HIV / AIDS Kapsamlı ve Maliyet Etkin Laboratuvar Kontrolü: Afrikalı bir Rol Modeli

Summary

HIV / AIDS tedavisi için anti-retroviral tedavi Güney Afrika'da büyük bir ölçekte izlenir. Flow sitometri, hematoloji (CD45), immünoloji (CD4) ve CD38 tahlil bağlantılı viral yük için birleştirilmiştir. NHLS-SA laboratuarları, Johannesburg kaydedildi, kaynak sınırlı teşhis için rol modelleri olarak hizmet veren bu modern yöntemleri, artan yerel iç kalite kontrolü ile maliyet-etkin.

Abstract

- Biz, ekonomik büyük ölçekli tanı testi bir Güney Afrika rol modeli temsil apt bir laboratuvar hizmeti tarafından anti-retroviral tedavi (ART) yardım ile ilgili video sunmak. Ucuz SANAT düşük gelirli ülkelerde HIV seropozitif hastaların hayatta kalma umutları dönüştürdü ama ART ve ne pahasına olursa olsun laboratuar izlenmesi için bir ihtiyaç olup olmadığını şüpheler vardır durumlarda patoloji hizmetlerinin genel kalitesini hala çok düşük. Uygun bir yanıt, daha iyi bir koordinasyon ve Batı ülkelerinde görülen daha sıkı iç kalite değerlendirmesi ile ekonomik ses hizmetleri kurmak için. Witwatersrand Üniversitesi, Johannesburg, Güney Afrika, Ulusal Sağlık Laboratuvar Hizmetleri (NHLS SA) yerde fotoğraflanmış bu video, 2-renkli orijinal CD4-CD45 PanLeucoGating stratejisi (PLG) genişleyen bu koordineli bir düzeni sağlar. Böylece video sunumu altı modül tek bir tüp içinde, hematolojik, immunolojik ve viroloji ilgili testler birleştirmek için 4 renkli akım sitometri testinin basitliği ortaya. Bu video modülleri şunlardır: (i) set-up araçların, (ii) numune hazırlama, (iii) mutlak sayıları ve boncuk sayısı oranı ile her bir örnek için izleme kalitesi test; beyaz hücre için (iv) heamatological CD45 testi sayımı ve diferansiyel, (v) CD4 sayıları, ve (vi) CD8 aktivasyon + CD38 gösterge ile ölçülen T hücrelerinin, viral yük ile ilgili parametre. Potansiyel maliyet tasarrufu ile dikkat çekicidir. Bu düzenleme, bir NHLS-SA ağ içinde diğer laboratuarlara teknoloji transferi ile de, Batı laboratuarlarda uygulanan bu daha sıkı kalite kontrol ile günde 800-1000 testleri yerine fizibilite için bir örnektir. Uzman danışmanlar, laboratuar, modern tıp teknolojisi tanıtan hakkında karar verme görevi taşıyan yöneticiler ve politika yapıcılar, sık sık bir konumda iş yükünün büyük yüklerin büyük bölgesel laboratuarlarda gerçekleştirilen son teknik detayları görmek için değildir. Dolayısıyla bu video bu yeni gelişmelerin ayrıntıları gösterir.

Protocol

Giriş

Biyomedikal alanında modern bilimsel çalışmalar, bulaşıcı hastalıklar için daha etkili bir teşhis konulması gibi pratik yararları yol açar. Yüksek kaliteli ve hızlı teşhis global seyahat ve ¹ dünyanın en fakir bölgeler viral ve bakteriyel enfeksiyonlar mevcut yıkıcı etkisi nedeniyle yayılmış hastalık tehlikesi nedeniyle ihtiyaç vardır.

Anti-HIV tedavisi ile HIV pozitif hastaların kaynak yoksul ülkelerde tedavi (ART) başarıyla ^2,3 girmiştir. ART protokolleri henüz HIV + bireyler için serolojik testler (i) üzerine dayalı olan, (ii) genetik ilaç rejimleri günde bir kez kombinasyonları 'ilk-hat' ART olarak kullanılan ve (iii) CD4 ve / veya viral yük testleri SANAT başlamak için karar vermek. Protokoller kapsamında ART olarak değişen, ancak şimdi daha yüksek CD4 önceki SANAT başlatmak için daha rahat kurallarına genişletilmiş olabilir ² sayar. Önemlisi, yüksek CD4 + hücre / ul kan bile mevcut olmamasına rağmen HIV aşısı ^{4, 5,} HIV'in yayılmasını yavaşlatabilir SANAT alırsınız HIV + hasta sayısı artmaktadır.

