Summary
Aneurysmatisk subarachnoidalblödning (SAH) blöder som sker i subaraknoidalrummet när ett aneurysm brister. Medan sjuklighet och dödlighet i denna händelse har varit på en nedgång till följd av förbättrade behandlingsmetoder, risken för vasospasm efter subaraknoidalblödning fortsätter att vara den samma som det var flera år sedan. Vikten av att upprätta en omfattande och reproducerbar djurmodell för att identifiera inledande händelser av cerebral vasospasm har varit i fokus för forskning sedan den första användningen av råttor i en experimentell vasospasm modell 1979 av Barry
Abstract
Mål: Att karakterisera och etablera en reproducerbar modell som visar fördröjd cerebral vasospasm efter aneurysmal subaraknoidalblödning (SAH) hos råttor, för att identifiera de inledande händelser, patofysiologiska förändringar och potentiella mål för behandling.
Metoder: Tjugoåtta Sprague-Dawley råttor (250 - 300 g) fick godtyckligt tilldelas en av två grupper - SAH eller saltlösningskontroll. Råtta subaraknoid blödning i SAH-gruppen (n = 15) inducerades genom dubbel injektion av autologt blod, 48 timmar isär, till cisterna magna. Likaså, normal saltlösning (n = 13) injicerades i cisterna magna av saltlösning kontrollgruppen. Råttorna avlivades på dag fem efter den andra injektionen blodet och hjärnan bevarades för histologisk analys. Graden av vasospasm mättes med användning sektioner av den basilära artären, genom att mäta den interna luminala tvärsnittsarean med NIH Image-J programvara. Betydelsen vartestats med Tukey / Kramer: s statistisk analys.
Resultat: Efter analys av histologiska sektioner, var basilar artär luminala tvärsnittsarea mindre i SAH än i saltlösning gruppen, i enlighet med cerebral vasospasm i den förra gruppen. I SAH-gruppen var basilaris artär inre område (0,056 nm ± 3) betydligt mindre från vasospasm fem dagar efter den andra blod injektionen (sju dagar efter den första blod injektion), jämfört med saltlösning kontrollgruppen med inre område (0,069 ± 3, p = 0,004). Det fanns inga döda från cerebral vasospasm.
Slutsats: Råttan dubbla SAH modell inducerar en mild, långlivade, basilaris artär vasospasm som kan användas för att studera de patofysiologiska mekanismerna av cerebral vasospasm i en liten djurmodell. En låg och acceptabel Dödligheten är ett viktigt kriterium skall uppfyllas för en ideal SAH djurmodell, så att mekanismerna för vasospasm kan elucidated 7, 8. Ytterligare modifieringar av modellen kan göras för att justera för ökad svårighetsgrad vasospasm och neurologiska undersökningar.
Protocol
1. Råtta Kirurgi för SAH Ämne injiceras med 0,15 ml autolog arteriellt blod
- Råttan sövs med användning av 0,1 mg / kg av ketamin / xylazin gnagare cocktail och fick stå under 5 min.
- Adekvat anestesi bekräftas genom reduktion av bakbenen reflex.
- Använda en elektronisk rakapparat en hals för att näsan av hår runt sub-occipital regionen rakat.
- Djuret placeras i ryggläge på operationen bordet och svansen tvättas med betadin att säkerställa en steril snitt.
- En rak 1 cm mittlinjesnitt tas på den ventrala aspekten av svansen
- Den dissektion förlängs tills svansartären identifieras och isoleras.
- Med användning av en steril 26-gauge kateter är svansartären kanylerades och 0,15 ml arteriellt blod dras upp i en spruta.
- En steril gasväv lindas runt snittet för att säkerställa hemostas före applicering av vetbond att täta snittet.
- Than råtta slås benägna på bordet och den rakade området över sub-occipitala regionen tvättas med betadin.
- Med hjälp av en vertikal mittlinje snitt tillgång erhålls till cisterna magna.
- När detta har skett en 25 gauge nål sätts in i cisterna magna och 0,15 ml CSF dras upp i en spruta för att undvika ökade intrakraniella trycket med injektion av autologt blod volym.
- Nu är 0,15 ml blod extraheras från svansartären injiceras långsamt i cisterna magna.
- Nålen lämnas på plats under 30 sek för att säkerställa koagulering i subaraknoidalrummet och sedan försiktigt tillbaka.
