飞行攀岩测定：在德罗索菲拉梅拉诺加斯特测试一般运动的方法

Overview

此视频描述了一种简单的方法来量化飞行运动，并显示执行的攀爬测定。 爬蝇测定是一种依赖于负地球塔xis反应的运动功能的一般测试。

Protocol

本协议摘自Gevedon等人的摘录，在Vivo 前瞻基因屏幕上识别新颖的神经保护基因在德罗索菲拉梅拉诺加斯特 ，J.Vis.Exp.（2019年）。

1. 攀岩分析（改编自阿里等人，J.维斯.Exp. （2011））

1. 验证攀岩检测。在这项研究中，使用Elav^C155+ UAS-Tau^R406W（表现出较低的爬坡通过率）和Elav^C155+ UAS-GFP（控制）和Elav^C155+ UAS-mCherry（控制）苍蝇，根据阿里等人先前描述的方法测试攀爬检测。
2. 将苍蝇翻转到测试室，一次一条线（不要使用 CO₂麻醉），并允许它们恢复 5 分钟。如果测试是在不同的日子里进行的，则在一天的同一时间进行检测。在这项研究中，所有攀岩检测都在下午进行，以控制昼夜运动的影响。
   注释测试时避免将苍蝇暴露在阳光直射下;这将干扰他们攀登的能力。
3. 强行将腔室（标记侧向下）敲击到放置在固体表面上的鼠标垫上 3 次，以便所有苍蝇在底部开始检测。观察10s期间的飞行运动。
4. 记录在此时间内到达或通过 5 厘米线的苍蝇数量，以及测试的苍蝇总数。重复协议，在每次试用之间等待 1 分钟，每行至少重复 3 次试用。
   注释在本研究中，每只小瓶含有2至19只苍蝇进行初步筛选（雄性苍蝇），6至21只小瓶含有6至21只苍蝇，用于交叉雌性线的突变缺陷分析。

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
VWR® Drosophila Vial; Narrow	VWR	75813-160
VWR® General-Purpose Laboratory Labeling Tape	VWR	89097-912
Standard mouse pad
Stereoscope	Motic		Model SMZ-168
Drosophila Incubator	VWR	89510-750
R software package