Bu nedenle HIV enfeksiyonu, her zamankinden daha fazla organize ilaç gerektiren, kurtulanların giderek daha çok sayıda kronik bir hastalık haline gelmeye adaydır ama Afrika olabilir laboratuvar tıp yoksul bir devletin, ^hala etkin sağlık 6 bir bariyer kalır. Orada, kısa vadeli hibe sağlanması sürdürülebilir ^çözümler 7-9 olmadığını vurgulamak için sesleri, ve mevcut ölçekli Batılı ülkeler tarafından verilen HIV ile ilgili hibe sonsuza ^dek 8,9 devam edemiyor . 2008 yılında 15,6 milyar dolar düşük ve orta gelirli ülkelerde AIDS programlarının geçti ve bu yaklaşık% 50, Kuzey Amerika, kaynaklar dahil olmak üzere, harici. Hesaplanan eğilimler bu harcama salgın hala 2031 yılında bizimle olacak, mevcut genel ^yaklaşım 9 bir değişiklik olmadığı sürece, 2-3 kat daha yüksek seviyede artış, ve buna olduğunu göstermektedir .

Böylece, Afrika ülkeleri, HIV önleme ve akıllıca ^maliyet tasarrufu 9 katkıda bulunmalıdır. Burada, rutin işleri için en son 'rol modelleri' yaratıcı kurulmuş ve kaynak yoksul ülkelerin (örneğin Afrika veya Hindistan) tanıtıldı olacağını düşündürmektedir. Bunlar, bilim adamları, tamamen mevcut uluslararası destekten yararlanmak için öğrenecek ve daha sonra her gün teknolojisini geliştirmek için daha küresel gelişimine katkıda bulunarak, becerilerini kullanmak için dünyanın alanlardır.

Batı tıbbında büyük akademik merkezlerde ve hastanelerde teşhis faaliyetleri sık sık "departmentalized", yani ayrı bir "ilgi bölgeleri" Haematococcus, Viro, retroviro, bacterio, Sero-parçalanma önde gelen farklı disiplinlerden var immüno-ve bulaşıcı bir hastalık laboratuvar multidisipliner tanı testleri en az bir dizi kullanarak bir birleştirici bir yaklaşım yerine yapma sitolojik laboratuarlar. Buna ek olarak, tanı testleri de çok karmaşık ve masraflı olabilir. Açıkçası, bu tür hizmetlerin, daha iyi koordine edilmiş ancak bu birleştirici çabaları tamamen batı yönden gelmek olası değildir olması gerekir. Sonuç olarak, bu tür, Güney Afrika'nın Johannesburg Witwatersrand Üniversitesi ile işbirliği içerisinde Ulusal Sağlık Laboratuvar Hizmetleri (NHLS SA) gibi önde gelen laboratuarları ve enstitüleri, daha da geliştirmek, değiştirmek, tekrar odaklanmak ve geliştirmek için ekstra bir görev ile karşı karşıya modern teknolojiye dayalı maliyet-etkin bir teşhis.

Geçerli video HIV enfeksiyonlu hastalarda anti-retroviral tedavi (ART) izlemek için akış sitometrik yöntemler açıklanmaktadır. Bu teknolojinin bir kombinasyonu için altı modül adım bilge sunulmaktadır ilgili Haematococcus immüno-ve ¹⁰ test tekrarlanabilirliği sağlamak amacıyla gerekli iç kalite kontrol (QC) ile birlikte tek bir tüp virolojik testleri. Burada kullanılan monoklonal antikorlar kullanır bilimsel olarak tam olarak kurulmuş. CD45 reaktif ^12-14 HIV için öncelikli hedefleri olan "yardımcı" T-lenfositler numaralandırmak CD4 ile birlikte ^11-13 beyaz kan hücre sayımı için. Bu aynı tüp CD38 aktivasyon belirteci HIV viral yük (VL) ilgili tahlil ^15-17 olarak CD8 + T hücreleri tespit olduğunu "yapıcı bir hile". Güney Afrika katkıyı vurgulamak amacıyla, bu kavram ve maliyet-etkin pratik kombinasyonları tüm batı teknolojileri önde gelen ^{10,12,13,16,17} dayalı NHLS-Wits işbirlikleri çalışmış olduğunu işaret.