- Hemostas säkerställs och snittet stängs med hjälp av en häftning anordning.
- Djuret placeras nu benägna på en värmande yta med en 20 ° huvud ned position för 20 minuter för att tillåta blod att stelna i cisterner kring basilära artären.
- Steg 1,1 till 1,15 upprepas under andra operationen 48 timmar isär.
2. Råtta Kirurgi för SAH Ämne injiceras med 0,15 ml saltlösning
- Råttan sövs med användning av 0,1 mg / kg av ketamin / xylazin gnagare cocktail och fick stå under 5 min.
- Adekvat anestesi bekräftas genom reduktion av bakbenen reflex.
- Använda en elektronisk rakapparat en hals för att näsan av hår runt sub-occipital regionen rakat.
- Djuret placeras i ryggläge på operationen bordet och svansen tvättas med betadin att säkerställa en steril snitt.
- En rak 1 cm mittlinjesnitt tas på den ventrala aspekten av svansen
- Den dissektion förlängs tills svansartären identifieras och isoleras.
- Med användning av en steril 26-gauge kateter är svansartären kanylerades och 0,15 ml arteriellt blod dras upp i en spruta.
- En steril gasväv lindas runt snittet för att säkerställa hemostas före applicering av vetbond att täta snittet.
- Rat sätts benägna på bordet och det rakade området över sub-occipital region är målad med betadin.
- Med hjälp av en vertikal mittlinje snitt tillgång erhålls till cisterna magna.
- När detta har skett en 25 gauge nål sätts in i cisterna magna och 0,15 ml CSF dras upp i en spruta och provet lagras.
- Nu är 0,15 ml normal saltlösning (37 ° C) injicerades långsamt i cisterna magna.
- Nålen lämnas på plats i 30 sekunder och försiktigt tillbaka.
- Hemostas säkerställs och snittet stängs med hjälp av en häftning anordning.
- Djuret placeras nu benägna på en värmande yta med en 20 ° huvud ned position för 20 minuter.
- Steg 2,1 till 2,15 upprepas under andra operationen 48 timmar isär.
3. Råtta Sacrifice
- På dag 5 efter den andra operationen är råttorna som hjärt perfusion.
- Råttan ges en dödlig dos (00,2 ml / kg) av Fatal Plus (Vortech PHARMACEUTICALS LTD., Dearborn, MI)
- Med en vertikal mittlinjen snitt är bukhålan närmade sig och bukhinnan öppnas.
- En främre torakotomi utförs och hjärtat exponeras.
- Med hjälp av en 26-gauge kateter ansluten till en fosfatbuffertlösning (PBS pH 7,4 och vid 37 °) djuret töms på blod och därefter perfuseras med 4% paraformaldehyd.
- Efter säkerställa en tillräcklig perfusion är perfusionen stoppas och råttan förs över till halshuggning tabellen.
- Efter halshuggning, är en ben rongeur används för att avlägsna kraniet för hjärnans borttagning.
- Hjärnan och hjärnstammen noggrant ur skalle och placerades i en 4% paraformaldehyd-lösning och förvarades vid 4 ° C under 48 timmar.
4. Skapa avsnitt för att bedöma Vasospasm
- Den råtthjärna som nu har hamnat i 30% sackaros i 4 dagar kommer till the kryostat för sektionering.
- När kryoskyddades, 12 ^ M sektioner skapas med hjälp av kryostaten, med den främre Inferior Cerebellar artär (AICA) som utgångspunkt för att inter-individuell konsistens.
- 20 sektioner skapas för varje djur, slutar vid Superior Cerebellar artären (SCA).
- Sektionerna är placerade på en glasskiva och utvärderas för vasospasm användning histologisk metod
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Inom protokollen beskrivna ovan, finns det flera steg som vi tror kräver en bättre karakterisering av modellen än vad som tidigare beskrivits i litteraturen. Här fokuserar vi på de åtgärder som är nödvändiga för att uppnå en reproducerbar låg dödlighet cerebral vasospasm liten djurmodell och undvika potentiella fallgropar i samband med denna modell om den inte görs på rätt sätt.
1. Autologt blod Rita från svansartären:
Noggrann placering av angiocatheter i svansartären är det viktigt första steg i modellen. Figur-1 visar placeringen av en 26 gauge kateter i svansartären hos råtta. Detta utgör en bra placering med minimal trauma och blodförlust. Korrekt placering av angiocatheter kan bekräftas genom god avkastning blod.
2. Injektion av autologt blod i Cisterna Magna:
Djup dissekering av tHan suboccipital regionen utförs tills nacken membranet är visualiseras som en skinande vit membran (figur-2). Cisterna magna nås via en punktering genom membranet med en 25-gauge nål. Efter tillbakadragande av nålen, sammanslagning av blod bör noteras, att säkerställa en tillräcklig volym av autologt blod stannar inom subaraknoidalrummet av cisterna magna. Överdriven ansamling av blod på utsidan aspekten av nacken membranet är önskvärt eftersom vår modell använder relativt låga volymer (0,15 ml) av autologt blod jämfört med befintliga modeller och samla kan medföra ineffektiva volymer av blod i subaraknoidalrummet. Högre volymer av blod ledde ofta i andningssvikt förmodligen från förhöjt intrakraniellt tryck och blodprodukter kort efter injektion. Insamlingen av blod runt artärer i subaraknoidalrummet är en av flera möjliga metoder för att initiera experimentell vasospasm 8
3. Provexemplar
Figur-3 visar en hjärnstammen prov hämtas från en råtta utan (figur-3A) och med (fig-3B) subaraknoidalblödning. Notera insamling av blod i subaraknoidalrummet runt den basilära artären i figur-3B. Detta innebär en tillräcklig volym av blod för att inducera vasospasm av basilaris artären. Pilarna i figur-3A och figur 3B-definierar omfattningen av den basilära artären (BA). Sektioner (12 um) tas från längden av BA som sträcker sig från AICA-till SCA.
4. Histologiska snitt
Tjugo sektioner analyserades för varje basilar artär prov i SAH och saltlösningskontrollgrupper (figur-4). Den interna luminala tvärsnittsarea den basilära artären var mindre och det var signifikant korrugering av inre elastisk lamina antyder vasospasm, i SAH-gruppen (figur-4A). Den basilära artären från saltlösningen kontrollgruppen var större i området och inte har en korrugerad inre elastisk lamina (figur-4B). En kvantifiering av graden av reduktion i området mellan de två grupperna kan hittas i figur 5. Dessa studier bekräftar att detta SAH modellen inte producerar cerebral vasospasm som kan bedömas med histologiska metoder. Luminal tvärsnittsarea användes för att bestämma vasospasm eftersom vävnadsbehandling ibland resulterar i amorfa tvärsnitt av fartygen, vilket gör det svårt att bestämma en lämplig diameter för att mäta och använda för dataanalys. Alla mätningar utfördes med användning av NIH Image-J programvara. I SAH gruppen, basilaris artären ärA (intern = 0,056 nm ± 3) var betydligt mindre än den saltlösning kontrollgruppen (intern = 0,069 nm ± 3, p = 0,004) på grund av vasospasm. Betydelse testades med Tukey / Kramer: s statistisk analys. Tabell 1 visar dessa värden med beräknade standardavvikelser och medelfel för båda grupperna.
Figur 1. Införande av en 26 gauge kateter införes i svansartären.
Figur 2. Utseende av nacken membran (pil) i råtta.
Figur 3. Ventrala ytan av rått behåinstem en basilar artär (pilar) med (A), och utan (B), SAH.
Figur 4. Histologiska sektioner som visar basilar artär i SAH (A) och saltlösningskontroll (B) grupper. Notera att den luminala tvärsnittsarea den basilära artären är mindre och den inre elastisk lamina är korrugerad (pil) i SAH-gruppen, både förenligt med vasospasm.
Figur 5. Jämförelse av basilar Artery luminala tvärsnittsareor mellan SAH och saltlösning kontrollgrupper.
| Räkna | Medelvärde (Luminal tvärsnittsarea) | Std. Dev. | Std. Err. | |
| SAH | 15 | 0,056 mm | 0,01 | 0,003 |
| Saltlösning | 13 | 0,069 mm | 0,012 | 0,003 |
Tabell 1. Beräknad medelvärden och standardavvikelser för SAH och salien kontrollgrupper.
