Name: A-crítico tamaño femoral Defecto sencillo modelo en ratones (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-03-15T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 41 s
Description: Aprenda a crear defectos óseos de tamaño crítico en fémur de ratón usando pines medulares de acero quirúrgico. Este método simplificado permite evaluar la cicatrización ósea mediante radiografía e histología.

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Damos las gracias al personal y los veterinarios en el Departamento de Medicina Comparada, Temple, Texas Scott &amp; White Hospital, por su asesoramiento y ayuda inestimable durante el desarrollo de esta técnica. Este trabajo fue financiado en parte por el Instituto de Medicina Regenerativa de fondos del programa, Scott &amp; White RGP subvención # 90172, NIH 2P40RR017447-07 y NIH R01AR066033-01 (NIAMS). Se agradece al Dr. Suzanne Zeitouni para las pruebas del manuscrito.

<ol><li>Brinker, M. R., O'Connor, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+incidence+of+fractures+and+dislocations+referred+for+orthopaedic+services+in+a+capitated+population%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bone+Joint+Surg+Am%22%5BJournal%5D)">The incidence of fractures and dislocations referred for orthopaedic services in a capitated population.</a> J Bone Joint Surg Am. 86, 290-297 (2004).</li>
<li>Cheung, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+future+of+bone+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Podiatr+Med+Surg%22%5BJournal%5D)">The future of bone healing.</a> Clin Podiatr Med Surg. 22, 631-641 (2005).</li>
<li>Rosemont, I. L. United States Bone and Joint Decade: The burden of musculoskeletal diseases and musculoskeletal injuries. , American Academy of Orthopedic Surgeons. (2008).</li>
<li>Tzioupis, C., Giannoudis, P. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+long-bone+non-unions%5BTitle%5D)+AND+%22Injury%22%5BJournal%5D)">Prevalence of long-bone non-unions.</a> Injury. 38, Suppl 2. S3-S9 (2007).</li>
<li>Marsh, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Concepts+of+fracture+union%2C+delayed+union%2C+and+nonunion%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Orthop+Relat+Res%22%5BJournal%5D)">Concepts of fracture union, delayed union, and nonunion.</a> Clin Orthop Relat Res. , S22-S30 (1998).</li>
<li>Spicer, P. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+bone+regeneration+using+the+rat+critical+size+calvarial+defect%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Evaluation of bone regeneration using the rat critical size calvarial defect.</a> Nat Protoc. 7, 1918-1929 (2012).</li>
<li>Green, E., Lubahn, J. D., Evans, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Risk+factors%2C+treatment%2C+and+outcomes+associated+with+nonunion+of+the+midshaft+humerus+fracture%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Orthop+Adv%22%5BJournal%5D)">Risk factors, treatment, and outcomes associated with nonunion of the midshaft humerus fracture.</a> J Surg Orthop Adv. 14, 64-72 (2005).</li>
<li>Kanakaris, N. K., Giannoudis, P. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+health+economics+of+the+treatment+of+long-bone+non-unions%5BTitle%5D)+AND+%22Injury%22%5BJournal%5D)">The health economics of the treatment of long-bone non-unions.</a> Injury. 38, Suppl 2. S77-S84 (2007).</li>
<li>Dimitriou, R., Mataliotakis, G. I., Angoules, A. G., Kanakaris, N. K., Giannoudis, P. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complications+following+autologous+bone+graft+harvesting+from+the+iliac+crest+and+using+the+RIA%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Injury%22%5BJournal%5D)">Complications following autologous bone graft harvesting from the iliac crest and using the RIA: a systematic review.</a> Injury. 42, Suppl 2. S3-S15 (2011).</li>
<li>Boer, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+history+of+bone+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Orthop+Relat+Res%22%5BJournal%5D)">The history of bone grafts.</a> Clin Orthop Relat Res. , 292-298 (1988).</li>
<li>Aro, H. T., Aho, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+use+of+bone+allografts%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Med%22%5BJournal%5D)">Clinical use of bone allografts.</a> Ann Med. 25, 403-412 (1993).</li>
<li>Burstein, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+substitutes%5BTitle%5D)+AND+%22Cleft+Palate+Craniofac.+J%22%5BJournal%5D)">Bone substitutes.</a> Cleft Palate Craniofac. J. 37, 1-4 (2000).</li>
<li>Kao, S. T., Scott, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+bone+substitutes%5BTitle%5D)+AND+%22Oral+Maxillofac+Surg+Clin+North+Am%22%5BJournal%5D)">A review of bone substitutes.</a> Oral Maxillofac Surg Clin North Am. 19, 513-521 (2007).</li>
<li>Boden, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overview+of+the+biology+of+lumbar+spine+fusion+and+principles+for+selecting+a+bone+graft+substitute%5BTitle%5D)+AND+%22Spine.+%28Phila+Pa+1976%29%22%5BJournal%5D)">Overview of the biology of lumbar spine fusion and principles for selecting a bone graft substitute.</a> Spine. (Phila Pa 1976). 27, S26-S31 (1976).</li>
<li>Hollinger, J. O., Kleinschmidt, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+critical+size+defect+as+an+experimental+model+to+test+bone+repair+materials%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Craniofac+Surg%22%5BJournal%5D)">The critical size defect as an experimental model to test bone repair materials).</a> J Craniofac Surg. 1, 60-68 (1990).</li>
<li>Key, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+local+calcium+depot+on+osteogenesis+and+healing+of+fractures%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Bone+Joint+Surg.+%28Am%29%22%5BJournal%5D)">The effect of local calcium depot on osteogenesis and healing of fractures.</a> J. Bone Joint Surg. (Am). 16, 176-184 (1934).</li>