Bu yazı, kombinasyon halinde yürütülen uzun vadeli ART uygulanan hastalarda sağlıklı bir şekilde izlenebilmesi için gerekli olacak. Zaman, maliyet-efficieNCY incelenip, bu koordine akış sitometri teknoloji ^16,18,19 ekonomik olduğunu kanıtlamaktadır. Bu tek tüp Testler batı varyantları üzerinde ve ayrı enstrümanlar ve / veya diğer yöntemleri kullanarak farklı vekil testi olarak yürütülen benzer testler üzerinde maliyet tasarrufu temsil eder. Bu tasarruf tartışmaya dökümü verilir.

Dört renkli akım sitometri tek bir tüp kullanan bu temelde basit bir teknoloji, kabulü için, bir video biçimi teknik adımları göstermek için esastır. Uzman danışmanlar, laboratuar, modern tıp teknolojisi tanıtan hakkında karar verme görevi taşıyan yöneticiler ve politika yapıcılar bir konumda sık sık iş yükü büyük yüklerin büyük bölgesel laboratuarlarda gerçekleştirilen son teknik detayları görmek için değildir. Dolayısıyla bu video Güney Afrika'da her çalışma gün ^10,13,16,17> 1000 klinik örneklerde test etmek için iş akışını optimize etmek için girmiştik yeni gelişmelerin detaylarını gösterir .

Protokol

Flow sitometri

4-renkli akım sitometri testleri yapılmıştır ancak deneyleri de iki paralel boru (aşağıya bakın) 2 renk kullanarak da yapılabilir. Beckman-Coulter XL-MCL, istikrarlı akışkansal ²¹ sitometresinin kullanılır ama aynı teknoloji, aynı zamanda diğer sitometre için geçerli olabilir. Açıklanan teknoloji ~ 800-1100 örnekleri / gün ^10,13 büyük günlük iş yüklerinin üstesinden gelebilir.

Modül 1: araçların kurun

Günlük içi her gün iki kez bakım yapmak temizlik: start-up ve son hasta numunesi tamamlanması. Bu yıkama ve vakum hatları CLENZ (M.Ö. Miami, FL% 5 sodyum hipoklorit) elde içerir. Ayrıca, her biri 30 tüp atlıkarınca CLENZ ve distile su sonunda protein birikmesi en aza indirmek için, sistem üzerinden çalıştırılabilir.

Günlük start-up, vakum ve basınç okuma kontrol edilir. Bu arka plan sayımı (<100 100 sn olaylar) kabul edilebilir olmadığını doğruladı. İlk kan örneği çalıştırdıktan sonra kılıf sıvı bir kısım taşınmasını <% 1 olduğunu kurulmuştur. Sonra lazer hizalama ve floresan duyarlılık FlowCheck ²¹ günlük bir örnek kullanarak izlenir. Ortalama Kanal Numaraları düşük bir varyasyon (yarım tepe CV değerleri <% 2) ile (500 ± 50) uyumlu olduğu görülmektedir. Tazminat haftalık olarak kontrol edilir; FlowSet boncuk ortalama kanal değerleri önceden belirlenmiş hedef ^değerler 22% 1 içinde olup olmadığını görmek için çizilir . Levey-Jennings araziler, ortalama kanal numaraları ve dört Floresan kanalları (FL1-FL4) günlük olarak görüntülenir (HPCV) değerleri değişimi yarısı pik katsayısı görsel hassas onaylamak için. Sonraki iki CD4 düzeyde CD4 sayımları doğruluğunu teyit edilir. PLG-CD4 sırasında testi stabilize kan süreç kontrolleri (IMMUNOTROL) düşük, normal (450-700 CD4 hücre / ml) ve düşük seviyelerde (toplu üzerine bağlı olarak 100-200 CD4 hücreleri / ml; ref 23). Bu Immunotrol değerleri uluslararası BC-IQAP programı ^24, İngiltere NEQAS ²⁵ ve AFREQAS ²⁶ tarafından talep edildiği gibi, <% 5% CV ile ortalama 0.5 SD içinde olması gereklidir . Videoda gösterildiği gibi bu basit organize önlemler ile sağlam bir akış sitometrelerinde CD4 testleri ve aktivasyon belirteci CD38 için kullanılan floresan yoğunluğu ölçümleri için hem mutlak hücre sayımı için gerekli istikrarı korumak için önemlidir. Bu istikrar, son zamanlarda diğer ^sitometre kullanarak 15,27 önceki çalışmalarda ^teyit detay 17 belgelenmiş oldu.

