Abstract
Iskemisk hjertesykdom (IHD), eller akutt koronarsyndrom (ACS), er en av de fremste årsakene til død i USA. IHD er kjennetegnet ved redusert blodtilførsel til hjertet, noe som resulterer i tap av oksygen til og den påfølgende nekrose av hjertemuskelen. MI-modellen har vunnet popularitet for sin bruk som en kortsiktig iskemi-reperfusjon modell og en langsiktig permanent ligation modell. Nedenfor beskriver vi en pålitelig metode for permanent ligering av LAD. Med musen genteknologi blir mer avansert, og med en økende tilgjengelighet av kvalitets murine kirurgiske instrumenter, har musen blitt en populær modell for MI operasjoner. Vår kirurgisk modell omfatter bruk av en lett reversibel bedøvelse for rask gjenoppretting av mus; en minimalt invasiv endotracheal intubasjon uten å involvere et trakeotomi; og en thoracentesis gjennom den opprinnelige torakotomi området uten å skape et ytterligere snitt i brystet, som ergjort i noen andre metoder, for effektivt å fjerne overskytende blod og luft fra brysthulen. Denne fremgangsmåten er forholdsvis mindre inngrep enn andre fremgangsmåter, noe som dramatisk reduserer kirurgi og postoperative komplikasjoner og dødelighet og forbedrer reproduserbarhet.
Introduction
Koronarsykdom, eller ACS, er den mest utbredte kardiovaskulær hendelse, og vil bli ansett som den viktigste årsaken til sykelighet og dødelighet på verdensbasis i 2020 en. Årsaken til ACS er tilstedeværelsen av et hjerteinfarkt trombose på grunn av brudd på en koronar aterosklerotisk plakk som blokkerer eller reduserer blodstrømmen til hjertevevet 2. Derfor finnes det kliniske tegn i overensstemmelse med tilstedeværelsen av akutt myokardialt ischemi, så som myokardinfarkt (MI) 3, 4. MI fører til et tap i massen av kardiomyocytter og en progresjon til patologisk ventrikulær remodeling, noe som kan føre til ventrikulær dysfunksjon og hjertesvikt 5, 6.
En av de mest effektive måter å studere IHD har vært å etterligne humant hjerteinfarkt i en dyremodell. Dette oppnås ved å okkludere LAD imus. Ved hjelp av denne modellen, studerer vi hvordan hjertet kan være beskyttet mot skade som følge av IHD.
I løpet av det siste tiåret har forskere gått fra å bruke større dyremodeller til mindre dyr, inkludert skiftet fra rotter til mus. Den mindre musemodell er i ferd med å foretrekke av mange grunner, blant annet deres lille størrelse, stort kullstørrelse, lav pris å vedlikeholde, og kort drektighetsperioden, så vel som for den ekspansive tilgjengeligheten av transgene og genet knockout-modeller 7. Selv mus er små i størrelse, har nye kirurgiske instrumenter er spesielt utviklet for dem hjulpet i denne utviklingen. Vår metode benytter disse nye kirurgiske instrumenter.
Mens flere metoder gjennomføre en invasiv trakeotomi, bruker vi en mindre invasiv metode for endotrakeal intubasjon. Ved hjelp av overliggende belysning i munnhulen, intubere vi uten å skape noen innsnitt, noe som gir en sikrere og mindre traumatisk opplevelse for tHan dyr. Musen anbringes så på en ventilator og holdt på isofluran under hele prosedyren. På grunn av den korte varigheten av anestesi som produseres av medikamentet, tar det bare noen få minutter for dyret å komme seg fra bedøvelsen når den er avviklet. Vår kirurgisk Modellen inkluderer også en minimal invasiv thoracentesis. Den forsiktig fjerning av blod og overskuddsluft fra brysthulen ved hjelp thoracentesis gjennom den opprinnelige torakotomi innsnitt har adressert en vanlig postoperative komplikasjoner under LAD rings: spenningen pneumothorax. Denne fremgangsmåten, noe som eliminerer behovet for de to ytterligere innsnitt som brukes i andre fremgangsmåter-en for trakeotomi og en annen for thoracentesis-, har gitt mindre postoperative komplikasjoner og har drastisk redusert dødelighet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Dette dyret protokollen er gjennomgått og godkjent av Institutional Animal Care og bruk Committee (IACUC) ved Rhode Island Hospital.
1. Anestesi og Intubering
- Vei musen for å beregne dosen av postoperativ smertestillende medikamenter.
