Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

एलर्जीक राइनाइटिस और / या अस्थमा के साथ चीनी दक्षिणी इलाकों में घास पराग एलर्जी के अध्ययन के लिए एक घटक-सुलझाया नैदानिक ​​दृष्टिकोण

Published: June 4, 2017 doi: 10.3791/55723
* These authors contributed equally

Summary

यह काम एक प्रोटोकॉल का वर्णन करता है जो दक्षिणी चीन के मरीजों के एक समूह में एलर्जी रिनिटिस और / या अस्थमा के साथ घास पराग एलर्जी के संवेदीकरण के अध्ययन के लिए एक घटक-सुलभ दृष्टिकोण का उपयोग करता है।

Abstract

घास पराग को संवेदीकरण एलर्जी से ग्रस्त परागों के लिए एक वैश्विक जोखिम को लगाता है। हालांकि पराग पराग एलर्जी के स्थानीय जांच पर निर्भर करता है, हालांकि इस विषय पर डेटा दक्षिण चीन में सीमित है। किसी भी उपलब्ध आंकड़ों को स्व-रिपोर्ट प्रश्नावली, त्वचा के चुभन परीक्षण, और कच्चे तेल के अर्क के उपयोग से कुल या विशिष्ट आईजीई परीक्षणों द्वारा प्राप्त किया गया था। कई कारणों से, इन विधियां अविश्वसनीय हैं बैरमुडा घास, टिमोथी घास पर सीरम एसआईजीई रिएक्टर, और हामुलस ग्रेटर गुआंगज़ो (दक्षिणी चीन के सबसे बड़े शहर और उसके बाहरी इलाके) से एलर्जिक राइनाइटिस और / या अस्थमा के रोगियों के एक समूह में एलर्जी के कारण एक घटक के रूप में पूरी तरह से स्वचालित इम्युनोसाय विश्लेषक का उपयोग करके जांच की जाती है -रोडेड निदान (सीआरडी) उपकरण

पहली बार, बरमूडा घास के एक बहुत उच्च प्रसार एसआईजीई सकारात्मकता चीनी दक्षिणी में एलर्जी रिनिटिस और / या अस्थमा के साथ प्रदर्शित किया गया था। इन रोगियों में, संवेदीकरण का एक सूक्ष्म प्रसारतीमुथियुस घास के लिए और Humulus scandens भी नोट किया गया था, जो क्रॉस-प्रतिक्रिया से उत्पन्न हो सकता है, क्योंकि बाद के दो क्षेत्र में सामान्य नहीं हैं। यह एलर्जी के घटकों का पता लगाने के द्वारा भी समर्थित था।

पूरी तरह से स्वचालित इम्युनोसाय विश्लेषक क्षेत्र, प्रयोगशालाओं और संस्थानों के बीच और समय के साथ संतोषजनक स्थिरता प्रदान कर सकते हैं। उपकरण की स्वचालितता एक मानकीकृत पहचान को सक्षम कर सकती है जो सीआरडी के आगमन से पहले आसानी से प्रकट नहीं हुई होगी।

यह एक ऐसा अध्ययन है जो दक्षिण चीन में घास पराग एलर्जी के संवेदीकरण की जांच के लिए एक सीआरडी दृष्टिकोण का उपयोग करता है। यह साहित्य में वर्तमान साक्ष्य के लिए जोड़ता है इन निष्कर्षों को मान्य करने के लिए भविष्य के अध्ययन की आवश्यकता है हालांकि, हालांकि सीआरडी एक उपयोगी उपकरण है, पूर्ण-स्वचालित प्रतिरक्षा विश्लेषक के साथ किए गए निष्कर्ष अन्य प्रयोगशाला जांच, नैदानिक ​​मूल्यांकन, और चिकित्सक विशेषज्ञता के लिए विकल्प नहीं लेना चाहिए।

Introduction

लगभग 50% इम्युनोग्लोब्युलिन ई (आईजीई) से संबंधित एलर्जी के लिए घास पराग खाता है और इसकी हवाई प्रकृति की वजह से, एलर्जी से जुडी बीमारियों, विशेष रूप से अस्थमा और एलर्जी रैनिटिस 1 , 2 , 3 , 4 के वैश्विक जोखिम को रोकता है। एक क्षेत्र में घास पराग एलर्जी के खिलाफ रोकथाम पराग एलर्जी के स्थानीय वितरण के बारे में जानकारी पर निर्भर करता है। दुर्भाग्य से, संवेदीकरण एलर्जी के स्पेक्ट्रम को जगह से जगह-भिन्न होता है-एक अवलोकन जिसे आम तौर पर क्षेत्रीय विशिष्टता के रूप में जाना जाता है

चीन में, एक विशाल पूर्व-एशियाई क्षेत्र, पिछले दशकों में वर्तमान में इस देश के दक्षिणी हिस्से से उपलब्ध सीमित डेटा द्वारा घास पराग संवेदीकरण की क्षेत्रीय विशिष्टता अधिक जटिल है। आंकड़ों में इतनी कम कमी ने घास पराग को समग्र रूप से दिखाने में कठिनाई पैदा की हैइस बड़े देश में तनाई 6 इसके अतिरिक्त, चीनी दक्षिणीरियों पर बहुत सीमित डेटा बड़े पैमाने पर आत्म-रिपोर्ट प्रश्नावली, त्वचा की चुभन परीक्षण (प्रयोगशाला सीरम परीक्षणों के बजाय), कुल आईजीई माप (एलर्जी-विशिष्ट आईजीई (एसआईजीई) के बजाय), और एलआईजीआरएजी (एसआईजीई) की पहचान से एलर्जी के लिए प्राप्त किया गया था बजाय घटक अणु allergen)।

एलर्जी के लक्षणों की आत्म-रिपोर्टिंग अविश्वसनीय हो सकती है जब विशिष्ट एलर्जी का संबंध है स्किन प्रिक टेस्ट, हालांकि व्यापक रूप से सुलभ हैं, गैर-मानक, कच्चे एलर्जीन अर्क के उपयोग में शामिल होते हैं, जो स्वयं को अन्य संवेदनशील घटक शामिल कर सकते हैं जो परिणाम व्याख्या को उलझा देते हैं। त्वचा के प्रिक टेस्ट की विश्वसनीयता भी गंभीर रूप से एलर्जीवादियों या विशेषज्ञ नर्सों, हालिया हिस्टामाइन उपयोग, और रोगी अनुपालन (कभी-कभी छोटे बच्चों के लिए बहुत मुश्किल) द्वारा कुशल हेरफेर पर निर्भर करती है। कुल आईजीई एलर्जी की जांच करने के लिए उपयोगी है, लेकिन इसे समझ में नहीं आता हैएक रोगी में एलर्जन ई। इसके अलावा, लगभग सभी एलर्जीजनों में कई एलर्जीन घटक अणु होते हैं। प्रमुख घटकों ( अर्थात्, डार पी 1 और डर पी 2, घर के धूल के कण से) संवेदनशीलता एक "वास्तविक" एलर्जी (अन्य एलर्जी के साथ क्रॉस-प्रतिक्रियाओं के कारण झूठी सकारात्मकता की बजाय एक विशिष्ट एलर्जी के लिए एलर्जी), लेकिन संवेदीकरण कुछ लोगों के लिए ( यानी, क्रॉस-रिएक्टिव डर पी 10, ट्रॉपमोओसिन) 7 नहीं हो सकता।

