Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Murine שמאל Anterior יורד (LAD) קשירת עורקים הכליליים: דגם משופר או פשוט עבור אוטם שריר לב

Published: April 2, 2017 doi: 10.3791/55353
* These authors contributed equally

Abstract

מחלת לב איסכמית (IHD), או תסמונת כלילית חריפה (ACS), היא אחד הגורמים המובילים למוות בארצות הברית. IHD מאופיין אספקת דם מופחתת אל הלב, וכתוצאה מכך אובדן של חמצן ואת נמק שהתפתח של שריר הלב. מודל MI צבר פופולרי עבור השימוש בו כמודל לטווח קצר איסכמיה-רה-פרפוזיה ומודל קשירה קבעה לטווח ארוך. להלן, אנו מתארים שיטה אמינה עבור קשירת הקבע של LAD. עם טכנולוגיית הנדסה גנטית עכבר הופכת מתקדמת יותר, וכן עם זמינות גוברת של מכשירי ניתוח בעכברי איכות, העכבר הפך מודל פופולרי עבור ניתוחי MI. מודל כירורגיים שלנו משלב את שימוש הרדמה הפיכה בקלות על ההתאוששות המהירה של העכבר; אינטובציה endotracheal פולשנית מבלי לערב שקנה; וכן thoracentesis דרך אתר בית החזה המקורי מבלי ליצור חתך נוסף בחזה, כמונעשה בכמה שיטות אחרות, כדי להסיר עודפי דם ואוויר מן החזה החלל ביעילות. שיטה זו היא יחסית פחות פולשנית מאשר שיטות אחרות, אשר מפחיתות באופן משמעותי סיבוכים כירורגיים לאחר ניתוח ותמותה ומשפרות שחזור.

Introduction

מחלה כלילית, או ACS, הוא אירוע קרדיווסקולארי הנפוץ ביותר ייחשב הגורם העיקרי לתחלואה ולתמותה בעולם 2020 1. סיבת ACS היא הנוכחות של פקקת שריר הלב עקב קרע של פלאק טרשתי כלילית שחוסמת או מפחית את זרימת הדם אל הרקמה בלב 2. לכן, יש קליני סימנים עקביים עם נוכחות של איסכמיה לבבית חריפה, כגון אוטם שריר הלב (MI) 3, 4. MI מובילה לאובדן מסת של שריר הלב ואת התקדמות שיפוץ חדרית פתולוגי, מה שעלול להוביל תפקוד לקוי של החדר ואת אי ספיקת לב 5, 6.

אחת הדרכים היעילות ביותר כדי ללמוד IHD כבר לחקות אוטם שריר לב אנושי במודל חיה. זו מושגת על ידי גורם לחסימה של הבחורעכברים. באמצעות מודל זה, אנחנו לומדים איך הלב יכול להיות מוגן מפני נזק הנובע IHD.

במהלך העשור האחרון, חוקרים השתנו משימוש במודלים של בעלי חיים גדולים יותר לבעלי חיים קטנים, כולל מעבר בין חולדות עכברים. מודל העכבר הקטן מתחיל להיות מועדף מסיבות רבות, כולל גודלם הקטן, בגודל שגר גדול, בעלות נמוכה כדי לשמור, ואת תקופת הריון קצרה, כמו גם לזמינותם המרחיבה של מודלים בנוקאאוט מהונדסים גנטי 7. למרות העכברים קטנים בגודלם, מכשירי ניתוח חדשים שתוכננו במיוחד עבורם סייעו להתפתחות זו. השיטה שלנו מנצלת מכשירי הניתוח החדשים הללו.

