RasA Est Nécessaire Pour Le Développement De Myxococcus Xanthus Et Mobilité Sociale

Journal of Bacteriology. Oct, 2005  |  Pubmed ID: 16166548

Une insertion dans le gène de la rasA a entièrement bloqué l'agrégation du développement et la sporulation chez Myxococcus xanthus tout en réduisant les essaim expansion sur une surface d'agar de 0,3 %. Les données présentées ici montrent que rasA est requis pour la formation de fibrilles extracellulaires et sociale mobilité par glissement.

ADN-PK Phosphoryle Histone H2AX Au Cours De La Fragmentation De L'ADN Apoptose Dans Les Cellules De Mammifères

DNA Repair. May, 2006  |  Pubmed ID: 16567133

La phosphorylation de l'histone H2AX à sérine 139 est l'une des premières réponses des cellules de mammifères aux cassures de l'ADN induite par le rayonnement ionisant. Cassures de l'ADN sont également générées pendant les phases terminales de l'apoptose lorsque l'ADN chromosomique est clivé en petite morceaux. Fragmentation de l'ADN de l'apoptose et la condensation de la chromatine qui en découle sont importants pour la compensation efficace d'ADN génomique et de nucléosomes et pour protéger l'organisme contre auto-fondements et transformation oncogénique. Dans cette étude, nous démontrons que H2AX est phosphorylé au cours de la fragmentation de l'ADN apoptotique dans souris, ovaire de hamster chinois et les cellules humaines. Nous avons déjà montré qu'ataxia telangiectasia muté kinase (ATM) est principalement responsable de la phosphorylation de H2AX dans des cellules en réponse à des rayonnements ionisants. Fait intéressant, on y trouve que protéine kinase ADN-dépendante (ADN-PK) est seul responsable de la phosphorylation de H2AX pendant l'apoptosis tandis que ATM n'est pas indispensable pour le processus. En outre, l'activité de la kinase d'ADN-PKcs (sous-unité catalytique de la DNA-PK) est formellement requise pour l'induction de la gammaH2AX. Plus loin, nous montrons qu'ADN-PKcs intervient fermement dans les cellules apoptotiques, comme en témoigne l'autophosphorylation à sérine 2056, avant elle est inactivée par clivage. En revanche, les ATM se dégrade bien avant induction de fragmentation et gammaH2AX l'ADN entraînant la prédominance de l'ADN-PK durant les derniers stades de l'apoptose. Enfin, nous montrons que l'induction ADN-PKcs autophosphorylation et gammaH2AX se produisent seulement dans les noyaux apoptotic avec condensation de la chromatine caractéristique, mais pas dans les noyaux non-apoptotique de la même culture, établissant un lien plus direct entre la fragmentation de l'ADN, l'activation de l'ADN-PKcs et phosphorylation H2AX. Il est bien établi que l'ADN-PK est inactivé par clivage vers la fin de l'apoptose afin de prévenir la réparation de l'ADN. Nos résultats démontrent, pour la première fois, que les ADN-PK est effectivement activé dans les cellules apoptotiques fin et est en mesure d'ouvrir une étape précoce de la réponse de lésions de l'ADN, à savoir H2AX phosphorylation, avant elle est inactivée par protéolyse.

Un Dirigeant Moléculaire Pour Mesurer L'activité Nucléasique Et Empreinte D'ADN De Nanoplasmonic

Nature Nanotechnology. Oct, 2006  |  Pubmed ID: 18654141

Panophthalmitis Due à Aspergillus Chez Un Patient De Syndrome D'immunodéficience Acquise : Clinicopathologique étude D'un Cas

Indian Journal of Ophthalmology. May-Jun, 2007  |  Pubmed ID: 17456953

Psychopathologie, Psychosocial, Le Sexe Et Les Résultats Cognitifs Chez Les Patients Avec Exstrophie Cloacale

The Journal of Urology. Aug, 2007  |  Pubmed ID: 17570426

Fonctionnement psychologique, comme en témoigne en psychopathologie, fonctionnement psychosocial, l'identité de genre, rôle des sexes et des capacités cognitives, a été examiné dans un échantillon de patients avec exstrophie cloacale.