<li>Holstein, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+the+establishment+of+defined+mouse+models+for+the+study+of+fracture+healing+and+bone+regeneration%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Trauma%22%5BJournal%5D)">Advances in the establishment of defined mouse models for the study of fracture healing and bone regeneration).</a> J Orthop Trauma. 23, S31-S38 (2009).</li>
<li>Histing, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+bone+healing+models%3A+standards%2C+tips%2C+and+pitfalls+results+of+a+consensus+meeting%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Small animal bone healing models: standards, tips, and pitfalls results of a consensus meeting.</a> Bone. 49, 591-599 (2011).</li>
<li>Cheung, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+externally+fixed+femoral+fracture+model+for+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">An externally fixed femoral fracture model for mice.</a> J Orthop Res. 21, 685-690 (2003).</li>
<li>Hiltunen, A., Vuorio, E., Aro, H. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+standardized+experimental+fracture+in+the+mouse+tibia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">A standardized experimental fracture in the mouse tibia.</a> J Orthop Res. 11, 305-312 (1993).</li>
<li>Manigrasso, M. B., O'Connor, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+a+closed+femur+fracture+model+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Trauma%22%5BJournal%5D)">Characterization of a closed femur fracture model in mice.</a> J Orthop Trauma. 18, 687-695 (2004).</li>
<li>Garcia, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+animal+models+of+delayed+bone+healing+and+non-union+formation%3A+a+comprehensive+review%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Cell+Mater%22%5BJournal%5D)">Rodent animal models of delayed bone healing and non-union formation: a comprehensive review.</a> Eur Cell Mater. 26, 1-12 (2013).</li>
<li>Garcia, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+reliable+non-union+model+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Development of a reliable non-union model in mice.</a> J Surg Res. 147, 84-91 (2008).</li>
<li>Flecknell, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relief+of+pain+in+laboratory+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">The relief of pain in laboratory animals.</a> Lab Anim. 18, 147-160 (1984).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Guidelines+on+the+Euthanasia+of+Animals%22">Guidelines on the Euthanasia of Animals</a>. , American Veterinary Medical Association. Schaumburg, IL 60173. (2013).</li>
<li>Neill, K. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micro-computed+tomography+assessment+of+the+progression+of+fracture+healing+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Micro-computed tomography assessment of the progression of fracture healing in mice.</a> Bone. 50, 1357-1367 (2012).</li>
<li>Bagi, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+micro-CT+to+evaluate+cortical+bone+geometry+and+strength+in+nude+rats%3A+correlation+with+mechanical+testing%2C+pQCT+and+DXA%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">The use of micro-CT to evaluate cortical bone geometry and strength in nude rats: correlation with mechanical testing, pQCT and DXA.</a> Bone. 38, 136-144 (2006).</li>
<li>Hadjiargyrou, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptional+profiling+of+bone+regeneration.+Insight+into+the+molecular+complexity+of+wound+repair%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Transcriptional profiling of bone regeneration. Insight into the molecular complexity of wound repair.</a> J Biol Chem. 277, 30177-30182 (2002).</li>
<li>Clough, B. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+regeneration+with+osteogenically+enhanced+mesenchymal+stem+cells+and+their+extracellular+matrix+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bone+Miner+Res%22%5BJournal%5D)">Bone regeneration with osteogenically enhanced mesenchymal stem cells and their extracellular matrix proteins.</a> J Bone Miner Res. , (2014).</li>
<li>Lu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+basis+for+age-related+changes+in+fracture+repair%5BTitle%5D)+AND+%22J+Orthop+Res%22%5BJournal%5D)">Cellular basis for age-related changes in fracture repair.</a> J Orthop Res. 23, 1300-1307 (2005).</li>
<li>Jepsen, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+variation+in+the+patterns+of+skeletal+progenitor+cell+differentiation+and+progression+during+endochondral+bone+formation+affects+the+rate+of+fracture+healing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bone+Miner+Res%22%5BJournal%5D)">Genetic variation in the patterns of skeletal progenitor cell differentiation and progression during endochondral bone formation affects the rate of fracture healing.</a> J Bone Miner Res. 23, 1204-1216 (2008).</li>
<li>Thayer, T. C., Wilson, S. B., Mathews, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+nonobese+diabetic+mice+to+understand+human+type+1+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinol+Metab+Clin+North+Am%22%5BJournal%5D)">Use of nonobese diabetic mice to understand human type 1 diabetes.</a> Endocrinol Metab Clin North Am. 39, 541-561 (2010).</li>
<li>Jee, W. S., Yao, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overview%3A+animal+models+of+osteopenia+and+osteoporosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Musculoskelet+Neuronal+Interact%22%5BJournal%5D)">Overview: animal models of osteopenia and osteoporosis.</a> J Musculoskelet Neuronal Interact. 1, 193-207 (2001).</li>
</ol>

Los autores no tienen intereses financieros contrapuestos.

En este documento, se describe un método simple para generar un defecto crítico tamaño pin-estabilizada del fémur murino utilizando estándar de laboratorio y equipo veterinario. Mientras que el montaje de los pasadores y el procedimiento quirúrgico en sí mismo requiere práctica, está dentro de las capacidades de un científico de investigación biomédica bien entrenado o veterinario. El pasador se coloca en el canal medular sin fijación adicional, haciendo que el procedimiento técnicamente más...

Se estima que la mitad de la población de Estados Unidos experimenta una fractura por la edad de 65 años 1. Para los pacientes con fracturas tratadas quirúrgicamente, 500.000 procedimientos implican el uso de un injerto de hueso 2 y se espera que esta cifra aumente con una población cada vez más envejecida 3 . Aunque el hueso es uno de los pocos órganos que tiene la capacidad para sanar completamente sin dejar cicatriz, hay casos en que el proceso falla 3,4. Dependiendo de las circunstancias y la calidad del tratamiento, 30.2% de las fracturas de huesos largos fallar, lo que resulta en la no unión 3,5. Si bien sigue habiendo cierto debate sobre la definición, pseudoartrosis, lesiones óseas críticos de tamaño o no sindicalizados generalmente se refiere a una lesión que no sana durante toda la vida natural de la materia 6. Para fines experimentales, esta duración se acorta el tiempo promedio requerido para la curación completa de una lesión de tamaño medio hueso. Lesiones óseas no sindicalizados se producen por numrazones erous, pero los principales factores incluyen trauma extremo que resulta en una brecha crítica de tamaño, infección, mala angiogénesis, el consumo de tabaco, o la capacidad de regeneración ósea inhibida debido a la enfermedad o la edad de 7 años. Incluso si no uniones son tratados con éxito, puede costar más de $ 60,000 por procedimiento, dependiendo del tipo de lesión y los enfoques utilizados 8. En casos moderados, se emplea un injerto óseo autólogo. Esta estrategia implica la recuperación del hueso de un sitio donante y la implantación en el sitio de la lesión. Si bien este enfoque es extremadamente eficaz, el volumen de hueso derivado del donante disponible es limitada y el procedimiento implica una cirugía adicional, que se traduce en dolor persistente en muchos pacientes 9,10. Además, la eficacia del injerto de hueso autólogo es dependiente de la salud del paciente. Los sustitutos óseos fabricados con materiales sintéticos o hueso de cadáver procesados ​​son abundantemente disponibles 11-13, pero HÃve limitaciones significativas, incluyendo las propiedades pobres de adhesión de la célula huésped, la reducción de osteoconductividad, y el potencial para el rechazo inmune 14. Por tanto, existe una necesidad urgente de tecnologías de regeneración ósea que son seguros, eficaces y ampliamente disponibles. Nuestra capacidad para mejorar las estrategias de regeneración de hueso depende fundamentalmente de la capacidad de imitar traumatismo óseo grave en animales de laboratorio, pero la generación y la estabilización de las lesiones óseas grandes es técnicamente difícil. En la mayoría de los casos, grave trauma hueso largo es imitado experimentalmente mediante el establecimiento de un defecto que no se cura de forma natural. Aunque puede variar con la especie 15, esto se logra mediante la eliminación completa de un segmento de hueso que es mayor que 1,5 veces el diámetro de la sección transversal del hueso 16. El hueso se estabiliza luego con un implante metálico para mantener la orientación correcta de los bordes de la fractura y permitir la movilidad. Debido a su pequeño tamaño y la fragilidad desus huesos largos, el establecimiento de este tipo de lesiones en los ratones están más allá de las capacidades de la mayoría de los grupos de investigación. Como tal, los modelos de defectos de huesos largos se limitan a ratas y animales más grandes. Sin embargo, los ratones ofrecen ventajas significativas en investigación que pueden ser modificados y criados como cepas inmunocomprometidos que no rechazan las células y tejidos humanos genéticamente. Para las aplicaciones basadas en células humanas, los ratones inmunodeprimidos son atractivas para trabajar con ellos porque son fisiológicamente bien caracterizados, fácil de casa, rentables y de fácil analizaron radiográfica como microscópicamente. De suma importancia es que los ratones inmunodeprimidos no rechazan las células de diferentes especies, incluyendo los seres humanos. Su pequeño tamaño también permite el ensayo de un número muy pequeño de células o volúmenes de andamios experimentales en aplicaciones ortopédicas. Se han descrito varios modelos murinos ortopédicos que permitirse diversos grados de estabilidad ósea 17,18. Aquellos systems que resultan en niveles muy altos de estabilidad, tales como fijadores externos y las placas de bloqueo se curan predominantemente por la osificación endocondral intramembranous aunque la curación ha sido reportado 19. Por el contrario, las que permiten algunos micro y / o macro-movimiento, como las que emplean pasadores medulares no fijadas o parcialmente fijos, por lo general se curan con un predominio de la osificación endocondral 20,21. Unión retardada o defectos no sindicalizados de los huesos largos son particularmente difíciles de lograr en los ratones debido al nivel adicional de estabilización requerida. Sin embargo, se ha informado de una serie de enfoques, incluyendo pasadores medulares con clavos entrelazados, placas de bloqueo y fijadores externos 22. Estos sistemas generalmente funcionan bien, pero teniendo en cuenta su diseño complicado que puede ser técnicamente difícil de instalar. Por ejemplo, García et al. 23 ideó un sistema de pasador de enclavamiento elegante para su uso en ratones, pero el procedimiento implica incisiones en dos sitios separadoss y una amplia modificación del fémur para acomodar los pasadores. Estos procedimientos se realizaron bajo un microscopio de disección. En este documento, se describe un sencillo pasador medular femoral con un collar central diseñado para evitar el cierre de un déficit óseo 3 mm y también delinear los bordes originales del defecto. Mientras que el pasador no se fija en el hueso, el tamaño preciso de pasador y el diámetro de escariado de los resultados cavidad medular en la interferencia suficiente para minimizar el movimiento de torsión (Figura 1). Con una cuidadosa selección de edad endogámica, género y ratones de la cepa emparejados, el resultado es un no-uniondefect hipertrófica altamente reproducible 22 que puede ser fácilmente evaluada radiológicamente. Además regiones de interés pueden ser definidos de forma reproducible después de micro-tomografía computarizada (μCT) para la medición de la formación de hueso de novo y los parámetros histomorphological. Los pasadores se prototipos en nuestro laboratorio utilizando herramientas disponibles.<img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/52368/52368fig1highres.jpg" /> Figura 1: Principio Experimental resumen esquemática del modelo de defecto segmentario.. El segmento central 3 mm de un fémur murino 9-10 mm se extirpa quirúrgicamente (izquierda). Un tubo de acero quirúrgico de calibre 19 de 3 mm de largo se pasa más de un 9 mm de largo, 22 G tubo de acero inoxidable y se fija con adhesivo en el centro exacto (derecha). El pasador resultante se encaja en los canales medulares de las porciones proximal y distal restantes del fémur con el collar 19 G sustituyendo el segmento de 3 mm de hueso (por debajo de, centro).