בעוד כמה שיטות ליישם קנה פולשני, אנו משתמשים בשיטה פחות פולשנית של אינטובציה endotracheal. באמצעות תאורה תקורה של הלוע התחתון, אנחנו לצנרר מבלי ליצור שום מקריות, מתן חוויה בטוחה פחות טראומטי עבור tהוא חיה. העכבר ממוקם אז למכונת נשמה והמשיך isoflurane במהלך ההליך כולו. בשל משך ההרדמה הקצר מיוצר על ידי התרופה, זה לוקח רק כמה דקות עבור החיה להתאושש מההרדמה לאחר שהוא הופסק. המודל כירורגי שלנו כולל גם thoracentesis פולשנית. ההסרה הזהירה של דם ואוויר עודף מחלל החזה באמצעות thoracentesis דרך חתך פתיחת בית החזה המקורי התייחסה סיבוך לאחר ניתוח נפוץ של קשירת LAD: את pneumothorax המתח. שיטה זו, אשר מבטלת את הצורך בשני החתכים נוספים המשמשים שיטות-אחד אחרות עבור הניתוח בקנה הנשימה נוסף thoracentesis-הניב פחות סיבוכים לאחר ניתוח פחית תמותה באופן דרסטי.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

פרוטוקול חיה זו נבדק ואושר על ידי ועדת הטיפול בבעלי החיים המוסדי השתמש (IACUC) בבית חולי רוד איילנד.

הרדמה אינטובציה 1.

  1. לשקול את העכבר כדי לחשב את המינון של משככי כאבים שלאחר ניתוח.
  2. מניחים את העכבר בתא אינדוקציה ולספק isoflurane 4% עבור 9 - 10 דק ', ניטור החיה לאורך. הפעל מעקר חרוז חם כך המנגנון יכול מחמם כ 250 מעלות צלזיוס. Preheating ייקח 15 - 20 דקות.
  3. לאחר העכבר מגיע מטוס עמוק של הרדמה, עם קצב נשימה של כ 32 נשימות / דקה, למקם את פרקדן העכבר על לוח הקלקר להשתמש גומייה המאובטחת תחת החותכות העליונות להחזיק את הפה פתוח. אשר סדציה על ידי ביצוע קמצוץ הבוהן. מקם פנס בעצמה גבוהה מעל העכבר, כך שניתן יהיה לנגד עיניו את הלוע התחתון.
  4. שימוש במלקחיים מעוקלים כדי לפתוח את הלסת ועוד זוג מלקחיים כדי להרים את לשון מהדרך. הקפד לצנרר בעוד התמקמו בבית או מעט מתחת לגובה העיניים עם הגוף של העכבר. השימוש כירורגיים כירורגים מומלצים.
  5. דמיינו את הפתיחה והסגירה של מיתרי הקול. כאשר פתוח, הכנס קטטר 20-מד, 1-ב תוך ורידים (IV) עם היכרויות מחט קהה קצה. השתמש במחט כדי להנחות את הקטטר לפתיחת קנה הנשימה, אך להימנע החדרת המחט לתוך קנה הנשימה. אימות למיקום נכון ניתן לעשות זאת באמצעות פיפטה העברת פלסטיק.
  6. העבר את העכבר מחובר לצינורות אל משטח הפעלה מצויד מכשיר חימום. חברו את העכבר כדי מאוורר מכרסם קטן מוגדר נפח הפעימה של 150 μL / שבץ שיעור השבץ של 130 משיכות / min.
  7. 2.5% לספק isoflurane. בדוק את אינטובציה על ידי בדיקת עליית חזה הבילטרליים. ודא הרדמה על ידי ביצוע קמצוץ הבוהן. העכבר עשוי להזדקק 5 - 10 דקות במכונת ההנשמה להיות בהרדמה מלאה.

