Summary
Protocol
- חותכים חתיכות הזנב (3mm) והאוזניים סימן.
- הוספת 720 מ 'אני STE ו 30 מ' אני proteinase K (10 מ"ג / מ"ל המלאי).
- לדגור על 55 מעלות צלזיוס על בלוק חימום מערבולת כל שעה במשך 3 שעות במהירות שיא עבור 10 שניות.
- להשבית proteinase K ב 70 מעלות צלזיוס למשך 5 דקות.
- דובדבני על הקרח במשך 5 דקות.
- צנטריפוגה DNA הזנב במשך 10 דקות בשיא המהירות.
- למזוג לתוך שפופרת חדשה המכילה 720 מ 'אני Isopropanol.
- משקע ה-DNA על ידי צינור vortexing או היפוך.
- ספין למטה DNA במשך 5 דקות במהירות מלאה. הסר supernatant.
- לשטוף גלולה עם אתנול 70%.
- ספין למטה הדנ"א הגנומי 5 דקות במלוא המהירות. הסר supernatant.
- אפשר DNA להתייבש במשך 1-2 דקות.
- Resuspend דנ"א l מ 100-200 תלוי בגודל של גלולה.
- צינור מקום ב 55 מעלות צלזיוס במשך שעה 1 כדי להקל על פירוק של דנ"א.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| STE | Buffer | 100 mm Tris; pH 8.5 /5 mM EDTA /0.2% SDS /200 mM NaCl / in H2O | ||
| TE | Buffer | 100 mM Tris; pH 5.0 /1 mM EDTA /10 mM NaCl |