<table><tbody><tr><td colspan="4">Conjunto de pines</fuerte></td></tr><tr><td>Herramienta rotativa Dremel</td><td>8220</td><td>o equivalente</td><td></td></tr><tr><td>Disco de corte de alta resistencia</td><td>Dremel</td><td>420</td> Tubo quirúrgico Dremel 420 <td></td></tr><tr><td>19&nbsp; G</td><td>Piezas pequeñas (Amazon)</td><td>B000FMZ8LY</td><td>OD 1.07&nbsp; mm, ID 0.889&nbsp; mm</td></tr><tr><td>Tubo quirúrgico 21&nbsp; G</td><td>Piezas pequeñas (Amazon)</td><td>B000FMZ8YQ</td><td>OD 0.82&nbsp; mm, ID 0.635&nbsp; mm</td></tr><tr><td>Tubo quirúrgico 22&nbsp; G</td><td>Piezas pequeñas (Amazon)</td><td>B000FMYLZS</td><td>OD 0.719&nbsp; mm, ID 0.502&nbsp; mm</td></tr><tr><td>Tubo quirúrgico 23&nbsp; G</td><td>Piezas pequeñas (Amazon)</td><td>B000FN0SY0</td><td>OD 0,643&nbsp; mm, ID 0.444&nbsp; mm</td></tr><tr><td>Adhesivo de cianoacrilato</td><td>Loctite 1365882</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Disco de esmeril</td><td>Dremel</td><td>413</td><td></td></tr><tr><td>Punta de pulido de goma</td><td>Dremel</td><td>462</td><td></td></tr><tr><td>Disco de pulido de fieltro</td><td>Dremel</td><td>414</td><td></td></tr><tr><td>Esponja de gelatina</td><td>Surgifoam/Ethicon</td><td>1974</td><td></td></tr><tr><td>Cortador de biopsia con punzón</td><td>Miltex</td><td>33-34</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">Cirugía/postoperatorio</fuerte></td></tr><tr><td>Bomba circuladora y almohadilla caliente</td><td>Stryker/Thermocare</td><td>TP700, TP700C, TPP722</td><td></td></tr><tr><td>Spray cuaternario de cobertura</td><td>Steris</td><td>1429-77</td><td></td></tr><tr><td>Esterilizador de perlas</td><td>Germinator/CellPoint Scentific Germinator</td><td>500</td><td></td></tr><tr><td>Sistema de anestesia</td><td>VetEquip Inc</td><td>901806 o 901807/901809</td><td></td></tr><tr><td>Anestésico isofluorano</td><td>VETone/MWI</td><td>501017, 502017</td><td></td></tr><tr><td>Desinfectante quirúrgico</td><td>Chloraprep/CareFusion</td><td>260449</td><td></td></tr><tr><td>Herramientas quirúrgicas</td><td>Fine Science Tools</td><td>varios</td><td>recomiendan Fabricación alemana</td></tr><tr><td>Protección facial</td><td>Splash Shield</td><td>4505</td><td></td></tr><tr><td>Taladro de alta velocidad recargable</td><td>Fine Science Tools</td><td>18000-17</td><td></td></tr><tr><td>Disco de corte de diamante</td><td>Strauss Diaiond</td><td>361.514.080HP</td><td></td></tr><tr><td>Suturas absorbibles&nbsp;</td><td>Covidien</td><td>UM-213</td><td></td></tr><tr><td>Suturas exteriores</td><td>Ethicon</td><td>668G</td><td>o equivalente</td></tr><tr><td>Vetbond</td><td>3M</td><td>1469SB</td><td>o equivalente</td></tr><tr><td>Gel de hidratación</td><td>Clear H2O</td><td>70-01-1082</td><td></td></tr><tr><td>Gel dietético</td><td>Clear H2O</td><td>72-01-1062</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfina</td><td>Reckitt and Benckser</td><td>12496-0757-01</td><td>sustancia controlada</td></tr><tr><td>Iglús de ratón</td><td>Bio Serv</td><td>K3328, 3570,3327</td><td></td></tr><tr><td>Cóctel de eutanasia</td><td>Euthasol/Virbac</td><td>710101</td><td>sustancia</td></tr><tr> controlada<td colspan="4">Análisis</td></tr><tr><td>Imágenes de animales vivos&nbsp;</td><td>Orthoscan</td><td>FD Pulse</td><td>o unidad Micro-CT equivalente</td></tr><tr><td>y software</td><td>Bruker</td><td>Skyscan1174</td><td>o equivalente</td></tr><tr><td>Película de sellado/Parafilm M</td><td>VWR o Fisher</td><td>100501-338, S37441</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">*Las fuentes genéricas son adecuadas para todos los demás artículos, como gasas, cortinas, ropa de protección, equipos de cuidado de animales.</td></tr></tbody></table>