घटक-समाधान किए गए निदान (सीआरडी) पेश करने से पहले, इन निराशाजनक झटके चीन में एलर्जी के अध्ययन में बाधा उत्पन्न करते थे। सीआरडी ठीक से पुनः संयोजक या शुद्ध एलर्जी के अणुओं का उपयोग करके एलर्जी के घटकों का पता लगाता है, जिससे माप आसानी से मात्रात्मक और वर्णक्रमीय 8 बना सकता है । पिछले दशकों में, एलर्जी की पढ़ाई अक्सर एलर्जी के कच्चे तेल के निष्कर्षों पर नियोजित होती है जो अनिवार्य रूप से कई अप्रासंगिक घटकों को शामिल करते हैं। इनमें से बहुत से सहमोपेन्ट्स निष्क्रिय होते हैं, लेकिन कभी-कभी, कुछ सकारात्मक प्रतिक्रियाओं को उलझे कर सकते हैं। सीआरडी में पुनः संयोजक या शुध्द एलर्जीन अणुओं का उपयोग इस पर पड़ सकता है और इसलिए बेहतर परीक्षण सटीकता प्रदान करता है। जब माइक्रोएरे में संसाधित होता है, तो एक सीआरडी दृष्टिकोण तेजी से स्क्रीन या व्यक्तिगत विषयों में सैकड़ों एलर्जी के अणुओं को संवेदीकरण की पहचान करता है। दक्षिणी चीन में घास पराग संवेदनशीलता पर एक अच्छी तरह से तैयार सीआरडी अध्ययन वर्तमान में कमी है। आदर्श रूप से, इस तरह के अध्ययन में काफी भौगोलिक कवरेज की एक स्थानीय आबादी शामिल है, आमतौर पर चीन में रिपोर्ट किए गए घास परागों के लिए खाते, और उपर्युक्त तकनीकी पहलुओं को संबोधित करना चाहिए। नैदानिक ​​प्रासंगिकता के एक व्यावहारिक स्तर तक पहुंचने के लिए और सीरम नमूनों की भर्ती की सुविधा के लिए, घास परागों के संवेदीकरण की जांच के बारे में प्रारंभिक जांच, इन्हेंल्ट एलर्जी के रूप में सामान्य जनसंख्या के बजाय, एलर्जी श्वसन विकार वाले रोगियों पर केंद्रित हो सकती है।

यह काम एक विधि का वर्णन करता हैसीआरडी दृष्टिकोण का उपयोग करते हुए एलर्जिक राइनाइटिस और / या अस्थमा के साथ ग्रेटर गुआंगज़ौ (दक्षिणी चीन के सबसे बड़े शहर और उसके बाहरी इलाके) के रोगियों में सीरम सीआईजीई जेटी को बरमूडा घास, टिमोथी घास, और होमलूलस स्कैंडेन्स का परीक्षण करने के लिए प्रयोग किया जाता है। दक्षिणी चीन में इन उपोष्णकटिबंधीय और शीतोष्ण घास परागों पर संवेदीकरण पर ये निष्कर्ष वर्तमान में साहित्य में महत्वपूर्ण साक्ष्य हैं।

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

मानव सीरम नमूना प्रयोग सहित अध्ययन प्रोटोकॉल को नैतिकता समिति, गुआंगज़ौ मेडिकल विश्वविद्यालय के पहले संबद्ध अस्पताल द्वारा अनुमोदित किया गया था। सभी प्रतिभागियों ने लिखित सूचित सहमति दी, या तो स्वतंत्र रूप से या उनके माता-पिता के माध्यम से (बच्चों के मामले में)। प्रोटोकॉल ऑनलाइन पंजीकृत किया गया है (चीनी क्लिनिकल ट्रायल रजिस्ट्री, रेग नं .: चीइटीटीआर-डीसीसी-13004003, http://www.chictr.org/cn/ देखें)।

1. अध्ययन जनसंख्या की पहचान

नोट: श्वसन रोग (एआईआर-एसकेएलआरडी) की एलर्जी सूचना भंडार राज्य की प्रमुख प्रयोगशाला रोगी भर्ती का प्राथमिक स्रोत है, क्योंकि एआईआर दक्षिण चीन 9 , 10 में एलर्जी परीक्षणों के लिए मरीजों का सबसे अच्छा दस्तावेज है। एयर लगभग एक दशक से मरीजों के सीरम के नमूने संग्रहीत कर रहा है। संक्षेप में, इन संग्रहीत नमूनों को पहले 5 एमएल ओ सेंटीफ्यूगिंग द्वारा तैयार किया गया थाच फ्ल्बोटोमाइज्ड शिनीस रक्त को 3,000 XG पर 10 मिनट और सतह पर तैरने वाले को ठीक करने के लिए। लंबी अवधि के भंडारण के लिए सीरम के नमूनों को -80 डिग्री सेल्सियस रेफ्रिजरेटर में रखा गया था। वर्तमान अध्ययन में सभी परीक्षणों के लिए उपयोग करने के लिए रोगियों को शामिल करने के मानदंडों से मिले नमूने तैयार थे।

  1. एयर डेटाबेस से, एलर्जिक राइनाइटिस और / या अस्थमा वाले रोगियों के बारे में डेटा पुनः प्राप्त करें, जो जनवरी 2013 और जून 2015 के बीच घास एलर्जीन एसआईजीई के लिए सीरम टेस्ट से गुजरे, पूर्व-डिज़ाइन किया गया अध्ययन अवधि
  2. अस्थमा (एआरआईए) 11 और अस्थमा (जीना) के लिए ग्लोबल इनिशिएटिव 12 दिशानिर्देशों के अनुसार हल्के से मध्यम एलर्जी रिनिटिस और / या अस्थमा एलर्जी रहिनाइटिस और इसके प्रभाव के अनुसार रोगियों का चयन करें। उन्हें "अध्ययन समूह" के रूप में निरुपित करें।
  3. अपर्याप्त चिकित्सा अभिलेखों के साथ मरीजों को बाहर निकालें, जिनको अनुवर्ती कार्रवाई में खोया जाता है, जो वैज्ञानिक उद्देश्यों के लिए अपने सीरम नमूनों के उपयोग के बारे में सूचित सहमति देने से इंकार करते हैंवर्तमान में इम्यूनोथेरेपी या इम्युनोमोडायुलेट्री एजेंटों पर या उन पर परजीवी संक्रमण पाए जाने वाले मम्यूनोडिफ़िसिएंसी
  4. एक ही बहिष्करण मानदंड के अनुसार गैर-श्वसन एलर्जी ( यानी, एक्जिमा, एलर्जी जिल्द की सूजन और भोजन एलर्जी) वाले मरीजों के समकालीन समूह का चयन करें और उन्हें "नियंत्रण समूह" के रूप में निर्दिष्ट करें।
  5. सुनिश्चित करें कि किसी भी नुस्खे से पहले सीरम नमूने एकत्र किए गए थे या उपचार प्रयोगशाला निष्कर्षों पर घनिष्ठ प्रभाव को कम करने के लिए दिए गए थे। इस आवश्यकता को पूरा न करने वाले किसी भी सीरम नमूने को बाहर करें
  6. सुनिश्चित करें कि सभी विषयों ग्रेटर गुआंगज़ौ के सभी भागों ( यानी, 10 से अधिक वर्षों के लिए वहां रहते हैं या यहां रहते हैं) के स्थायी निवासकर्ता हैं।