"Jove_title"> 2. הכנת העכבר

  1. סרט במורד צינור אינטובציה באתר המקשר בין ההנשמה ואת קטטר IV. סרט במורד הגפיים. מניחים טיפות סיכה סטרילי על העיניים.
  2. חתוך בצד שמאל הגחון של בית החזה עם סכין גילוח חשמלי. אבק הפרווה המגולחת עם מגבונים יבשים למרוח שכבה קטנה של קרם להסרת שיער באמצעות מקלון צמר גפן סטרילי. הקרם צריך להישאר במגע עם זקיקי השיער למשך כ 30 - 45 s.
  3. בעוד תהליכים שמנת, למקם שלושה צמר גפן סטרילי בשלושה צינורות 1.5 מ"ל מלאים בבטאדין לספוג. באמצעות מגבונים טבולים במים מזוקקים, בעדינות לנגב את השמנת פרווה.
  4. נקה את שדה הניתוח שלוש פעמים, לסירוגין בבטאדין רפידות הכנה isopropanol 70% סטרילי, ניקוי בתנועה מעגלית נע ממרכז אל הפריפריה. מניחים וילון סטרילי עם חור בגודל רבע מעל השדה כירורגית של העכבר.
  5. נקו את האזור שסביב mousדואר עם אתנול 70%. ודא הרדמה פעם נוספת עם קמצוץ הבוהן.

3. LAD קשירה

  1. מניחים את מכשירי ניתוח autoclaved ב מעקר את החרוז חם שחומם מראש ל 250 מעלות צלזיוס למשך כ 20 שניות. מניחים את כלי מעוקר על לעטוף כירורגית autoclaved סטרילי. דון כפפות מנתחים.
  2. השתמשו עדין קצה מלקחיים כדי להסיר את העור בעדינות בנקודה כ 5 מ"מ בצד שמאל של סחוס xiphoid בולט. השתמש אזמל כירורגי עם להב מס '10 כדי ליצור חתך אנכי בעור מנקודה זו כלפי מעלה, לרמה של manubrium.
  3. שימוש במלקחיים מעוקל בעדינות כדי להפריד את שכבות העור והשרירים. פתח את שכבת השריר, בעקבות החתך בעור. הכניסו שתי 5-0 תפרים פוליפרופילן דרך שכבת השריר, אחד בכל צד של החתך, ולאבטח את התפרים זמנית עם מלחציים כדי להחזיק את שכבת השריר פתוח.
  4. זהה ולעשות חתך בחלל צלעי השלישי, בעקבותזווית טבעית של בית החזה. הסר את הסרט מן בגפיים השמאליים של העכבר ולאבטח הרגל האחורית השמאלית שלה ברגל הימנית האחורית שלו עם קלטת. חותכים חתיכה ארוכה של קלטת ולאבטח הרגל הקדמית השמאלית שלו אל פני השטח ההפעלה במצב מוגבה מעט. נקה את הכפפות עם אתנול 70%.
  5. השתמש מפשק להפיץ בעדינות לגזרים את צלעות 3 rd ו 4 th. חותכים מקטע קטן של גזה סטרילי, כ 1 ב x ½ ב, לטבול אותו מלוחים 0.9% סטרילי. סוחט את מלוחים העודפים להשתמש במלקחיים כדי להכניס את הגזה בעדינות כנגד הריאה השמאלית כדי למנוע ניזק ריאות בשוגג במהלך ההליך.
  6. הוצא בעדינות את קרום הלב הדק עם מלקחיים.
  7. קורע כמות קטנה של צמר גפן את מקלון צמר גפן סטרילי לגלגל אותו לכדור קטן. טובלי צמר גפן זה לתוך מלוח 0.9% סטרילי ספוגי בעדינות על פני השטח של הלב כדי להעריך את העורקים. דחף בעדינות את החדר השמאלי כלפי מעלה לאתר את העורקים הכליליים תחתneath.
  8. זהה את LAD ולהעביר תפר ניילון 8-0 תחת LAD; שלם שני זורק כדי לאבטח את הקשירה. אם הקשירה היא מוצלחת, דיסטלי החדר השמאלי מן לחלוט הרצון ליגטורה.
  9. בעזרת מלקחיים, להסיר את הגזה הוכנסה קודם לכן, ולאחר מכן להסיר בעדינות המפשקת. מחדיר צינורית גמישה 6-ב, 25-מד מצורף מחט 25-מד לתוך חלל בית החזה דרך פתח פתיחת בית החזה. Advance כ 1 - 2 ב של צינור לתוך החלל מעל הריאה השמאלית. החזר את עכבר פרקדן ולנקות את הכפפות עם אתנול 70%.
  10. השתמשו 5-0 תפרים פוליפרופילן בדפוס נקטע פשוט לסגור את בית החזה, שמירה על צינור החזה במקום. הסר את שני תפרים מחזיקים את שכבת השריר פתוחה. השתמשו 5-0 תפרים פוליפרופילן ב דפוס מתמשך פשוט לסגור את שכבת השריר, שוב שמירה על צינור החזה במקום.
  11. צרף מזרק 1 מ"ל על מחט 25-מד על צינור החזה. משוך בעדינות כלפי מעלה על הצעדr בעוד בהדרגה במקביל לחילוץ צינור חזה מחלל החזה עם מלקחיים. חלץ את הצינורות לאט, כמו צעד זה מסיר אוויר ודם עודפים, שאחרת להיות לכוד בתוך חלל החזה ולגרום pneumothorax.
  12. לאחר המזרק מלא, לנתק את המזרק מהמחט ולהיפטר מהפסולת בכוס או כיור פסולת. המשך תהליך זה עד צינור החזה מופק לחלוטין. ודא כי החזה הוא אטום היטב.
  13. החלש את isoflurane ל 1.5%. סגור את העור עם 4-0 תפרי פוליפרופילן בדפוס נקטע פשוט. סובב את מאדה isoflurane off.
  14. נהל 0.1 מ"ג / מ"ל ​​עצירות מלוחים 0.9% באמצעות זריקה intraperitoneal (IP). טופיקלי חלים 2 מ"ג / מ"ל ​​לידוקאין עם 2 מ"ג / מ"ל ​​Bupivacaine מלוחים 0.9% ל החתך. נהל בין 200 - 500 μL של מלוחים 0.9% באמצעות זריקה תת עורית, ומדרוג הסכום המלוח למשקל של העכבר.
  15. המתן 5 דקות לאחר adminiואחסון התרופות לשיכוך כאבים כדי להסיר את העכבר מהצינור אינטובציה. זה מסייע במעבר ממכונת ההנשמה.
    1. אם העכבר לא קיים עליית חזה הבילטרליים פעם ממכונת ההנשמה, לבצע דקומפרסיה מחט. כדי לעשות זאת, להציג את מחט סטרילית 25-מד ומזרק 1-מ"ל בין צלעות 3 rd ו 4 th עד שהוא נכנס חלל בית החזה, כונה על ידי ירידה פתאומית התנגדות. משוך כלפי מעלה בעדינות על הבוכנה כדי להסיר אוויר עודף.
  16. כאשר העכבר מדגים שיעור נשימת הבילטרליים נאות ועומק ומגיב קמצוץ בוהן, למקם את העכבר בכלוב התאוששות נקי מתחת לפנס חום. ספק את העכבר עם מזון לח ובקבוק מים, ניטור במנדף זרימה למינרית במשך 15 - 20 דקות. נטר עבור במאמץ נשימה מוגזם, דימום יתר, או סיבוכים פוטנציאליים אחרים מסכני חיים.
  17. במשך שלושת הימים הבאים, לנהל תרופה 0.1 מ"ג / מ"ל ​​עצירות כאבים דרך כתובת IP בjection פעמיים ביום. צג את העכבר יומי.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