- Den plasseres i en induksjonskammeret og levere 4% isofluran til 9 - 10 min, overvåking av dyr gjennom. Slå på en varm perle sterilisator, slik at apparatet kan forvarme til omkring 250 ° C. Forvarming vil ta 15-20 min.
- Når mus når en dyp plan av anestesi, med en pustehastighet på omtrent 32 åndedrag / min, plasseres musen liggende på en plate av styrenskum, og bruke et elastisk bånd er festet under de beste fortenner for å holde munnen åpen. Bekreft sedasjon ved å utføre en tå klype. Plasser en høy-intensitet-lys over musen slik at oropharynx kan visualiseres.
- Bruk buet pinsett for å åpne kjeve og et annet partang for å løfte tunge ut av veien. Sørg for å intubere mens plassert på eller litt under øyehøyde med liket av musen. Bruken av kirurgiske luper anbefales.
- Visual åpning og lukking av stemmebåndene. Når den er åpen, sette inn en 20-gauge, en i intravenøs (IV) kateter med en butt spiss nål innføreren. Bruk nålen for å styre kateteret til luftrøråpningen, men unngå å sette nålen inn i trakea. Verifisering av korrekt plassering kan gjøres ved hjelp av en plastisk overføringspipette.
- Overfør den intubert musen til en drifts overflate utstyrt med en varmeinnretning. Koble musen til en liten gnager ventilator settes til et slagvolum på 150 ul / slag og et slagtall på 130 slag / min.
- Lever 2,5% isofluran. Bekreft intubasjon ved å sjekke for bilateral brystet stige. Kontroller anestesi ved å utføre en tå klype. Musen kan trenge 5 - 10 min på ventilator å bli helt bedøvet.
- Tape ned intubering røret ved å forbinde området mellom respiratoren og IV kateter. Tape ned ekstremiteter. Plasser sterile smøre dråper på øynene.
- Trimme den ventrale venstre side av toraks med en elektrisk barbermaskin. Støv av den barberte pels med tørrservietter og påføre et lite lag av hårfjerning krem med en steril bomullspinne. Kremen bør forbli i kontakt med hårsekkene for ca 30 - 45 s.
- Mens krem prosesser sted tre sterilt bomullspinner i tre 1,5 ml rør fylt med Betadine å suge. Ved hjelp av kluter fuktet med destillert vann, tørker bort fløte og pels.
- Rens det kirurgiske felt tre ganger, alternerende Betadine og sterile 70% isopropanol prep pads, rengjøring i en sirkulær bevegelse beveger seg fra sentrum til periferien. Plasser en steril drapere med et kvart størrelse hull over kirurgiske feltet av musen.
- Rengjør området rundt mouse med 70% etanol. Kontroller anestesi gang med en tå klype.
3. LAD hemorroider
- Plasser de autoklaverte kirurgiske instrumentene i varm perle sterilisator som er forvarmet til 250 ° C i ca. 20 sek. Plasser steriliserte instrumenter på sterile autoklavert kirurgisk drapere. Don kirurgiske hansker.
- Bruk fin-tip pinsett til å løfte forsiktig på huden på et punkt ca 5 mm til venstre for fremtredende xiphoid brusk. Med en kirurgisk skalpell med en nr 10 blad for å opprette et vertikalt snitt i huden fra dette punkt oppover, til nivået av det manubrium.
- Bruk buet pinsett for å forsiktig skille huden og muskellagene. Åpne muskelen laget, etter huden snittet. Sett to 5-0 suturer polypropylen gjennom muskellaget, en på hver side av snittet, og feste suturene midlertidig med klemmer for å holde muskelen laget åpen.
- Identifisere og gjøre et snitt i tredje interkostalrom, etternaturlige vinkel av brystkasse. Fjern tapen fra venstre ekstremiteter av musen og sikre dens venstre bakre foten sin høyre bak fot med tape. Skjær et lengre stykke tape og sikre dens venstre fremre fot til arbeidsflaten i en noe forhøyet stilling. Rengjør hanskene med 70% etanol.
- Bruk en retractor å forsiktig fra hverandre i 3. og 4. ribbeina. Skjær en liten del av sterilt gasbind, ca. 1 i x ½ i, og dyppe den i steril 0,9% saltoppløsning. Presse ut overskytende saltoppløsning og bruke tang for å forsiktig setter gasen mot venstre lungen for å hindre utilsiktet lungeskade under prosedyren.
- Fjern forsiktig den tynne posen med pinsett.