2. अध्ययन प्रवाह और ब्याज का मापन

  1. जैव-बैंक से योग्य रोगियों के सीरम के नमूने पुनः प्राप्त करें एलर्जी / एलर्जीन घटक का परीक्षण करने के लिए, 140 μL सीरम का उपयोग करें (100 μL को भरने के लिएमृत अंतरिक्ष ऊपर)
    नोट: इस अध्ययन में प्रत्येक रोगी के लिए आवश्यक अधिकतम कुल सीरम मात्रा है: 3 विशिष्ट एलर्जी और 8 एलर्जी घटक, sIgE = 140 μL * 11 = 1,540 μL।
  2. इस उपकरण का उपयोग करते समय, मुख्य रूप से सीरम के नमूने को सीरिज के लिए बरमूडा घास, टिमोथी घास के पूरे एलर्जी, और Humulus स्कैन्डेन्स के लिए परीक्षण करें । धारा 3 में दिए गए निर्देशों का पालन करें
    नोट: इन परागों को माप के लिए चुना गया क्योंकि बरमूडा की घास 13 , 14 , 15 और स्कून्डेन्स 16 को व्यापक रूप से चीन में बताया गया है, जबकि टिमोथी घास 17 , 18 , 1 9 एक विशिष्ट पौधे प्रजाति है जो कि उष्णकटिबंधीय से समशीतोष्ण जोन और दुनिया भर में सबसे अधिक अध्ययन किया है
  3. दूसरे, चरण 2.3 में पहचाने गए सीरम नमूनों का परीक्षण करेंबाईमूडा [Cyn डी 1 (जी 216)], पीएचपी 1 (जी 205), पीएचपी 4 (जी 208), पीएचपी 5 (जी 215), पीएचपी 6 (जी 20 9) के एलर्जी के घटकों के लिए एसआईजीई की उपस्थिति के लिए पूरे एलर्जी के लिए एसआईजीई ), पीएच पी 7 (जी 210), पीएचपी 11 (जी 211), और पीएचएल पी 12 (जी 212)], और क्रॉस-रिएक्टिव कार्बोहाइड्रेट डायरेक्टंट्स [सीसीडी (ओ 214)] धारा 3 में दिए गए निर्देशों का पालन करें

3. Immunoassay विश्लेषण प्रणाली का उपयोग कर पूरी तरह से स्वचालित टेस्ट प्रक्रिया

नोट: एलर्जी सीआईजीई परीक्षण की पूरी प्रक्रिया, जो पूरी तरह से स्वचालित है और जिसे कहीं 7 , 8 , 9 , 10 में वर्णित किया गया है, निर्माता के प्रोटोकॉल का अनुसरण करता है।

  1. पूरी तरह से स्वचालित इम्युनोसाय विश्लेषक ( जैसे, इम्यूनोएकएपी 1000) को प्रारंभ करें और पूरे अध्ययन में प्रतिरक्षा को पूरा करने के लिए इसका इस्तेमाल करें। अंतर्निहित सूचना डेटा प्रबंधन (IDM) कंप्यूटर चालू करें
    नोट: Immunoassay गुदाजेजर स्टैंड-बाय मोड में नियमित रूप से है।
  2. "प्राथमिक पावर" के साथ, "सिस्टम पावर" पर स्विच करें और अंतर्निहित सॉफ़्टवेयर शुरू होने तक 3 मिनट की प्रतीक्षा करें। "लोड कुल्ला समाधान" और "लोड वाशिंग सॉल्यूशन" पर क्लिक करें।
  3. प्रत्येक एलर्जी / एलर्जी घटक परीक्षण के लिए एक शीशी में 140 μL सीरम जोड़ें। हर मरीज के लिए एक पहचान संख्या के साथ 140 μL सीरम युक्त प्रत्येक शीशी को लेबल करें।
  4. IDM इंटरफ़ेस से, मेनू पर क्लिक करके निम्न चरणों को निष्पादित करें
    1. यह सुनिश्चित करने के लिए कि "sige" विकल्प का परीक्षण विधि है, IDM पर "अनुरोध सूची" विंडो की जांच करें
    2. नमूना रिक्तियों को नमूना रैक और गुणवत्ता-नियंत्रण ट्यूबों को गुणवत्ता नियंत्रण रैक में लोड करें, बार कोड के साथ।
      नोट: प्रत्येक रोगी के लिए, शुरूआत में एसआईजीई के लिए 3 विशिष्ट एलर्जी और 8 एलर्जी के घटक या 346 * 11 (3,806) नमूना ट्यूबों के लिए परीक्षण किया गया था। प्रत्येक नमूना ट्यूब के लिए, 3 गुणवत्ता नियंत्रण ट्यूबजिसमें सीआईजीई नियंत्रण के कम, मध्यम और उच्च स्तर होते हैं (विवरण के लिए सामग्री की तालिका देखें) मिलान किए गए थे। आखिरकार, प्राथमिक परीक्षण (चरण 2.3) में सकारात्मक परीक्षण करने वाले केवल 58 मरीज़ों को द्वितीयक परीक्षण (चरण 2.3) में जांच की गई थी। ट्यूबों को लदान कंप्यूटर कंसोल पर स्वचालित रूप से सेट किया जा सकता है।
    3. "परख प्रसंस्करण" स्क्रीन में "लोड अभिकर्मकों" का चयन करें नमूना और गुणवत्ता नियंत्रण रैक, विकास समाधान, संयुग्मित, कैलिब्रेटर, वाहक, विंदुक युक्तियाँ, समाधान को रोकने, और "भार सूची" के अनुसार वाशिंग समाधान लोड करने के लिए (विवरण के लिए सामग्री की तालिका देखें) को पूरा करें।
    4. "लोड एंड स्टार्ट" में "ओके" दबाएं।
      नोट: माप के अंत में, परिणाम IDM पर दिखाई देते हैं
    5. IDM इंटरफ़ेस से, निर्यात किए जाने वाले डेटा का चयन करें। "मेनू," "अनुमोदन करें" और "इस रूप में सहेजें" पर क्लिक करें और एक स्प्रेडशीट फ़ाइल के रूप में sIgE माप परिणामों को निर्यात करें। स्प्रैडशीट फ़ाइल को सांख्यिकीय सॉफ्टवेयर में आयात करें ( जैसे, एसपीएसएस) 10 एसपीएसएस मेन्यू से स्पीयरमैन के गुणकों के लिए विशिष्ट मॉड्यूल का उपयोग करना, इन घास परागों (सकारात्मक सीआईजीई से पूरे एलर्जीन) और पराग घटक (सकारात्मक अणुओं को एलर्जी करने के लिए सकारात्मक सिग) के बीच संवेदीकरण में सहसंबंध का विश्लेषण करें।

