak Mukusunun Üç Boyutlu Miktar Tayini

Öğrenin fare mide dokusunun İsviçre Roll tekniğiyle hazırlanması ve tüm bölgelerin tek kesitte görüntülenmesi. Bu yöntem histolojik analizde uzamsal oryantasyonu korur ve tekrarlanabilirliği artırır.

Değiştirilmiş İsviçre Roll Tekniği Kullanarak Fare Mide Kası Katmanlarının Geliştirilmiş Mekansal Haritalanması

Daha fazla video keşfet