- Rive en liten mengde av bomull av en steril bomullspinne og rull den inn i en liten ball. Dypp denne bomullsdott i steril 0,9% saltoppløsning og tørk forsiktig over overflaten av hjertet for å verdsette arteriene. Skyv venstre atriet oppover og finn koronararteriene etterNeath.
- Identifiser LAD og passerer et 8-0 nylon sutur under LAD; komplett to kast for å sikre ligering. Hvis ligation er vellykket, venstre ventrikkel distal fra ligaturen vilje Blanch.
- Bruk pinsett, fjerner den innsatte tidligere gasbind, og deretter forsiktig fjerne retractor. Sett en 6-in, 25-gauge fleksibel slange festet til en 25-gauge nål inn i brysthulen via toraktomi åpningen. Advance omtrent 1 - 2 i av rør inn i rommet over den venstre lungen. Returner musen til en liggende stilling og rengjør hansker med 70% etanol.
- Bruk 5-0 polypropylen suturer på en enkel avbrutt mønster for å lukke brystkasse, holde brystet røret på plass. Fjern de to stingene som holder muskellag åpen. Bruk 5-0 polypropylen suturer i en enkel kontinuerlig mønster for å lukke muskellaget, igjen holder brystet røret på plass.
- Fest en 1-ml sprøyte til den 25-gauge nål på brystet røret. Trekk forsiktig oppover på sprangetr mens samtidig etter hvert ekstrahering av brystet røret fra brysthulen med pinsett. Ekstraher rørledningen langsomt, da dette trinnet fjerner overskudd av luft og blod, som ellers ville blitt fanget i brysthulen, og resultere i en pneumothorax.
- Når sprøyten er fullstendig, tas sprøyten fra nålen og bli kvitt avfallet i en avfallsbegerglass eller en vask. Fortsett denne prosessen til brystet røret var fullstendig ekstrahert. Sikre at brystet er tett forseglet.
- Reduser isofluran til 1,5%. Lukk huden med 4-0 polypropylen sutur på en enkel avbrutt mønster. Slå av isofluran vaporizer av.
- Administrere 0,1 mg / mL buprenorfin i 0,9% saltløsning via en intraperitoneal (IP) injeksjon. Topisk anvendelse 2 mg / ml lidokain med 2 mg / ml Bupivacaine i 0,9% saltvann til snittet. Administrere mellom 200 til 500 ul av 0,9% saltløsning via en subkutan injeksjon, skalering salt mengde til vekten av musen.
- Vent fem minutter etter Administering de smertestillende medikamenter for å fjerne musen fra intubasjon røret. Dette hjelper til overgangen fra ventilatoren.
- Hvis musen ikke har en bilateral brystet stige en gang av ventilator, utfører nål dekompresjon. For å gjøre dette, å innføre en 25-gauge nål og en steril 1 ml sprøyte mellom det 3. og 4. ribber inntil den kommer inn i brysthulen, betegnet ved en plutselig reduksjon i motstand. Trekk opp forsiktig på stempelet for å fjerne overskudd av luft.
- Når musen viser en tilstrekkelig bilateral pustehastighet og dybde og reagerer på en tå klemme, den plasseres i en ren utvinning bur under en varmelampe. Gi musen med fuktig mat og en vannflaske, overvåking i en laminær strømningshette i 15 - 20 min. Monitor for en overdrevet puste innsats, store blødninger, eller andre potensielt livstruende komplikasjoner.
- For de neste tre dagene, administrere 0,1 mg / ml buprenorfin smertestillende medikamenter via et IP-ijection to ganger daglig. Overvåk mus daglig.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Musene avlives tjueåtte dager etter operasjonen, og hjertene er høstet og undersøkt. Musene ble bedøvet med 50-75 mg / kg ketamin og 5 - 10 mg / kg xylazin. Når dyret er under adekvat anestesi, blir brysthule ble åpnet, og ved anvendelse av en 23-gauge nål, blir kald kaliumklorid (KCl, 30 mM) injisert inn i den bakre basal region av hjertet. Hjertet er arrestert i diastolen. For ytterligere validering av ligering, ble hjertet fjernet fra dyret og blir injisert med 4% paraformaldehyd og deretter 1% Evans blått fargestoff. Figur 1 viser mangel på Evans blå i den ischemiske venstre ventrikkel. Figur 2 viser en skikkelig endotrakeal intubasjon oppsett. Figur 3 viser plasseringen av brystet rør for thoracentesis i den første snittstedet, med muskel lag syes lukket rundt røret før luftuttaket fra chest hulrom. Trichrome farging viser en økning i kollagen i infarktområdet (figur 4).
Figur 1: Evan Blue Injection. Den Evans blått injeksjon viser en mangel på fargestoff i ischemisk vev, lokalisert til venstre ventrikkel infarktområdet. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 2: Endotrakeal intubering. Demonstrasjon av en skikkelig endotrakeal intubasjon oppsett. Operatøren, iført kirurgiske luper, sitter i øyehøyde med musen. En høy intensitet belysnings er rettet nedover på tracheal-regionen, gjennomlyse oropharynx. Et elastisk bånd blir hektet bak de øvre fortenner, slik at operatøren kan åpne munnen med de buede tang. De buede tang brukes til å holde tungen til side for klar visualisering. Et intravenøst kateter intubering kanyle med en butt spiss nål innførings føres fremad med en skrå, mens åpning og lukking av stemmebåndene synliggjøres. Visualisering av stemmebåndene åpner og lukker før intubasjon forsøk er en av de kritiske punktene for en vellykket intubasjon. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 3: Thoracentesis. Plassering av brystet rør som anvendes for thoracentesis, innsatt i den opprinnelige snittstedet. Muskel lag sutureres lukket rundtrøret før luften inne i brysthulen blir ekstrahert med en sprøyte, og deretter brystet røret er fjernet. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 4: Trichrome farging. Venstre panel: Kontroll, ikke-LAD-ligert hjerte. Høyre panel: LAD-ligert, infarkt hjerte. Trikromfarge (Masson) ved anvendelse av Biebrich skarlagen syrefuksin løsning, fosfor / fosforsyreoppløsningen, og anilin blå viser øket kollagen (blå) som en markør for fibrose i tverrsnitt venstre hjertekammer infarktområdet. Bar = 500 pm. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Med økende bruk av MI-modell i laboratorier, søker den beskrevne fremgangsmåten for å øke effektiviteten og overlevelse av musene samtidig minimere deres post-operativ smerte og ubehag. Denne protokollen streber etter å minimere dødelighet ved å foreta tallrike forbedringer av forskjellige aspekter av fore LAD-ligeringsprosedyren. Det er noen forskjeller. Noen murine intubasjon studier som benytter ketamin og xylazin sammen med isofluran for induksjon, på grunn av fordelen ved deres lengre varighet av anestesi, har vist økt dødelighet 8. Vår metode bruker bare isofluran for induksjon, noe som reduserer potensialet for legemiddelrelaterte komplikasjoner. En annen lignende LAD ringsprotokollen omfatter en trakeotomi, produsere en utvidet utvinning tid og et økt behov for nøyaktig trening 9. Fremgangsmåten som beskrives her anvender en ikke-invasiv metode for endotracheal intubasjon, noe som resulterer i lower dødelighet og høyere reproduserbarhet av resultatene. Også, i stedet for bare ved hjelp av en elektrisk barbermaskin, vår fremgangsmåte utnytter også hårfjerningskrem for pels fjerning, noe som gir en fullstendig klar visualisering av det sterile felt på mindre enn 1 min.
En annen nøkkel forskjell er reposisjonering av musen, som oppstår etter, heller enn før, de første snitt. Å lage innsnittene mens muse er ryggen gjør det mulig for en mer direkte og nøyaktig visualisering av landemerker som xifoid kartilasje, noe som resulterer i høyere reproduserbarhet av resultatene. Vår metode bruker også sterile bomullspinner i stedet for en Cauter for blødning ledelse, mink iatrogen brannskader og fare for infeksjon. Bortsett fra disse forskjellene, brystet Innsetting for thoracentesis er spesielt å merke seg, som vår metode ikke innebærer å lage et nytt innsnitt for røret. I stedet omfatter det å sette røret inn i en foregående innsnitt, igjen avtar mortality. Prosedyren vi beskriver også omfatter: (1) bruk av en tilbaketrekkings, som muliggjør en mer nøyaktig og stabil visualisering av koronararteriene; (2) innføring av sterilt gasbind inn i brysthulen i løpet av fremgangsmåten, og dermed redusere risikoen for iatrogene lungeskader; og (3) administrering av saltvann ved å følge prosedyren, noe som har vist seg å både redusere utvinningen tid og hindre nedkjøling.
Selv om vi beskrive en permanent ligering modellen, kan denne fremgangsmåten også bli modifisert for en akutt MI modell. Den akutte MI modellen, også beskrevet som iskemi og reperfusjon, refererer til 30 - 60 min av ischemi fulgt av reperfusjon i hjertevevet 7. En alternativ metode for å vurdere infarktstørrelse eller området i fare etter ischemi og reperfusjon, er fargingen av 2% trifenyltetrazoliumklorid (TTC) 10. TTC farging er basert på evnen til å sette flekker levedyktig vev etter ischemisk skadepå grunn av dehydrogenaser som er tilstede i hjertevev. Disse enzymene konvertere en oppløselig komponent til en uløselig røde komponent, for derved å opptegning av infarktområdet 11. Den akutte MI Modellen kan etterligne de mekanismene som forekommer i menneskehjertesykdom og kan således være et nyttig verktøy for å belyse hendelsene i myokardial ischemi 10. Den LAD Rings kan verifiseres ved å observere en umiddelbar endring i vev farge, noe som gir en fordel for denne fremgangsmåte til å indusere en MI. En annen metode for å sjekke for vellykket ligation er bruk av elektrokardiogram, selv om dette innebærer bruk av dyrt utstyr, og kan ikke være mulig for alle laboratorier.
Som beskrevet ovenfor, er det flere enkle og rimelige molekylære teknikker for å bekrefte sammenbindings etter høsting hjertet. De to teknikkene vist ovenfor er Evans blått-farging og Trichrome farging. Evans blå fargestoff injiseres direkte inn i buen på aoRTA, som angir hvor det er en mangel på blodstrøm. Dette er en rask og effektiv metode som anvendes umiddelbart etter oppsamling av hjertet for å teste hvorvidt modellen var vellykket og for å måle graden av koronar blokkering. For Trichrome farging, hjertet må være seksjonert og deretter underkastet immunhistokjemi. Trichrome farging kan indikere post-iskemiske fibrotiske områder eller kardiale områder som påvirkes av kronisk iskemi. Injeksjonen av postoperativ mus 2-24 timer før avlivelse med 5-etynyl-2'-deoksyuridin (EDU), en analog av tymidin, er en effektiv metode for å indikere områder av DNA-replikasjon og celleformering etter iskemi, spesielt i studier med vaskulære regenerering 12.
Generelt er begrensningene av LAD rings studien omfatter forekomsten av postoperativ dødelighet, forårsaket hovedsakelig av nærværet av hjertearytmier, blødning, og pneumothorax. En effektiv thoracentesis, viddHout ytterligere bryst innsnitt (beskrevet i den aktuelle metoden), og passende postoperativ behandling er nødvendig for å unngå morbiditet og mortalitet hos dyrene. Den svært nøye overvåking av postoperativ hypotermi er også kritisk. Reduksjonen i antall halsen og brystet innsnitt (for trakeotomi og thoracentesis) som er beskrevet i den aktuelle metoden vil bidra til å forbedre overlevelse. Unngåelsen av injiserbare preoperative bedøvelsesmidler som er beskrevet her vil også forbedre den postoperative av dyrene.
For å oppnå høy reproduserbarhet, krever LAD ringsmodell grundig opplæring og erfaring. Operatøren må utføre flere uker av operasjoner for å få muligheten til å reproduserbart gjøre infarkter på ønskede steder på hjertet. Trening og erfaring er to viktige faktorer for en vellykket LAD ligation overleve operasjonen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| High-Intensity Light Source | Harvard Apparatus | 72-0215 | |
| SurgiSuite Operating Platform | Kent Scientific Corporation | SurgiSuite | Uses a rechargeable, battery-operated far infrared warming pad. Charge overnight before surgery. |
| SurgiSuite LED Lighting Kit | Kent Scientific Corporation | SURGI-5003 | |
| Hot Bead Sterilizer | Fine Science Tools | 18000-45 | Preheating takes 15 - 20 min. Instruments take 20 s to sterilize. |
| Small Rodent Anesthesia System | VetEquip Inc. | 901810 | |
| Isofluorane | Piramal Enterprises | 66794-017-10 | |
| Buprenorphine | Rhode Island Hospital Pharmacy | NDC 12496-0757-1, 12496-0757-5 | |
| Surgical Loupes | Roboz | RS-6687 | |
| Small Rodent Ventilator | Harvard Apparatus | 73-0043 | |
| Lubricating Drops | Thermo Fisher Scientific | 19-898-350 | |
| Electric Razor | Kent Scientific Corporation | CL 9990-1201 | |
| Hair Removal Cream | Nair | ||
| Medical Tape | Thermo Fisher Scientific | 18-999-380 | |
| Betadine | Thermo Fisher Scientific | 19-027136 | |
| 70% Isopropanol Wipes | Thermo Fisher Scientific | 22-363-750 | |
| Surgical Drapes | Braintree | SP-TS | |
| Surgical Gloves | Thermo Fisher Scientific | 18999102D | |
| 5-0 Polypropylene Sutures | Ethicon | 8630G | |
| 8-0 Nylon Sutures | Fine Science Tools | 12051-08 | |
| Platinum-Cured Tubing | Harvard Apparatus | 72-1042 | 0.3 mm inside diameter x 0.6 mm outside diameter |
| 0.9% Saline | Thermo Fisher Scientific | 19-310-207 | |
| 4-0 Polypropylene Sutures | Ethicon | 8631G | |
| 1 CC Syringe with 25-Gauge Needle | Thermo Fisher Scientific | 14-826-100 | |
| Scissors | Kent Scientific Corporation | INSS600225 | |
| Forceps | Kent Scientific Corporation | INS700100 | |
| Cotton Swabs | Thermo Fisher Scientific | 23-400-118 | |
| IV Catheter, 20-Gauge | Thermo Fisher Scientific | NC9892181 | |
| Retractor | Kent Scientific Corporation | INS 750369 | |
| Forceps | Fine Science Tools | 11003-12 | |
| Dissecting Forceps, Straight | Kent Scientific Corporation | INS 700101 | |
| Dissecting Forceps, Curved | Kent Scientific Corporation | INS 700103 | |
| Hemostatic Forceps, Straight | Kent Scientific Corporation | INS 750451 | |
| Hemostatic Forceps, Curved | Kent Scientific Corporation | INS 750452 | |
| Tissue Forceps | Kent Scientific Corporation | INS 700131 | |
| Needle Holder | Kent Scientific Corporation | INS 600109 | |
| Scissors | Kent Scientific Corporation | INS 600225 |
References
- Hausenloy, D. J., Yellon, D. M. New directions for protecting the heart against ischaemia-reperfusion injury: targeting the Reperfusion Injury Salvage Kinase (RISK)-pathway. Cardiovasc Res. 61 (3), 448-460 (2004).
- Roffi, M., et al. 2015 ESC Guidelines for the management of acute coronary syndromes in patients presenting without persistent ST-segment elevation. Eur Heart J. 37 (3), 267-315 (2015).
- Kumar, A., Cannon, C. P. Acute Coronary Syndromes: Diagnosis and Management, Part I. Mayo Clin Proc. 84 (10), 917-938 (2009).
- Eitan, A., Nikolsky, E. Antithrombotic therapy in patients with acute coronary syndromes: how to make the right choice. Minerva Med. 104 (4), 357-381 (2013).
- Abbate, A., Bussani, R., Amin, M. S., Vetrovec, G. W., Baldi, A. Acute myocardial infarction and heart failure: role of apoptosis. Int J Biochem Cell Biol. 38 (11), 1834-1840 (2006).
- Zheng, Z., et al. Nebivolol protects against myocardial infarction injury via stimulation of beta 3-adrenergic receptors and nitric oxide signaling. PLOS ONE. 9 (5), 98179 (2014).
- Tarnavski, O., et al. Mouse cardiac surgery: comprehensive techniques for the generation of mouse models of human diseases and their application for genomic studies. Physiol Genomics. 16 (3), 349-360 (2004).
- Buitrago, S., Martin, T. E., Tetens-Woodring, J., Belicha-Villanueva, A., Wilding, G. E. Safety and Efficacy of Various Combinations of Injectable Anesthetics in BALB/c Mice. J Am Assoc Lab Anim Sci. 47 (1), 11-17 (2008).
- Kolk, M. V., et al. LAD-Ligation: A Murine Model of Myocardial Infarction. J Vis Exp. (32), e1438 (2009).
- Wu, Y., Yin, X., Wijaya, C., Huang, M. H., McConnell, B. K.
- Ferrera, R., Benhabbouche, S., Bopassa, J. C., Li, B., Ovize, M. One hour reperfusion is enough to assess function and infarct size with TTC staining in Langendorff rat model. Cardiovasc Drugs Ther. 23 (4), 327-331 (2009).
- Zeng, C., et al. Evaluation of 5-ethynyl-2'-deoxyuridine staining as a sensitive and reliable method for studying cell proliferation in the adult nervous system. Brain Res. 1319, 21-32 (2010).