4. एसआईजीई रिएक्टिविटी की परिभाषा

नोट: एक अनिलुटेड सीरम नमूने के लिए, विशिष्ट आईजीई माप की सीमा 0.35 से 100 कि.यू. / एल है।

  1. एसआईजीई मानों के साथ नमूनों को पतला करें> 100 केयू / एल 1: 5 और फिर से परख। जहां मूल्य 100 कि.यू. / एल से अधिक रहता है, 1000 ku / l तक एक अंत-प्वाइंट स्तर तक तक पहुंचने तक आगे बढ़ने के साथ आगे बढ़ें।
  2. 0.35 केयू / एल के थ्रेशोल्ड वैल्यू के आधार पर, सीआईजीई स्तर पर 0.35 कियू / एल से अधिक पॉजिटिव 5 , 7 , 10 होने पर विचार करें । रिएक्टिव को रेट करेंएसआईजीई परीक्षणों के रूप में: वर्ग 1 (≥0.35 और <0.70 ku / L), कक्षा 2 (≥0.70 और <3.50 ku / एल), कक्षा 3 (≥3.50 और <17.50 केयू / एल), कक्षा 4 (≥ 17.50 और <50.00 केयू / एल), कक्षा 5 (≥50.00 और <100.00 केयू / एल), और कक्षा 6 (≥100.00 केयू / एल)।

5. सांख्यिकीय विश्लेषण

  1. सांख्यिकीय सॉफ्टवेयर के साथ डेटा का विश्लेषण ( जैसे, एसपीएसएस) 10 औसत और मानक विचलन के रूप में मात्रात्मक डेटा की रिपोर्ट करें, औसत और इंटरक्वैटाईल श्रेणी (IQR) के रूप में गुणात्मक डेटा, और सकारात्मक परिणामों के अनुपात के रूप में स्पष्ट डेटा।
  2. अनुपात के बीच-समूह की तुलना के लिए ची-स्क्वायर परीक्षण का उपयोग करें, मात्रात्मक डेटा के लिए एक अनपेक्षित टी-परीक्षण, और गुणात्मक डेटा के लिए रैंक-सम परीक्षा।
  3. पैरासिट्रिक डेटा के बीच सहसंबंध के लिए पियरसन का परीक्षण का प्रयोग करें, "आर" के रूप में व्यक्त सहसंबंध गुणांक और गैर-पैरामीट्रिक मानों के लिए स्पीयरमन की परीक्षा के साथ, टीवह सहसंबंध गुणांक " आर एस ।" के रूप में व्यक्त किया गया जब पी- वेल्यू <0.05 हो तो सांख्यिकीय महत्व पर विचार करें।

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

इस अध्ययन में प्रयुक्त पूरी तरह से स्वचालित इम्युनोसाय विश्लेषक में एक ठोस चरण संरचना है जो कि covalently युग्मन एलर्जन या एलर्जीन घटकों के साथ कवर किया गया है जो रोगी से सीरम नमूनों में ब्याज के अणुओं (एसआईजीई) के साथ प्रतिक्रिया करता है। एक स्वचालित प्रोग्राम के साथ, विश्लेषक 150 μL कुल्ला समाधान के साथ सभी गैर-विशिष्ट आईजीई को नष्ट करता है और यह 5 बार दोहराता है। फिर यह एक जटिल बनाने के लिए एंजाइम-लेबल एंटी-आईजीई एंटीबॉडी (50 μL) जोड़ता है। एंजाइम-लेबल एंटी-आईजीई एंटीबॉडी (संयुग्म) एक माध्यमिक एंटीबॉडी है जो विशिष्ट आईजीई से जुड़ा हुआ है। अनबाउंड एंटी-आईजीई एंटीबॉडी 150 μL वाशिंग समाधान (दोहराया 3 बार) के साथ धोने से समाप्त हो जाती है। बाध्य जटिल को एक विकासशील एजेंट (50 μL) के साथ 37 डिग्री सेल्सियस पर 9 मिनट के लिए इलाज किया जाता है विकासशील एजेंट एक एंजाइम-पचाने वाला एजेंट है जो सभी बाध्य एंटी-आईजीई एंटीबॉडी काट देता है। उत्तरार्द्ध क्षारीय स्थिति के तहत प्रतिदीप्ति का उत्सर्जन करता है। प्रतिक्रिया के साथ बंद कर दिया हैक्षारीय रोक समाधान के अलावा इसके बाद, साधन ठोस चरण संरचना को संपीड़ित करता है जिससे कि एल्वेट को निचोड़ कर और 470 एनएम की तरंग दैर्ध्य पर परिणामस्वरूप प्रतिदीप्ति को मापने के लिए। प्रतिदीप्ति समानता से eluate में ब्याज की analyte अणुओं के पूर्ण स्तर के लिए सहसंबद्ध है एक उच्च प्रतिदीप्ति मूल्य सीरम नमूना में अधिक sIGE का मतलब है। परीक्षण के परिणामों की व्याख्या करने के लिए, सिस्टम स्वचालित रूप से एक अंशांकन वक्र का उपयोग करते हुए नमूने के लिए नमूने के लिए प्रतिक्रियाओं को बदल देती है। माप डेटा इलेक्ट्रॉनिक रूप से इलेक्ट्रॉनिक सॉफ्टवेयर में स्थानांतरित किया जाता है, जो विश्लेषणात्मक परिणामों की गणना, आंकड़ों की गणना और परिणाम रिपोर्टिंग के लिए कार्यों को एकीकृत करता है।

