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Articles by Yashdeep Phanse in JoVE
JoVE Bioengineering
Analyser l'internalisation cellulaire de nanoparticules et de bactéries multi-spectrale par cytométrie de flux d'imagerie
1Department of Veterinary Microbiology and Preventive Medicine, Iowa State University, 2Amnis Corporation, 3Department of Chemical and Biological Engineering, Iowa State University
Dans cet article, nous décrivons une méthode utilisant multi-spectrale cytométrie de flux d'imagerie pour quantifier l'internalisation des nanoparticules ou des bactéries polyanhydride par des cellules RAW 264.7.
Other articles by Yashdeep Phanse on PubMed
Chimie Des Polymères Influence Monocytaire Absorption Des Nanosphères De Polyanhydride
Pour illustrer ce copolymère polyanhydride chimie affecte l'absorption et le compartimentage intracellulaire des nanosphères de cellules monocytaire humaines THP-1.
Microparticules POLYANHYDRIDE Améliorent L'activation Et La Présentation Des Antigènes Des Cellules Dendritiques
La présente étude visait à évaluer l'activité adjuvante de microparticules de polyanhydride établis en l'absence d'autres stabilisateurs, excipients ou immunomodulateurs. Microparticules composé de différents rapports de soit bis(p-carboxyphenoxy) 1, 6 hexane (CPH) et l'acide sébacique ou 1,8-bis(p-carboxyphenoxy)-3, 6-dioxaoctane et CPH ont été ajoutés à des cultures in vitro de la moelle osseuse des cellules dendritiques (CD). Microparticules ont été efficacement et rapidement phagocytés par les contrôleurs de domaine en l'absence de l'opsonisation et sans centrifugation ou agitation. Moins de 2 h, les particules intériorisées ont été rapidement localisés dans un compartiment de phagolysosomal acide. 48 H, seulement une faible réduction des microparticules de taille a été observée dans le compartiment de phagolysosomal, indiquant l'érosion minime particule conforme étant localisées à l'intérieur une stabilité de particules favorisant microenvironnement intracellulaire. POLYANHYDRIDE microparticules augmenté DC expression du complexe majeur d'histocompatibilité classe II à la surface, les molécules de costimulation CD86 et CD40 et la lectine de type C CIRE (murin DC-SIGN ; CD209). En outre, stimulation de microparticules de DCs également amélioré la sécrétion des cytokines IL - 12 p 40 et IL-6, un phénomène constaté à dépendre de la chimie des polymères. DCs cultivées avec des microparticules de polyanhydride et l'ovalbumine induite par polymère chimie-dépendante antigène-spécifiques prolifération des OT tant OT-II de CD4 + et CD8-j'ai T cellules. Ces données indiquent que les particules polyanhydride peuvent être adaptés pour tirer parti de la plasticité potentielle de la réponse immunitaire, ce qui entraîne la capacité d'induire une protection immunitaire contre de nombreux types d'agents pathogènes.
Nanoparticules De Mannose Fonctionnalisés « Comme Agent Pathogène » Polyanhydride Ciblent Les Récepteurs De Lectine De Type C Sur Les Cellules Dendritiques
Ciblage des récepteurs de reconnaissance du pathogène sur les cellules dendritiques (CD) offre l'avantage de déclencher des voies de signalisation spécifiques pour induire une réponse immunitaire adaptée et robuste. Dans ce travail, nous décrivons une nouvelle approche de prestation ciblée de l'antigène en décorant la surface des nanoparticules de polyanhydride avec des glucides spécifiques pour fournir les propriétés « comme agent pathogène » qui assurent les nanoparticules livrer à des récepteurs de lectine de type C sur les contrôleurs de domaine. La surface des nanoparticules polyanhydride est fonctionnalisée par liaison covalente des résidus dimannose et le lactose, à l'aide d'un acide carboxylique aminé-réaction de couplage. Co-culture de nanoparticules fonctionnalisés avec des dérivés de la moelle osseuse DCs a significativement augmenté expression superficielle de cellules de MHC II, les molécules de costimulation lymphocytes T CD86 et CD40, le récepteur de lectine de type C CIRE et le récepteur du mannose CD206 sur les nanoparticules une. Nanoparticules fonctionnalisés tant une ont été efficacement intériorisées par les contrôleurs de domaine, indiquant que l'internalisation des nanoparticules fonctionnalisés était nécessaire mais non suffisante pour activer DCs. bloquant le mannose et récepteurs de CIRE avant l'addition de nanoparticules fonctionnalisés à la culture inhibent l'expression en surface accrue de MHC II, CD40 et CD86. Ensemble, ces données indiquent que l'engagement de la CIRE et le récepteur du mannose est des principaux mécanismes par lesquels les nanoparticules fonctionnalisés activent DCs. Ces études fournissent des renseignements précieux dans la conception rationnelle de plates-formes nanovaccine ciblées à induire des réponses immunitaires robustes et à améliorer l'efficacité du vaccin.
Conception Rationnelle Du Pathogène Imitant Des Matériaux D'amphiphiles Comme Nanoadjuvants
Une occasion existe aujourd'hui pour la recherche transversale utilisant les progrès en science des matériaux, immunologie, pathogénie microbienne et analyse computationnelle efficacement concevoir la prochaine génération de vaccins et des adjuvants. Cette étude intègre ces avancées dans une approche bottom-up pour la conception moléculaire des nanoadjuvants capables d'imiter la réponse immunitaire induite par une infection naturelle, mais sans les effets secondaires toxiques. Polyanhydrides amphiphiles biodégradables possèdent la capacité unique d'imiter les agents pathogènes et pathogènes associés profils moléculaires en ce qui concerne la persistance au sein et en activant des cellules immunitaires, respectivement. Les propriétés moléculaires responsables pour les capacités imitant pathogène de ces matériaux ont été identifiées. La valeur de l'utilisation de polyanhydride nanovaccines a été démontrée par l'induction d'une protection longue durée contre un défi mortel de Yersinia pestis, suivi d'une seule administration dix mois plus tôt. Cette approche a le potentiel alléchant pour catalyser le développement de prochaines génération vaccins contre les maladies causées par émergentes et agents pathogènes.
