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Articles by Jackson C. Kirkman-Brown in JoVE
JoVE General
이미징 CA의 기술 2 + 인간 정자의 시그널링
1School of Biosciences, University of Birmingham, 2School of Medicine, University of Birmingham, 3Centre for Human Reproductive Science, Birmingham Women’s Hospital
자극 - evoked [칼슘
Other articles by Jackson C. Kirkman-Brown on PubMed
세포내 [Ca2 +] 황 체 호르몬 자극 강도의 인코딩 ([Ca2 +] I) 인간의 정자에서
황 체 호르몬 유도 나아졌다 Ca(2+) 유입 및 결과 acrosome 반응을 인간의 정자에서. 우리 (복용량 및 이전 수용 체 둔감) 세포내 [Ca(2+)] ([ca(2+)](i))에 의해 자극 강도의 인코딩을 조사 자극을 다양 하 게 두 개의 프로시저를 사용 했습니다. Acrosome 반응 및 진폭 (하지만 하지 속도 론) 과도의 [약 300에 흠뻑 젖 게 Ca(2+)](i) 응답 (인구 측정) 자형 복용량 감도 범위 0.3 nM 3 microM 통해 보여준 nM (ED(50) 약 30 nM). 3 Microm에서 포화 상태 지속된 응답의 진폭. 싱글 셀 이미징 보여준 과도 하 고 지속적인의 진폭 [Ca(2+)](i) 응답 높은 복용량 의존 했지만 그들의 주파수의 발생과 속도 론 크게 복용량 독립 했다. Fluorimetric 측정을 확인 하는 황 체 호르몬 유도 [Ca(2+)](i) 유입 둔감, 효과적인 되 고 3 microM progesterone의 두 번째 및 후속 응용 프로그램 대상 이었다. 그러나, 3의 순차적 추가 nM, 30 Nm과 3 microM 생성 된 황 체 호르몬 과도 [Ca(2+)](i) 응답 진폭 및 기간 3 microM 황 체 호르몬 감소 되 고에 대 한 응답의 각 농도에서 비 pretreated 셀과 비교 합니다. 싱글 셀 이미징 밝혀 전처리 반응 셀의 비율에 영향을 주지 않습니다 했지만 인구 응답 마찬가지로 단일 셀 응답 했다 작고 기간 [Ca(2+)](i) 과도의 늦은 구성 요소에 둔감의 효과와 일치에 현저 하 게 감소. 우리는 다양 한 복용량 또는 둔감, 황 체 호르몬 자극의 강도 [Ca(2+)](i) 신호는 아날로그로 인코딩된 결론 Acrosome 반응의 복용량 종속성은 황 체 호르몬 반응 셀 수 아니라 '상수' 반응 인구에서 exocytosis 확률의 변화에 따라서 결정 됩니다.
인간의 정자에서 느린 칼슘 진동입니다
우리 세포내 Ca2 + 신호 인간의 정자 황 체 호르몬 (3 microM) 자극된에 조사를 단일 셀 이미지를 사용 했습니다. 셀의 약 9%에서 황 체 호르몬 발생의 느린 반복적인 [Ca2 +] i (세포내 Ca2 + 농도) 진동 1-4 분 기록 (20-30 분) 동안 유지 되는 기간으로 합니다. Nifedipine, 어느 블록 T-L-타입 전압 구동 Ca2 + 채널 spermatogenic 셀에는 진동의 특성을 수정 하지는 않았다 하지만 관찰 된 셀의 비율을 감소와 함께 전처리. 베이 K 8644 또는 fpl64176와 자극 유발 [Ca2 +] i 셀, 하지만 그들의 주파수의 진동 5-10%에는 낮은 (기간, 4-5 분). Valinomycin (1 microM) 클램프 E(K) (칼륨에 대 한 잠재적인 평형)에서 잠재적인 멤브레인의 응용 진동 셀, 그 플라즈마 멤브레인 잠재적 페이지에서 수정 하지 및 전압 구동 conductances의 활성화는 정자 [Ca2 +]에 의해 메커니즘에 관련 되지 않은 i 진동 생성 됩니다.
황 체 호르몬 유도 Acrosome 반응 및 개별 인간의 정자에서의 세포내 칼슘 응답의 관계 속도 론
3 Microm에서 황 체 호르몬 유발 나아졌다 (과도 하 고 지속적인) 증가 세포내 칼슘 (acrosome 황 체 호르몬 유발 반응 (아칸소 주)에 대 한 전제 조건 여겨진다 인간의 정자에 [Ca(2+)](i)). 아주 작은 아칸소 발생, 대기 시간 및 완료 황 체 호르몬 유도의 특성에 관계에 대해 알려진 대로 [Ca(2+)](i) 신호, 우리는 개별 살아있는 인간의 정자의 형광 현미경 검사 법을 사용 하 여 이러한 이벤트를 검사 합니다. 칼슘 이미징 속도 론 또는 나타냅니다 acrosome 반응 및 acrosome 그대로 셀에 위의 황 체 호르몬을 이용한 칼슘 반응의 진폭에 차이가 후 acrosomal 상태의 평가 직접 [Ca(2+)](i) 신호는 체포 후 황 체 호르몬 자극 밝혀 최대한 아칸소 황 체 호르몬 자극 직후 발생 한 다양 한 시간에 AR 세포 외 칼슘의 아칸소 Chelation 하지 중요 한 결정의 진폭지속적인된 칼슘 응답 하는 동안이 아니라 초기 일시적인 칼슘 유입 중. Acrosomal 분산 실시간으로 수행 하려고 산 트는와 얼룩에 의해 프로브 LysoTracker 디 앤디-99과 dapoxyl (2-aminoethyl) sulphonamide (DAES) 셀 인구의 다른 유형의 라벨 때문에 결정적이 입증 했다. 놀랍게도, 염료는 acrosome에 국한 되지 않고 자주는 하지만 인간의 정자 세포만 subpopulation 충분히 산 성 acrosome 포함 제안 전체 정자 머리 스테인드.
인간의 정자에 비 게놈 스테로이드 작업입니다. "영구 라덴된 환경에서 격 이네요"입니다
정자 질에서 oocyte 여성의 요로 통과, 그들은 스테로이드 milieu는 transcriptional 않아 그들은 수만 비 게놈 신호를 통해 응답을 경험 하 고. 이 환경 capacitation 등 이벤트를 중재, 운동 성 본과 chemotaxis, acrosome 반응의 변화. 이벤트, 칼슘 신호 경로 수용 체 관련된의 잠재적인 정체성의 현재 정보는 필드, 그리고 혼합 흥분 제 스테로이드의 중요성을 강조에서 추가 작업을 위해 컨텍스트 사용 하 여 최신 데이터에 비추어 검토 됩니다. 황 체 호르몬 수용 체 후보는 황 체 호르몬 막 수용 체 구성 요소-1 또는-2 serpine 1 mRNA 바인딩 단백질, 지금까지 인간의 정자에서 황 체 호르몬 활동에 대 한 가장 적합 한 후보와 복잡 한 예: 수용 체의 새로운 클래스를 포함 하 여 최근 연구 결과 비추어 간주 됩니다. 다른 대체 후보 수와 신호 통로 활성화의 명백한 다양성을 감안할 때, 황 체 호르몬 수용 체의 여러 종족의 존재는 제외할 수 없습니다. 정자 기능 장애는 불 임의 가장 일반적인 정의 원인, 그에 주어진 이러한 통로 이벤트의 우리의 현재 제한 된 지식에 진보는 뿐만 아니라 더 나은 치료를 만들지만 또한 합리적인 진단 개선에 매우 중요.
정자 계산을 더 이상 추가 하지 않습니다: 새로운 방정식에 대 한 시간?
정자 기능 장애 불 임의 하나의 가장 흔한 원인 이지만, 우리는 불 쌍 한 방식의 진단과 놀라울 정도로 효과적인 치료 (보조 생식 기술 제외). 이 리뷰에서 우리 기본 정액 분석의 유용성도 전하고 새로운 패러다임 즉시 필요 하다는 주장. 우리는 재택 심사 잠재적으로 남성의 진단 개선 하 고 sub-fertile 커플 관리 합리화를 사용 하 여 논의. 또한, 우리는 정자 함수의 새로운 바이오 마커의 개발 하면 proteomics에 필드에서 최근 진행 상황을 예를 들어, 간략하게 설명 합니다. 이 새로운 지식과 시스템으로는 정자의 우리의 이해를 변형 시킬 것 이다 정자 기능 장애를 가진 남자에 대 한 비-예술 치료로 이어질 가능성이 높습니다.
정자의 운동 성: 점도 기본적인 진행은?
내부 수정 성공 여성 관을 통해 성공적인 정자 마이그레이션 따라 의존 이다. 무슨 oocyte의 적시 위치가 촉촉한 반대 표면의 복잡 한 3 차원, 매우 invaginated 시리즈는 정자의 수만 적 성공 도전 이다. 부분적으로이 규모에서 차이 때문 50 µ m 긴 셀이 복잡 한 구조 때문에 20cm 이상의 가능성이 마이그레이션에 직면 수 있습니다. 많은 그룹 지침 수정 사이트에 있는 숫자를 증가 하는 정자에 혈 '매력적인 그' 효과 대 한 역할에 집중 했다. 대부분의 연구는 소홀히 고려 하는 코트 전체로 하 고 있는 정자 수영 해야 합니다, 점 막 층의 점도 정자 선택과 그들의 행동의 지속적인 변조에서 수행 하는 역할 이다. 배 란 단계에서 입구 여성 피임 알 약의 행동을 통해 그들을 부인 하는 자 궁 경부를 통해 입력 하는 정자 수에서 점성 효과 관을 통해 마이그레이션 정자 인구 제어에 근본 되며. 점도의 생리 적 효과 설계 및 생체 조건 상황에 체 외 실험에서 데이터를 extrapolating 때 고려해 야 할 중요 한 있습니다.
