Name: C. elegans Sinaptik İletim Mutants farmakolojik karakterizasyonu için Paradigmalar (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-08-18T17:08:00.000+00:00
Duration: 18 min 1 s
Description: Öğrenin C. elegans sinaptik iletim mutantlarını aldicarb ve PTZ ile farmakolojik olarak nasıl karakterize edeceğinizi. Bu yöntem epilepsi ve nöronal senkronizasyon mekanizmalarını anlamak için değerli bilgiler sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz tüm Caldwell Lab üyeleri işbirliği ruhu kabul etmek istiyoruz. Dimes, Mart ve Ulusal Bilim Vakfı GAC KARİYER Ödülü Basil O&#39;Connor Scholar Ödülü yanı sıra, Alabama Üniversitesi ile Howard Hughes Tıp Enstitüsü Lisans Araştırma Lisans Programı Hibe, nöronal uyarılabilirliği ve finanse Caldwell Lab epilepsi araştırma.

Aldicarb Pozlama paradigması <ol><li> İlk gün, her genotip ve her çoğaltmak en az otuz genç yetişkin aşamada solucanlar aldicarb testlerin ikinci gününde kullanılabilir olmasını sağlamak. E. içeren taze NGM plakalar üzerine elli veya daha fazla L4 aşamada solucanlar (en iyi nystatin olmadan), bir deneyci seçerse en iyisidir bir besin kaynağı olarak coli (tercihen OP50), tutarlı ve müsamahakar sıcaklığında (20 ° C - 22 ° C 25 ° C tamam olmasına rağmen, en iyi), 12-24 saat boyunca onları büyümeye </li><li> Ikinci gününde,% 70 etanol (EtOH) ve% 30 GKD 2 O. aldicarb 100 mM stok solüsyonu Istenen aldicarb konsantrasyonları elde etmek için uygun miktarda aldicarb tanımlanan hacimli NGM eksi nistatin plakalar üzerine sürün. Biz sürekli olarak 7.5 ml NGM plakalar üzerine kaplama ile 100 mM aldicarb 37.5 mcL 0.5 mM aldicarb kullanabilirsiniz. Aldicarb plakaları oda sıcaklığında yaklaşık 30-60 dakika kurumasını bekleyin. Bu kapaklar çatlak için gerekli değildir. Alternatif olarak, aldicarb NGM eklendi ve 4 ° C de bir hafta boyunca saklanan olabilir. &nbsp;</li><li> E. kurutma, plaka tutarlı hacimleri sonra Her aldicarb plaka merkezi ve başka bir 30-60 dakika oda sıcaklığında kuru üzerine coli (tercihen OP50). Biz sürekli aşırı kalabalık olmayan, küçük bir noktada yoğunlaşmış solucanlar tutmak için yeterli büyüklükte bir gıda çim oluşturur plaka OP50 25 mcL. &nbsp;</li><li> Gıda çim kuru olduğunda, bir aldicarb deneyleri ile devam edebilir. Aldicarb deneyleri öznel doğası nedeniyle, son derece deneyleri &quot;körü körüne&quot; yapılması tavsiye edilir. Birincil deneyci bir meslektaşım çalışılmalıdır solucanlar orijinal plakaları yeniden-etiket. Aynı şekilde, iş arkadaşı, bir zamanlayıcı başlamadan hemen önce, orijinal plakalardan şifreli aldicarb plakaları solucanlar transfer olabilir. Deneyci solucanlar gibi uncoordination gibi karakteristik bir fenotip, belirli bir gerginlik assaying öngörüyor, sonra da orada yanlılığı azaltmak için benzer bir fenotip bir kontrol edilmelidir. Dahası, deneyci deneyleri deneyler standardize yardımcı paralel yabani tip bir gerginlik yanı sıra dirençli ve aşırı duyarlı bir gerginlik, eğer en iyisidir. Deneyci solucanlar her çoğaltmak için tutarlı bir analiz etmek için gayret göstermelisiniz. Biz sürekli olarak her çoğaltmak için tek bir genotip otuz solucanlar analiz eder. Biz de en az üç gerçekleştirin her bir deney için çoğaltır. Deneyimli bir deneyci bir defada en az altı suşları analiz etmek gerekir. &nbsp;</li><li> Tutarlı bir şekilde dürtüsüyle bir platin tel ile her solucan felç solucanlar sayısını. Biz iki kez baş ve kuyruk üç saat olmak üzere toplam her 30 dakikada iki kez sürekli solucanlar eşya. Faringeal pompalama durması da deneyci, tüm