Modulation De La Réponse De Lésions De L'ADN Aux Particules HZE De Blindage

DNA Repair. Oct, 2008  |  Pubmed ID: 18672098

Ions de nombre atomique élevé et de l'énergie (particules HZE) présentent un risque significatif de cancer pour astronautes de missions spatiales prolongées. Sur terre, les ions similaires sont utilisées pour le traitement ciblé du cancer. Les propriétés de ces particules peuvent être radicalement modifiées lors du passage à travers le blindage du véhicule spatial, modulateurs de faisceau de thérapie ou le corps humain. Ici, nous avons utilisé des réponses pertinentes aux cassures double brin de l'ADN (CDB) de comprendre les conséquences de la perte d'énergie par rapport à une fragmentation nucléaire d'ions Fe pendant le passage dans le blindage ou matériaux équivalents tissulaires. La phosphorylation de l'histone H2AX et recrutement de 53BP1 ont été utilisés pour générer des reconstructions 3D de dommages à l'ADN dans les cellules humaines et de suivre sa réparation. Les cellules humaines sont incapables de réparer une partie significative des lésions de l'ADN induite par les ions Fe. ADN-PK et ATM sont tenus, à des degrés divers, pour la réparation partielle des lésions de l'ADN induite par le Fe. Blindage aluminium a peu d'effet sur les lésions de l'ADN ou de sa réparation, confirmant que les coques de la navette spatiale et la Station spatiale internationale offre une protection limitée contre ces particules. Blindage de plomb, en revanche, exacerbe les effets des ions Fe en raison de la perte d'énergie au cours de la traversée de la particule. En contraste, en polyéthylène (PE), un bouclier hydrogéné favorisé, résultats ADN endommagent c'est plus facile de réparer sans doute en raison de la fragmentation de l'ion Fe. Les cellules humaines sont en effet en mesure de réparer efficacement DSBs induites par les ions de chlore et les protons qui représentent les produits de fragmentation du Fe. Fait intéressant, l'activation de la suppresseur de tumeur p53 dans les cellules irradiées Fe est biphasique et culmine dans l'induction des niveaux élevés de p21 (Cip1/Waf1), p16 (INK4a) et l'activité de la bêta-galactosidase associée à la sénescence. Étonnamment, ces événements se produisent même en l'absence d'ATM kinase impliquant que l'ATR peut être un intervenant majeur au complex ADN dommages infligés par les ions Fe. Significativement, la fragmentation du faisceau à travers PE Fe atténue ces réponses et ceci, à son tour, conduit à mieux la pérennité dans un essai de formatrices. Nos résultats nous aident à comprendre les conséquences biologiques de fragmentation des ions à travers les matériaux, que ce soit dans l'espace ou à la clinique et nous fournissent une base biologique pour l'utilisation de matériaux hydrogénés comme PE boucliers aussi efficaces de l'espace.

Fluorescentes Faux Neurotransmetteurs Visualisez La Libération De Dopamine à Partir Individuels Terminaisons Présynaptiques

Science (New York, N.Y.). Jun, 2009  |  Pubmed ID: 19423778

Le système nerveux transmet des signaux entre les neurones via la libération de neurotransmetteurs lors de la fusion des vésicules synaptiques. Afin d'observer l'absorption et la libération de neurotransmetteurs individuels terminaisons présynaptiques directement, nous avons conçu fluorescentes faux neurotransmetteurs comme substrats pour le transporteur de la vésicule synaptique monoamine. L'utilisation de ces sondes pour la libération de dopamine dans le striatum l'image, nous avons fait plusieurs observations pertinentes à la plasticité synaptique. Nous avons constaté que la fraction de vésicules synaptiques libérant des neurotransmetteurs par stimulus était dépendante de la fréquence du stimulus. Un cinétiquement distinctes «réserve» de la population des vésicules synaptiques n'a pas été observé dans ces conditions expérimentales. Une hétérogénéité dépend de la fréquence des terminaisons présynaptiques a été révélé que dépendait en partie sur les récepteurs dopaminergiques D2, indiquant un mécanisme de codage dépendant de la fréquence de sélection présynaptique.

