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Biology

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JoVE Journal Biology
Affinità Precipitazioni di Active Rho-GEFs Utilizzo di un GST-tagged Mutant proteina Rho (GST-RhoA (G17A)) da lisati di cellule epiteliali
High Throughput SiRNA Screening for Chloropicrin and Hydrogen Fluoride-Induced Cornea Epithelial Cell Injury
Journal (Biology)
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Quantification of Site-specific Protein Lysine Acetylation and Succinylation Stoichiometry Using Data-independent Acquisition Mass Spectrometry
Journal (Biology)
Quantification of Site-specific Protein Lysine Acetylation and Succinylation Stoichiometry Using Data-independent Acquisition Mass Spectrometry
 
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Affinità Precipitazioni di Active Rho-GEFs Utilizzo di un GST-tagged Mutant proteina Rho (GST-RhoA (G17A)) da lisati di cellule epiteliali

Article DOI: 10.3791/3932-v • 11:29 min • March 31st, 2012
March 31st, 2012 •
1,2, 1,2, 1,2, 3, 1,2
1Keenan Research Centre, Li Ka Shing Knowledge Institute, St. Michael's Hospital, 2Department of Surgery, University of Toronto, 3Department of Cell and Developmental Biology, University of North Carolina at Chapel Hill

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Il metodo qui presentato descrive un saggio per seguire l'attivazione di specifici RhoA PIL / GTP Fattori di cambio (GEFs) in cellule coltivate facendo uso di una proteina di fusione GST RhoA mutante che ha un'elevata affinità per GEFs attivati. GEFs vengono precipitati da lisati cellulari, rilevati da Western blotting e quantificato mediante densitometria.

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Biologia Molecolare Numero 61 piccole GTPasi della famiglia Rho guanina-nucleotide fattore di scambio (GEFs) Affinity Precipitazioni Assay espressione di proteine ​​in E. Coli Purificazione di GST-tagged proteine test microsfere
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