çalışmalar boyunca felç tutarlı bir tanım istihdam sadece felç tanımlamak için kullanılır, ama olabilir. Ayrıca, özellikle bazı solucanlar, aldicarb karşı dayanıklı bu plaka tarama deneyebilir fazlalaştı. Bu durumda, deneyci aldicarb plakaların etrafında, palmitik asit, solucan lokomosyon fiziksel bir bariyer tutarlı bir miktarda yayılabilir. Biz 10 mg palmitik asit / ml EtOH 25 mcL yayıldı. </li></ol> PTZ Pozlama Paradigma <ol><li> İlk gün, her genotip ve her çoğaltmak en az otuz genç yetişkin aşamada solucanlar ikinci gününde PTZ testleri için kullanılabilir olmasını sağlamak. E. içeren taze NGM plakalar üzerine elli veya daha fazla L4 aşamada solucanlar (en iyi nystatin olmadan), bir deneyci seçerse en iyisidir bir besin kaynağı olarak coli (tercihen OP50), tutarlı ve müsamahakar sıcaklığında (20 ° C - 22 ° C 25 ° C tamam olmasına rağmen, en iyi), 12-24 saat boyunca onları büyümeye </li><li> Ikinci gününde, PTZ 0.5 g PTZ / ml GKD 2 O stok solüsyonu olun. PTZ uygun miktarda, istenilen PTZ konsantrasyonları elde etmek için tanımlanmış hacimli NGM eksi nistatin plakalar üzerine sürün. PTZ için doz-yanıt deneyleri tercih Çünkü plaka 7.5 mL NGM plakalar üzerine PTZ değişen miktarlarda. Örneğin, bir plaka PTZ stok solüsyonu 7.5 ml NGM tabağa mcL 37.5, 5 mg PTZ / ml çözüm haline getirmektedir. PTZ plakaları oda sıcaklığında yaklaşık 60-120 dakika kurumasını bekleyin. Bu kapaklar çatlak için gerekli değildir. Alternatif olarak, PTZ NGM direkt olarak ilave edilebilir, ancak hemen katılaşmadan sonra deneyleri için kullanılmalıdır. PTZ istikrarı aldicarb bu çok daha az. Bu nedenle, eski PTZ plakaları ile testlerin daha az güvenilir. PTZ kullanmadan önce kurutucu bir desikatöre -20 ° C&#39;de muhafaza edilmelidir. Biz istikrarı sağlamak için açtıktan sonra yaklaşık iki ay PTZ atmak için tercih ediyor. </li><li> E. kurutma, plaka tutarlı hacimleri sonra coli (tercihen OP50)Her PTZ plaka ve başka bir 30-60 dakika oda sıcaklığında kuru merkezi üzerine. Biz sürekli aşırı kalabalık olmayan, küçük bir noktada yoğunlaşmış solucanlar tutmak için yeterli büyüklükte bir gıda çim oluşturur plaka OP50 25 mcL. &nbsp;</li><li> Gıda çim kuru olduğunda, bir PTZ testleri devam edebilir. PTZ testleri aldicarb testleri daha az öznel olmakla birlikte, hala çok deneyleri &quot;körü körüne&quot; yapılması tavsiye edilir. Birincil deneyci bir meslektaşım çalışılmalıdır solucanlar orijinal plakaları yeniden-etiket. Aynı şekilde, iş arkadaşı, bir zamanlayıcı başlamadan hemen önce orijinal plakalardan şifrelenmiştir PTZ plakaları solucanlar transfer olabilir. Deneyci solucanlar gibi uncoordination gibi karakteristik bir fenotip, belirli bir gerginlik assaying öngörüyor, sonra da orada yanlılığı azaltmak için benzer bir fenotip bir kontrol edilmelidir. Ayrıca, deneyci deneyleri deneyler standardize yardımcı paralel ön veya tam vücut konvülsiyonlar ile yabani tip gerginlik yanı sıra suşları, eğer iyi olur. Deneyci solucanlar her çoğaltmak için tutarlı bir analiz etmek için gayret göstermelisiniz. Biz sürekli olarak her çoğaltmak için tek bir genotip otuz solucanlar analiz eder. Biz de en az üç gerçekleştirin her bir deney için çoğaltır. Deneyimli bir deneyci bir defada en az üç tür analiz etmek gerekir. Ancak, solucanlar ilaç gelmesini felç olmak veya bazı durumlarda, PTZ ile indüklenen maruz kalma 15-30 dakika arasında genellikle tepe konvülsiyonlar ve sıklığını ve şiddetini zayıflatmak. </li><li> Toplam bir saatlik bir &quot;sara gibi&quot; solucanlar çırpınan her 30 dakika