Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Placer en aflivet fisk på en dissektion seng og bruge en kirurgisk klinge til at halshugge fisk på niveau med gællerne. Hold hovedet med ventral side vender op og fjerne det bløde væv, indtil du ser den optiske chiasm, en struktur lavet af synsnerver, der forbinder hjernen til øjnene.
Skær synsnerven og fjern øjnene. Nu orientere fisken med den dorsale side vender op og fjerne de dele af kraniet til at isolere hjernen.
De olfaktoriske pærer er et par strukturer i den forreste ende forbundet med de olfaktoriske organer, der registrerer lugtsignaler. Telencephalonen omfatter hukommelsesrelaterede områder. Habenula videresender information fra telencephalon til andre dele af hjernen.
Det optiske tectum er et sensorisk informationsbehandlingscenter.
Til at begynde med skal du forberede en dissektionsseng ved at fylde en petriskål med gelpakker. Dæk derefter skålen med det tilsvarende låg og inkuber den ved minus 20 grader Celsius. Når gelen er frosset, skal du fjerne skålen fra fryseren og placere et rent kvadrat af filterpapir oven på låget. Fortsæt med at pakke både papir og skål med plastfolie.
Derefter skal du behandle alle mikrodissektionsinstrumenter med 70% ethanol. Placer disse steriliserede værktøjer ved siden af et dissekerende mikroskop og placer den færdige dissektionsseng under mikroskopet med optisk fiberbelysning. Placer straks en tidligere forberedt hovedprøve oven på dissektionssengen og orientere den, så dens dorsale side vender nedad.
Brug derefter en saks til at lave et langsgående snit gennem det bløde væv fra bagsiden af hovedet til munden. Derefter udsætte bunden af kraniet med pincet og fjerne alle de tilstødende væv. Næste, skære en af de laterale vægge af kraniet starter på bagsiden af hovedet og bevæger sig mod tectum region af hjernen. Gentag denne proces for kontralaterale side. Fortsæt med at skære synsnerven. Og derefter fjerne de to laterale de fleste sider af kraniet på niveau med tectum
Til sidst drejes hovedåbningssiden op. Og med pincet, skræl den mest apikale del af kraniet for at udsætte hjernen. Bagefter overføre hjernen og eventuelle resterende dele af kraniet til en skål, der indeholder dissektion medium, som er sammensat af DMM F12 suppleret med penicillin streptomycin. Med plast håndtag af en mikroknife under mikroskopet, rense hjernevævet, være omhyggelig med ikke at beskadige neurale strukturer. Brug op til to zebrafisk hjerner til at generere hele hjernen afledte neurosfærer.