शामिल किए जाने और बहिष्करण मानदंड के बाद, वर्तमान अध्ययन में 346 रोगियों से सीरम की जांच की गई। अध्ययन समूह में अकेले एलर्जी राइनाइटिस के साथ 78 विषयों, अकेले अस्थमा 92 और 88 सहवर्ती शामिल थेअस्थमा और नाइलिथिस के साथ बोलो नियंत्रण समूह में गैर-श्वसन एलर्जी वाले 88 मरीज़ शामिल हैं। इन रोगियों की आयु 1-87 वर्ष की थी और ग्रेटर गुआंगज़ौ के सभी हिस्सों से स्थायी निवासी होने की पुष्टि हुई थी, जो अध्ययन का लक्ष्य क्षेत्र था। सभी अध्ययन समूहों और नियंत्रण समूह लिंग, आयु और परिवार के इतिहास सहित जनसांख्यिकीय और सामाजिक विशेषताओं में तुलनात्मक थे। अध्ययन समूह के मरीजों में से, 22.5% का परीक्षण बरमूडा घास, 13.6% से तीमुथियुस घास, और 7.0% से होमूलस स्कैन्डेन्स के लिए किया गया । अध्ययन समूह में, किसी भी घास पराग को संवेदीकरण की दर नियंत्रण समूह ( तालिका 1 ) की तुलना में बहुत अधिक थी। सभी बरमूडा घास टीआईजीओ घास के लिए ऋणात्मक रोगी भी ऋणात्मक थे और Humulus scandens थे यह ध्यान देने के लिए ब्याज की बात है कि एलर्जी रिनिटिस और / या अस्थमा वाले रोगियों ने अन्य एलर्जी (एन = 4, 4.5%) के साथ बरमूडा घास (एन = 58, 22.5%) के लिए संवेदीकरण की उल्लेखनीय उच्च दर का प्रदर्शन किया।

होमलूलस स्कैन्डेन्स या सीसीडी 30% से नीचे थी। इसके विपरीत, क्लास -4 बरमूडा घास एसआईजीई जेट वाले मरीज़ों में सीएन डी 1, टिमोथी गेज एलर्जेंस, मॉमुलस स्कैन्डेन्स या सीसीडी ( चित्रा 1 ) के लिए सहवर्ती सकारात्मकता का 67-100% मौका था। बरमूडा घास एसआईजीई जेट स्तर के अन्य घास पराग आईजीई ( आर एस = 0.669, पी <0.001) के लिए सकारात्मकता की संभावना के साथ, एक महत्वपूर्ण सहसंबंध का प्रदर्शन किया।

टिमोथी घास संवेदीकरण का मूल्यांकन टिमोथी घास घटकों के लिए एसआईजीई द्वारा किया गया था। 35 तीमुथियुस घास वाले सकारात्मक रोगियों में, सबसे अक्सर पता चला एलर्जीन घटक Phl p 4 (100%, 35/35) था, इसके बाद पीएचएल पी 1(17.1%, 6/35) पीएच 5, 6, 7, 11 और 12 ( तालिका 2 ) में से किसी एक के लिए तीन रोगियों में प्रत्येक (3/35, 8.6%) सकारात्मक थे। सीरम पीएल पी 4 सीआईजीई स्तर कुल टिमोथी गम एलर्जीन और सीसीडी सीआईजीई स्तर (क्रमशः = 0.941 और 0.928, क्रमशः पी <0.001; तालिका 3 ) के साथ सहसंबंधित है। बरमूडा घास वाले सकारात्मक रोगियों के 41.4% (24/58) और टिमोथी घास-संवेदित रोगियों के 68.6% (24/35) सीसीडी में सकारात्मक थे। स्पीयरमैन के रैंक सहसंबंध विश्लेषण ने सीसीडी और अन्य घास एलर्जी के बीच संवेदीकरण ( तालिका 3 ) में एक महत्वपूर्ण सहयोग दिखाया।

आकृति 1
चित्रा 1: बरमूडा घास के लिए सकारात्मक रोगियों में सह-संवेदीकरण एसआईजीई
यह आंकड़ा बरमूडा घास (एन = 58) और एक concomit को sIGE प्रतिक्रिया के विभिन्न वर्गों के साथ रोगियों का प्रतिशत दिखाता हैतीमुथियुस घास, मानवू स्कंडेंस , सीसीडी, और अन्य घास एलर्जीन घटकों के प्रति संवेदनशीलता। इस आंकड़े के एक बड़े संस्करण को देखने के लिए कृपया यहां क्लिक करें

सकारात्मक परीक्षण की दर [% (एन / रोगियों)]
बरमूडा घास टिमोथी घास होमलूलस स्कैन्डेन्स
एआर और / या एएस के साथ मरीजों 22.5% (58/258) †† ‡ 13.6% (35/258) † 7.0% (18/258)
एआर के साथ मरीजों 21.8% (17/78) †† 10.2% (8/78) 7.7% (6/78)
एएस के साथ मरीजों 22.8% (21/92)†† 14.1% (13/92) † 5.4% (5/92)
एआर और एएस के साथ मरीजों 22.7% (20/88) †† 15.9% (14/88) 8.0% (7/88)
आयु
<14 साल या उससे छोटी 18.6% (8/43) 14.0% (6/43) 7.0% (3/43)
> 4 साल 23.3% (50/215) 13.5% (29/215) 7.0% (15/215)
लिंग
नर 25.7% (35/136) 13.9% (1 9/136) 7.4% (10/136)
महिला 18.8% (23/122) 13.1% (16/122) 6.6% (8/122)
अन्य एलर्जी वाले मरीजों 4.5% (4/88) ** 1.1% (1/88) ** 0 *

तालिका 1: रोगी इकाई और जनसांख्यिकीय विवरण के आधार पर बरमुडा घास, टिमोथी घास, और होमलूलस स्कैन्डेन्स के लिए सीआईजीई-पॉजिटिव टेस्ट वाले मरीजों एलुग्रिक श्वसन रोगों वाले रोगियों का उच्च अनुपात बरमूडा घास (χ 2 = 14.35, पी <0.001), तीमुथियुस घास (χ 2 = 10.88, पी <0.001), और होमुलस स्कैन्डेन्स2 = 5.14, पी = 0.02) के लिए सकारात्मक था। ) अन्य एलर्जी नियंत्रण बनाम ( ** पी <0.01, * पी <0.05)। एक सकारात्मक बरमूडा घास परीक्षण के साथ रोगियों का अनुपात टिमोथी घास के अनुपात ( ; पी <0.05) और होमुलस स्कैन्डेन्स ( †† पी <0.01)। एक सकारात्मक टिमोथी घास परीक्षण वाले रोगियों का अनुपात Humulus scandens ( पी <0.05) से अधिक था। बरमूडा घास, टिमोथी घास के लिए सकारात्मक परीक्षणों का अनुपात और Humulus स्कैन्डेन्स एसआईजीई नाबालिग और वयस्क समूहों (χ 2 = 0.07, पी = 0.7 9 ; χ 2 = 0.06, पी = 0.80; χ 2 = 0.11, पी = 0.74; क्रमशः) घास पराग संवेदनशीलता की दर पुरुषों और महिलाओं के बीच सांख्यिक रूप से भिन्न नहीं थी (क्रमशः 2 = 1.338, पी = 0.25; χ 2 = 0.063, पी = 0.80; χ 2 = 0.38, पी = 0.54; क्रमशः)। इसी तरह, संवेदनशीलता दरों में कोई महत्वपूर्ण अंतर नास और अस्थमा के रोगियों के बीच इंगित नहीं किया गया (χ 2 = 0.030, पी = 0.985; χ 2 पी = 0.558; Χ 2 = 0.528, पी = 0.768; क्रमशः)।