sayısını. Solucanlar sayısı tam vücut konvülsiyonlar, tam vücut felç, &quot;tonik&quot; diyoruz, ya da bir kombinasyonu ile ayrı ayrı &quot;kafa kafaya bobs&quot; diyoruz ön konvülsiyonlar, solucanlar sayısını skor iyi , &quot;tonik-klonik&quot; diyoruz BWM felç anterior konvülsiyonlar,. Çoğu tek bir genotip solucanlar konvülsiyon sadece bir tür sergiler. Ancak, tonik-klonik solucanlar genellikle tamamen tonik, bu yüzden tüm solucanlar zaten konvülsiyonlar sergilenmektedir olsa bile bir 30 dakika geçmiş tahlil devam etmelidir. Ayrıca, bazı solucanlar plaka tarama deneyebilir fazlalaştı. Bu durumda, deneyci tutarlı bir PTZ plakaların etrafında palmitik asit miktarı yayılabilir. Biz 10 mg palmitik asit / ml EtOH 25 mcL yayıldı. </li></ol> Aldicarb ve PTZ Seçilmiş C. elegans Sinaptik İletim Mutants Davranış Yanıtları <table style="height: 157px;" border="1"><tbody><tr><th> Mutant Adı </th><th> Synaptic Rolü </th><th> İlaç olmayan davranışı </th><th> Aldicarb Davranış Tepki (yabani tip N2 göre) </th><th> PTZ için Davranışsal Tepki </th></tr><tr><td> tom-1 (ok188) </td><td> sinaptik iletim inhibe </td><td> koordinasyonsuz </td><td> gelişmiş felç oranı </td><td> wild-tip ayırt edilemez </td></tr><tr><td> unc-43 (n498n1186) </td><td> karmaşık </td><td> koordinasyonsuz </td><td> gelişmiş felç oranı </td><td> tam vücut konvülsiyonlar </td></tr><tr><td> unc-25 (e156) </td><td> GABA iletim teşvik </td><td> koordinasyonsuz </td><td> gelişmiş felç oranı </td><td> ön konvülsiyonlar, tam vücut felci </td></tr><tr><td> SNB-1 (md247) </td><td> sinaptik iletim teşvik </td><td> koordinasyonsuz </td><td> felç düşük oranda </td><td> ön konvülsiyonlar </td></tr><tr><td> unc-4 (E120) </td><td> ACh iletim teşvik </td><td> koordinasyonsuz </td><td> felç düşük oranda </td><td> wild-tip ayırt edilemez </td></tr></tbody></table> Pentylenetetrazole (PTZ) olarak adlandırılan iki sinir uyarıcı aldicarb denilen bir asetilkolinesteraz inhibitörü ve GABA reseptör antagonisti, C. elegans sinaptik iletim mutantlar karakterize etmek için tamamlayıcı bir şekilde kullanılabilir. Aşırı eksitatör asetilkolin (Ach) solucan vücut duvarı nöromüsküler kavşaklar (NMJs) ACh iletim negatif düzenleyiciler zararlı mutasyonlar birikir (mesela tom-1 ve unc-43) veya inhibitör GABA şanzıman (örneğin, amc-25) pozitif düzenleyiciler. Tersine, solucan NMJs eksitatör ACh düzeyleri, zararlı mutasyonların genel sinaptik iletim (örneğin, SNB-1) veya ACh özel iletim genler (örneğin unc-4) pozitif düzenleyiciler azaldı. Alçaltılmış eksitatör ACh iletim mutant solucanlar aldicarb kaynaklı felç azalmış oranları göstermektedir ise yabani tip N2 solucanlar karşılaştırıldığında, NMJs yükseltilmiş eksitatör ACh şanzıman ile mutant solucanlar, aldicarb kaynaklı felç gelişmiş oranları sergilerler. PTZ, C. elegans vücut duvarı kasları aldicarb aksine nöronal senkronizasyonunu bozan rağmen, PTZ C. elegans baş kasları da inhibitör GABA antagonize. Sonuç olarak, aldicarb hassasiyet, PTZ hassasiyetini doğru tahmin edemez. Negatif ya da pozitif Regul özel kusurları olan Mutant solucanlarACh iletim ation PTZ varlığı yabani tip N2 solucanlar ayırt edilemez, inhibitör GABA iletim sergi sağlam PTZ ile indüklenen ön konvülsiyonlar genel sinaptik iletim ya da belirli kusurlar olumlu yönetmelikte kusurları ile mutant solucanlar ise. Ayrıca, PTZ varlığı unc-43-fonksiyon kaybı mutantlar tam vücut konvülsiyonlar görüntüler ve muhtemelen kendilerine özgü ilaç yanıtları katkıda bulunan ek sinaptik iletim anormallikleri var.

<ol><li>Mahoney, T. R., Luo, S., Nonet, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+synaptic+transmission+in+Caenorhabditis+elegans+using+an+aldicarb-sensitivity+assay%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">Analysis of synaptic transmission in Caenorhabditis elegans using an aldicarb-sensitivity assay.</a> Nat. Protoc. 1, 1772-1777 (2006).</li>
<li>Williams, S. N., Locke, C. J., Braden, A. L., Caldwell, K. A., Caldwell, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epileptic-like+convulsions+associated+with+LIS-1+in+the+cytoskeletal+control+of+neurotransmitter+signaling+in+Caenorhabditis+elegans%5BTitle%5D)+AND+%22Hum.+Mol.+Genet.%22%5BJournal%5D)">Epileptic-like convulsions associated with LIS-1 in the cytoskeletal control of neurotransmitter signaling in Caenorhabditis elegans.</a> Hum. Mol. Genet.. 13, 2043-2059 (2004).</li>
</ol>

C ile aldicarb maruziyet için mevcut protokoller elegans mutantlar iki sınıfları aldicarb direnç gösterirler deneyciler, sinaptik iletim genelleştirilmiş açıkları ile ACh iletim ve mutantlar belirli eksiklikler ile mutantlar arasında ayrım izin vermez. Aynı şekilde, aldicarb mutantlar iki sınıfları aldicarb aşırı duyarlılık sergileyen mutantlar olumsuz ACh iletim düzenleyen GABA iletim veya genelleştirilmiş hataları belirli eksiklikler varsa belirlemek için kullanılan olamaz. PTZ maruz deneyleri, aldicarb maruz testlerin s...

<table><tbody><tr><td>Aldicarb</td><td>Reaktif</td><td>Supelco, Sigma-Aldrich</td><td>PS734</td><td>Sigma'dan satın alınabilir</td></tr><tr><td>Pentylenetetrazol</td><td>Reaktif</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P6500</td><td></td></tr></tbody></table>

c. elegans sinaptik İletim mutants farmakolojik karakterizasyonu için paradigmalar

Paradigms for Pharmacological Characterization of C. elegans Synaptic Transmission Mutants

Caenorhabditis elegans, nematod, nörotransmisyon çalışmak için bir çare bir model haline gelmiştir. Sinir sistemi anatomisi ve bağlantı elektron mikrograflar belirlenir ve farmakolojik testlerin rafine olarak C. elegans, hayvan modelleri arasında eşsizdir. Bu video, özellikle C. elegans nöromüsküler kavşaklarda sinyalizasyon karakterize pentylenetetrazole (PTZ) olarak adlandırılan iki tamamlayıcı sinir uyarıcı, aldicarb denilen bir asetilkolinesteraz inhibitörü ve bir gama-amino butirik asit (GABA) reseptör antagonisti, istihdam nasıl tarif (NMJs) ve antagonist nöral devrelerin anlaşılmasını kolaylaştırmak. 302 C. elegans nöronlar, ondokuz GABAerjik D-tipi motor nöronlar innerve vücut duvarı kasları (BWMs), Of iken RMEs adlı dört GABAerjik nöronlar, innerve baş kasları. Tersine, otuz dokuz motor nöronların asetilkolin eksitatör nörotransmitter ifade (ACh) ve GABA iletim lokomosyon koordine etmek BWMs antagonize. Vücut duvarı NMJs GABAerjik ve kolinerjik motor nöronların antagonistik doğa başlangıçta lazer ablasyon tarafından belirlenir ve daha sonra aldicarb maruz tarafından desteklenebilir. Yabani tip solucanlar bir zaman kurs veya doz-yanıt felç Akut aldicarb pozlama sonuçları. Ancak, daha az ACh, solucan NMJs birikir gibi eksitatör ACh iletim kaybı, BWMs az stimülasyonuna yol, aldicarb direnç bahşeder. ACh özel veya genel sinaptik fonksiyon mutantlar aldicarb için direnç görülebilir. GABA antagonistik ve ACh şanzıman, GABA iletim kaybı ya da olumsuz ACh serbest düzenlemek için bir başarısızlık ile tutarlı, aldicarb aşırı duyarlılık bahşeder. Aldicarb maruz aldicarb maruz kalma, çok sayıda solucan homologları nörotransmisyon genlerin izolasyonu yol olmasına rağmen, tek başına verimli özel C. elegans motor nöronların genler ve yollar için geçerli olan rolleri tespit edemez. Bu amaçla, tamamlayıcı bir deneysel yaklaşım, PTZ kullanır girmiştik. Nörotransmisyon mutantlar PTZ yanıt aldicarb-kaynaklı felç farklı açık fenotipleri, gösterir. Wild-tip solucanların yanı sıra, ACh salınımı veya almak için özel Yetersizliklerimizle ile mutantlar, PTZ için belirgin hassasiyet görünmüyor. Bununla birlikte, GABA mutantlar yanı sıra genel sinaptik fonksiyon mutant zaman kurs veya doz duyarlı bir şekilde ön konvülsiyonlar. Genel nörotransmitter serbest olumsuz düzenleyen ve böylece, Mutants PTZ üzerinde felç haline BWMs üzerine ACh aşırı miktarda salgılar. Ayrık mutant sınıfların PTZ ile indüklenen fenotipleri C. elegans aldicarb ve PTZ maruz paradigmalar ile tamamlayıcı bir yaklaşım nörotransmisyon anlayışımız hızlandırmak olduğunu göstermektedir. Ayrıca, biz farmakolojik testlerin nasıl performans gösteren videolar C. elegans araştırma için tutarlı yöntemler oluşturmalıdır.

Bu video iki sinir uyarıcı, aldicarb ve pentylenetetrazole (PTZ), nematod, C. elegans sinaptik fonksiyonu çalışma tamamlayıcı yollardan nasıl istihdam göstermektedir. Bu modüle nöronal senkronizasyonu için evrimsel olarak korunmuş mekanizmaları tamamlayıcı bir yaklaşım da ışık tutmak için kullanılan ve epilepsi ve nöbet etkileri olabilir.

C. elegans Sinaptik İletim Mutants farmakolojik karakterizasyonu için Paradigmalar

Nematod Caenorhabditis elegans, nörotransmisyon çalışmalarında kullanışlı bir model haline gelmiştir. C. elegans, ... olması nedeniyle hayvan modelleri arasında benzersizdir.

Merhaba, ben Alabama Üniversitesi Biyolojik Bilimler Bölümü'ndeki Caldwell Laboratuvarı'ndan Cody Locke. Ben Kyle Lee; size solucanların dış karbonat (outta carb) ve PTZ maruziyet analizleri için nasıl hazırlanacağını göstereceğim. Ben Bernard Tu ve size dış karbonat (out carb) analizlerinin nasıl gerçekleştirileceğini göstereceğim.Ben Kaylin Berry, C. elegans videolarından sorumluyum. Bu sunumda, anlatımı gerçekleştirerek PTZ maruziyet analizini uygulamalı olarak göstereceğim. Bugün meslektaşlarım ve ben, bir dizi temsilci mutant suşu kullanarak, PTZ ve Aldicarb maruziyeti sonrası epilepsi C. elegans modeli ile sinaptik iletim mutantlarının nasıl karakterize edileceğini göstereceğiz.Öyleyse başlayalım. Kyle Lee, bugün prosedürün ilk gününde ALD karbon analizlerinin hazırlanışını göstererek bizi başlatacak. Her bir genotipten ve her bir tekrardan, ikinci gün yapılacak ALD karbon analizleri için en az 30 adet genç yetişkin evre solucanın hazır olduğundan emin olun.Bir deneycinin, besin kaynağı olarak e coli OP 50 ile ekilmiş, fungusit içermeyen taze NGM plaklarına 50 veya daha fazla L4 evresindeki solucanı seçmesi en iyisidir. Solucanları tutarlı ve uygun bir sıcaklıkta 12 ila 24 sa

paradigms-for-pharmacological-characterization-c-elegans-synaptic

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Erişilebilir sinaps elektrofizyoloji Uygulama sinaptik mutantlar analiz yararlı sinaptik aktivite ölçülebilir bir ölçü, sağlar. Bu makale, nöromüsküler kavşaklar (NMJ) ortaya çıkarmak için kullanılan bir diseksiyon yöntemi...