Réparation De Cassure Double Brin EGFRvIII Et ADN : Un Mécanisme Moléculaire De Radiorésistance Dans Le Glioblastome

Cancer Research. May, 2009  |  Pubmed ID: 19435898

Glioblastome multiforme (GBM) est le plus meurtrier des tumeurs cérébrales et est très résistant aux rayonnements ionisants (IR) et de la chimiothérapie. Ici, nous présentons un mécanisme moléculaire par lequel une mutation de gliome propres clée, variante de récepteur de facteur de croissance épidermique III (EGFRvIII), confère la résistance de rayonnement. À l'aide des astrocytes de souris primaire de Ink4a/Arf-deficient, astrocytes primaires immortalisés par suppression p53/Rb, ainsi que des cellules de gliome U87 humaines, nous montrons que l'expression EGFRvIII améliore survie de clonogénique après IR Cette radiorésistance amélioré est accélérée réparation des cassures double brin de l'ADN (ORD), la lésion plus meurtrière infligée par IR. L'EGFR inhibiteur gefitinib (Iressa) et l'inhibiteur (PI3K) de la phosphatidylinositol 3-kinase LY294002 atténuent le taux de réparation de l'ORD. Ce qui est important, expression de constitutivement active, myristylée Akt-1 accélère la réparation, impliquant la voie PI3K/Akt-1 dans la radiorésistance. Plus particulièrement, des cellules de gliome exprimant l'EGFRvIII U87 montrent élevée d'activation d'une clé ORD réparation enzymatique, la sous-unité catalytique de la kinase protéines ADN-dépendante (ADN-PKcs). Radiorésistance amélioré est abrogé par l'inhibiteur spécifique de l'ADN-PKcs NU7026 et EGFRvIII ne parvient pas à conférer la radiorésistance dans les cellules déficientes en PKcs-ADN. In vivo, orthotopique U87 EGFRvIII dérivés tumeurs affichent plus rapide taux de réparation ORD après radiothérapie du cerveau entier comparée à U87 dérivées de tumeurs. Par conséquent, les tumeurs exprimant l'EGFRvIII sont radiorésistantes et continuent à croître après la radiothérapie du cerveau entier avec peu d'effet sur la survie globale. Ces données in vitro et in vivo confirment notre hypothèse que EGFRvIII expression favorise activation ADN-PKcs et réparation de l'ORD, peut-être par suite de la signalisation de hyperactivé PI3K/Akt-1. Pris ensemble, nos résultats soulèvent la possibilité que l'EGFR ou ADN-PKcs inhibition simultanée avec le rayonnement peut être une stratégie thérapeutique efficace pour les gliomes de haut grade radiosensibilisants.

Les Rôles Distincts Des ATR Et ADN-PKcs Dans Le Déclenchement De L'ADN Endommagent Les Cellules Déficientes En ATM

EMBO Reports. Jun, 2009  |  Pubmed ID: 19444312

La réponse cellulaire à des cassures double brin de l'ADN implique une activation directe d'ataxia telangiectasia muté (ATM) et une activation indirecte d'ataxie télangiectasie et Rad3 associés (ATR) d'une manière dépendante de ATM/Mre11/cellule-cycle. Nous rapportons ici que le point crucial de contrôle signalisation protéines-p53, entretien structurel des chromosomes 1 (SMC1), protéine p53 1 (53BP1), kinase de point de contrôle (Chk) 1 et Chk2-sont phosphorylés rapidement par ATR d'une façon indépendante de ATM/Mre11/cellule-cycle, quoiqu'à des niveaux faibles. Nous avons observé le recrutement séquentielle des protéines de réplication A (RPA) et ATR vers les sites des lésions de l'ADN dans les cellules déficientes en ATM, qui prévoit les phosphorylations observées de façon mécaniste. Le recrutement des ATR et les phosphorylations qui en résulte ne nécessitent pas de Mre11 mais dépendent de l'Exo1. Nous montrons que ces faibles niveaux de phosphorylation est biologiquement importants, comme les cellules déficientes en ATM imposer un point de contrôle au début de G2/M qui dépend de l'ATR. ATR est également essentielle pour l'accumulation de G2 fin propre à des cellules déficientes en ATM irradiées. Fait intéressant, phosphorylation de la protéine KRAB associé 1 (KAP-1), une protéine impliquée dans le remodelage de la chromatine, est véhiculée par la sous-unité catalytique de la kinase protéines ADN-dépendante (ADN-PKcs) de manière temporelle en plus de l'ATM. Nous affirmons que les substrats ATM impliqués dans la signalisation de point de contrôle du cycle cellulaire peuvent être minimalement phosphorylées indépendamment par ATR, alors qu'un petit sous-ensemble des protéines intervenant dans le remodelage de la chromatine sont phosphorylés par ADN-PKcs en plus de l'ATM.

Quantification De L'activité Temporelle Seule étape Protéase à L'aide De Capteurs De Résonateur De Nanoplasmonic

ACS Nano. Feb, 2010  |  Pubmed ID: 20121209

Mesure de l'activité protéase a large application dans le dépistage des drogues, le diagnostic et stadification de la maladie et profil moléculaire. Toutefois, dosages immunopeptidemetric classiques (IMPA) présentent les rapports signal-bruit faible fluorescence, empêchant des mesures fiables à des concentrations plus faibles dans le cliniquement important picomoles à nanomolaire. Ici, nous avons démontré une mesure très sensible de l'activité de la protéase à l'aide d'un résonateur de nanoplasmonic (NPR). RNP améliorer les signaux Raman par 6,1 x 10 (10) fois de manière hautement reproductible, ce qui permet une détection rapide des activités de l'antigène prostatique spécifique (paPSA) clivage protéolytique actif en temps réel, à un niveau de sensibilité de 18 (0,2 ng/mL) avec une plage dynamique de 3 ordres de grandeur. Expériences sur le liquide extracellulaire (ECF) des cellules positives paPSA démontrent une détection spécifique dans un contexte complexe biofluid. Cette méthode offre une rapide, sensible, précis et une approche en une seule étape pour détecter les activités des protéases dans des volumes très petits échantillons.

Réparation D'une Recombinaison Homologue De Compromis PTEN Perte Dans Les Astrocytes : Implications for Glioblastoma Therapy Avec Inhibiteurs De Témozolomide Ou Ribose Polymérase

Cancer Research. Jul, 2010  |  Pubmed ID: 20530668

Les glioblastomes (GBM) sont des tumeurs de cerveau mortelle qui sont très résistants à la thérapie. L'amélioration significative uniquement en réponse thérapeutique provenait de l'utilisation de la type 1 S (N) agent alkylant témozolomide en combinaison avec des rayonnements ionisants. Toutefois, aucun des marqueurs génétiques qui pourraient prévoir une meilleure réponse aux ADN des agents alkylants n'ont été identifiés dans GBM, à l'exception de la perte de O (6-) méthylguanine ADN méthyltransférase, par l'intermédiaire de méthylation du promoteur. Dans cette étude, génétiquement définies des astrocytes murines primaires ainsi que les lignes de gliome humain, nous montrons que la perte de la phosphatase et tensine homologue supprimé sur le chromosome 10 (PTEN) confère sensibilité à N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG), un analogue fonctionnel du témozolomide. Nous trouvons que MNNG induit associées à la réplication ADN cassures double-brin (DSB), qui sont réparés inefficacement dans les astrocytes PTEN déficient et déclenchent l'apoptose. Mécaniquement, c'est parce que les astrocytes PTEN null sont compromises dans la recombinaison homologue (HR), qui est important pour la réparation des CDB associées à la réplication. Nos résultats suggèrent que des niveaux réduits de Rad51 paralogues dans les astrocytes PTEN null pourraient sous-tendre l'insuffisance de ressources humaines de ces cellules. Ce qui est important, le déficit de HR de cellules null PTEN rend sensible à l'inhibiteur de polymérase (PARP) du ribose ABT-888 en raison de la létalité synthétique. En somme, nos résultats suggèrent provisoirement que patients atteints de PTEN null GBM (environ 36 %) surtout bénéficient de traitement avec l'ADN des agents comme le témozolomide alkylants. Significativement, nos résultats fournissent également une base rationnelle pour traiter le sous-groupe de patients qui sont PTEN déficiente avec des inhibiteurs de PARP outre le schéma thérapeutique actuel du rayonnement et du témozolomide.

Blow-in Fracture De L'orbitale Toit Présentant Comme Un Cas De Non Résolution Choroïdienne épanchement

Indian Journal of Ophthalmology. Jul-Aug, 2010  |  Pubmed ID: 20534928

Un patient de sexe masculin âgé de 34 ans parlait de nous comme un cas de non-résoudre l'hémorragie suprachoroidal. L'histoire a révélé diminution vision oeil droit suite à un traumatisme au front. B scan (USG) l'échographie de le œil droit a montré une structure réfléchissante haute mise en retrait du monde. Il s'est avéré pour être un fragment de fracture déplacée inférieurement du toit orbital sur la tomodensitométrie (CT). L'élévation choroïdienne a disparu après que réduction ouverte du fragment de la fracture et patient avait la bonne récupération de la vision. USG et tomodensitométrie sont utiles dans le diagnostic et la gestion de l'espèce.

Perte De P15/Ink4b Accompagne La Tumorigenèse Déclenchée Par Complexes Cassures Double Brin De L'ADN

Carcinogenesis. Oct, 2010  |  Pubmed ID: 20663777

Cassures double brin de l'ADN (CDB) sont la lésion plus délétère infligée par les rayonnements ionisants. Bien que CDB est potentiellement cancérigènes, il n'est pas clair si DSBs complexes qui sont réfractaires à la réparation sont plus puissamment tumorigènes comparé avec des sauts simples qui peuvent être rapidement réparés, correctement ou incorrectement, par les cellules de mammifères. Nous avons démontré précédemment que DSBs complexes induits par transfert d'énergie linéaire haute Fe (LET), les ions sont réparées lentement et incomplètement, tandis que ceux induits par les rayons gamma de faible TLE sont réparés efficacement par les cellules de mammifères. Pour déterminer que si Fe induite par la CDB est plus puissamment tumorigènes que les pauses induite par rayons gamma, nous irradié des astrocytes murine « sensibles » qui étaient déficients en Ink4a et Arf suppresseurs de tumeurs et les cellules survivantes injection sous-cutanée souris nues. En utilisant ce système de modèle, nous constatons que les ions Fe sont puissamment tumorigènes, générant des tumeurs avec une fréquence significativement plus élevée et des temps de latence plus courte par rapport aux tumeurs générées par rayons gamma. La formation de tumeurs de cellules irradiées Fe s'accompagne d'une instabilité génomique rampante et de multiples changements génomiques, le plus intéressant qui est perte du suppresseur de tumeur p15/Ink4b due à une délétion d'une région chromosomique hébergeant les loci CDKN2A et CDKN2B. La perte supplémentaire de p15/Ink4b dans les tumeurs dérivées de cellules qui manquent déjà p16/Ink4a renforce l'hypothèse que p15 joue un rôle important dans la suppression tumorale, surtout en l'absence de p16. En effet, nous trouvons cette ré de p15 dans dérivées de tumeurs cellules atténue considérablement le potentiel tumorigène de ces cellules, indiquant que la perte de p15 peut-être être un événement critique dans la tumorigenèse déclenchée par la CDB complexes.

Ciblage Fin-joining Non-homologues Par Inhibition De Récepteur De Facteur De Croissance épidermique : Raison D'être Et Les Stratégies De Radiosensibilisation

Seminars in Radiation Oncology. Oct, 2010  |  Pubmed ID: 20832017

Cassures de l'ADN double-brin (CDB) sont les plus meurtrières des lésions de l'ADN induite par le rayonnement ionisant ou médicaments chimiothérapeutiques utilisés pour éradiquer les cellules cancéreuses. La capacité des cellules cancéreuses pour réparer efficacement les CDB significativement influence le résultat des régimes thérapeutiques. Par conséquent, un nouveau et important domaine de recherche sur le cancer clinique est le développement de l'ADN réparation inhibiteurs qui peuvent être utilisés comme radio - ou chimiosensibilisant. Fin non-homologues rejoindre (NHEJ) est la voie prédominante pour la réparation des CDB radio-induits. Une série de rapports récents indique que le récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR) ou ses composants en aval peuvent moduler NHEJ par interaction directe avec l'enzyme de réparation de l'ADN, protéine kinase ADN-dépendante. Parce que l'EGFR est surexprimé ou activé dans nombreux cancers, ces résultats fournissent une justification convaincante pour associer radiothérapie avec les traitements qui bloquent l'EGFR ou ses éléments de signalisation en aval. Dans cette revue, nous préciser comment ces nouvelles connexions entre un récepteur de surface cellulaire (EGFR) et un événement principalement nucléaire (NHEJ) aux nœuds vulnérables qui peuvent être ciblés de manière sélective afin d'améliorer le traitement du cancer.

Un Cas Inhabituel De Corps étranger Infraorbitaire Et Sa Gestion

Indian Journal of Ophthalmology. Jan-Feb, 2011  |  Pubmed ID: 21157077

Infraorbitaire corps étrangers sont généralement le résultat d'un traumatisme accidentel et peuvent conduire à une morbidité considérable. Nous rapportons un cas inhabituel d'une blessure industrielle dans une unité de fabrication en plastique dans lequel le plastique fondu chaud éclaboussé et solidifié à l'intérieur de l'orbite. La résultante ont augmenté la pression infraorbitaire a conduit à la perte de la vision de cet œil. La température extrême du corps étranger causé de graves dommages thermiques aux structures avoisinantes annexielles. Mise en scène de la chirurgie réparatrice a été entreprise pour réparer les dégâts, avec un résultat esthétique final acceptable. Emploi des lunettes pour éviter ces accidents dans les professions à risque élevé devrait être rendue obligatoire.

Cassures Double Brin De L'ADN Font Le Ménage De L'ATM Et AKT

Cell Cycle (Georgetown, Tex.). Oct, 2011  |  Pubmed ID: 21946524

Fasciite Nodulaire De PERI-orbitaire Chez L'enfant

Orbit (Amsterdam, Netherlands). Dec, 2011  |  Pubmed ID: 22145964

Fasciite nodulaire est une prolifération idiopathique, bénigne, nodulaire du tissu conjonctif, impliquant le fascia superficiel. Le tableau clinique d'une masse rapidement croissante et l'aspect histopathologique de la lésion souvent donner la fausse impression d'un sarcome. Fréquemment observées dans le tronc et les extrémités supérieures des adultes, la lésion est rarement vu dans la région orbitale. Nous rapportons le premier cas de fasciite nodulaire impliquant la région périorbitaire d'un enfant en provenance du sous-continent indien.

Exo1 Influences Réparation De Cassure Double Brin Et Dommages Décisions De Signalisation Et Joue Un Rôle Majeur Dans La Résection Fin ADN Chez L'homme

DNA Repair. Feb, 2012  |  Pubmed ID: 22326273

La résection des cassures double brin de l'ADN (CDB) pour générer des queues d'ADN simple brin est un événement marquant dans la réponse cellulaire à ces ruptures. Dans le modèle en deux étapes de résection, élucidé principalement chez les levures, résection initiale par Mre11-CtIP est suivie d'une résection étendue par deux voies distinctes impliquant Exo1 ou BLM/AVT-Dna2. Cependant, les voies de résection et leurs contributions exactes chez l'être humain in vivo ne sont pas aussi clairement fonctionnées comme dans la levure. Ici, nous avons examiné la contribution de Exo1 à la résection fin ADN chez l'homme in vivo en réponse à des rayonnements ionisants (IR) et de sa relation avec les autres voies de résection (Mre11-CtIP ou BLM/AVT). Nous trouvons que Exo1 joue un rôle prédominant dans la résection dans les cellules humaines ainsi qu'une autre voie dépend de l'AVT. Tandis que Mre11 et CtIP stimulent la résection dans les cellules humaines, ils ne sont pas absolument nécessaires à ce processus et Exo1 peut fonctionner en résection même en l'absence de Mre11-CtIP. Fait intéressant, le recrutement de Exo1 de cassures de l'ADN semble être inhibée par la protéine NHEJ Ku80, et le niveau plus élevé de résection qui se produit en cas d'épuisement induite par le siARN de Ku80 dépend de Exo1. En outre, Exo1 peut être réglementé par 53BP1 et Brca1, et la restauration de la résection dans les cellules déficientes en BRCA1 sur l'appauvrissement de la couche de 53BP1 dépend de Exo1. Enfin, nous trouvons que cette résection Exo1-mediated facilite une transition du point de contrôle de cycle de cellules ATM à ATR-médiation signalisation. Nos résultats identifient Exo1 comme un médiateur clé de résection fin ADN et réparation ORD et dommages signalisation des décisions dans les cellules humaines.