रोगियों (%) पीएचएल पी 4 पीएचएल पी 1 पीएचएल पी 5 पीएचएल पी 6 पीएचएल पी 11 पीएचएल पी 7 पीएचएल पी 12
28 (80.0%) +
4 (11.4%) + +
1 (2. 9%) + + + + + +
2 (5.7%) + + + + + + +
कुल 35 (100%) 6 (17.1%) 3 (8.6%) 3 (8.6%) 3 (8.6%) 3 (8.6%) 3 (8.6%)
एसआईजीई (केयू / एल) 0.52, 0.06-2.02 0.02, 0.01-0.10 0.04, 0.03-0.24 0.12, 0.03-0.34 0.05, 0.02-0.27 0.03, 0.02-0.36 0.10, 0.04-0.28

तालिका 2: तीमुथियस ग्रास संवेदीकरण सीआईजीई पॉसिटिविटी और स्तर के अनुसार तीमुथियुस ग्रास अवयव (एन = 35)। +, सकारात्मक परीक्षण; , एसआईजीई स्तर (केयू / एल) को औसत और आईक्यूआर के रूप में दिखाया गया है 35 तीमुथियस घास के एसआईजीई-पॉजिटिव रोगियों में, 80.0% केवल पीएच पी 4-पॉजिटिव थे, जबकि 11.4% पीएचपी 4 या पीएचएल पी 1 के लिए सकारात्मक थे।

एलर्जी बरमूडा टिमोथी होमलूलस स्कैन्डेन्स सीसीडी
बरमूडा - 0.709 ** 0.682 ** 0.565 **
Cyn डी 1 0.583 ** 0.787 ** 0.751 ** 0.865 **
टिमोथी 0.709 ** - 0.921 ** 0.856 **
पीएचएल पी 4 0.645 ** 0.941 ** 0.886 * 0.928 **
पीएचएल पी 1 0.616 ** 0.681 ** 0.712 ** 0.507 **
पीएचएल पी 5 0.46 0.273 0.590 * 0.624 *
पीएचएल पी 6 0।445 0.306 0.583 * 0.569
पीएचएल पी 7 0.681 * 0.481 0.632 * 0.531
पीएचएल पी 11 0.589 * 0.372 0.620 * 0.568
पीएचएल पी 12 0.671 * 0.411 0.565 0.446
होमलूलस स्कैन्डेन्स 0.682 ** 0.921 ** - 0.853 **

तालिका 3: सीसीडी और घास पराग एलर्जी के बीच सकारात्मकता के लिए सहसंबंध गुणांक। The सहसंबंध गुणांक के रूप में प्रस्तुत किया जाता है; इस गैर-पैरामीट्रिक डाटासेट के लिए स्पीयरमन का सहसंबंध विश्लेषण किया गया था * पी <0.05, ** पी <0.01

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

पूरी तरह से स्वचालित इम्युनोसाय विश्लेषक क्षेत्र, प्रयोगशालाओं और संस्थानों के बीच और समय के साथ संतोषजनक स्थिरता प्रदान कर सकते हैं। इस तरह की एक स्वचालित प्रक्रिया को बेंच अनुसंधान और नैदानिक ​​अध्ययनों का समर्थन करने के लिए पाया गया है, कई एलर्जी और / या एलर्जी के घटकों का मानकीकृत पता लगाने में सक्षम है, और संभव एलर्जीन क्रॉस-एक्टिविटी की पहचान करता है जो कि सीआरडी के आगमन से पहले आसानी से प्रकट नहीं होता। इसके अलावा, पूरे परीक्षण प्रक्रिया को सख्त गुणवत्ता नियंत्रण के साथ पूरा किया जा सकता है, जो कि एक उच्च भौगोलिक क्षेत्र के सर्वेक्षण में आवश्यक उच्च-थ्रुपुट विधियों के लिए अनुमति देता है। यद्यपि परीक्षण प्रक्रिया को ज्यादातर कंप्यूटर कंसोल द्वारा चलाया जाता है, कई महत्वपूर्ण मुद्दों को ध्यान में लाया जाना चाहिए। यह अनिवार्य है कि उपयोगकर्ता मैनुअल के साथ कठोर अनुपालन में उपयोग किया जाता है; किसी भी विपथन के कारण अनावश्यक परीक्षण त्रुटियों, यांत्रिक क्षति या लेजर बीम या उच्च विद्युत वोल्टेज से निजी हताहत हो सकता है। हमेशा एनसुनिश्चित करें कि एक उचित और सही अंशांकन वक्र प्रणाली में संग्रहीत किया गया है, क्योंकि यह परीक्षण की सटीकता से जुड़ा हुआ है। अन्यथा, एक निर्दिष्ट अंशशोधक के एसआईजीई एकाग्रता को सीरम नमूना परीक्षण से पहले मापा जाना चाहिए। बाद में, सिस्टम स्वचालित रूप से बाद के उपयोग के लिए अंशांकन वक्र को गणना और संग्रहीत कर सकता है। अन्य प्रयोगशाला तकनीकों के साथ, तकनीशियनों को संक्रमण से बचाने के लिए और पर्यावरण को दूषित होने से बचने के लिए मानव सीरम हेरफेर की सुरक्षा का भी निरीक्षण करना महत्वपूर्ण है।

सीआरडी दृष्टिकोण के रूप में पूरी तरह से स्वचालित इम्युनोसाय विश्लेषक का उपयोग करके, इस अध्ययन में बरमूडा घास के सीआईजीई सकारात्मकता (22.5%) के रोगियों में एलर्जिक राइनाइटिस और / या गुआंगज़ौ, दक्षिण चीन में अस्थमा के रोगियों में काफी प्रभाव दिखाई दिया। चूंकि तीमुथियुस घास और Humulus scandens आम नहीं हैं, यहां तक ​​कि गैर-मौजूद, गुआंगज़ौ में, तीमुथियुस घास की सकारात्मकता दर (13.6%) और Humulus स्कैन्डेन्स एसआईजीई (7.0%) मीघास परागों के बीच क्रॉस-जेट को जिम्मेदार ठहराया जा सकता है।

घास पराग एलर्जी के विश्लेषण से, यह स्पष्ट रूप से दिखाया गया कि सभी टिमोथी घास आईआईजी-पॉजिटिव मरीज़ भी टिमोथी घास एंटीजन पीएचएल पी 4 के लिए सकारात्मक थे। बहुत कम (17.1%) पीएच पी 1 के लिए पॉजिटिव परीक्षण किया गया, जो आंकड़ों से आश्चर्यजनक रूप से अलग था यूरोप में, जहां पीएच पी 1 के लिए सकारात्मकता की दर Phl पी 4 18 , 20 , 21 से अधिक है । चूंकि पीएच पी 1 टिमोथी घास का प्रमुख घटक है, इस अध्ययन की आबादी में पीएच पी 1 पर पीएच पी 4 की सकारात्मकता की प्रमुख दर भी "वास्तविक" संवेदीकरण के अलावा संभावित क्रॉस-रिएक्टिव का सुझाव दे सकती है, क्योंकि पीएच पी 4 के शेयर एक संरचनात्मक समानता सीसीडी के साथ और पेड़ों, सब्जियों और उष्णकटिबंधीय फल , 1 9 , 22 , 23 सहित अन्य कई एलर्जीएं हैं, 24 इस अवलोकन के नैदानिक ​​प्रासंगिकता यह हो सकता है कि इस अध्ययन में टिमोथी के अधिकांश घास वाले रोगियों को टिमोथी घास इम्यूनोथेरेपी प्राप्त करने के लिए कभी सलाह नहीं दी जानी चाहिए, जो वर्तमान में पीएचएल पी 1 25 का उपयोग करता है।