a-crítico tamaño femoral defecto sencillo modelo en ratones

A Simple Critical-sized Femoral Defect Model in Mice

Si bien el hueso tiene una notable capacidad de regeneración, un traumatismo óseo grave a menudo resulta en daños que no se curan adecuadamente. De hecho, una décima parte de todas las fracturas óseas de las extremidades no se curan por completo debido a la extensión del traumatismo, la enfermedad o la edad del paciente. Nuestra capacidad para mejorar las estrategias de regeneración ósea depende fundamentalmente de la capacidad de imitar un traumatismo óseo grave en animales de experimentación, pero la generación y estabilización de lesiones óseas grandes es un desafío técnico. En la mayoría de los casos, el traumatismo grave de huesos largos se imita experimentalmente mediante el establecimiento de un defecto que no se curará de forma natural. Esto se logra mediante la extirpación completa de un segmento óseo que es mayor de 1,5 veces el diámetro de la sección transversal del hueso. Luego, el hueso se estabiliza con un implante de metal para mantener la orientación adecuada de los bordes de la fractura y permitir la movilidad. 
Debido a su pequeño tamaño y a la fragilidad de sus huesos largos, el establecimiento de tales lesiones en ratones está más allá de las capacidades de la mayoría de los grupos de investigación. Como tal, los modelos de defectos de huesos largos se limitan a ratas y animales más grandes. Sin embargo, los ratones ofrecen importantes ventajas en la investigación, ya que pueden ser modificados genéticamente y criados como cepas inmunocomprometidas que no rechazan las células y los tejidos humanos.
En este artículo, demostramos una técnica que facilita la generación de un defecto segmentario en el fémur del ratón utilizando equipos veterinarios y de laboratorio estándar. Con la práctica, la fabricación del dispositivo de fijación y la implantación quirúrgica es factible para la mayoría de los veterinarios capacitados y el personal de investigación con animales. Utilizando datos de ejemplo, también proporcionamos metodologías para el análisis cuantitativo de la cicatrización ósea para el modelo.

Los ratones se recuperan la conciencia y de las extremidades posteriores movilidad 5-10 minutos después de la retirada de la anestesia. Durante los primeros 5 días, es aconsejable para albergar a los ratones individualmente e introducir el enriquecimiento ambiental para evitar el exceso de uso de la extremidad. Para este propósito, los nidos de tipo iglú reducen la necesidad de la construcción del nido y animan descanso. También hemos observado que la provisión de alimentos y de hidrogel en el suelo de la jaula reduce l...

Los modelos animales se emplean con frecuencia para imitar lesiones óseas graves en la investigación biomédica. Debido a su pequeño tamaño, el establecimiento de lesiones óseas estabilizadas en ratones está más allá de las capacidades de la mayoría de los grupos de investigación. En este trabajo, describimos un método simple para establecer y analizar defectos femorales experimentales en ratones.

A-crítico tamaño femoral Defecto sencillo modelo en ratones

While bone has a remarkable capacity for regeneration, serious bone trauma often results in damage that does not properly heal. In fact, one tenth of all ...