| Författare | 2: a SAH | Källa | Injicerade volymen (1: a / 2: a) | Offra (efter 2: a SAH) | Analysmetoder | Dödlighet |
| Ryba et al. (1999) | 48 | Arteriell | 0.1/0.1 ml | Dag 5 | EM | 25% |
| Suzuki et al. (1999) | 48 | Arterial | 0.3/0.3 ml | Dag 5 | Angiografi | Okänd |
| Sato et al. (2002) | 48 | Arteriell | 0.35/0.35 ml | Dag 5 | Histologi | 20% |
| Aladag et al. (2003) | 48 | Venös | 0.3/0.3 ml | Dag 4 | Histologi | 18% |
| Vatter et al. (2006) | 24 | Arteriell | 0.2/0.2 ml | Dag 3 | Angiografi, MR | 47% |
| Lee et al. (2008) | 24 | Arteriell | 0.3/0.2ml (n = 15) 0.2/0.1 ml (n = 54) | Days 1/3/4/7/9 * | Histologi | 40% (n = 15) 1,5% (n = 54) |
| * Råttorna avlivades differentiellt Dag 1 (n = 7), Dag 3 (n = 7), Dag 5 (n = 7), Dag 7 (n = 7), Dag 9 (n = 7) et al. (2008) | ||||||
Tabell 2. Sammanfattning av de publicerade dubbla råtta subaraknoidalblödning modeller.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Primater, har en mer likartad genetisk sammansättning och anatomiska funktioner till människa, närmare efterlikna händelser fördröjd cerebral vasospasm och kan lättare genomgå icke-invasiv (MRT och angiografi) för att övervaka arteriella förändringar än gnagare 8. Men primatmodeller är kostsamt och förknippas med mer komplexa vård-och etiska frågor, än mindre djurmodeller. Små djur SAH modeller som har utvecklats tidigare har fokuserat på tre metoder för att förmå SAH: 1) Endovaskulär arteriell perforering av en intrakraniell artär så att blodet kan fly in i subaraknoidalrummet och samla runt den skadade artären, 2) Kirurgisk exponering av en artär och lokala autolog koagel injektion, 3) Direkt injektion av blod (autolog eller donator) i subaraknoidalrummet 8. Varje modell har sina egna förtjänster och nackdelar. Till exempel endovaskulära perforering modellen närmast efterliknar händelserna en aneurysm bristning men är förenad med en mycket hög dödlighet och tidig vasospasm, medan den kirurgiska metoden är konstgjord och inte härma händelserna den typiska mänskliga presentation av aneurysmatisk SAH. Den direktinsprutning modell som vi beskriver här har en lägre dödlighet än den endovaskulära perforering modellen och närmare efterliknar människokroppens SAH tillstånd än en öppen kirurgisk modell. Även liknande modeller har beskrivits tidigare, hade vi en stor inlärningskurva med SAH modellutveckling eftersom de potentiella komplikationer från nyanserna i modellen, inte väl beskrivna någonstans tidigare. Det var vår avsikt att bättre definiera dessa potentiella fällor så att framtida utredare kan lättare använda denna reproducerbar SAH modell.
Medan vi föreslå en enkel och kostnadseffektiv modell för att studera effekterna av fördröjd vasospasm, är det inte utan sina begränsningar. På grund av förmågan för råttor att snabbt rensa blodet från subaraknoidalrummet,och de anatomiska skillnaderna i de cerebrala artärerna själva är råttorna vara en dålig modell för studiet av fördröjd subaraknoidalblödning 6, 8. Det finns några viktiga steg som skulle påverka resultatet av modellen. Dosen av ketamin / xylazin cocktail skall inte överstiga 0,1 ml / kg för att säkerställa tillräcklig anestesi. Något belopp av sammanslagning av blod efter injektion i cisterna magna bör noteras och dokumenteras som vi har noterat att sammanslagning av blod leder till en lägre grad av vasospasm 9, 13, 15. Andra studier har visat att andra injektioner av blod 24 timmar isär kan inducera en mer betydande grad av vasospasm 6, tror vi att det inte skulle efterlikna tidsförloppet av vasospasm i människor där vasospasm sällan inträffar före dag tre efter SAH. För att närmare efterlikna denna tidsförlopp vi gjort den andra injektionen av blod 48 timmar efter den första injektionen.
