마우스의 오른쪽 심장의 심 초음파 평가
Summary
이 문서에서는 우심실의 크기와 생쥐의 폐 고혈압의 심 초음파 평가를위한 프로토콜을 제공합니다. 응용 프로그램은 유전자 변형과 심장 근육 병증 및 폐 혈관 질환의 독소 유발 마우스 모델에서 표현형 결정 및 직렬 평가를 포함.
Abstract
형질 전환 및 폐동맥 고혈압 (PAH)의 독성 모델은 널리 PAH의 병태 생리를 연구하고 잠재적 인 치료를 조사하는 데 사용됩니다. 질병의 동물 모델을 만드는 데 관련된 비용과 시간을 감안할 때, 그것은 연구자들은 정확하게 질병의 형질 발현을 평가하는 도구를 가지고하는 것이 중요합니다. 우심실 부전이 폐 고혈압의 중요한 표현이다. 심 초음파 설치류 모델에서 우심실 기능의 비 침습적 평가의 의지와 같은 도구를 사용하는 누구에 인간에게 분명 번역의 장점이 있습니다. PAH의 쥐 모델에 게시 된 심 초음파 검사 프로토콜이 부족하다.
그러나,이 프로토콜은 폐 혈관 또는 오른쪽으로 심장에 영향을 미치는 모든 질병에 적용 할 수있다,이 문서에서는, 우리는 RV 및 지배적 인 부정적인 BMPRII 돌연변이와 PAH의 마우스 모델에서 폐 혈관 기능을 평가하기위한 프로토콜을 설명합니다. 우리동물 준비, 이미지 수집 및 박출량, 심 박출량 및 폐동맥 압력의 추정 혈류 역학적 계산에 대한 자세한 설명을 제공합니다.
Introduction
높은 폐 압력과 우심실 (RV) 장애 동물 모델과 폐동맥 고혈압 (PAH)와 인간의 환자에서 폐 혈관 질환의 특징입니다. PAH의 형질 전환 및 독성 (예 monocrotaline 또는 저산소증) 모델은 널리 PAH의 병태 생리를 연구하고 잠재적 인 치료를 조사하는 데 사용됩니다. 질병의 동물 모델을 만드는 데 관련된 비용과 시간을 감안할 때, 그것은 연구자들은 정확하게 질병의 형질 발현을 평가하는 도구를 가지고하는 것이 중요합니다.
심 초음파 설치류 모델 1,2에서 심실 기능의 비 침습적 평가의 의지입니다. 심 초음파 검사는 같은 도구를 사용하는 누구에 인간에게 분명 번역의 장점이 있습니다. 또한, 일부 유전 모델은 불완전한 penetrance 3을 나타내고; 간접적으로 영향을받는 동물을 식별하는 능력은 귀중한 시간과 자원을 절약. disea의 비 침습적 평가동물을 희생하지 않고 자체의 심각도는 연구원이 순차적으로 조사 요법의 효과를 연구 할 수 있습니다. 이 번역 요법은 인체에 실험 4,5에 진출 할 수있는 신속성 주어진 특히 중요합니다.
인간, RV의 크기와 폐 고혈압의 심 초음파 평가 인해 retrosternal 위치와 RV 6의 불규칙한 형태에 특히 도전이다. 설치류 모델은 작은 크기의 추가 도전과 매우 빠른 심박수 (300 ~ 700 비트 / 분)가있다. 대부분의 설치류 영상이 마취 7,8에서 수행 불구하고 높은 프레임 속도와 작은 센서를 포함하여 최근의 진보는 이미지 품질과 몇 가지 실험 프로토콜에도 허용 의식 이미지를 개선했습니다. PAH의 쥐 모델에서 심장 초음파 검사의 우수한 실험 프로토콜은 MRI 및 침입 혈류 역학 1,9 모두에 대해 설명하고 검증되었다. 그러나 출판 심 초음파PAH의 쥐 모델에서 프로토콜이 부족하다.
이 문서에서는, 우리는 지배적 인 부정적인 BMPRII 돌연변이 및 폐동맥 밴딩 후 고립 된 RV의 후 부하의 모델 PAH의 마우스 모델에서 RV 및 폐 혈관 기능을 평가하기위한 프로토콜을 설명하지만,이 프로토콜에 영향을 미치는 모든 질병에 적용 할 수있다 폐 혈관 또는 오른쪽으로 마음. 우리는 동물의 준비와 RV의 크기와 기능뿐만 아니라, 주 폐동맥 (PA) 크기의 상세한 평가에 대해 설명합니다. 우리는 또한 박출량 및 심 박출량을 추정하는 데 필요한 기술과 계산을 보여줍니다. 기술적 인 한계는 폐 압력의 정확한 도플러 추정을 배제하지만, 우리는 PA 압력을 추정하기 위해 잘 검증 된 사람의 대리, 폐동맥 가속 시간을 적용했습니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
질환의 마우스 모델, 유전자 변형 또는 독소 관련 하나는 모델이 실제로는 모방하기위한 것입니다 인간의 질병을 되풀이되었습니다 것을 표현형의 확인이 필요합니다. 이 유효성은 종종 종양의 예 개발을위한, 특정 기능의 존재 또는 부재에 의해 달성 될 수있다. 그러나, 좌심실 비대 또는 PAH의 우리의 유전자 변형 모델의 대동맥 협착 모델 등의 혈역학 적 이상을 초래할 모델의 유효성을 검사하?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Vevo 770 High Resolution Micro-Ultrasound System | Visualsonics Inc. | get more info at www.visualsonics.com/products | |
| RMV (Real-Time MicroVisualization) 704B 40 mH Scanhead w/ Encapsulated Transducer | Visualsonics Inc. | get more info at www.visualsonics.com/products | |
| Vevo Integrated Rail System including the Physioogical Monitoring System | Visualsonics Inc. | get more info at www.visualsonics.com/products | |
| Computer Monitor set up for use with the Vevo770 | DELL or other General Supplier | ||
| Computer Mouse set up for use with the Vevo770 | General Supplier | ||
| Vevo770 Cardiac Package Software | Visualsonics Inc. | get more info at www.visualsonics.com/products | |
| VetEquip Portable Tabletop Anesthesia Machine with an Isoflurane Vaporizer | VetEquip | get more info at vetequip.com | |
| Activated Charcoal Waste Gas Containers | VetEquip/Vaporguard | 931401 | get more info at vetequip.com |
| Puralube Eye Ointment | Henry Schein | get more info at henryschein.com | |
| Ecogel 100 Ultrasound Gel | EcoMed Pharmaceuticals | 30GB | get more info at ecomed.com |
| 3M Transpore Tape | Fisher Scientific | 1527-0 | get more info at fishersci.com |
| Small Flathead Screwdriver | General Supplier | ||
| Sterile H2O | DDI H2O from faucet and then autoclave | ||
| 6 in Cotton Tipped Applicators | Fisher Scientific | get more info at fishersci.com | |
| Nair (depilatory cream) | General Supplier | ||
| 2 in x 2 in Gauze Sponges | Fisher Scientific | get more info at fishersci.com |
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