अध्ययन विधियों और तकनीकों की कई सीमाओं का उल्लेख किया जाना चाहिए। सबसे पहले, तीन अलग-अलग अंशशोधक स्ट्रिप्स को एक विंदुक / अभिकर्मक ट्रे में रखा जा सकता है, क्योंकि अधिकतम तीन मैचों में तीन टेस्ट बैचों को एक ही समय में चलाया जा सकता है। जब एक भारी वर्कलोड की आवश्यकता होती है, जैसे एक बड़ा क्षेत्रीय सर्वेक्षण में, यह अभी भी प्रक्रिया के लिए एक महत्वपूर्ण राशि लेता है दूसरा, मानव आईजीए, आईजीडी, आईजीएम, और आईजीजी के साथ क्रॉस-एक्टिविटी इस अध्ययन से विश्लेषक का उपयोग करते समय शारीरिक सांद्रता पर मौजूद नहीं है, इसलिए जब इन इम्युनोग्लोबुलिनों के साथ क्रॉस-एक्टिविटी का संबंध है तब अन्य जांच करने योग्य दृष्टिकोण की आवश्यकता होती है। तीसरे, devic के परिष्कार के बावजूदई, पूरी तरह से स्वचालित इम्युनोसाय विश्लेषक के साथ किए गए निष्कर्ष अन्य प्रयोगशाला जांच, नैदानिक ​​मूल्यांकन, और चिकित्सक की विशेषज्ञता के लिए प्रतिस्थापित नहीं होना चाहिए जब एक निश्चित निदान किया जा रहा है। चतुर्थ, चीन में एलर्जी सीआरडी के देर से शुरू होने के कारण, उपप्रौढ घास पराग घटकों के कई वाणिज्यिक उत्पाद अनुपलब्ध हैं या अभी तक शोध के लिए स्वीकृत नहीं किए गए हैं। इसलिए, एलर्जी के लिए सीआरडी दृष्टिकोण के रूप में इस तकनीक का उपयोग काफी हद तक एक क्षेत्र में विशिष्ट उपयोग के लिए निर्माता से उत्पाद की आपूर्ति की वाणिज्यिक उपलब्धता पर निर्भर करता है। पौधों के परागों की एक सर्वव्यापी जटिलता के साथ उष्णकटिबंधीय और उपोष्णकटिबंधीय क्षेत्रों में, परीक्षण के लिए संबंधित एलर्जीन उत्पादों की कमी के कारण सीआरडी का अध्ययन अपर्याप्त और मुश्किल हो सकता है। इस तरह की दुविधा इस तकनीक की दक्षता से काफी समझौता कर सकती है।

फिर भी, हमारे ज्ञान के नवीनतम ज्ञान के लिए, यह एक अग्रणी अध्ययन है जो सीआरडी दृष्टिकोण का उपयोग करता हैO दक्षिणी चीन में घास पराग एलर्जी के लिए संवेदीकरण की जांच करना। आगे के अध्ययन इस नस में जारी रख सकते हैं और इन निष्कर्षों को मान्य कर सकते हैं।

अब तक, पूरी तरह से स्वचालित इम्युनोसाय विश्लेषक का प्रयोग करने वाली तकनीकों को इन विट्रो एलर्जीन सीआईजीई परीक्षणों में स्वर्ण मानक के रूप में स्वीकार किया गया है। 26 , 27 । चीन के विशाल क्षेत्र में एलर्जी संवेदीकरण पर बहुत सीमित डेटा को देखते हुए सीआरडी दृष्टिकोण के रूप में पूरी तरह से स्वचालित इम्यूनोज़ास का इस्तेमाल करते हुए बड़े-नमूना अध्ययन में अंतराल को भरने और इस क्षेत्र में उपलब्ध साक्ष्य को जोड़ सकते हैं। यह ध्यान रखना महत्वपूर्ण है कि ऐसे अध्ययन, आमतौर पर बहु-केंद्र और राष्ट्रव्यापी सहयोग, मानकीकरण के लिए एक प्रोटोकॉल के आधार पर इम्यूनोसेस के नेटवर्किंग की आवश्यकता हो सकती हैं।

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

लेखकों के पास खुलासे के लिए कुछ भी नहीं है।

Acknowledgments

हम इस आंकड़े को तैयार करने में अपनी सहायता के लिए यूमिंग र का धन्यवाद करते हैं। यह अध्ययन गुआंग्डोंग फाउंडेशन ऑफ साइंस एंड टैक्नोलॉजी (प्रोजेक्ट नं .: 2014 ए 020212352), गुआंगज़ौ एजुकेशन ब्यूरो (1201630044, 1201630393) और नेशनल नेचुरल साइंस फाउंडेशन ऑफ़ चाइना (एनएसएफसी 81572063, एनएसएफसी 81601394) द्वारा वित्त पोषित किया गया था।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
ImmunoCAP 1000 Instrument Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 12-3800-01
Phadia Information Data Manager Software Package Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 12-3801-11
Software Package, ImmunoCAP 1000 Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 12-3801-12
g2
(Bermuda grass)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-4131-01
g6
(Timothy grass)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-4100-01
w22
(Japanese Hop)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-4452-01
g216
(nCyn d 1)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-4972-01
g205
(rPhl p 1)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5234-01
g208
(nPhl p 4)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5288-01
g215
(rPhl p 5b)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5338-01
g209
(rPhl p 6)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5289-01
g210
(rPhl p 7)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5290-01
g211
(rPhl p 11)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5291-01
g212
(rPhl p 12)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5292-01
o214
Cross-reacting carbohydrate determinants (CCDs)
Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-5339-01
Specific IgE Conjugate 400 Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9310-08
Specific IgE Calibrator Strip Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9459-08
Specific IgE Curve Control Strip Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9312-08
Specific IgE Anti-IgE ImmunoCAP Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 14-4417-01
ImmunoCAP Specific IgE Negative Control Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9445-01
ImmunoCAP Specific IgE Control L Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9528-01
ImmunoCAP Specific IgE Control M Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9529-01
ImmunoCAP Specific IgE Control H Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9530-01
Development Solution Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9439-08
Stop Solution Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 34-2271-58
Washing Solution Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9202-08
FluoroC Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9264-01
Maintenance Solution Kit Thermo Fisher Scientific Inc.(Phadia AB, Uppsala Sweden) 10-9476-01