Haftalık bakım sırasında liste modunda veri (LMD) dosyaları ileride başvurmak üzere arşivlenir ve bu arşivlenen malzeme daha sonra sitometrisi sabit disk silinir.

Aylık bakım, reaktif kapları, kılıf, CLENZ ve atık tankları temizleme içerir. Atlıkarınca modu örnek kafa, tüm filtreleri de kaldırılır ve yıkanır temizlenir. Bu temizlik de hazırlık istasyonları TQPrep ve PrepPlus2 (M.Ö., FL) uzatılır. Manuel hazırlanması için kullanılan pipetler en az her 3 ayda bir ev olarak doğrulanmış ancak pipet pipetleme yanlışlık şüphesi varsa derhal düzeltici eylem için hizmet dışı alınır. Beckman Coulter, SA tarafından altı aylık bakım planlanıyor.

Modül 2: numunelerin hazırlanması

CD45/CD4 iki renkli PanLeucogated protokolü ⁵ için Beckman Coulter FlowCARE kiti ²⁸ lyse-no-yıkama işlemi (IMMUNOPREP, Beckman Coulter, FL) kullanılmaktadır. Ve CD4-fikoeritrin (PE; turuncu); Bu kit, CD45-floresein izotiyosiyanat (yeşil FITC) içerir. Flow-Count boncuk ²⁹ toplu olarak satın alınan ve numbe olarak bilinen özel bir kullanıcı dostu bir rol oynamaya eklenirbilinen bir hacmi boncuk rs ³⁰ örnek içine spot pipetlenir. Bu kan hacmi teslim etmek için kullanılan olarak aynı pipetleme ile yapılır. Böylece beklenen aralık Boncuk Sayısı Oranı (BCR) verilen örnek pipetleme tam olarak, aşağıda Modül 3 açıklandığı gibi yapılır gösterir. Önemlisi, burada 'ileri pipetleme' olarak adlandırılan basit pipetleme yöntem, en iyi işleri, boncuk ve kan hacimleri aynı pipet ve ucu ile özdeş işlenmesi 30 ile teslim edilir. Biz ileri pipetleme operatörleri açısından kabul edilebilir tolerans sınırları ve tekrarlanabilirlik içinde co-verimli değişimi (% ^CV) 10,31,32 ile ölçülen dağıtım tekrarladı pipetleme hedeflere ulaşmada, laboratuarlar, ikisi arasında en iyi genel bütünlüğü vermiştir bulundu. ³² yerel kongrelerde sunulan bu yöntem, Güney Afrika Ulusal Akreditasyon Programı (SANAS, www.SANAS.co.za) kurallar altında kullanım için onaylanmıştır. Bu BCR boncuk kullanımı en sık BDS Trucount hazırlıkları olarak liyofilize ürün boncuk boncuk bilinen numaraları içeren kullanılır yöntemleri sayma diğer hacimsel farklı. Bu hazırlıklar Akış Sayısı Oranı (FCR) yöntemi ^20,31 akış araçların akışkansal istikrarı belgelemek için mükemmel. Bununla birlikte, burada mutlak son derece hassas olan bu tüp içine kan hacmi sunmak için çok önemlidir çünkü hazır boncuk içeren tüpler teknoloji kullanımı daha karmaşık hale getirir. Bu genellikle sadece bu amaç için "ters-pipetleme" teknolojisi uygulanan eğitim kabul edilebilir olduğu kabul edilmektedir. Bizim BCR yöntem, bu nedenle, daha ucuz, daha bilgilendirici, kolay ve kolay öğrenme gibi video gösterilen - Biz de benzer ^alternatif yöntemleri 10,31,32 kıyasla bulmak ileri pipetleme kullanan operatörler, daha az muhtemel olduğunu pipet ile iç mekanizması hasar ve uzak yerlerde zordur yeniden kalibrasyonu için ihtiyaç ters pipetleme yol açabilir örnek aspirat. Bizim BCR yöntemi de, küçük-orta ölçekli laboratuvarlarda (Liste 1) otomatik pipetleme sistemleri için ihtiyaç ortadan kaldırır.

Kan örnekleri, Sınıf II biohazard dolapları her zaman işlenir. Çekimler sırasında yoğun gürültü önlemek için, gösterilen video bu dolaplar dışında güvenli bir malzeme ile yeniden yürürlüğe girmesi. Sitometrelerinde PLG CD4 satın alma protokolü, bir süre, belirli bir süre durdurmak ya da düşük CD4 sayımları ile numuneler üzerinde doğruluğunu geliştirmek için 5000 lenfosit olaylar kazanmak için devam etmek için izin verir.