העכברים מומתים עשרים ושמונה ימים לאחר הניתוח, ואת הלבבות נקצרים ובחן. העכברים מורדמים עם 50 - 75 מ"ג / ק"ג קטמין ו 5 - 10 מ"ג / ק"ג xylazine. כאשר החיה נמצאת תחת הרדמה נאותה, חלל בית החזה נפתח, באמצעות מחט 23-מד, אשלגן כלורי קר (KCL, 30 מ"מ) מוזרק באזור הבסיס האחורי של הלב. הלב נעצר ב דיאסטולה. עבור אימות נוספת של הקשירה, בלב יוסר מן החי מוזרק עם 4% paraformaldehyde ולאחר מכן 1% הצבע הכחול של האוון. איור 1 מראה את חוסר הכחול של האוון בחדר השמאלי איסכמי. איור 2 מדגים התקנה אינטובציה endotracheal נכונה. איור 3 מציג את המיקום של הצינור החזה עבור thoracentesis באתר החתך הראשוני, עם שכבת השריר לצורך איחוי נסגר סביב הצינור לפני מיצוי אוויר מן גחלל hest. Trichrome מכתים מציג גידול קולגן באזור האוטם (איור 4).

איור 1
איור 1: ההזרקה הכחולה של האוון. הזריקה הכחולה של האוון מגלה חוסר הצבע ברקמת איסכמי, המקומי לאזור אוטם החדר השמאלי. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

איור 2
איור 2: אינטובציה endotracheal. הפגנה של התקנת אינטובציה endotracheal נכונה. המפעיל, לובש כירורגיים כירורגיים, יושב בגובה העיניים עם העכבר. פנס בעצמה גבוהה הוא ממוקד כלפי מטה על גבי באזור קנה הנשימה, transilluminating את oropharynx. גומייה מחוברת מאחורי החותכות העליונות, המאפשרת למפעיל כדי לפתוח את הפה עם המלקחיים המעוקלים. המלקחיים המעוקלים משמשים כדי להחזיק את הלשון לצד להדמיה ברורה. צינורית ההנשמה קטטר תוך ורידי עם ההיכרויות מחט קהה קצה מתקדמת בזווית קלה כלפי מעלה ואילו הפתיחה והסגירה של מיתרי הקול הוא מדמיין. ויזואליזציה של מיתרי הקול פותחים וסוגרים לפני ניסיון האינטובציה היא אחת הנקודות הקריטיות עבור אינטובציה מוצלחת. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

איור 3
איור 3: Thoracentesis. מיקום של צינור החזה משמש thoracentesis, הוכנס במקום החתך המקורי. שכבת השריר לצורך איחוי נסגר סביבהצינור לפני האוויר בתוך חלל החזה מופק בעזרת מזרק, ולאחר מכן בצינור החזה מוסר. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

איור 4
איור 4: Trichrome מכתים. פאנל משמאל: בקרה, הלא LAD-ligated הלב. פנל ימני: ligated-LAD, לב אוטם. Trichrome כתם (מאסון) העסקת פתרון fuchsin ארגמן-חומצה Biebrich, phosphotungstic / פתרון חומצה phosphomolybdic, וכחול אנילין מגלה קולגן מוגברת (כחול) כסמן סיסטיק באזור אוטם שמאל בחתך רוחב החדר. בר = 500 מיקרומטר. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

עם שימוש גובר של מודל MI במעבדות, ההליך המתואר הוא שואף להגדיל את שיעור יעילות הישרדות של העכברים תוך מזעור שלאחר ניתוח הכאבים ואי הנוחות שלהם. פרוטוקול זה שואף למזער תמותה על ידי ביצוע שיפורים רבים להיבטים שונים של הליך קשירת LAD. ישנן כמה הבחנות. מספר מחקרים בעכברים אינטובציה המנצלות קטמין ו xylazine יחד עם isoflurane לזירוז, בשל היתרון של משך ההרדמה הארוך שלהם, הראו עליה בשיעור התמותה 8. השיטה שלנו משתמשת isoflurane רק עבור אינדוקציה, צמצום פוטנציאל משמעותי עבור סיבוכים הקשורים לסמים. עוד פרוטוקול LAD קשירה דומה כולל קנה, הפקת זמן החלמה ממושך צורך מוגבר אימונים מדויקים 9. ההליך המתואר כאן מנצל שיטה לא פולשנית של אינטובציה endotracheal, וכתוצאה מכך loתמותת wer ואת שחזור גבוה של תוצאות. כמו כן, במקום להשתמש רק סכין גילוח חשמלי, ההליך שלנו גם מנצל קרם להסרת שיער להסרת פרווה, מתן להדמיה ברורה לחלוטין של השדה סטרילי בתוך פחות 1 דקות.

הבחנה נוספת מפתח היא המיצוב מחדש של העכבר, אשר מתרחש לאחר, ולא לפני, החתכים הראשוניים. ביצוע החתכים בזמן שהעכבר הוא שכיבה מאפשר ליהנות מתצוגה יותר ישירה ומדויקת אתרים מפורסמים כדוגמת סחוס xiphoid, ולכן תוצאת השחזור גבוה של תוצאות. השיטה שלנו גם משתמשת צמר גפן סטרילי ולא Cauter עבור דימום וניהול, הפחתת מכוויות iatrogenic ואת הסיכון לזיהום. מלבד ההבדלים הללו, החדרת צינור חזה עבור thoracentesis במיוחד של פתק, כשיטה שלנו אינה כרוכה ביצירת חתך חדש עבור הצינור. במקום זאת, הוא כרוך החדרת הצינור לתוך חתך קודם, שוב יורד מורtality. ההליך אנו מתארים גם כולל: (1) השימוש מפשק, המאפשר הדמיה מדויקת יותר ויציבה של העורקים הכליליים; (2) החדרת גזה סטרילי לתוך חלל החזה במהלך ההליך, ובכך להפחית את הסיכון של פציעות ריאות iatrogenic; ו (3) הניהול של מלוחים ביצוע ההליך, אשר הוכח הוא לקצר את זמן ההחלמה ולמנוע היפותרמיה.

למרות שאנו מתארים מודל קשירת קבע, הליך זה יכול גם להיות שונה עבור דגם MI אקוטי. המודל האוטם הלבבי החריף, מתואר גם איסכמיה ו reperfusion, מתייחס 30 - 60 דקות של איסכמיה ואחריו reperfusion ברקמת הלב 7. שיטה חלופית כדי להעריך את גודל האוטם או באזור בסיכון לאחר איסכמיה ו reperfusion הוא מכתים של כלוריד tetrazolium 2% triphenyl (TTC) 10. מכתים TTC מבוסס על היכולת להכתים רקמת קיימא אחרי העלבון איסכמיבשל דהידרוגנאז הנוכחי ברקמת הלב. אנזימים אלה להמיר מרכיב מסיס לרכיב אדום מסיס, ובכך המגדירים את האזור האוטם 11. מודל MI האקוטי יכול לחקות את המנגנונים שמתרחשים מחלת לב אנושית ובכך עשוי להיות כלי שימושי עבור הבהרת אירועי איסכמיה לבבית 10. קשירת LAD יכול להיות מאומת על ידי התבוננות שינוי מיידי בצבע רקמות, מתן יתרון שיטה זו של גרימת MI. שיטה נוספת לבדוק קשירה מוצלחת היא השימוש אק"ג, אם כי זה כרוך בשימוש בציוד יקר ולא בטוח שדבר אפשרי עבור כל המעבדות.

כפי שתוארו לעיל, ישנם מספר שיטות מולקולאריות קלה ובמחיר סביר כדי לאשר את הקשירה לאחר קצירת הלב. שתי טכניקות המוצג לעיל הינם כתמים כחולים של אוון ו trichrome מכתים. הצבע הכחול של האוון מוזרק ישירות לתוך הקשת של AORTA, המציין היכן קיים חוסר זרימת דם. זוהי שיטה מהירה ויעילה מועסקת מייד לאחר קצירת הלב כדי לבדוק אם המודל היה מוצלח כדי למדוד את מידת החסימה כלילית. עבור trichrome מכתים, הלב חייב להיות מחולק ולאחר מכן נתון אימונוהיסטוכימיה. Trichrome מכתים יכול להצביע באזורים פיברוטית פוסט-איסכמי או באזורי לב מושפעים איסכמיה כרונית. ההזרקה שלאחר ניתוח עכברי 2 - 24 שעות לפני להקריב עם 5-ethynyl-2'-deoxyuridine (EDU), אנלוגי עבור thymidine, היא שיטה יעילה עבור מציין תחומי שכפול ה- DNA ואת התפשטות התאים הבאים איסכמיה, במיוחד מחקרים שכללו התחדשות כלי דם 12.

באופן כללי, את המגבלות של המחקר קשירת LAD כוללים את שכיחות התמותה שלאחר הניתוח, הנגרמת בעיקר על ידי נוכחות של הפרעות בקצב הלב, דימום, ו pneumothorax. שנינות אן, thoracentesis יעילההאוט נוסף חתכים בחזה (המתוארים בשיטה הנוכחית), וטיפול שלאחר ניתוח נכון נחוצים כדי למנוע תחלואה ותמותה של חיות. הניטור מאוד זהיר של היפותרמיה שלאחר הניתוח הוא גם קריטי. הקטנת מספר החתכים בצוואר ובחזה (עבור ניתוח בקנה נשימה thoracentesis) מתוארת בשיטה הנוכחית תסייע לשפר את שיעורי הישרדות. ההימנעות של הרדמה טרום ניתוחית בזריקות כפי שיתואר בהמשך יהיה גם לשפר את ההתאוששות שלאחר הניתוח של בעלי חיים.

על מנת לקבל שחזור גבוה, מודל קשירת LAD דורש הכשרה וניסיון קפדניים. המפעיל צריך לבצע מספר שבועות של ניתוחים כדי לקבל את היכולת לעשות אוטמי reproducibly באתרים הרצויים על הלב. אימון וניסיון הם שני גורמים קריטיים עבור ניתוח הישרדות קשירת LAD מוצלח.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
High-Intensity Light Source Harvard Apparatus 72-0215
SurgiSuite Operating Platform Kent Scientific Corporation SurgiSuite Uses a rechargeable, battery-operated far infrared warming pad. Charge overnight before surgery. 
SurgiSuite LED Lighting Kit Kent Scientific Corporation SURGI-5003
Hot Bead Sterilizer Fine Science Tools 18000-45 Preheating takes 15 - 20 min. Instruments take 20 s to sterilize.
Small Rodent Anesthesia System VetEquip Inc. 901810
Isofluorane Piramal Enterprises 66794-017-10
Buprenorphine Rhode Island Hospital Pharmacy NDC 12496-0757-1, 12496-0757-5
Surgical Loupes Roboz RS-6687
Small Rodent Ventilator Harvard Apparatus 73-0043
Lubricating Drops Thermo Fisher Scientific 19-898-350
Electric Razor Kent Scientific Corporation CL 9990-1201
Hair Removal Cream Nair
Medical Tape Thermo Fisher Scientific 18-999-380
Betadine Thermo Fisher Scientific 19-027136
70% Isopropanol Wipes Thermo Fisher Scientific 22-363-750
Surgical Drapes Braintree SP-TS
Surgical Gloves Thermo Fisher Scientific 18999102D
5-0 Polypropylene Sutures  Ethicon 8630G
8-0 Nylon Sutures Fine Science Tools 12051-08
Platinum-Cured Tubing Harvard Apparatus 72-1042  0.3 mm inside diameter x 0.6 mm outside diameter
0.9% Saline Thermo Fisher Scientific 19-310-207
4-0 Polypropylene Sutures Ethicon 8631G
1 CC Syringe with 25-Gauge Needle  Thermo Fisher Scientific 14-826-100
Scissors Kent Scientific Corporation INSS600225
Forceps Kent Scientific Corporation INS700100
Cotton Swabs Thermo Fisher Scientific 23-400-118
IV Catheter, 20-Gauge Thermo Fisher Scientific  NC9892181
Retractor Kent Scientific Corporation INS 750369
Forceps Fine Science Tools 11003-12
Dissecting Forceps, Straight Kent Scientific Corporation INS 700101
Dissecting Forceps, Curved Kent Scientific Corporation INS 700103
Hemostatic Forceps, Straight Kent Scientific Corporation INS 750451
Hemostatic Forceps, Curved Kent Scientific Corporation INS 750452
Tissue Forceps Kent Scientific Corporation INS 700131
Needle Holder Kent Scientific Corporation INS 600109
Scissors  Kent Scientific Corporation INS 600225

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Hausenloy, D. J., Yellon, D. M. New directions for protecting the heart against ischaemia-reperfusion injury: targeting the Reperfusion Injury Salvage Kinase (RISK)-pathway. Cardiovasc Res. 61 (3), 448-460 (2004).
  2. Roffi, M., et al. 2015 ESC Guidelines for the management of acute coronary syndromes in patients presenting without persistent ST-segment elevation. Eur Heart J. 37 (3), 267-315 (2015).
  3. Kumar, A., Cannon, C. P. Acute Coronary Syndromes: Diagnosis and Management, Part I. Mayo Clin Proc. 84 (10), 917-938 (2009).
  4. Eitan, A., Nikolsky, E. Antithrombotic therapy in patients with acute coronary syndromes: how to make the right choice. Minerva Med. 104 (4), 357-381 (2013).
  5. Abbate, A., Bussani, R., Amin, M. S., Vetrovec, G. W., Baldi, A. Acute myocardial infarction and heart failure: role of apoptosis. Int J Biochem Cell Biol. 38 (11), 1834-1840 (2006).
  6. Zheng, Z., et al. Nebivolol protects against myocardial infarction injury via stimulation of beta 3-adrenergic receptors and nitric oxide signaling. PLOS ONE. 9 (5), 98179 (2014).
  7. Tarnavski, O., et al. Mouse cardiac surgery: comprehensive techniques for the generation of mouse models of human diseases and their application for genomic studies. Physiol Genomics. 16 (3), 349-360 (2004).
  8. Buitrago, S., Martin, T. E., Tetens-Woodring, J., Belicha-Villanueva, A., Wilding, G. E. Safety and Efficacy of Various Combinations of Injectable Anesthetics in BALB/c Mice. J Am Assoc Lab Anim Sci. 47 (1), 11-17 (2008).
  9. Kolk, M. V., et al. LAD-Ligation: A Murine Model of Myocardial Infarction. J Vis Exp. (32), e1438 (2009).
  10. Wu, Y., Yin, X., Wijaya, C., Huang, M. H., McConnell, B. K. Acute myocardial infarction in rats. Journal of visualized experiments : J Vis Exp. (48), (2011).
  11. Ferrera, R., Benhabbouche, S., Bopassa, J. C., Li, B., Ovize, M. One hour reperfusion is enough to assess function and infarct size with TTC staining in Langendorff rat model. Cardiovasc Drugs Ther. 23 (4), 327-331 (2009).
  12. Zeng, C., et al. Evaluation of 5-ethynyl-2'-deoxyuridine staining as a sensitive and reliable method for studying cell proliferation in the adult nervous system. Brain Res. 1319, 21-32 (2010).

Tags

לרפואה גיליון 122 אוטם שריר הלב איסכמיה השמאלי הקדמי היורד לב כלילית קשירת LAD thoracentesis אינטובציה endotracheal ניתוח היסטולוגית בעכברים חסימה קבועה
Murine שמאל Anterior יורד (LAD) קשירת עורקים הכליליים: דגם משופר או פשוט עבור אוטם שריר לב
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Reichert, K., Colantuono, B.,More

Reichert, K., Colantuono, B., McCormack, I., Rodrigues, F., Pavlov, V., Abid, M. R. Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction. J. Vis. Exp. (122), e55353, doi:10.3791/55353 (2017).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter