Inducibile Ossido Nitrico Sintasi Svolge Un Ruolo in LPS-indotta Iperglicemia E Insulino-resistenza

American Journal of Physiology. Endocrinology and Metabolism. Feb, 2002  |  Pubmed ID: 11788371

I meccanismi molecolari sottostanti la resistenza all'insulina indotta da endotossina rimangono poco chiari. Endotossina o lipopolisaccaride (LPS) iniezione è un potente stimolatore dell'inducibile ossido nitrico sintasi (iNOS). Questo studio sui ratti, utilizzando l'iNOS specifico inibitore aminoguanidina, indagato il ruolo di iNOS in endotossine indotta da iperglicemia e insulino-resistenza. Iniezione di LPS ha condotto a iperglicemia, insulino-resistenza e iNOS aumentata espressione della proteina e attività. Aminoguanidina ha impedito l'iperglicemia indotta da LPS senza alterare l'espressione di livelli o iNOS insulina. Aminoguanidina attenuato la resistenza di insulina indotta da LPS, riflettuta l'esigenza di un più alto tasso di infusione di glucosio mantenere euglycemia durante uno studio pinza iperinsulinemica. Aminoguanidina completamente bloccato l'output di glucosio epatico LPS-elevato e inoltre inibito LPS-indotta aumenta in attività di fosforilasi del glicogeno epatico e fosfoenolpiruvato carbossichinasi (PEPCK) espressione del mRNA, enzimi chiave per glicogenolisi e gluconeogenesi, rispettivamente. Così, questi dati dimostrano un ruolo importante per iNOS nella resistenza all'insulina indotta da LPS, testimoniano l'attenuazione dell'iperglicemia indotta dal LPS e inversione dell'uscita del glucosio epatico aumentato da aminoguanidina. L'effetto protettivo di aminoguanidina su resistenza di insulina è probabilmente di attenuazione dell'uscita del glucosio epatico attraverso l'inibizione degli enzimi chiavi per glicogenolisi e gluconeogenesi, compresi fosforilasi del glicogeno e PEPCK.

Confronto Del Comet Assay, Microscopia E Citometria a Flusso Per La Rilevazione Del Apoptosis

The Journal of Histochemistry and Cytochemistry : Official Journal of the Histochemistry Society. Jul, 2003  |  Pubmed ID: 12810838

Differenziando il apoptosis da necrosi è una sfida in singole cellule e nei tessuti parenchimali. Le tecniche disponibili, tra cui TUNEL in situ (deossiribonucleotide Terminal trasferasi-mediated dUTP-X Nick End-etichettatura) colorazione, dosaggio di DNA ladder e flusso cytometry, soffrono da bassa sensibilità o da un alto tasso di falsi-positivi. Questo studio, utilizzando un modello di cellulare Jurkat, inizialmente ha valutato la specificità di cytometry di flusso e dosaggio cometa neutro rispetto al gold standard, microscopia elettronica, per la rilevazione del apoptosis e necrosi. Neutro comet assay apoptosi distinto da necrosi in cellule Jurkat, come dimostra il punteggio maggiore cometa in cellule apoptotic e quasi pari a zero il punteggio di cometa in cellule necrotiche. Questi risultati sono coerenti con quelli di microscopia e citometria a flusso. Inoltre, utilizzando ratti con lesioni ustione o ischemia/reperfusion, modelli consolidati di apoptosis di tessuto muscolare scheletrico e cardiaco, rispettivamente, abbiamo applicato il comet assay per rilevare apoptosis in questi muscoli. Neutro comet assay è stato in grado di rilevare cambiamenti apoptotici in entrambi i modelli. Nel muscolo campioni da ratti con bruciano o ischemia-reperfusion pregiudizio, il punteggio di cometa è stato superiore a quello dei campioni di muscolo dai loro rispettivi controlli. Questi studi confermano la consistenza del comet test per la rilevazione del apoptosis in cellule singole e forniscono la prova per la sua applicabilità come un ulteriore metodo per rilevare l'apoptosi nelle cellule parenchimali.

Up-regulation Dei Recettori Dell'acetilcolina Durante L'infusione Subcronica Di Pancuronio è Causata Da Un Meccanismo Di Posttranscriptional Relative Al Disuso

Critical Care Medicine. Feb, 2004  |  Pubmed ID: 14758171

In contrasto con la teoria classica che il blocco competitivo del recettore dell'acetilcolina induce up-regulation del recettore, studi recenti mostrano che il blocco irreversibile dei recettori dell'acetilcolina con alfa-bungarotoxin diminuisce numero di recettori dell'acetilcolina entro le ore. Questo studio ha studiato gli effetti primi del blocco del recettore acetilcolina competitivo con il rilassante muscolare reversibile, competitivo, pancuronio.

Miorilassanti Nondepolarizing Steroidei Non Simulare Gli Effetti Dei Glucocorticoidi Sulla Trascrizione Di Mediata Da Recettori Glucocorticoidi in Cellule Del Muscolo Scheletrico Colta

Anesthesiology. Jun, 2004  |  Pubmed ID: 15166588

Bruciare Infortunio Altera Attivazione Di Akt/PKB Stimolato Da Insulina Nel Muscolo Scheletrico

American Journal of Physiology. Endocrinology and Metabolism. Mar, 2005  |  Pubmed ID: 15536206

Le basi molecolari sottostanti burn - o critico malattia indotta da insulino-resistenza ancora rimangono non precisate. Catabolismo proteico muscolare è una caratteristica onnipresente di malattia critica. Akt/PKB è un regolatore fondamentale dell'ipertrofia e atrofia dei muscoli scheletrici e svolge un ruolo centrale nell'azione metaboliche dell'insulina. Abbiamo quindi esaminato gli effetti della masterizzare lesioni sull'attivazione di Akt/PKB stimolato da insulina nel muscolo scheletrico. Insulina-stimolata fosforilazione di Akt/PKB è stato notevolmente attenuata bruciato rispetto ai ratti sham-bruciato. Attività della chinasi Akt/PKB stimolata da insulina, giudicata dallo status di dosaggio e fosforilazione della chinasi di complessi immuni di substrato endogeno di Akt/PKB, glicogeno sintasi chinasi-3beta (GSK-3 β), è stato significativamente alterato nei ratti bruciati. Inoltre, insulina costantemente omesso aumentare la fosforilazione di p70 S6 chinasi, un altro effettore a valle di Akt/PKB, nei ratti con lesioni burn, considerando che la fosforilazione di p70 S6 chinasi è stata aumentata di insulina nei controlli. L'espressione della proteina di Akt/PKB, GSK-3beta e p70 S6 chinasi era inalterata da bruciare lesioni. Tuttavia, stimolata da insulina attivazione di ERK, una via di segnalazione parallela di Akt/PKB, non è stata influenzata da bruciare lesioni. Questi risultati dimostrano che bruciare infortunio altera l'attivazione di Akt/PKB stimolato da insulina nel muscolo scheletrico e suggeriscono che l'attivazione di Akt/PKB attenuato potrebbe essere coinvolta nel metabolismo squilibrato e deperimento muscolare osservata dopo l'infortunio di bruciare.

Inducibile Ossido Nitrico Sintasi E Nessun Donatore Indurre La Degradazione Di Substrato-1 Recettore Insulina in Cellule Del Muscolo Scheletrico

The Journal of Biological Chemistry. Apr, 2005  |  Pubmed ID: 15805118

Infiammazione cronica svolge un ruolo importante nella resistenza all'insulina. Inducibile ossido nitrico sintasi (iNOS), un mediatore dell'infiammazione, sono stato implicato in molte malattie umane, tra cui la resistenza all'insulina. Tuttavia, i meccanismi molecolari da cui iNOS da intermediario insulino resistenza rimangono in gran parte sconosciuto. Qui ci dimostrano che l'esposizione a nessun donatore o iNOS transfezione ridotto insulina recettore substrato (IRS)-1 espressione della proteina senza alterare il livello di mRNA nelle cellule del muscolo scheletrico colta. NESSUN donatore aumentato ubiquitination IRS-1, e gli inibitori del proteasoma non bloccato alcuna riduzione indotta da donatori IRS-1 espressione in cellule del muscolo scheletrico colta. L'effetto di nessun donatore su IRS-1 espressione fu indipendente dal cGMP e accentuata dalla concomitante dello stress ossidativo, suggerendo un coinvolgimento di Aβ stress. Gli inibitori della chinasi del fosfatidilinositolo 3, mammiferi bersaglio della rapamicina e c-Jun amminico-terminale chinasi non è riuscito a non bloccare nessuna riduzione indotta da donatori di IRS-1, considerando che questi inibitori impedito stimolato da insulina IRS-1 diminuiscono. Inoltre è stata aumentata espressione di iNOS nel muscolo scheletrico di topi diabetici (ob/ob) rispetto ai topi wild-type magri. rottura del gene iNOS o trattamento con inibitore iNOS migliorata depresso espressione di IRS-1 nel muscolo scheletrico di topi diabetici (ob/ob). Questi risultati indicano che iNOS riduce l'espressione di IRS-1 nel muscolo scheletrico tramite degradazione mediata dal proteasoma e quindi possono contribuire alla resistenza all'insulina obesità.

Spettroscopia NMR Protonica Illustrato Lipidi Si Accumulano Nel Muscolo Scheletrico in Risposta a Bruciare Apoptosi Indotta Dal Trauma

FASEB Journal : Official Publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology. Sep, 2005  |  Pubmed ID: 16126910

Masterizzare trauma trigger ipermetabolismo e muscolo sprecando via degradazione maggiore proteina cellulare e l'apoptosi. Spettroscopia di risonanza magnetica nucleare (NMR 1h) protone può rilevare mobile lipidi in vivo. Per esaminare gli effetti locali di bruciare nel muscolo scheletrico, abbiamo eseguito in vivo 1H NMR su topi 3 giorni dopo il trauma di ustione; ed ex vivo, ad alta risoluzione, magic angle spinning (1) H NMR sul mouse escissa intatto muscolare campioni prima e 1 e 3 giorni dopo l'ustione. Questi campioni sono stati poi analizzati per i nuclei apoptotic utilizzando un terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL) dosaggio. Per confermare i nostri risultati di biologia delle cellule e NMR, abbiamo usato transcriptome analisi per dimostrare che brucia trauma altera l'espressione dei geni coinvolti nell'apoptosi e metabolismo dei lipidi. I nostri risultati dimostrano che bruciare risultati lesioni in un accumulo di lipidi intramyocellular localizzata, che a sua volta è accompagnato dall'apoptosi indotta da bruciare e la disfunzione mitocondriale, come visto da up-regolazione di geni apoptotici e down-regulation dei geni che codificano l'ossidazione dei lipidi e il coactivator gamma di peroxisomal proliferator activator receptor PGC-1beta. Inoltre, l'aumento dei livelli di bisallylic metilene acilico grassi protoni (2,8 ppm) e protoni vinile (5,4 ppm), in combinazione con i risultati del saggio TUNEL, suggerisce ulteriori che trauma ustione risultati nell'apoptosi. Insieme, i nostri risultati forniscono nuova visione del locali cambiamenti fisiologici che si verificano nel muscolo scheletrico dopo un trauma grave ustione.

Apoptosi Degli Adipociti Dopo L'infortunio Di Burn Sono Associato Con Alterato Metabolismo Dei Grassi

Journal of Burn Care & Research : Official Publication of the American Burn Association. May-Jun, 2006  |  Pubmed ID: 16679908

Bruciare lesioni spesso sono associato con il metabolismo dei lipidi anormali, tra cui iperlipidemia, desensibilizzazione alle risposte lipolitiche di catecolamine e riduzione delle dimensioni del tessuto adiposo bianco. Comprendere i meccanismi biologici per la diminuzione della massa grassa nonostante la desensibilizzazione alle catecolamine è importante per lo studio del metabolismo lipidico e per lo studio della sua relazione con concomitante insulino-resistenza. Utilizzando il tessuto adiposo dell'epididimo da ratti Sprague-Dawley maschi adulti dopo l'infortunio di ustione (n = 102) o sham-burn lesioni (n = 102), abbiamo testato l'ipotesi che un infortunio di bruciare tutto il corpo provoca apoptosi in quel tessuto. A 1, 3 e 7 giorni dopo 40-50% corpo bruciare lesioni ratto, epidydimal del tessuto adiposo è stato raccolto e studiato per le proprietà lipolitiche e cambiamenti apoptotic. Per apoptosi, tessuto fisso paraformaldeide sezioni sono stati analizzati in situ TdT-mediated dUTP-X nick end labeling (TUNEL) colorazione e omogeneati del tessuto sono stati analizzati anche per la frammentazione del DNA enzyme-linked immunoassay e dosaggio di scaletta reazione a catena della polimerasi-legatura-mediata. Adipociti isolati sono stati stimolati con isoprotenerol, e produzione di glicerolo è stata misurata come un riflettore di efficacia della lipolisi. Tessuto adiposo dell'epididimo hanno mostrato aumentato apoptosis manifestato dalla colorazione TUNEL positiva e maggiore frammentazione del DNA da immunoassay enzima-collegato al day 3 e 7 dopo l'infortunio di ustione. La frammentazione del DNA è stata confermata ulteriormente dal dosaggio scaletta reazione a catena della polimerasi legatura-mediata. Questo elevato DNA frammentazione persistenti negli animali bruciati dal giorno 3 fino al 7 ° giorno dopo la ferita brucia, la fine del periodo di osservazione. Aumento di apoptosi è stata correlata con diminuzione di peso contenuto e tessuto di DNA nella epidydimis. A livello funzionale, una diminuzione significativa nell'attività lipolitica isoproterenol-induced (produzione di glicerolo) è stata osservata a quasi il 50% del livello di controllo al day 3 e 7 ma non è stato ridotto a 1 giorno. Apoptosi degli adipociti possono giocare un ruolo nel metabolismo lipidico alterato, compresi iperlipidemia osservato nei soggetti bruciati.

I Mitocondri, Reticolo Endoplasmatico E Percorsi Alternativi Della Morte Delle Cellule Nella Malattia Critica

Critical Care Medicine. Sep, 2007  |  Pubmed ID: 17713398

Le cellule morenti sono distinti dai loro tratti morfologici e biochimici e suddivisa in tre sottotipi: apoptosis, oncosis (necrosi) e cellule morte con autophagy. Ognuno di questi tipi di morte cellulare svolge ruoli critici nella morfogenesi dei tessuti durante lo sviluppo normale e nella patogenesi delle malattie umane. Dato che l'omeostasi dei tessuti è controllata dall'intricato equilibrio fra degenerazione e rigenerazione, è essenziale per comprendere i meccanismi delle varie forme di morte cellulare per stabilire e migliorare gli interventi terapeutici per la prevenzione e il soccorso di questi disturbi correlati a morte delle cellule. Malattie gravi, tra cui sepsi, traumi e lesioni burn, sono spesso complicata da sindrome multipla di disfunzione organo ed sono accompagnata da morte cellulare aumentato nei tessuti parenchimali e nonparenchymal. Accumulando prove suggerisce che aumentata delle cellule morte gioca un ruolo importante nell'organo fallimento nella malattia critica. Si parlerà di possibili approcci terapeutici per la prevenzione della morte delle cellule, specialmente la morte delle cellule apoptotic.

Ruolo Primario Di Ischemia Funzionale, Prova Quantitativa Per Il Meccanismo Del Due-colpo E La Terapia Con Inibitori Della Fosfodiesterasi-5 Nella Distrofia Muscolare Del Mouse

PloS One. 2007  |  Pubmed ID: 17726536

Distrofia muscolare di Duchenne (DMD) è caratterizzata da danno muscolare maggiore e un anomalo flusso di sangue dopo la contrazione muscolare: lo stato di ischemia funzionale. Fino ad ora, tuttavia, il rapporto di causa-effetto tra la patogenesi della DMD e ischemia funzionale era poco chiaro. Abbiamo esaminato (i) se ischemia funzionale è necessaria per causare danni myofiber indotta da contrazione e (ii) se è sufficiente per indurre il danno funzionale ischemia da solo.

La Resistenza Di Insulina Obesità-indotta E Iperglicemia: Fattori Eziologici E Meccanismi Molecolari

Anesthesiology. Jul, 2008  |  Pubmed ID: 18580184

L'obesità è delle principali cause del diabete di tipo 2, clinicamente dimostrato come iperglicemia. L'omeostasi del glucosio alterata è causata dalla trasduzione del segnale difettoso tramite l'insulina, le proteine, che si traduce nell'assorbimento del glucosio è diminuito dal muscolo, alterato la lipogenesi e aumentato il glucosio dal fegato in uscita di segnalazione. L'eziologia di questa dismutazione nella segnalazione di insulina è correlata ad uno stato infiammatorio cronico, leader per l'induzione dell'inducibile ossido nitrico sintasi e rilascio di alti livelli di ossido nitrico e specie reattive dell'azoto, che insieme causano modificazioni post traduzionale delle proteine di segnalazione. Ci sono differenze sostanziali nei meccanismi molecolari della resistenza all'insulina nel muscolo contro il fegato. Ormoni e citochine da adipociti può potenziare o inibire sia glicemico di rilevamento e segnalazione di insulina. È stato istituito anche il ruolo del sistema nervoso centrale nell'omeostasi del glucosio. Terapie diversificate volte a rettifica obesità indotta da anomalie nel sistema nervoso centrale sia in tessuti periferici possono rivelarsi utile.

Combinato Fuori Risonanza E Rilassamento T2 Nel Telaio Rotante Per Contrasto Positivo MR Imaging Di Infezione in Un Modello Murino Di Ustione

Journal of Magnetic Resonance Imaging : JMRI. Nov, 2010  |  Pubmed ID: 21031524

Per sviluppare il romanzo imaging a risonanza magnetica (MR) metodi per monitorare l'accumulo dei macrofagi nell'infiammazione e infezione. Positivo-contrasto MR imaging fornisce un'alternativa alla risonanza magnetica negativa-contrasto, sfruttando lo spostamento chimico indotto da ultrapiccoli nanoparticelle superparamagnetiche ossido di ferro (USPIO) di molecole d'acqua nelle vicinanze. Introduciamo una nuova combinazione di fuori-risonanza (ORI) positivo-contrasto MRI e T(2ρ) di rilassamento il telaio rotante (ORI-T(2ρ)) per contrasto positivo MR imaging di USPIO.

Inducibile Ossido Nitrico Sintetasi, Migliora La Resistenza All'insulina Muscolo Scheletrico Ma Non Alterano Imprevisto Più Bassi Livelli Di Glucosio Dopo L'infortunio Di Bruciare Nei Topi C57BL/6

Metabolism: Clinical and Experimental. Jan, 2012  |  Pubmed ID: 21816442

Ustione lesione è associato con le risposte infiammatorie e alterazioni metaboliche tra cui la resistenza all'insulina. Con problemi di insulina recettore substrato-1 (IRS-1)-trasduzione del segnale mediata da insulina è una componente importante della resistenza all'insulina nel muscolo scheletrico seguito bruciare infortunio. Per indagare ulteriormente i meccanismi molecolari che sottendono bruciare la resistenza all'insulina indotta da lesioni, studiamo un ruolo dell'inducibile ossido nitrico sintasi (iNOS), un importante Mediatore dell'infiammazione, sulla resistenza all'insulina indotta da bruciare muscolo in iNOS-deficient mice. Ustione di grado pieno spessore terzo – lesioni comprendente il 12% della superficie corporea totale è stata prodotta in topi C57BL/6 wild-type e iNOS-carenti. Stimolato da insulina attivazione (fosforilazione) di IR, IRS-1 e Akt è stato valutato da immunoblotting e immunoprecipitazione. Assorbimento del glucosio insulino-stimolata dal muscolo scheletrico è stata valutata ex vivo. Masterizzare lesioni causate ad induzione di iNOS nel muscolo scheletrico di topi wild-type. L'aumento dell'espressione di iNOS parallelo aumento della resistenza all'insulina, come evidenziato dalla fosforilazione della tirosina è diminuito di attivazione IR e IRS-1, IRS-1 espressione, stimolato da insulina di fosfatidilinositolo 3-chinasi Akt/PKB e assorbimento del glucosio stimolata da insulina in muscolo scheletrico del mouse. L'assenza di iNOS nei topi geneticamente ingegnerizzati diminuito significativamente bruciare la resistenza all'insulina indotta da lesioni nel muscolo scheletrico. Nei topi wild-type, test di tolleranza di insulina ha rivelato tutto il corpo insulino-resistenza nei topi bruciati rispetto ai controlli sham-bruciato. Questo effetto è stato invertito da deficit di iNOS. Inaspettatamente, tuttavia, livelli di glucosio nel sangue sono stati depressi nei topi wild-type sia iNOS-carenti dopo l'infortunio di bruciare. Rottura del gene del iNOS migliorato l'effetto di bruciare su IRS-1-mediata insulina segnalazione nel muscolo scheletrico di topi. Questi risultati indicano che iNOS gioca un ruolo significativo nel bruciare la resistenza all'insulina indotta da lesioni muscolo scheletrico.