El objetivo general de este procedimiento es generar un defecto experimental simple de tamaño crítico en el fémur de un ratón. Esto se logra primero fabricando un pasador medular a partir de un tubo de acero quirúrgico. En el segundo paso, se genera un defecto de tamaño crítico en el fémur de un ratón anestesiado.El clavo se implanta entonces para estabilizar el hueso. En última instancia, la radiografía y la histología pueden utilizarse para evaluar el grado de curación ósea. Al intentar este procedimiento, es importante recordar fijar el hueso únicamente con la pinza actual y asegurarse de que el collar esté al ras con el borde del hueso seccionado.Comience colocando 10 microlitros de adhesivo de cianoacrilato en la parte media del eje de un trozo de tubo hipodérmico de acero inoxidable de calibre 22 y nueve milímetros de longitud. Pase un collar de tres milímetros sobre el eje hasta que alcance el centro, y luego gírelo para distribuir uniformemente el pegamento entre el collar y el eje, como se ilustra aquí. Se pueden prototipar varias configuraciones de pasadores según los objetivos específicos del estudio y del receptor.A continuación, mida las dimensiones del pasador con un

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Medicine

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Aunque los modelos de ratón son herramientas invaluables para la ingeniería de tejidos óseos, los modelos de defectos de huesos largos son escasos. Esta necesidad motivó el desarrollo del presente protocolo, que utiliza una placa de bloqueo con cuatro tornillos y una plantilla específica para realizar y estabilizar un defecto femoral, reproducible, de tamaño crítico y de baja morbilidad.

Establecimiento de un defecto segmentario Modelo femoral de tamaño crítico en ratones estabilizado por osteosíntesis Plate

Este protocolo describe una técnica de osteosíntesis mínimamente invasiva utilizando un tornillo intramedular para estandardizado estabilización de fracturas de fémur, que puede utilizarse para analizar el hueso endocondral en ratones.

Un modelo mínimamente invasivo para analizar la fractura endocondral en ratones en condiciones biomecánicas estandarizadas

El modelo murino fractura cerrada de fémur es una poderosa plataforma para el estudio de fracturas y nuevas estrategias terapéuticas para acelerar la regeneración ósea. El objetivo de este protocolo quirúrgico es generar fracturas femorales cerradas unilaterales en ratones con una varilla intramedular de acero para estabilizar el fémur.

La generación de fracturas femorales cerradas en ratones: un modelo para el estudio del hueso curativo

Modelos de mamíferos in vivo de defectos óseos de tamaño crítico son esenciales para los investigadores estudiando mecanismos de curación y tratamientos ortopédicos. Aquí, presentamos un protocolo para la creación de defectos reproducibles, segmentarias, femorales en ratas estabilizadas con fijación externa.

Un modelo confiable y Reproducible tamaño crítico Femoral defecto segmentario en ratas estabilizado con un Fixator externo personalizado

Este protocolo describe un método para realizar fracturas en ratones adultos y monitorear el proceso de curación.

Fractura transversal del fémur del ratón con pasador estabilizador

Este protocolo describe un procedimiento quirúrgico para el establecimiento de una fractura diafisaria en el fémur de ratones, que se estabiliza con un alambre intramedular, para estudios de cicatrización de fracturas.

Establecimiento de un modelo de fractura de fémur diafisario en ratones

Este estudio estableció un modelo de defecto semisegmentario femoral de rata para evaluar el rendimiento mecánico y osteogénico de materiales sustitutos óseos bajo condiciones portantes sin el uso de fijación interna o externa.

Modelo de defecto óseo diáfisario semisegmentario en ratas para evaluar el rendimiento de sustitutos óseos en regiones portantes

Con el fin de evaluar nuevos paradigmas terapéuticos para el tratamiento del glioma, fisiológicos modelos pertinentes son esenciales. Utilizamos un procedimiento de guía de tornillo implantable para el establecimiento de modelos de xenoinjerto intracraneal que es más rápido y más seguro que los enfoques estereotáctica.

Una guía sencilla Método de tornillo para intracraneal Estudios xenoinjerto en ratones

Este artículo describe un método para estabilizar fracturas de huesos largos que se basa en la aplicación de modificados Ilizarov fijadores...

Creación de fracturas rígidamente estabilizados para la evaluación de osificación intramembranosa, la distracción osteogénica, o la curación de los defectos críticos de tamaño

Este protocolo describe el aislamiento de tejido adiposo derivado de células estromales de lipoaspirado y la creación de un 4 mm de tamaño crítico defecto craneal para evaluar la regeneración esquelética.

La reparación de un modelo de defecto crítico del tamaño de calota Uso adiposo derivados de las células del estroma cosechadas desde lipoaspirado

Aprenda a crear defectos óseos de tamaño crítico en fémur de ratón usando pines medulares de acero quirúrgico. Este método simplificado permite evaluar la cicatrización ósea mediante radiografía e histología.

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