Modül 3: Boncuk Sayısı Oranı (BCR)

Sistemi ya da her bir kontrol örneği izlenerek boncuk sayısı oranları (BCR) boncuk olaylar / ^saniye 10,13,30,32,33 formül kullanılarak hesaplanır . Ortalama, SD ve% CV değerleri BCR aykırı ³⁰ tanımlamak için bir dizi komplo bir tablo oluşturmak için kullanılır. Bu numuneler elle ya da otomatik PrepPlus2 pipetleme aracı ¹⁰ ile pipetlenir hem uygulanan numune hazırlama doğrulaması (SPV) olarak anılan üç pipetleme, işleme ve analiz sistemleri, optimal operasyon onaylayın.

BCR sonuçları, satın alma sırasında doğrudan monitör üzerinde gerçek zamanlı olarak izlenebilir. BC sitometrelerinde, ortalama BCR değeri 80 ± 5 olaylar / sn. Biz anormal BCR-s hastanın sonuçları yayınlanmadan önce tespit ve yeniden çalıştırmak olduğunu göstermektedir. Karar ağacı algoritması (ayrıca ref.10 bakınız) Şekil 1'de gösterilmiştir.

Pipetleme eğilimleri, desenleri ve ani değişimler ¹⁰ algılamak için boyuna hassas doğrulaması (LPV) sırasında takip Enstrüman arızalar BCR dalgalanmalar gösterilir. Sıvıları hassas doğrulama (FPV) boncuk tek bir seyreltme, potansiyel söyleyemeyiz.Eğer ^bir enstrüman 10 akışkan istikrarsızlık işaretleri onaylamak için seri satın alma için 10 tüp içine aliquoted içi prosedürü isteğe bağlıdır.

Modül 4: CD45

Çalışmalarımız rutin mutlak sayımları için aylık kalibre tam kan sayımı analizörü LH-750 (Beckman Coulter), günlük akış sitometrelerinde karşılaştırıldığında karşı beyaz hücre sayımı (WCC) için bir referans olarak kullanılır. Akış sitometrelerinde CD45 oluşturulan WCC-üç düzeyde stabilize Beckman Coulter 5C tam kan hücre kontrolleri ile karşılaştırıldığında tarafından günlük olarak doğrulanır. Akış CD45 sayımı ve tam kan sayımı analizörleri arasındaki WCC anlaşma kabul edilebilir sınırlar <5% ^10. Kaynak kısıtlamaları böyle bir akış sitometresi gibi tek bir araç, daha sonra hizmet daha şiddetli olduğunu gösterir, klinik olarak uygun WCC da dahil olmak üzere CD4 sayıları sağlamak için yeterli gibi görünüyor.

Beyaz cell diferansiyel sayımı özellikle monosit sayıları değerlendirirken, farklılık çeşitli hematolojik analizörleri yapılmaktadır. Diferansiyel CD45 ifade desen diferansiyel WCC ^{11,12, 34} klasik bir akış teknoloji kullanımıdır. Akış sitometresinde elde edilen CD45 WCC ve diferansiyel sayıları, doğru, hassas ve sağlam olduğu kanıtlanmış olduğundan, bu rutin PLG CD4 test yöntemi içine dahil ve ayrıca hiçbir ekstra ücret ödemeden klinisyenler için hazır olabilir.

Anormal CD45 desen PLG CD4 protokol CD45/side dağılım araziler üzerinde dikkat ve takip lekeli bir kan film üzerinde daha fazla klinik araştırma istemi. Bu yöntem enfeksiyon (bakteriyel ve viral), lösemi ve lenfoma, HIV-negatif ve HIV + hastalar ^{34, 35} hem de algılar. Rutin laboratuar sırasında takip HIV + hastalarda tam kan sayımı sık hematoloji laboratuar talep değildir. Samimiyetle CD4 sayımları için gönderilen numunelerde gözlenen Bu nedenle anormal CD45 desen tanı. Doğru mutlak CD4 sayısı hala kan ³⁵ lösemi veya lenfoma bulguları olan hastalarda bile, yapılan bu ek bir avantaj.

Akış CD45 iyi hematoloji standartlaştırmak için uygundur. Hematolojik aletleri birbirinden önemli ölçüde farklıdır. Biz hematolojik analizörleri ^10,36 karşılaştırın ve standartlaştırmak için WBC diferansiyel için CD45 tabanlı akış sitometrik kalite kontrol tanıtan öneririz.

Modül 5: CD4

Beckman Coulter XL yazılımı tanıtıldı PLG CD4 Protokolü sekiz nokta araziler oluşur. Bu 4 CD4 sayımı ve 4 kalitesi izleme ^12,13 belirlemek için kullanılır. Bunlar arasında, Şekil 2'de gösterilen iki nokta araziler önemlidir. Tüm beyaz hücreleri, döküntü, kırmızı kan hücre / hayaletler ve trombositler göz ardı edilirken, CD45 ve yan dağılım (bölgeye nokta arsa 2) kullanarak tespit edilir. CD45 + olaylar daha sonra nokta-arsa 3 aktarılır CD4 + lenfositlerin parlak CD4 ifade ve düşük yan dağılım (bölge C) ile tanımlanır. Mutlak CD4 + lenfosit sayısı bölgesi C ve WCC olayların sayısı (Akış Sayısı kalibrasyon bölge F) hesaplanır. Bölge B nokta-arsa 2 CD4 lenfositlerin% değerleri elde edilir. Güçlü CD4 + T lenfositleri ve zayıf CD4 + monositler, ekstra bir CD3 T hücre spesifik antikor reaktif kokteyl (ref.13 gözden) kullanmak için bir gerek kalmadan CD4-floresan ve dağılım özellikleri ayrımcılığa maruz kalıyorlar.

Modül 6: CD8/CD38

CD8-CD38 boyama CD45-FITC/CD4-PE/CD8-ECD/CD38-PC5 kullanarak 4-rengine boyanmış bir parçasıdır. CD4/CD45 yukarıdaki gibi aynı (Akış Bakım PLG-CD4) ve iki ekstra reaktifler CD8-ECD/CD38-PC5 ¹⁷ sözlerine ekledi . Sitometresinin sadece iki renk çalışıyorsa, tekrar lyse-no-yıkama prosedürü (IMMUNOPREP, Beckman Coulter, FL) kullanılarak ekstra bir tüp, CD8-FITC/CD38-PE iki renk boyama gerçekleştirmek için eklenir. CD4 benzer bir yolluk strateji CD8-ECD karşı tarafında dağılım (Şekil 3) ile CD8 + T hücreleri tanımlamak için kullanılır. CD8 + lenfositlerin CD38 ifade floresan yoğunluğu (MFI) vs hücre sayımı ^16,17 demek, tek bir parametre histogramı CD38-PC5 olarak çizilir . CD38 MFI değerleri aynı hastada her ziyaret için sırayla çizilir. Ilk ziyaretiniz tedavi öncesinde, aynı kişinin CD38 MFI diğer her ^ziyaret 16 karşılaştırıldığında 'baseline' MFI değeri .

Modül 1 'de açıklandığı gibi Kontrolleri ve araç istikrar lazer hizalama ve gerilim kararlılığı izlemek için kontrol edin Akış günlük veri toplama dayanmaktadır. Akış Set dört floresan kanalları (yukarıya bakınız) için renk tazminat ayarlar. Immunotrol 'olumsuz' proses kontrol örneği. 'Olumlu' kontrolleri normal kan hücre başına 9 x 10 ³ CD38 moleküllerinin ifade monositler ve bilinen bir HIV + örnek tedavi edilmeyen ^17.

Güney Afrika Ulusal Sağlık Laboratuvar Hizmetleri (SA-NHLS) ağ laboratuvarlar benimsemiştir

standart işletim prosedürleri ve eğitim materyalleri içeren merkezi bir veritabanı ile 70 ^{laboratuvarlar, 13,} 33 üzerinden standardize edilmiş kalite kontrol yöntemleri. Laboratuvarlar ağ teknolojisi ^32,33 pipetleme inceleme de dahil olmak üzere tartışmalar, ileri eğitim ve düzenli seçmelere yardımcı oluyor. Kalite değerlendirme programı aylık olarak takip edilmektedir. Bu şekilde, kalite yönetimi bölgesel intikal ama yüksek standartlara SA-NHLS QA Bölümü ^{13, 26} katkısı ile korunur.

Liste 1: HIV hastalığı koordineli sitometri ile Potansiyel maliyet tasarrufu.

1. Aşinalık ve hizmet sözleşmesi ile tek bir enstrüman yerine ap kullanımı,çok sayıda hematolojik, immünolojik ve virolojik aletleri dolaşan
2. ART yanıt tahmin etmek için ekstra maliyetler olmadan ve tek bir tüp içinde ve hem de WCC, WBC diferansiyel sayıları CD4 test ve CD38MFI izleme de dahil olmak üzere farklı yerlerden numune göndermeden testleri, performans
3. CD38 MFI raporlama ile ART yanıt anında raporlama, geleneksel HIV VL raporlama göre dönüş süreleri (gerçek zamanlı) önemli ölçüde iyileştirilmesi
4. Aynı raporlama formları kombine değerlendirme sonuçları netlik ve klinik kullanımı
5. Otomatik pipetleme enstrümanlar için basit bir yöntem olarak "ileri-pipetleme" BCR tarafından kullanılan ve örnekleri takip edilmektedir olumsuzlanan olabilir
6. Işlemi sırasında, numune yanlış kullanım tespit ve sonuçlar yetkilidir önce sorunlu test sonuçları giderilene
7. Ciddi bir çarpışma öncesinde erken rezervasyon önde gelen araç arıza Proaktif önleyici yönetim
8. Rutin hizmet faaliyeti sırasında lösemi / lenfoma umulmadık durumlarda Teşhis
9. Lösemi fenotipleme ve izleme için benzer bir akış teknolojisi Uzatma
10. CD38, HIV VL tüm hastaların test ve değerlendirme için DBS göndererek tasarruf maliyetleri kurumuş kan lekeleri (DBS), depolama ile test Koordinasyon var klinik veya CD38 endikasyonları bunu yapmak için sadece
11. Tüberküloz testleri değiştirmek Benzer akış teknolojisi interferon-γ ELISPOT yöntemi
12. "Nokta-bakım" CD4 testleri gerçekleştirmek Çevre laboratuarları için kalite kontrolü
13. CD3 bu antikorları gibi "istenmeyen" reaktiflerin maliyetlerinden tasarruf ve alt kümesidir belirteçleri (ama yerine CD38 satın alma)
14. BCR test için ucuz boncuk toplu alım (pahalı öncesi Pipetlenen sayma tüpler yerine satın alma)
15. Ticari şirketler, avantajlı toplu fiyatlar için bir ağ, ortak müzakereleri

Şekil 1 bir karar, bir örnek test edildiğinde ağaç / algoritması kullanılan boncuk sayısı oranı (BCR) bir kenar sonucunu gösterir. Ana görevi aralıklı hacimsel başarısızlık karşısında hata pipetleme dışlamak için. Diyagramı hataların olası nedenleri gösterir. Aynı zamanda, protokol histogramlar ve ^{istatistikleri} 10 etkilenir bu da gösterilir .

Şekil 2 CD45-FITC (yeşil, x-ekseni) içermektedir PLG CD4 protokolü bir örnek vs yana saçılım (karmaşıklığı, y-ekseni) ve CD4-PE (turuncu, X-ekseni) karşı tarafında dağılım ( karmaşıklığı, y-ekseni). Kapısı 'A' lenfositler 'B' seçilen kapısı ile toplam beyaz hücre popülasyonu. Kapı 'A', CD4 + lenfositlerin kapı 'C' tanımlamak için sağdaki ikinci şemasına aktarılır.

Şekil 3 CD45/CD4 panleucogating testinin kombinasyonu; CD8/CD38 assay (diyagramlar '4 've '6) (diyagramları '2' ve '3 'Bakınız: Şekil 2) . Toplam lökosit (kapı 'A') diyagramı '4 transfer olduğunda '(x'ekseni) ve yan dağılım, burada CD8 + lenfositlerin CD8-ECD temelinde kapılı' (Y eksenli; gösterildiği gibi kapı 'D'). Sonra CD8 + hücreler tek bir parametre şemada CD38-PC5 boyanma yoğunluğu görselleştirmek için diyagram '6 'transfer. Bu parametre diyagramı '6 'G' olarak gösterilir. Ortalama floresan CD38-PC5 yoğunluğu (MFI) kaydedilir. ART bu değeri yavaş yavaş ^16,17 azalır.