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Scadding, G. K. BSACI guidelines for the management of allergic and non-allergic rhinitis. Clin Exp Allergy. 38 (1), 19-42 (2007).
  2. Pollart, S. M., Reid, M. J., Fling, J. A., Chapman, M. D., Platts-Mills, T. A. Epidemiology of emergency room asthma in northern California: association with IgE antibody to rye grass pollen. J Allergy Clin Immunol. 82 (2), 224-230 (1988).
  3. Wang, Q. Lower airway inflammation and hyperresponsiveness in non-asthmatic patients with non-allergic rhinitis. J Thorac Dis. 7 (10), 1756-1764 (2015).
  4. Ma, Y. The link between mold sensitivity and asthma severity in a cohort of northern Chinese patients. J Thorac Dis. 7 (4), 585-590 (2015).
  5. Luo, W. Major grass pollen allergens and components detected in a southern Chinese cohort of patients with allergic rhinitis and/or asthma. Mol Immunol. 78, 105-112 (2016).
  6. Zhang, Y., Zhang, L. Prevalence of allergic rhinitis in china. Allergy Asthma Immunol Res. 6 (2), 105-113 (2014).
  7. Zeng, G., Zheng, P., Luo, W., Huang, H., Wei, N., Sun, B. Longitudinal profiles of serum specific IgE and IgG4 to Dermatophagoides pteronyssinus allergen and its major components during allergen immunotherapy in a cohort of southern Chinese children. Mol Immunol. 74, 1-9 (2016).
  8. Kleine-Tebbe, J., Matricardi, P. M., Hamilton, R. G. Allergy work-up including component-resolved diagnosis: how to make allergen-specific immunotherapy more specific. Immunol Allergy Clin North Am. 36 (1), 191-203 (2016).
  9. Sun, B., Zheng, P., Wei, N., Huang, H., Zeng, G. Co-sensitization to silkworm moth (Bombyx mori) and 9 inhalant allergens among allergic patients in Guangzhou, southern China. PLoS One. 9 (5), e94776 (2014).
  10. Zeng, G. Component-resolved diagnostic study of Dermatophagoides pteronyssinus major allergen molecules in a southern Chinese cohort. J Investig Allergol Clin Immunol. 25 (5), 343-351 (2015).
  11. Allergic Rhinitis and Its Impact on Asthma (ARIA). Management of Allergic Rhinitis and Its Impact on Asthma Pocket Guide. , Available from: http://www.whiar.org/docs/ARIA_PG_08_View_WM.pdf (2015).
  12. Global Initiative for Asthma (GINA). Pocket Guide for Asthma Management and Prevention. , Available from: http://ginasthma.org/wp-content/uploads/2016/01/GINA_Pocket_2015.pdf (2015).
  13. Liu, J., Guo, A., Guo, H. Morphological variation and types of Cynodon dactylon. Acta Prataculture Sinica. 12 (6), 99-104 (2003).
  14. Zhang, H., Xi, J. Study on the germplasm resource and ecological characteristics of wild carpet grass (Axonopus compressus) in Guangdong. Grassland and Turf. 13 (1), 25-28 (2005).
  15. Kao, S. H., Su, S. N., Huang, S. W. Sub-proteome analysis of novel IgE-binding proteins from Bermuda grass pollen. Proteomics. 5 (14), 3805-3813 (2005).
  16. Ouyang, Y. H., Zhang, D. S., Fan, E. Z., Li, Y., Zhang, L. Correlation between symptoms of pollen allergic rhinitis and pollen grain spreading in summer and autumn. Zhonghua Er Bi Yan Hou Tou Jing Waike Zazhi. 47 (8), 623-627 (2012).
  17. Westritschnig, K. Analysis of the sensitization profile towards allergens in central Africa. Clin Exp Allergy. 33 (1), 22-27 (2003).
  18. Rossi, R. E., Monasterolo, G., Monasterolo, S. Measurement of IgE antibodies against purified grass-pollen allergens (Phl p 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 11, and 12) in sera of patients allergic to grass pollen. Allergy. 52 (12), 1180-1185 (2001).
  19. Zafred, D., Nandy, A., Pump, L., Kahlert, H., Keller, W. Crystal structure and immunologic characterization of the major grass pollen allergen Phl p 4. J Allergy Clin Immunol. 132 (3), 696-703 (2013).
  20. Chabre, H. Molecular variability of group 1 and 5grass pollen allergens between Pooideae species: implications for immunotherapy. Clin Exp Allergy. 40 (3), 505-519 (2010).
  21. Mari, A. Skin test with a timothy grass (Phleum pratense) pollen extract vs.IgE to a timothy extract vs. IgE to rPhl p 1 rPhl p 2, nPhl p 4, rPhl p 5, rPhl p 6, rPhl p 7, rPhl p 11, and rPhl p 12: epidemiological and diagnostic data. Clin Exp Allergy. 33 (1), 43-51 (2003).
  22. Grote, M., Stumvoll, S., Reichelt, R., Lidholm, J., Rudolf, V. Identification of an allergen related to Phl p 4, a major timothy grass pollen allergen, in pollens, vegetables, and fruits by immunogold electron microscopy. Biol Chem. 383 (9), 1441-1445 (2002).
  23. Andersson, K., Lidholm, J. Characteristics and immunobiology of grass pollen allergens. Int Arch Allergy Immunol. 130 (2), 87-107 (2003).
  24. Tripodi, S. Molecular profiles of IgE to Phleum pratense in children with grass pollen allergy: implications for specific immunotherapy. J Allergy Clin Immunol. 129 (3), 834-839 (2012).
  25. Stumvoll, S., et al. Purification, structural and immunological characterization of a timothy grass (Phleum pratense) pollen allergen Phl p 4, with cross-reactive potential. Biol Chem. 383 (9), 1383-1396 (2002).
  26. Wood, R. A., Segall, N., Ahlstedt, S., Williams, P. B. Accuracy of IgE antibody laboratory results. Ann Allergy Asthma Immunol. 99 (1), 34-41 (2007).
  27. Wang, J., Godbold, J. H., Sampson, H. A. Correlation of serum allergy (IgE) tests performed by different assay systems. J Allergy Clin Immunol. 121 (5), 1219-1224 (2008).

Tags

चिकित्सा अंक 124 एलर्जी घास पराग श्वसन रोग अस्थमा एलर्जिक राइनाइटिस इम्युनोसाय विश्लेषक पूर्ण-स्वचालित घटक समाधान निदान
एलर्जीक राइनाइटिस और / या अस्थमा के साथ चीनी दक्षिणी इलाकों में घास पराग एलर्जी के अध्ययन के लिए एक घटक-सुलझाया नैदानिक ​​दृष्टिकोण
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Luo, W., Pan, G., Huang, H., Zheng,More

Luo, W., Pan, G., Huang, H., Zheng, P., Wei, N., Zhang, Y., Zeng, G., Sun, B. A Component-resolved Diagnostic Approach for a Study on Grass Pollen Allergens in Chinese Southerners with Allergic Rhinitis and/or Asthma. J. Vis. Exp. (124), e55723, doi:10.3791/55723 (2017).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter