Summary
Protocol
- Вырезать хвост штук (3 мм) и отметьте уши.
- Добавить 720 мкл STE и 30 мкл протеиназы К (10 мг / мл акций).
- Инкубировать при 55 ° С на блоке отопления и вихревые каждый час в течение 3 часов при максимальной скорости в течение 10 секунд.
- Деактивировать протеиназы К при 70 ° С в течение 5 минут.
- Quench на льду в течение 5 минут.
- Центрифуга хвост ДНК в течение 10 минут на полной скорости.
- Декантировать в новую пробирку, содержащую 720 мкл изопропанола.
- Осадок ДНК путем обращения трубки или вортексе.
- Спином вниз ДНК в течение 5 минут на полной скорости. Удалить супернатант.
- Вымойте гранул с 70% этанола.
- Спином вниз геномной ДНК 5 минут на полной скорости. Удалить супернатант.
- Разрешить ДНК, чтобы высохнуть в течение 1-2 минут.
- Ресуспендируют ДНК в 100-200 л м в зависимости от размера гранул.
- Место трубке при 55 ° С в течение 1 часа для облегчения растворения ДНК.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| STE | Buffer | 100 mm Tris; pH 8.5 /5 mM EDTA /0.2% SDS /200 mM NaCl / in H2O | ||
| TE | Buffer | 100 mM Tris; pH 5.0 /1 mM EDTA /10 mM NaCl |
