Name: Canlı İmmobilize Maya Hücreleri Görselleştirme Hızlı Tekniği (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2006-11-09T00:00:00.000+00:00
Duration: 2 min 54 s
Description: Öğrenin, immobilize maya hücrelerinde epigenetik durum değişikliklerini gözlemlemek için hızlı bir görselleştirme tekniği. Bu yöntem, hücre bölünmesi sırasında genetik lokusların dinamiklerini incelemeyi mümkün kılar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Biz Pete Houston ve Eugenia Xu yardım ettikleri için teşekkür etmek istiyorum.

<ol><li> Zaman ders Epifloresans mikroskopi için immobilize hücreler. Mikroskop objektif lensleri aşağıda mikroskop aşamasında, bu protokolü sadece yararlı olduğunu lütfen unutmayınız. </li><li> Uzun bir lamel sıvı ortamda istenilen konsantrasyonda Yeri hücreleri (yaklaşık 24x50mm) </li><li> Sentetik bir medya plaka (bu düşük otofloresans) ve hücreleri üzerinde yer istenilen büyüklükte bir agar bloğu kesin. Hücreler ile temas halinde cımbız tarafından ele agar bloğu yan yerleştirin. </li><li> Daha kısa sürede ders (3 saate kadar), bu set yeterlidir. Mikroskop görüntülendi zaman hücreleri hareket, hücre veya agar bloğu artış alanı hacmi azalır. </li><li> Uzun süre dersler için, agar bloğu üstüne bir damla sıvı taze medya yerleştirin ve agar bloğunun üstüne bir bardak slayt yerde. Bu slayt agar bloğu üst yoluyla buharlaşma azaltır. İstenirse, kapak kayma ile temas agar bloğu kenarları nem daha da azaltmak için vazelin ile kapatılmalıdır. Vahşi tip fiyatla bölen hücreleri, uzun 9 saate kadar film bu seti kadar kullandık. </li></ol>

<ol>
	<li>Xu, E. Y., Zawadzki, K. A., Broach, J. R. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-cell+observations+reveal+intermediate+transcriptional+silencing+states.">Single-cell observations reveal intermediate transcriptional silencing states.</a> Mol. Cell. 23, 219-229 (2006).</li></ol>

Yazarların beyan edilecek bir çıkar çatışması yoktur.

Bu, hala büyüme izin verirken, maya hücreleri durağanlaştırır hızlı bir tekniktir. Biz, on saat kadar maya maya deney boyunca vahşi tip bölünme oranları gösteren büyüme izlemiştir. Bu kurulum, mikroskop aşamasında altında objektif lens gerektirdiğini unutmayın.

canlı İmmobilize maya hücreleri görselleştirme hızlı tekniği

A Rapid Technique for the Visualization of Live Immobilized Yeast Cells

Biz burada Epifloresans mikroskobu ile büyüyen maya hücreleri immobilizasyon ve görselleştirme için basit, hızlı ve son derece esnek bir teknik de mevcut. Teknik eşit uzunlukta on saat kadar statik maya nüfus, ya da zaman içerisinde deneyler görünüm için uygundur. Benim mikroskopi S. cerevisiae sessiz çiftleşme lokusların epigenetik miras inceler. Heterokromatin paketlenmiş olarak normal ifade edilmeyen iki sessiz çiftleşme lokusların HML ve HMR vardır. Sir1 mutant arka plan susturulmasında her lokus ya açık ya da susturulmuş epigenetik devlet olabilir zayıflar, bu nedenle bir bütün olarak nüfus HML ve HMR için farklı epigenetik devletlerin hücrelerinin bir karışımı var. Benim mikroskopi ayrı bir hücrede HML ve HMR epigenetik devlet arasında herhangi bir ilişki olduğunu gösterdi. sir1 hücreleri modelin önceden ifade lokustaki susturulması kurulması ya da önceden susturuldu lokus ifade, epigenetik devletler geçin. Benim zaman ders mikroskopi sıklığı, her dört olası epigenetik anahtarlar ve böylece her sir1 hücrelerinde epigenetik devletlerin istikrarını puan paletli bireysel sir1 hücreler ve onların çocukları. Ayrıca Xu ve ark. Mol. Hücre 2006.

Burada sessiz çiftleşme lokusların HML ve HMR floresan gazetecilere uygulanan büyüyen immobilize maya hücreleri görünüm için hızlı bir tekniği,

Canlı İmmobilize Maya Hücreleri Görselleştirme Hızlı Tekniği

Burada, büyüyen maya hücrelerinin epifloresan yöntemiyle immobilizasyonu ve görselleştirilmesi için basit, hızlı ve son derece esnek bir teknik sunmaktayız...

Deneyin amacı, epigenetik durumların nasıl değiştiğini ve hücrelerin her ardışık bölünmesinde bu epigenetik durumların ne sıklıkla değiştiğini görebilmek için mikroskop altında sir one hücrelerinden oluşan bir popülasyonu takip edebilmektir; uzun bir lameli alın, yaklaşık 7 µL hücre alın, uzun lamelin üzerine yerleştirin ve sentetik besiyeri plağı kullanın. Bir jilet alarak agar üzerinde kesikler oluşturun. Ardından bir agar bloğu alın, yukarı kaldırın ve hücrelerin üzerine yerleştirin.Tamam, üç saate kadar süren kısa süreli deneyler için bu durum tek başına yeterlidir. Uzun süreli deneyler için hücreler immobilize edilecektir; agar pedinin üstüne sıvı besiyeri ekliyorum ve ardından tüm düzeneğin üzerine bir lam yerleştiriyorum.Besiyeri, ikisi arasında bir mühür görevi görecektir. Lam ise yalnızca agar bloğunun üst kısmından buharlaşmayı önlemek içindir. Bu düzenekle agar bloğu nemli kalacak ve hücreler en az sekiz saat boyunca bölünmeye devam edecektir.

a-rapid-technique-for-visualization-live-immobilized-yeast

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Gen silme ve protein aşırı ekspresyonu proteinlerin işlevleri çalışmak için sık kullanılan yöntemlerdir. Bu makalede, bir nüfus protein konsantrasyonu fonksiyonu ve tek hücreli düzeylerde fenotip gelişimi analiz için bir...

Geliştirici Maya Protein Konsantrasyonu bir işlev olarak Morfolojik Fenotip Kalkınma Analizi

Işık ve elektron mikroskopi için kesit maya kolonileri izin gömmek için bir yöntem. Bu protokol, bir mantar toplum içinde hücre tiplerinin organizasyon anlayışına yönelik yeni bir araç sağlayan koloniler içinde sporulated hücreleri ve pseudohyphal hücrelerin dağılımı belirliyor.

Maya Colony Gömme Yöntemi

Bozulma ve geri dönüşüm için maya vakuol asidik lümen organelleri teslim izlemek için sağlam bir yaklaşım açıklanmıştır. Bu yöntem, genetik olarak kodlanmış çift emisyon floresan pH biyosensör ve floresan mikroskobu kullanarak tek tek hücrelerin görselleştirme hedef organellerin özel etiketleme dayanmaktadır.

Maya İzleme Mitophagy Floresan Mikroskopi Testi Saccharomyces cerevisiae

Fisyon Maya Kantitatif Canlı Hücre Floresan mikroskopi Analizi

Biz floresan büyüyen maya hücreleri mikroskop film ve tek hücreli zaman serisi veri ayıklamak için bir GUI tabanlı yazılım paketi elde etmek için basit protokol mevcut. Analizi otomatik soy ve görsel denetim ve izlenen verileri manuel küratörlüğü ile entegre bölümü zaman atama içerir.

Tomurcuklanma Maya Floresan Time-lapse Filmler Kazanılması ve GREFTLERİ kullanarak Tek hücreli Dynamics analiz

Tomurcuklanan mayadan yüzeye yayılan kromozomlar için bir yöntem sunulmuştur. Bu yöntem, daha önce Loidl ve Klein tarafından açıklanan bir yöntemden türetilmiştir. Ek olarak, yayılmış kromozomların immün boyaması için bir prosedür gösteriyoruz.

Yüzey Yayma ve Maya Kromozomlar immün

Fisyon mayası cinsel yaşam döngüsünün uzun süreli mikroskobu için tekrarlanabilir bir temel yöntem sunuyoruz. Açıklanan küçük ayarlamalarla, sunulan protokol, araştırmanın üreme sürecinin farklı adımlarına odaklanmasına izin verir.

Bölünme Maya Cinsel Yaşam Döngüsü Mikroskopi

Bu protokol, çok renkli 4d (zaman atlama 3D) Konfokal mikroskobu kullanarak mantar tomurcuklanan içinde floresan etiketli hücre içi bölmeler Analizi açıklanmaktadır. Görüntüleme parametreleri, fotodamat kısıtlarken yeterli sinyalleri yakalamak için seçilir. Özel ımagej eklentileri etiketlenmiş yapıların izlenmesini ve niceli olarak analiz edilmesini sağlar.

Maya 4D mikroskopisi

Burada, araştırmacıların mitoz ve Meiosis sırasında yaşayan fisyon Maya hücrelerinde protein davranışları ve nükleer dinamikleri incelemesini sağlayan toksik olmayan bir mikroskopi yöntemi olan canlı hücreli görüntüleme sunuyoruz.

Floresans canlı hücre mikroskobu ile mitotik ve meiotic Fission Maya nükleer dinamiklerinin incelenmesi

Hayati floresan boyalar modern mantar hücre biyolojisinde canlı hücre görüntüleme analizleri için gerekli araçlardır. Bu yazıda, filamentöz mantarlarda plazma membran dinamiği, endo-/eksositoz ve hücre duvarı morfogenezinin izlenmesi için kurulmuş ve daha az bilinen floresan boyaların uygulanması ayrıntılı olarak anlatılır.

Filamentöz Mantarların Canlı Hücre Görüntülemesi İçin Membran ve Hücre Duvarı Seçici Floresan Boyaların Uygulanması

Öğrenin, immobilize maya hücrelerinde epigenetik durum değişikliklerini gözlemlemek için hızlı bir görselleştirme tekniği. Bu yöntem, hücre bölünmesi sırasında genetik lokusların dinamiklerini incelemeyi mümkün kılar.

Canlı İmmobilize Maya Hücreleri Görselleştirme Hızlı Tekniği

Daha fazla video keşfet