C. Elegans Nöromüsküler Kavşağı Diseksiyon ve kayıt

Neurexins ve neuroligins sinaptik farklılaşma ve iletiminde önemli rolleri yerine membran nöron yapışma proteinleri. Neuroligin, eksik...

Osmotik Kaçınma IN Caenorhabditis elegans: İki Genler Synaptic Fonksiyonu, İnsan Orthologues NRXN1 Ve NLGN1</emOtizm> olarak Adaylar

Mikroarray analizi genetik ekspresyon profillerini belirlemek için...

Genetik İfade Profilleri Belirlenmesi C. elegans Mikroarray ve Real-time PCR

Kavşaklarda bulunan kümelenmiş nörotransmitter reseptörlerinin bolluğu güçlü sinaptik gücü etkiler. Bu yöntem tek-sinaps çözünürlükte üç boyutlu olarak floresan etiketli nörotransmitter reseptörleri...

Içinde Synaptic florasan Otomatik Sayısallaştırma<em&gt; C. elegans</em

DsRNA C. beslerken elegans büyük ölçekli besleme ekranlar için geçerli protokoller değişken devirme verimleri elde gen fonksiyonunu değerlendirmek için güçlü bir araçtır. Bu gen ifadesinin oldukça etkili ve yeniden üretilebilir bir devirme ile sonuçlanan büyük ölçekli RNAi besleme ekranları yerine getirmek için geliştirilmiş bir protokol açıklar.

Büyük ölçekli Gen demonte olarak<em&gt; C. elegans</em&gt; Sağlam Kayıp fonksiyon-fenotipleri oluşturmak için DsRNA Besleme Kitaplıklar kullanma

Caenorhabditis elegans antipsikotik ilaçlar (APDS) etkilerini test etmek için yaklaşımlar gösterilmektedir. Deneyler gelişimi ve canlılığı üzerinde ve yutak pompalama hızı üzerindeki, ilaç etkilerini test etmek için tarif edilmiştir. Bu yöntemler aynı zamanda APDS başka ilaç sınıfları ile farmakogenetik deneyler için geçerlidir.

Antipsikotik İlaçların Etki Mekanizmaları incelenmesi için Yöntemleri<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Bu iletişim kuralı Caenorhabditis elegans solucanlar davranışlar içinde sinirsel aktivite içinde genetik olarak kodlanmış Ca2 + gazetecilere kayıt değişiklikleri açıklar.

Ratiometric kalsiyum görüntüleme Caenorhabditis Elegans davranışlar içinde bireysel nöronların

Yüzme indüklenen felç (SWIP) olan köklü bir davranış tahlil Caenorhabditis elegans içinde (C. elegans) sinyal dopamin temel mekanizmaları çalışırdım. Ancak, tahlil gerçekleştirmek için detaylı bir yöntem bulunmamaktadır. Burada, SWIP için bir adım adım Protokolü açıklar.

Yüzme felç indüklenen Caenorhabditis elegans dopamin sinyal değerlendirmek için

Bu yazıda, C. elegans'tadopaminerjik nöron dendrit morfolojislerindeki değişiklikleri tutarlı bir şekilde ölçmek için yedi puanlık bir puanlama sisteminin nasıl kullanılacağını sergiliyoruz. Bu sistem, nörodejeneratif bozuklukların genetik, kimyasal ve yaşa dayalı modellerini kullanan dopaminerjik nörodejenerasyon testlerinin analizleri için tasarlanmıştır.

Caenorhabditis elegans'ta Dopaminerjik Nöron Morfolojik Değişim ve Dejenerasyon Seviyelerinin Ölçülmesi

Mevcut protokol, Caenorhabditis elegans asetilkolin reseptörlerinin bir sınıfının farmakolojik agonisti olan levamisole'ye yanıtı belirlemek için bir tahlili açıklamaktadır. Bu sıvı levamisol yüzme testinde, araştırmacılar 24 kuyucuklu plakalarda yetiştirilen hayvanların zamana bağlı felcini görsel olarak gözlemler ve nicelleştirir.

Caenorhabditis elegans Ölçümü Asetilkolin Reseptör Agonisti Levamisol'a duyarlılık

Öğrenin C. elegans sinaptik iletim mutantlarını aldicarb ve PTZ ile farmakolojik olarak nasıl karakterize edeceğinizi. Bu yöntem epilepsi ve nöronal senkronizasyon mekanizmalarını anlamak için değerli bilgiler sunar.

C. elegans Sinaptik İletim Mutants farmakolojik karakterizasyonu için Paradigmalar

Daha fazla video keşfet