Potentiella ändringar av den modell vi som beskrivere inkluderar injicera större volymer av blod i subaraknoidalrummet, ändra källan av blod, ändra tidsförloppet för den andra injektionen, och offra längre ut än fem dagar efter den andra blod injektionen. Sådana variationer i tidigare modeller återfinns ovan i tabell 2. Under vår modellutveckling, använde vi både enkla och dubbla injektion modeller ändrade tiden mellan injektioner med dubbel SAH-modellen, testade olika volymer av blod, testade effekterna av hemolyserat blod, försökte venös kontra arteriell och autologt kontra givarblod injektioner. Var och en av dessa modifieringar leda till komplikationer som resulterade i en oanvändbar modell för att testa fördröjd vasospasm. Den ovan beskrivna modellen konsekvent producerade en låg dödlighet basilaris artär SAH liten djurmodell av fördröjd cerebral vasospasm (CV) 6, 7, 11, 13, 15.
Låga dödligheten möjliggör en mer grundlig förståelse av endäck mekanism av cerebral vasospasm 13. Bederson et al. 1 har använt endovaskulära perforering modellen, rapporterar en dödlighet på 50% inom 24 timmar för observation. Veelken et al. 16 med sin endovaskulär glödtråd ICA perforering som beskrivs en dödlighet på 100% i den normala perfusion grupp inom 3 timmar av förfarandet. Den endovaskulära perforering modell utförs av Lee et al. 7 visade en betydande grad av vasospasm (BA diameter 230 nm ± 70) jämfört med den dubbla blödning modell inom samma studie (BA diameter 320 nm ± 36), och dödligheten för perforering modell rapporterades vara 44%. Den femdubbling av glutamat nivåer samt ökad laktat och fria fettsyrekoncentrationer är några av de skadliga metabola effekter ses några minuter efter induktion av SAH som bidrar till den ökade dödligheten i perforeringen modell 10. Dere är tillräckligt belägg för att perforeringen modellen behöver förfinas ytterligare för att kontrollera de höga dödstalen.
Dödligheten med dubbel-SAH modell varierar mycket beroende på volymen av blod injicerade och graden av injektionen. Vi fann att större volymer av blod och snabbare injektionstakt, alla leda till andningsstillestånd och ofta dödsfall under eller omedelbart efter blod injektionen. Under modellutveckling, varierade dödligheten från 1,5% till 47% med blodvolymen är den viktigaste faktorn som påverkar dödligheten. Med fulländning den nuvarande modellen som vi beskriver här, rapporterar vi inga dödlighet. Det finns flera verktyg för att framgångsrikt identifiera och bedöma graden av CV, histologi, elektronmikroskopi, angiografi och MR 5, 6, 11, 12, 15. I vår modell, gjordes inga försök att använda andra metoder förutom histologi.
I jakten på bättre förståelse avunderliggande patofysiologi fördröjd CV i råttmodeller, kan en göra en myriad av framtida tillämpningar som en förlängning av vår modell. Det väsentliga målet är att utveckla medel som man kan förebygga och behandla CV hos människor. För att göra detta måste man förstå de komplexa interaktioner och multifaktoriella processer som initierar och upprätthåller CV hos människor 17. Med etableringen av en lämplig överleva SAH råttmodell kan utredarna fokusera på kortsiktiga och långsiktiga mekanismer för cerebral vasospasm och undvika motstridiga uppgifter typiska för sekundär ischemisk skada hos råtta nervceller 2, 4, 8. Vi tror att SAH som beskrivs här kommer att bli en positiv undersökande verktyg för att förstå de processer som initierar och upprätthåller CV.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Vi har inget att avslöja avseende denna studie.
Acknowledgments
Vi vill erkänna de insatser som dr Mary-Lou Vallano, Institutionen för neurovetenskap och fysiologi, för hennes värdefulla bidrag i skriva upp för detta manuskript.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Male SD rats (250-300 g) | Taconic | SD-M | |
| 26 G Catheters | Webster | 8416683 | |
| 25 G Needles | Buffalo | 305122 | |
| 1 cc Syringes | Central stores | 54245 | |
| Ketamine/Xylazine cocktail | Animal Care (SUNY)* | - | |
| Betadine | Central stores | 51458 | |
| Sucrose | Sigma | S9378-1kg | |
| Paraformaldehyde | Sigma | P6148-500G | |
| Phosphate buffer solution | Fisher | BP-399-4 | |
| Surgical Table | Harvard | PY2 72-2590 | |
| OCT Compound (cryoprotection) | VWR | 25608-930 | |
| Superfrost Slides | Fisher | 12-550-15 | |
* Synthesized at Department of Laboratory Animal Care, SUNY Upstate Medical University. Add 1 cc [100 mg/ml] of Xylazine to 10 ml [100 mg/ml] of Ketamine. |
|||
References
- Bederson, J. B., Germano, I. M., Guarino, L. Cortical blood flow and cerebral perfusion pressure in a new noncraniotomy model of subarachnoid hemorrhage in the rat. Stroke. 26, 1086-1091 (1995).
- Cheng, G., Wei, L., Zhi-Dan, S., Shi-Guang, Z., Xiang-Zhen, L. Atorvastatin ameliorates cerebral vasospasm and early brain injury after subarachnoid hemorrhage and inhibits caspase-dependent apoptosis pathway. BMC Neurosci. 10, 7-17 (2009).
- Jackowski, A., Crockard, A., Burnstock, G., Russell, R. R., Kristek, F. The time course of intracranial pathophysiological changes following experimental subarachnoid hemorrhage in the rat. J. Cereb. Blood Flow Metab. 10, 835-849 (1990).
- Kaoutzanis, M., Yokota, M., Sibilia, R., Peterson, J. W. Neurologic evaluation in a canine model of single and double subarachnoid hemorrhage. J. Neurosci. Methods. 50, 301-307 (1993).
- Karaoglan, A., Akdemir, O., Barut, S., Kokturk, S., Uzun, H., Tasyurekli, M., Colak, A. The effects of resveratrol on vasospasm after experimental subarachnoid hemorrhage in rats. Surg. Neurol. 70, 337-343 (2008).
- Lee, J. Y., Huang, D. L., Keep, R., Sagher, O. Characterization of an improved double hemorrhage rat model for the study of delayed cerebral vasospasm. J. Neurosci. Methods. 168, 358-366 (2008).
- Lee, J. Y., Sagher, O., Keep, R., Hua, Y., Xi, G. Comparison of experimental rat models of early brain injury after subarachnoid hemorrhage. Neurosurgery. 65 (2), 331-343 (2009).
- Megyesi, J. F., Vollrath, B., Cook, D. A., Findlay, J. M. In vivo animal models of cerebral vasospasm: a review. Neurosurgery. 46, 448-460 (2000).
- Prunell, G. F., Mathiesen, T., Diemer, N. H., Svendgaard, N. A. Experimental subarachnoid hemorrhage: Subarachnoid blood volume, mortality rate, neuronal death, cerebral blood flow, and perfusion pressure in three different rat models. Neurosurgery. 52, 165-176 (2003).
- Prunell, G. F., Mathiesen, T., Svendgaard, N. A. Experimental subarachnoid hemorrhage: Cerebral blood flow and brain metabolism during the acute phase in three different models in the rat. Neurosurgery. 54, 426-436 (2004).
- Ryba, M. S., Gordon-Krajcer, W., Walski, M., Chalimoniuk, M., Chrapusta, S. J. Hydroxylamine attenuates the effects of simulated subarachnoid hemorrhage: implication for the role of oxidative stress in cerebral vasospasm. Neurol. Res. 31, 195-199 (1999).
- Satoh, M., Parent, A. D., Zhang, J. H. Inhibitory effect with antisense mitogen-activated protein kinase oligodeoxynucleotide against cerebral vasospasm in rats. Stroke. 33, 775-781 (2002).
- Suzuki, H., Kanamaru, K., Tsunoda, H., Inada, H., Kuroki, M., Sun, H., Waga, S., Tanaka, T. Heme oxygenase-1 gene induction as an intrinsic regulation against delayed cerebral vasospasm in rats. J. Clin. Invest. 104, 59-66 (1999).
- Swift, D. M., Solomon, R. A. Subarachnoid hemorrhage fails to produce vasculopathy or chronic blood flow changes in rats. Stroke. 19, 878-882 (1988).
- Vatter, H., Weidauer, S., Konczalla, J., Dettmann, E., Zimmermann, M., Raabe, A., Preibisch, C., Zanella, F., Seifert, V. Time course in the development of cerebral vasospasm after experimental subarachnoid hemorrhage: clinical and neuroradiological assessment of the rat double hemorrhage model. Neurosurgery. 58, 1190-1197 (2006).
- Veelken, J. A., Laing, R. J., Jakubowski, J. The Sheffield model of subarachnoid hemorrhage in rats. Stroke. 26, 1279-1283 (1995).
- Zubkov, A. Y., Nanda, A., Zhang, J. H. Signal transduction pathways in cerebral vasospasm. Pathophysiology. 9, 47-61 (2003).
