Farelerde Heterotopik Kalp Nakli

Summary

Fare heterotopik kalp transplantasyonu modeli ret ve immün yanıt mekanizmaları eğitim için önemli bir yöntem olduğu birçok araştırmacı tarafından kanıtlanmıştır. Ancak, söz konusu teknikleri hala zorlu. Standart teknikler değiştirerek 1000 nakli ile daha fazla başarı elde ettiler.

Abstract

Fare heterotopik kalp transplantasyonu Dr tarafından tanıtılan bu yana yaygın olarak kullanılmaya başlanmıştır. 1973 yılında Corry ve Russell. Şimdi yeni transgenik ve gen knockout farelerde mevcuttur ret ve immün yanıt çalışmak için özellikle değerli ve çok sayıda immünolojik reaktiflerin geliştirilmiştir. Kalp nakli modeli olmasına rağmen teknik olarak daha zor, deri nakli modellere göre daha az sıkı. Biz değiştirilmiş bir teknik geliştirdiler ve 1000 farelerde heterotopik kalp nakli başarılı durumlarda içinde tamamladık. Asendan aorta ve abdominal aorta anastomoz yaparken, iki kalış dikişlerle sonra devam sütür ile anastomoz için aort iki tarafında 11-0 sütür kullanarak, donör Asendan aorta ile alıcı abdominal aorta proksimal ve distal apexes yerleştirilir. Kalış sütür anastomoz kolaylaştırır ve 11-0 kanama ve tromboz önlemek için ideal bir dikiş boyutu.

Pulmoner arter ve inferior vena kava anastomoz yaparken, iki kalış dikişlerle, donör pulmoner arter ile proksimal apeks ve alıcı vena kava distal apeks yapılır. Inferior vena kava ve donör pulmoner arter sol duvarda, proksimal apeks kalın bir düğüm sağ duvar ve inferior vena kava donör pulmoner arter sütür sonra inferior vena kava içinde devam dikişlerle kapatılır. 10-0 sütür ile inferior vena mağara dışında devam dikişlerle kapatılır. Inferior vena kava ve 10-0 sütür bir tarafta anastomoz yapılır çünkü bu yöntemi gerçekleştirmek için kolay kanama ve tromboz önlemek için doğru boyut. Bu makalede, video tamamlamak için teknik ayrıntıları sağlar.

Protocol

Donör hazırlanması ve Kalp Hasat:

1. Fare, bir ameliyat alanında pentobarbital ve yerleştirilen yatar intraperitoneal ile anestezi.
2. Uzun bir orta hat abdominal kesi yapılır. Karın içeriği, abdominal aorta ve inferior vena kava göstermek için sol gazlı bez ile geri çekilir.
3. Heparin (10u/ml) 1 ml heparin için inferior vena kava enjekte edilir.
4. Torakotomi yapılır: kaburga omurganın her iki tarafta bölünmüş ve göğüs ön duvarı, kalp maruz karşı korur kadar.
5. Inferior vena kava, vena kava superior ve azygous ven 6-0 ipek ile bağlandı ve bitişik harfler üstün ayrılır.
6. Asendan aort ve akciğer atardamarı çok distalde mümkün olduğunca ayrılır ve ayrılır.
7. Pulmoner venlerin bağlandı ve bağları distal ayrılır.
8. Kalp, ⁴ C serum fizyolojik ile perfüze .
9. Kalbi buz tuz çözeltisi saklanır.

Alıcı Hazırlık ve Transplantasyon

1. Fare, bir ameliyat alanında pentobarbital ve yerleştirilen yatar intraperitoneal ile anestezi.
2. Uzun bir orta hat abdominal kesi yapılır. Karın içeriği, abdominal aorta ve inferior vena kava ortaya çıkarmak için gazlı bez ile karın dışında geri çekilir.
3. , Abdominal aorta ve inferior vena kava dalları maruz kalan ve 10-0 sütür ile bağlandı.
4. Proksimal ve distal bitişik harfler sırasıyla aorta ve inferior vena kava çevresinde yerleştirilir.
5. Venotomi, 30 gauge iğne ile alıcı inferior vena kava yapılır. Açılış sonra donör akciğer aort mikro-makas ile eşit bir uzunluk kadar uzatılmıştır.
6. Aortotomy, 30 gauge iğne ile alıcı abdominal aorta yapılır.
7. Açılan abdominal aorta ve inferior vena kava, tuzlu su çözeltisi ile sulanan.
8. Donör kalp alıcının karnın sol tarafına yerleştirilir ve gazlı bez ile kaplıdır.
9. Kalış dikişler donör Asendan aorta ile alıcı abdominal aorta proksimal ve distal apexes yerleştirilir.
10. Alıcının abdominal aorta ve vericinin Asendan aorta sağ tarafında anastomoz devam sütür ile tamamlandı.
11. İki kalış dikişler, donör pulmoner arter ve alıcının inferior vena kava anastomozu için donör pulmoner arter ile proksimal apeks ve alıcının vena kava distal apeks ilk yapılır.
12. Inferior vena kava ve donör pulmoner arter sol duvarda inferior vena kava içinde devam dikişlerle kapatılır.
13. Proksimal apeks kalış sütür ile tek bir düğüm sonra, inferior vena kava ve vericinin pulmoner arter sağ duvar vena mağaranın dışında devam dikişlerle kapatılır.
14. Donör kalbi alıcının karın sağ tarafında açıktır. Alıcının abdominal aorta ve donör Asendan aorta anastomoz sağ duvar devam sütür ile kapatılır.
15. Anastomoz yapıldıktan sonra, distal ligatür anastomoz kanama kontrol etmek için kaldırılır.
16. Anastomoz hiçbir kanama çok az varsa, proksimal ligatür kaldırılır. Vericinin kalbi hemen kan ile dolar, kalp kırmızı renk olur ve tekrar atmaya başlar.
17. Bağırsaklar karın, 6-0 sürekli dikişlerle kapatılır iade edilir.
18. Alıcı fare sıcak bir alan üzerine yerleştirilir. Bir saat sonra alıcı kurtarır.

Discussion

Sonuçlar

Biz farelerde başarıyla 1000'den fazla vaka heterotopik kalp transplantasyonu yapılan ve yabani türü, transgenik ve gen knockout farelerde de dahil olmak üzere, farelerde farklı suşlar% 90 başarı oranı üzerinden sağlanır.

Tartışma

Dr bu yana. Corry ve Russell 1973 yılında farelerde heterotopik kalp nakli tanıttı, bu model özellikle bağışıklık ret cevabı okuyan ve yeni immünsupresif stratejileri geliştirmek için değerli olduğu kanıtlanmıştır. Ortaya çıkması, çok sayıda transgenik ve gen knockout farelerde ret / tolerans mekanizmaları incelemek için yeni yollar sağladı, çünkü bu model şimdi daha geniş kullanılabilir. Vaskülarize kalp nakli modeli klinik solid organ nakli için daha uygun olabilir. Neonatal kalplerin deri nakli veya subkutan nakli teknik basit olmasına rağmen, bu nakli greft hayatta kalmak için gerekli olan neovaskülarizasyon allojenik yanıtları özellikle duyarlıdır. Böylece, deri ve derialtı duymak nakli sıkı bir tolerans testi için değil, immunosupresif ya da tolerans indükleyici protokollerin geliştirilmesi ve optimizasyonu için yararlı olabilir.

Biz verimlilik ve başarı oranlarını artırmak için çeşitli yollar damar kalp nakli tekniği güncellendi:

1. Kalp hasat sonrası açık renk olana kadar donör kalbi çıkan aortun tuzlu su çözeltisi ile sulanmalıdır.
2. , Abdominal aorta ve inferior vena kava alıcı dalları, işletme ve operasyon sonrası tromboz sırasında kanamayı önlemek, 10-0 sütür ile bağlandı olmalıdır.
3. Abdominal aorta lümen ve alıcının inferior vena kava, kan kalana kadar tuzlu su çözeltisi ile sulanmalıdır. Bu operasyon sonrası tromboz önleyebilir.
4. Anastomozlar yapma, damarların içinde hava kabarcıkları kaçınılmalıdır.
5. Arter anastomozlar anastomozlar kanama önlemeye yardımcı olmak için, 11-0 sütür kullanmanız gerekir.
6. Kesi abdominal aorta ve alıcının inferior vena kava, pulmoner arter ve donör kalbi Asendan aorta açılması eşit olmalıdır.
7. Açık ve geniş bir çalışma alanına sahip olmak önemlidir, bu nedenle geçici olarak aorta ve inferior vena kava kapamak için kelepçeler yerine 6-0 sütür kullanın.

Sonuç

Farelerde heterotopik kalp nakli tekniği teknik açıdan zor olmasına rağmen, bu alloresponses eğitim için önemli bir tekniktir. Uygulama ve teknik modifikasyonlar Laboratuvarımızda% 90'ın üzerinde bir başarı oranı ile sonuçlandı. Biz, video ve beraberindeki el yazması, bu tekniği kullanmak için isteyen laboratuarlar için öğrenme eğrisi azaltmak için yardımcı olacağına inanıyoruz.