This content is Free Access.
Chapters
- 00:04Introduction
- 00:36Donor/Acceptor Förster Resonance Energy Transfer (FRET) Pair Selection
- 01:13Cell Synchronization
- 01:42FRET/Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy (FLIM) Acquisitions
- 02:50Donor/Acceptor Pair Delta Lifetime Calculation and FLIM Value Comparison
- 03:53Results: Representative Aurora Kinase A (AURKA) FRET Biosensor and Negative Control Images
- 05:52Conclusion
Aktiveringen af den multifunktionelle Ser /Thr kinase AURKA er hallmærket af sin autophosphorylation på Thr288. Fluorescerende sonder, der er afhængige af FRET, kan skelne mellem dets inaktive og aktiverede tilstande. Her illustrerer vi nogle strategier for sondeteknik sammen med en hurtig FRET-protokol til at følge kinaseaktivering gennem hele mitose.