Discussion

Son yıllarda hayır odaklı ve hibe tahsis programlar yüksek HIV yükü ile dünya kaynak sınırlı alanlarda mükemmel bazı klinik uygulamaların kurulmasına yardımcı olmuştur. SANAT programları ölümlerini azaltmada başarılı oldu ve şimdi yüksek CD4 başlatılan ediliyor ^2,3 sayar. HIV özel bir aşı olmamasına rağmen, zaten bu yeni önlemler, ^HIV enfeksiyonunun 4,5 yayılmasını azalacak dair göstergeler vardır. Bizim Video biz belge ART hastaların izlenmesi, bu teknikler daha odaklı ve batı laboratuarları (Liste 1) yapılan rutin uygulamada gözlenen daha fazla maliyet-etkin hale olabilir.

Afrika güdümlü Böyle bir yaklaşım, ART ile tedavi edilen HIV enfeksiyonu, kronik bir hastalık haline geliyor, bir defada, laboratuvar hizmetlerinin iyileştirilmesi desteklemek için gerekli olabilir. Böyle bir izleme ART ART ¹⁶ başlangıç ​​hakkında bir karar yardımcı olmak üzere keyfi gruba hasta yerleştirmek için CD4 sayımı gerçekleştirmek için kesin CD4 sayımı ve viral yük, ilgili teknoloji, daha zorlu bir görev gerektirir. Bu teşhis yardımı ile, yani CD8/CD38 testi kullanılarak,> SANAT ^16,19 hastaların% 60 VL-izleme ve maliyetlerini azaltmak için mümkün. VL ribaund ve / veya hasta uyumu eksikliği erken belirtileri ilaç almak için büyük olasılıkla CD4 sayısı ^37, CD8/CD38 testi ^16,17 ve vurgulamak için de önemlidir.

Koordineli bir maliyet-etkin bir merkezi bir unsuru, operasyonun teknik ve tıbbi yönleri ile tanıdık uzman ve akademik danışmanlar tarafından desteklenen büyük ölçekli ulusal ya da bölgesel bir ağ durumu. Bu küçük merkezler için cesaret, eğitim ve kalite değerlendirmesi sağlar ve bu da 'nokta-bakım hizmetleri içerebilir Güney Afrika NHLS ağ faaliyetleri ve CD4-PLG.net eğitim programları ^{33, 36} olduğunu göstermiştir.

Önemlisi, merkez ve bakım noktası laboratuvarlarının operasyonları tamamlayıcı niteliktedir. Eski bir maliyet-etkili, büyük ölçekli servis operasyonunun yanı sıra periferik ^{laboratuarlar} 33,38 temel / ileri eğitim veren çift bir rol olsa da, ikincisi için uygun olan HIV + hastalarda işe SANAT yayılmasını kontrol etmek için katkı taşra klinikleri de dahil olmak üzere daha geniş bir tabanı, ART. Noktası bakım teşhis çok daha pahalı olabilir ve otomatik olarak ³⁸ doğruluğu garanti etmez, çünkü bazı dikkatli gereklidir. Bu nedenle, iki katmanlı bir sistem korumak için ve iki kol azalmaya izin vermeden iki katmanları arasındaki koordinasyonu kolaylaştırmak için mantıklı.

Sonuç olarak, bulaşıcı hastalıkların klinik yönetimi tanı izleme alanında gerekli bir maliyet tasarrufu, önemli ölçüde ^{geliştirilmiş} kalite 13,39, daha pahalı ve daha iyi koordine modern teknoloji kullanan apt servisleri tarafından sağlanabilir. İyi organize olmuş ulusal (bölgesel) tanı hizmet dikkatli bir ön olmadan daha iyi bir senaryo bu zengin ülkelerden ithal edilen hemen hemen tüm hibe desteği en kısa sürede pahalı ve / veya denenmemiş yöntemleri üzerinde israf edilir ^kaçınarak 6-8 desteklenen olmalıdır davranarak yapıcı bir inceleme. Benzer şekilde, daha esnek bir tasarım, yerel doktorların ve sağlık personelinin tam katılımı ile yapılan klinik terapötik çalışmaların gereksiz yere sık sık ve / veya laboratuvar ^testleri 3 iddialı üzerinde azalmasına yol açacaktır . Bu politika, ART hastaların koordineli bir klinik / laboratuvar değerlendirmesi doğru teşhis sonuçlarının kullanımı ile daha dolgun bir şans daha vermek istiyorum. Bu akıllı teşhis aynı zamanda mevcut tanıdık bir akış sitometrik platformu ⁴⁰ tüberküloz alanlarda ve lösemiler kaynak yoksul ülkelerde ⁸ öncülük olabilir.