Summary
यह अध्ययन एक सरल दो आयामी angiographic विधि एक सिलिकॉन रबर इंजेक्शन यौगिक और कोमल ऊतक एक्स-रे प्रणाली का उपयोग कर ठीक संवहनी संरचनाओं की जांच करने के लिए प्रस्तुत करता है ।
Abstract
एंजियोग्राफी विभिन्न अनुसंधान क्षेत्रों में संवहनी संरचनाओं के अध्ययन के लिए एक अनिवार्य उपकरण है । इस अध्ययन का उद्देश्य एक सिलिकॉन रबर इंजेक्शन यौगिक और कोमल ऊतक एक्स-रे प्रणाली का उपयोग कर स्थिर, ताजा ऊतक के ठीक संवहनी संरचना की जांच के लिए एक सरल angiographic विधि शुरू करने के लिए है । यह अध्ययन विशेष रूप से पुनर्निर्माण सर्जरी में इस्तेमाल प्रालंब क्षेत्रों पर ध्यान केंद्रित किया है । यह अध्ययन Sprague-Dawley चूहों का उपयोग कर विभिन्न प्रायोगिक परिस्थितियों में एक सिलिकॉन रबर इंजेक्शन यौगिक के साथ एंजियोग्राफी को रोजगार देता है । सबसे पहले, एमवी यौगिक के 15 मिलीलीटर और मंदक के 15 मिलीलीटर मिलाया जाता है । फिर, इलाज एजेंट के १.५ मिलीलीटर तैयार है, और एक 24G कैथेटर चूहे की आम मन्या धमनी में cannulated है । एक तीन तरह टोंटी तो एक कैथेटर से जुड़ा हुआ है, और radiopaque एजेंट, तैयार इलाज एजेंट के साथ मिश्रित होने के बाद, तुरंत छलकने के बिना इंजेक्ट किया जाता है । अंत में, एजेंट जम के रूप में, नमूना काटा जाता है, और एक angiographic छवि एक नरम ऊतक एक्स-रे प्रणाली का उपयोग कर प्राप्त की है । इस विधि इंगित करता है कि उच्च गुणवत्ता एंजियोग्राफी ठीक संवहनी संरचनाओं दिखा आसानी से किया जा सकता है और बस समय की एक छोटी अवधि में भीतर प्राप्त की ।
Introduction
ऐसे धमनियों और नसों के रूप में संवहनी संरचनाओं की जांच ब्याज की एक महत्वपूर्ण क्षेत्र है, विशेष रूप से पुनर्निर्माण सर्जरी में । इस क्षेत्र में, प्रालंब सर्जरी व्यापक रूप से किया जाता है । इसलिए, angiographic इमेजिंग सक्रिय रूप से प्रालंब क्षेत्र का अध्ययन करने के लिए प्रयोग किया जाता है, angiosome, और ताजा ऊतक के संवहनी आपूर्ति1. विशेष रूप से, ठीक vasculature का निरीक्षण करने के लिए सतत प्रयास किए गए हैं, जिनमें छिद्रों के रूप में ठीक जहाजों (त्वचा तक पहुंचने वाले गहरे जहाजों से उभर रहे जहाजों), और जहाजों (आसंन angiosomes के बीच जहाजों को जोड़ने)2 . जहाजों के इन दो प्रकार के वेध प्रालंब पुनर्निर्माण क्षेत्र में महत्वपूर्ण है और अनुसंधान के मुख्य ध्यान केंद्रित कर रहे है3,4।
एंजियोग्राफी में विभिन्न सामग्रियों का उपयोग किया जाता है । सबसे पहले, वहां भारत स्याही, जो रक्त वाहिकाओं के सकल शरीर रचना विज्ञान देख में सहायक है । तथापि, यह radiolucent है, इसलिए angiographic छवियों को प्राप्त नहीं किया जा सकता है । अधिक सामांयतः इस्तेमाल radiopaque सामग्री सीसा ऑक्साइड और बेरियम हैं । हालांकि, विषाक्तता सीसा ऑक्साइड का एक महत्वपूर्ण दोष है, और यह जब इसके पाउडर के रूप में पानी के साथ मिश्रित का उपयोग करने के लिए असुविधाजनक है । बेरियम विषाक्तता से मुक्त है; हालांकि, यह बहुत संभव नहीं है, क्योंकि यह कमजोर पड़ने के बाद इस्तेमाल किया जाना चाहिए । इन radiopaque सामग्रियों के दोनों केशिकाओं को पार नहीं कर सकते; इसलिए, अगर एक पूरे संवहनी संरचना का विश्लेषण किया जाना चाहिए, यह उन्हें धमनी और नस में अलग से इंजेक्शन के लिए आवश्यक है5. इसके अलावा, दो सामग्री संरचनात्मक विच्छेदन के दौरान डाई रिसाव का कारण है, तो वे जिलेटिन के साथ संयुक्त किया जाना चाहिए । सीसा ऑक्साइड-जिलेटिन और बेरियम-जिलेटिन मिश्रण में कम से एक दिन1,6,7जमना के लिए ले ।
गणना टोमोग्राफी (सीटी) एंजियोग्राफी एक और व्यापक रूप से इस्तेमाल किया विधि है और तीन आयामी (3 डी) संरचनाओं8देखने में सहायता कर सकते हैं । हालांकि, नसों प्रभावी ढंग से5visualized नहीं किया जा सकता । इस साधन में, ऐसे गला नसों के रूप में ठीक vasculature के स्पष्ट दृश्य मुश्किल है, सिवाय जब विशिष्ट उपकरणों का उपयोग कर । जरूरत से ज्यादा महंगे उपकरणों का नुकसान हो सकता है, इसलिए सभी प्रयोगशालाओं में सीटी एंजियोग्राफी का उपयोग नहीं किया जा सकता । इसके विपरीत, नरम ऊतक एक्स-रे प्रणाली अपेक्षाकृत सस्ता है और अधिक आसानी से काम कर सकते हैं । यह प्रणाली नरम ऊतकों को देखने के लिए इष्टतम है और सरल एक्स-रे प्रणाली की तुलना में उच्च गुणवत्ता वाले कोमल ऊतक चित्र प्रदान कर सकते हैं । हालांकि नरम ऊतक एक्स-रे प्रणाली ही 3 डी छवियों को नहीं दिखा सकते हैं, यह मदद कर सकते है ठीक संवहनी संरचनाओं सीटी एंजियोग्राफी से अधिक स्पष्ट रूप से कल्पना । इसलिए, हम कई प्रयोगों में नरम ऊतक एक्स-रे प्रणाली का इस्तेमाल किया है, विशेष रूप से विभिन्न प्रालंब मॉडल और बुनियादी शरीर रचना विज्ञान2,9में.
अंत में, सिलिकॉन रबर इंजेक्शन यौगिक एंजियोग्राफी के उपयोग के कई फायदे हैं । क्योंकि विभिन्न रंग एजेंटों तैयार कर रहे हैं, यह इंजेक्शन और भारत स्याही जैसे भेद रंग प्रदर्शित किया जा सकता है । इसलिए एक साथ ग्रॉस एनाटॉमी का अध्ययन और एंजियोग्राफी संभव है । यह दोनों केशिकाओं के माध्यम से पारित कर सकते है और नसों visualized, ठीक संवहनी संरचनाओं संभव की परीक्षा बनाने की अनुमति । जिलेटिन मिश्रण के विपरीत, सिलिकॉन रबर इंजेक्शन यौगिक एक कम समय अवधि के भीतर जम जाता है, लगभग 15 मिनट, किसी भी अतिरिक्त प्रक्रियाओं के बिना. पूरी प्रक्रिया 1 चित्रामें योजनाबद्ध छवि में संक्षेप है ।
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
पशु विषयों सहित सभी प्रक्रियाओं, सियोल राष्ट्रीय विश्वविद्यालय अस्पताल (IACUC No. 10-0184) की संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समितियों द्वारा अनुमोदित किया गया है । इस प्रोटोकॉल प्रालंब vasculature पर अनुसंधान के लिए अनुकूलित है । यह उदाहरण हमारी पिछली रिपोर्ट्स में चार-क्षेत्र प्रालंब मॉडल पर आधारित है ।
1. एक प्रालंब हालत की स्थापना
नोट: यह दृश्य अनुमान6,7से पहले एक चूहा प्रालंब मॉडल 4 से 5 दिनों में एक नाड़ी परिवर्तन उत्पन्न करने के लिए महत्वपूर्ण है.
- 7 सप्ताह पुराने पुरुष Sprague-Dawley चूहों वजनी २००-२५० जी का उपयोग करें ।
- Anesthetize के लिए 3-5% पर isoflurane का उपयोग कर चूहों को शामिल करना और 2-२.५% के रखरखाव के लिए । एक पैर की अंगुली चुटकी वापसी प्रतिबिंब परीक्षण संज्ञाहरण की गहराई पर्याप्त है कि पुष्टि करने के लिए प्रदर्शन । दर्द से राहत के लिए meloxicam 5दिन/
- एक पशु बाल क्लिपर और बालों को हटाने क्रीम का उपयोग ट्रंक दाढ़ी (thioglycolic एसिड, ८०%) । 10% povidone के साथ एक बाँझ सर्जिकल क्षेत्र तैयार-आयोडीन और एक बाँझ कपड़े प्रक्रियाओं भर में एक बाँझ हालत बनाए रखने के लिए. सूखापन को रोकने के लिए आंखों के लिए एक पशु चिकित्सक मरहम लागू करें । बाँझ हालत में सभी उपकरणों को बनाए रखने.
- उपयुक्त प्रालंब हालत स्थापित ।
- पीठ के निचले पेट से एक circumferential त्वचा प्रालंब डिजाइन मार्क, 4 x 12 सेमी को मापने । असिरूप प्रक्रिया और लिंग (चित्रा 1) के बीच आधे रास्ते प्रालंब के केंद्र का पता लगाएं ।
- एक शल्य ब्लेड का उपयोग कर चिह्नित के रूप में चीरा बनाओ ।
- काटना कैंची का उपयोग कर प्रालंब, त्वचा और panniculus carnosus सहित ।
- संवहनी pedicle के आसपास काटना [द्विपक्षीय डीप circumflex श्रोणि (डीसीआई) जहाजों और द्विपक्षीय सतही अवर अधिजठर (सिे) जहाजों] निचले पेट में और एक शल्य pedicle और loupe उपकरणों का उपयोग संवहनी microsurgical का पर्दाफाश ।
- बनाए रखने या इच्छित शर्तों के आधार पर जहाजों ligate ।
- एक शल्य ब्लेड या कैंची का उपयोग पृष्ठीय midline साथ प्रालंब विभाजित ।
- अपनी मूल स्थिति में प्रालंब करना और यह एक त्वचा स्टेपलर के साथ ठीक ।
- 3 दिनों के लिए शल्य घाव के लिए एक सामयिक मरहम लागू करें और मौखिक रूप से 3 दिनों के लिए प्रति दिन एक बार 5 मिलीग्राम/kg की एक खुराक पर meloxicam प्रशासन द्वारा पश्चात analgesia प्रदान करते हैं ।
- पुष्टि करें कि चूहे को कड़ी recumbency बनाए रखने के लिए पर्याप्त चेतना हासिल । पिंजरे में चूहे लौटें और उसे आवास क्षेत्र में ले जाएं । प्रत्येक चूहों के लिए एक अलिज़बेटन कॉलर लागू करें ।
2. उपकरणों की तैयारी
- एक 24G कैथेटर और एक तीन तरह टोंटी तैयार करते हैं ।
- मच्छर संदंश, छोटी कैंची, एक शल्य स्केलपेल, और एक शल्य ब्लेड तैयार करें ।
- angiographic एजेंट (सिलिकॉन रबर इंजेक्शन यौगिक) तैयार करें ।
- बाँझ नमूना संग्रह कप में मंदक के साथ रंग एजेंट यौगिक ब्लेंड । वजन से एक बराबर मात्रा सुनिश्चित करें: रंग एजेंट यौगिक की 15 मिलीलीटर और एक चूहे में एमवी मंदक के 15 मिलीलीटर (Sprague-Dawley चूहा, २००-२५० जी) ।
- इंजेक्शन का इलाज एजेंट प्रति 5% वजन या मिश्रण समाधान की मात्रा तुरंत से पहले जोड़ें: एक चूहे में इलाज एजेंट की १.५ मिलीलीटर (Sprague-Dawley चूहा, २००-२५० ग्राम) ।
3. चूहा धमनी की तैयारी
- उपयोग isoflurane चूहों anesthetize करने के लिए (प्रेरण के लिए 3-5% और 2-२.५% रखरखाव के लिए) । एक पैर की अंगुली चुटकी वापसी प्रतिबिंब परीक्षण संज्ञाहरण की गहराई पर्याप्त है कि पुष्टि करने के लिए प्रदर्शन ।
- एक पशु बाल क्लिपर और बालों को हटाने क्रीम का उपयोग गर्दन दाढ़ी (thioglycolic एसिड, ८०%) ।
- आम मन्या धमनी10बेनकाब.
- scapulae के बीच एक 2 सेमी midline चीरा बनाओ ।
- काटना अधिक गहरी लार ग्रंथि परिसर उजागर होता है जब तक मच्छर संदंश और कुंद कैंची का उपयोग कर ।
- लार ग्रंथि को वापस लेने और कुंद omohyoid मांसपेशी longitudinally काटना ।
- आम मन्या धमनी के आसपास काटना.
- cephalic और काले रेशम के साथ आम मन्या धमनी के caudal पक्षों हुक और यह प्रत्यय ।
- समीपस्थ टांका पर एक टाई बनाओ और धमनियों के engorgement बनाए रखने के लिए कर्षण रखें ।
- 24G कैथेटर की सुरक्षा के लिए caudal पक्ष में एक रेशम टांका तैयार करें ।
4. Cannulation
- Cannulate तैयार मन्या धमनी एक 24G कैथेटर का उपयोग कर ।
- caudal पक्ष में पूर्व बनाया टाई कस और इंजेक्शन के दौरान कैथेटर को दूर नहीं करने के लिए सावधान रहना ।
- इलाज एजेंट (step 1.3.2) तैयार करें ।
- संमिलित कैथेटर के लिए सुरक्षित रूप से तीन तरह टोंटी कनेक्ट ।
- एक खाली सिरिंज का उपयोग नकारात्मक दबाव जोड़कर कैथेटर में regurgitated रक्त की पुष्टि करें ।
5. इंजेक्शन
- सिलिकॉन रबर इंजेक्शन यौगिक सुई जब तक आंख और पैर का रंग बदल गया है ।
नोट: रंग परिवर्तन के रूप में दिखाई देना चाहिए इंजेक्शन तरल पदार्थ की प्रगति (इंजेक्शन राशि प्रत्येक चूहे के लिए लगभग 25-30 मिलीलीटर है) । - तीन तरह के टोंटी को लॉक करें और एजेंट के जम जाने तक इंतजार करें ।
- एजेंट के साथ दूषित करने के लिए नहीं सावधान रहना, खासकर जब तीन तरह से टोंटी से सिरिंज को हटाने. ऐसे धुंध या vinyl के रूप में एक सुरक्षात्मक बाधा का उपयोग करने के लिए अपने परिवेश से इंजेक्शन जगह अलग ।
चेतावनी: किसी भी संक्रमण यह मुश्किल angiographic छवि का विश्लेषण करने के लिए बनाता है क्योंकि यौगिक रेडियो-अपारदर्शी है । - धड़कनों और श्वसन की समाप्ति की पुष्टि करें । संज्ञाहरण बंद करो ।
- एक संदर्भ के रूप में शेष एजेंट के साथ कठोरता की दर का निरीक्षण (लगभग 15 मिनट की जरूरत है) ।
- एजेंट के साथ दूषित करने के लिए नहीं सावधान रहना, खासकर जब तीन तरह से टोंटी से सिरिंज को हटाने. ऐसे धुंध या vinyl के रूप में एक सुरक्षात्मक बाधा का उपयोग करने के लिए अपने परिवेश से इंजेक्शन जगह अलग ।
6. नमूना की कटाई
- प्रालंब के अंदर किसी भी नाड़ी संरचना को नुकसान को रोकने के लिए प्रालंब के बाहर panniculus carnosus 1 सेमी के लिए एक शल्य ब्लेड का उपयोग कर एक चीरा बनाओ ।
- कदम १.४ से पहले विच्छेदित विमान के साथ काटना (panniculus carnosus विमान के नीचे) और प्रालंब और नाड़ी pedicle कैंची का उपयोग सहित ऊतक फसल (संवहनी संरचना प्रालंब में शामिल है) ।
- एक 5-0 रेशम सीवन का उपयोग कर प्रालंब के pedicle Ligate और शरीर से प्रालंब अलग । संवहनी संरचना को नुकसान नहीं सावधान रहें ।
7. Angiographic छवि पर कब्जा
- बाहर नमूना प्रसार, यह सुनिश्चित करना है कि यह गुना नहीं है, और धीरे यह संदंश का उपयोग कर सर्जिकल कपड़े पर जगह है ।
- एक रेडियोग्राफी छवि ले लो ।
- नमूना लोड हो रहा है अंतरिक्ष के लिए फिल्म कैसेट पर झूठ बोल नमूना हस्तांतरण ।
- ६० kVp, 5 mA, और 5 एस एक्सपोजर के लिए नरम ऊतक एक्स-रे प्रणाली सेट करें ।
- एक स्वत: विकास मशीन का उपयोग कर एक darkroom में फिल्म विकसित करना ।
- संभव उच्चतम संकल्प पर फिल्म स्कैन ।
8. छवि का विश्लेषण6,7,11
- धमनियों और नसों प्रवाह और व्यास की निरंतरता के आधार पर भेद ।
- pedicle धमनी के प्रवाह से शुरू और लक्ष्य पोत पर ध्यान केंद्रित की जांच की जा रही है ।
- पहले छवि खोलने के द्वारा सॉफ्टवेयर के साथ व्यास उपाय ।
- सीधे बटन पर क्लिक करें और स्केल बार पर एक लाइन बनाएं जो कि एक ही लंबाई की है ।
- खुला विश्लेषण । स्केल मेनू सेट करें और ज्ञात दूरीमें स्केल बार का मान दर्ज करें ।
- सीधे बटन पर क्लिक करें और जिसमें से व्यास मापा जा करने की जरूरत है पोत पर एक लाइन आकर्षित ।
- खुला विश्लेषण । उपाय मेनू और लंबाईकी पुष्टि करें ।
- नाड़ी रक्षा क्षेत्र प्रालंब पर विचार पैटर्न का विश्लेषण ।
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
इस प्रोटोकॉल का पालन के माध्यम से, Sprague-Dawley चूहे की फ्लैप संवहनी जांच की गई । एक circumferential त्वचा के निचले पेट से पीठ है कि मापा 4 x 12 सेमी के लिए हमारी पिछली रिपोर्टों के आधार पर चिह्नित किया गया था प्रालंब । प्रत्येक नमूना एक अलग संवहनी हालत में था ।
सभी फ्लैप गहरे circumflex श्रोणि धमनी (DCIA) और नस और फिर विभिन्न स्थानों से धमनियों के साथ supercharged के आधार पर ऊंचा किया गया था । समूह 1 नियंत्रण था, समूह 2 ipsilateral सतही अवर अधिजठर धमनी (SIEA) के साथ supercharged था, समूह 3 supercharged contralateral के साथ SIEA था, और समूह 4 supercharged contralateral के साथ DCIA था । नतीजतन, प्रत्येक प्रालंब के angiographs अलग पैटर्न दिखाया । पूरे प्रालंब मुख्य प्रालंब क्षेत्र चार्ज पोत के साथ मानक के रूप में चार क्षेत्रों में विभाजित किया गया था, angiographic एजेंट supercharging धमनी से परे अगले बाहर क्षेत्र आरोप है कि मुख्य पोत तक पहुंच गया है । फैली हुई गला नस भी देखी गई, लेकिन नॉर्मल स्किन एंजियोग्राफी (चित्रा 2) में नहीं देखा गया ।
अन्य उदाहरणों में, सिलिकॉन रबर इंजेक्शन एंजियोग्राफी स्पष्ट रूप से ठीक संवहनी संरचनाओं दिखाया. यहां, विधि लाभप्रद है क्योंकि चूहे की नस इतनी पतली है और एंजियोग्राफी के साथ आसानी से visualized नहीं है । उच्च गुणवत्ता angiographic छवियों भी विशिष्ट धमनी की आपूर्ति और विभिन्न स्रोतों से शिरापरक जल निकासी पर देख स्थितियों में फैली हुई गला नसों प्रदर्शित (जैसे, जैसेकि contralateral के रूप में ipsilateral DCIA या नस जैसे एक धमनी सतही हीन अधिजठर नस) (figure 3).
चित्रा 1 : संपूर्ण कार्यविधि का स्कीमा । इस पैनल की तैयारी से पता चलता है वांछित प्रालंब हालत पहले से और एंजियोग्राफी के प्रदर्शन 4-5 दिन बाद, निंनलिखित प्रक्रिया का उपयोग: angiographic एजेंट तैयारी, इंजेक्शन, नमूना संचयन, और छवि पर कब्जा । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्रा 2 : पश्चात दिन 4 पर फ्लैप की ठेठ एंजियोग्राफी चूहा त्वचा प्रालंब में । सामांय त्वचा के निचले ट्रंक क्षेत्र में मूल चार संवहनी क्षेत्र फ्लैप का प्रतिनिधित्व करता है । फ्लैप में द्विपक्षीय डीप circumflex श्रोणि (डीसीआई) और सतही अवर अधिजठर (सिे) पोत क्षेत्र (पीला वर्ग) सहित चार संवहनी क्षेत्र शामिल हैं । सभी समूहों एक आम संवहनी pedicle, गहरी circumflex श्रोणि धमनी और नस (DCIA & वी) है । इसके अतिरिक्त, प्रत्येक प्रालंब एक अलग supercharging धमनी है । समूह 2 ipsilateral सतही अवर अधिजठर धमनी (SIEA) के साथ supercharged है, समूह 3 supercharged contralateral के साथ SIEA है, और समूह 4 supercharged contralateral के साथ DCIA है । समूह 4 अलग बच प्रालंब क्षेत्रों और angiographic पैटर्न से पता चलता है । क्योंकि supercharging धमनी मूल संवहनी pedicle (DIEA & वी) के लिए बाहर है, और अधिक लंबी स्थित प्रमुख पोत एजेंट (पीला तीर) के विपरीत है । अंत में, फैली हुई गला नसों कि संवहनी क्षेत्रों से कनेक्ट दिखाई दे रहे हैं (सफेद arrowhead). मैं = ipsilateral; ग = contralateral । स्केल बार = 1 सेमी. कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए ।
चित्रा 3 : अन्य प्रतिनिधि परिणाम. दिखाया प्रालंब ipsilateral गहरी circumflex श्रोणि धमनी (DCIA) द्वारा आपूर्ति की है और contralateral सतही अवर अधिजठर नस (SIEV) द्वारा सूखा । (ऊपरी बाएं) यह पैनल काटा प्रालंब की सकल फोटोग्राफी से पता चलता है । ipsilateral ओर भीड़भाड़ परिवर्तन दिखाता है, लेकिन प्रालंब परिगलन नहीं होती है । मध्य भाग और बाहर के दो प्रालंब के तिहाई एक पूरा अस्तित्व दिखा । (निचला बायां) एंजियोग्राफी फैली हुई गला नस, जो आसंन संवहनी क्षेत्र को जोड़ता है सहित विस्तृत ठीक संवहनी संरचना से पता चलता है । सही बढ़ाया एंजियोग्राफी धमनियों (लाल ऐरोहेड) और नसों (नीले ऐरोहेड) निरंतरता और वाहिकाओं के व्यास द्वारा भेद । सामांय में, नसों धमनियों से बड़ा व्यास दिखाते हैं । DCIA = गहरी circumflex श्रोणि धमनी; SIEV = सतही हीन अधिजठर नस; श्वेता arrowhead = फैली गला नस । स्केल बार = 1 सेमी. कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए ।
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
सिलिकॉन रबर इंजेक्शन यौगिक एंजियोग्राफी आसानी से प्रदर्शन किया जा सकता है, महंगे उपकरणों की आवश्यकता नहीं है, और कई फायदे प्रदान करता है । रोगियों के ऑपरेटिव और intraoperative मूल्यांकन के विपरीत, जानवरों और cadavers का उपयोग प्रयोगों विशिष्ट शर्तों पर विवरण प्रदान करते हैं, और अधिक विविध और गहराई से अध्ययन में सक्षम कर सकते हैं. प्रालंब चूहों का उपयोग मॉडल चिकित्सकों के लिए विशेष रूप से मूल्यवान है क्योंकि विभिंन संदर्भों में परिवर्तन नैदानिक अनुप्रयोगों6,7,11से पहले मनाया जा सकता है । उदाहरण के लिए, जब supercharging या superdrainage एक लंबे प्रालंब के लिए लागू किया जाता है, जो बाहर का कोरोनरी परिगलन हल कर सकते हैं, फ्लैप क्षेत्र में परिणाम की भविष्यवाणी संभव है; इसलिए, यह नैदानिक अभ्यास करने के लिए इन तकनीकों को लागू करने से फ्लैप के अस्तित्व को बढ़ाने के लिए संभव है (चित्रा 2). शव विच्छेदन के मामले में, सकल शारीरिक और angiographic मूल्यांकन एक साथ प्रदर्शन किया जा सकता है, शव के उपयोग को अधिकतम12.
सिलिकॉन रबर इंजेक्शन यौगिक अन्य radiopaque सामग्री की तुलना में संभाल करने के लिए आसान है । मिश्रण सिलिकॉन रबर इंजेक्शन यौगिक और पहले से मंदक और इलाज एजेंट जोड़ने के लिए सीधे इंजेक्शन प्राथमिक प्रक्रियाओं शामिल हैं । अन्य इमेजिंग तरीकों के साथ-साथ इंजेक्शन के दौरान छलकने से बचने के लिए सावधानी बरतनी चाहिए । छलकने से बचने के लिए, हम एक सुरक्षित टाई और cannulation के बाद एक कैथेटर के साथ एक तीन तरह टोंटी का उपयोग करने की सलाह देते हैं । अगर वहां छलकने, नमूना radiopaque एजेंट के साथ दूषित हो सकता है, एक angiographic छवि के रूप में अपनी गुणवत्ता कम । के रूप में चर्चा की, सिलिकॉन रबर इंजेक्शन यौगिक है कि यह में मिश्रण के बाद जल्दी से जम में लाभप्रद है, के बारे में 15 मिनट के बाद । हालांकि, इस समय के भीतर प्रयोग सामांयतया समाप्त हो जाता है । इसलिए, हम केवल एक समय में एक चूहे के लिए आवश्यक राशि में मिश्रण की सिफारिश, यहां तक कि जब कई प्रयोगों प्रदर्शन. यौगिक solidification के बाद एक्स-रे इमेजिंग का प्रदर्शन ताजा ऊतक के विकार से पहले किया जाना चाहिए ।
सिलिकॉन रबर इंजेक्शन यौगिक की आणविक आकार काफी छोटा है केशिकाओं के माध्यम से पारित करने के लिए; इसलिए, एजेंट को अलग से नस में इंजेक्ट करने की कोई आवश्यकता नहीं है, जिसका एक और फायदा है । इसके विपरीत, सीसा ऑक्साइड-जिलेटिन मिश्रण या बेरियम-जिलेटिन मिश्रण नसों में अलग से शिरापरक दृश्य के लिए इंजेक्ट किया जाना चाहिए । हालांकि, वे नसों में वाल्व के माध्यम से पारित नहीं कर सकते, तो यह धारावाहिक cannulations और इंजेक्शन प्रदर्शन करने के लिए आवश्यक है । शारीरिक antegrade प्रवाह धमनी से नस करने के लिए जब सिलिकॉन रबर इंजेक्शन यौगिकों का उपयोग कर मनाया जा सकता है, अभी तक इस विशेषता देखा नहीं है जब अंय विपरीत एजेंटों का उपयोग कर ।
दोनों धमनियों और नसों सिलिकॉन रबर इंजेक्शन यौगिक के साथ विषम किया जा सकता है और प्रवाह और व्यास की निरंतरता (चित्रा 3) के अनुसार प्रतिष्ठित किया जा सकता है । सामांय में, नसों एक अपेक्षाकृत बड़ा व्यास दिखाते हैं ।
कोमल ऊतक एक्स-रे प्रणाली का उपयोग कर एक 3 डी विश्लेषण प्रदर्शन के नुकसान में से एक यह है कि यह सीटी एंजियोग्राफी8का उपयोग करने से अधिक कठिन है । हालांकि त्रिविम रेडियोग्राफी नरम ऊतक एक्स-रे प्रणाली का उपयोग कर प्राप्त किया जा सकता है, यह उच्च गुणवत्ता वाले 3 डी सीटी एंजियोग्राफी13में देखा छवियों का उत्पादन नहीं करता है । हालांकि, यह अभी भी ठीक संवहनी संरचनाओं visualizing के लिए बेहतर है । यह विशेष रूप से ध्यान देने योग्य है जब नरम ऊतक एक्स-रे प्रणाली के बजाय सादे एक्स-रे प्रणाली (चित्रा 3) का उपयोग कर । वर्तमान में, वास्तविक समय सीटी एंजियोग्राफी समय प्रवाह14,15के साथ 3 डी परिवर्तन का पालन करने के लिए प्रयोग किया जाता है । 3 डी वास्तविक समय छवियों केवल नरम ऊतक एक्स-रे प्रणाली का उपयोग कर प्राप्त नहीं किया जा सकता है, लेकिन वास्तविक समय एंजियोग्राफी इंजेक्शन के दौरान मोबाइल सी बांह प्रणाली का उपयोग कर धारावाहिक इमेजिंग के माध्यम से हासिल किया जा सकता है । हालांकि इसकी छवि गुणवत्ता ठीक संवहनी संरचनाओं visualizing के लिए नरम ऊतक एक्स-रे प्रणाली की तुलना में कमजोर है, यह वास्तविक समय में गतिशील परिवर्तन के मूल्यांकन को सक्षम कर सकते हैं । हम सक्रिय रूप से शोधकर्ताओं जो सूक्ष्म सीटी का उपयोग नहीं कर सकते हैं या इस तरह के छोटे नसों कि प्रभावी रूप से माइक्रो सीटी द्वारा visualized नहीं कर रहे हैं के रूप में ठीक संवहनी संरचनाओं पर बुनियादी अनुसंधान का संचालन करना चाहते हैं इस विधि की सिफारिश.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।
Acknowledgments
यह काम (2017R1A2B1006403) एक राष्ट्रीय अनुसंधान फाउंडेशन कोरियाई सरकार (विज्ञान और आईसीटी के मंत्रालय द्वारा वित्त पोषित अनुदान के माध्यम से मध्य कैरियर शोधकर्ता कार्यक्रम द्वारा समर्थित) था ।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| MICROFIL Silicone Rubber Injection Compounds | Flow Tech Inc. | MV-112 | White color agent |
| MICROFIL Silicone Rubber Injection Compounds | Flow Tech Inc. | MV-117 | Orange color agent |
| MICROFIL Silicone Rubber Injection Compounds | Flow Tech Inc. | MV-120 | Blue color agent |
| MICROFIL Silicone Rubber Injection Compounds | Flow Tech Inc. | MV-122 | Yellow color agent |
| MICROFIL Silicone Rubber Injection Compounds | Flow Tech Inc. | MV-130 | Red color agent |
| MICROFIL Silicone Rubber Injection Compounds | Flow Tech Inc. | MV-132 | Clear agent |
| MICROFIL Silicone Rubber Injection Compounds | Flow Tech Inc. | MV-Diluent | Diluent |
| MICROFIL CP-101 For Cast Corrosion Preparations | Flow Tech Inc. | CP-101 | Curing agent |
| SOFTEX X-ray film photographing inspection equipment | SOFTEX | CMB-2 | Soft tissue x-ray system |
| Film | Fujifilm | Industrial X-ray Film (FR 12x16.5cm) | |
| Automatic Development Machine | Fujifilm | FPM 2800 | |
| Rat | Sprague-Dawley rat weighing 200-250 g | ||
| Three-way stopcock | |||
| 24-guage catheter | |||
| Image J | National Institutes of Health | https://imagej.nih.gov/ij/ |
References
- Taylor, G. I., Minabe, T. The Angiosomes of the Mammals and Other Vertebrates. Plastic and Reconstructive Surgery. 89 (2), 181-215 (1992).
- Taylor, G. I., Palmer, J. H. The vascular territories (angiosomes) of the body: experimental study and clinical applications. British Journal of Plastic Surgery. 40 (2), 113-141 (1987).
- Geddes, C. R., Morris, S. F., Neligan, P. C. Perforator flaps: evolution, classification, and applications. Annals of Plastic Surgery. 50 (1), 90-99 (2003).
- Saint-Cyr, M., Schaverien, M. V., Rohrich, R. J. Perforator Flaps: History, Controversies, Physiology, Anatomy, and Use in Reconstruction. Plastic and Reconstructive Surgery. 123 (4), 132-145 (2009).
- Lie, K. H., Taylor, G. I., Ashton, M. W. Hydrogen peroxide priming of the venous architecture: a new technique that reveals the underlying anatomical basis for venous complications of DIEP, TRAM, and other abdominal flaps. Plastic and Reconstructive Surgery. 133 (6), 790-804 (2014).
- Chang, H., Nobuaki, I., Minabe, T., Nakajima, H. Comparison of Three Different Supercharging Procedures in a Rat Skin Flap Model. Plastic and Reconstructive Surgery. 113 (1), 277-283 (2004).
- Chang, H., Minn, K. W., Imanishi, N., Minabe, T., Nakajima, H. Effect of Venous Superdrainage on a Four-Territory Skin Flap Survival in Rats. Plastic and Reconstructive Surgery. 119 (7), 2046-2051 (2007).
- Rozen, W. M., Stella, D. L., Ashton, M. W., Phillips, T. J., Taylor, G. I. Three-dimensional CT angiography: a new technique for imaging microvascular anatomy. Clinical Anatomy. 20 (8), 1001-1003 (2007).
- Taylor, G. I., Chubb, D. P., Ashton, M. W. True and "choke" anastomoses between perforator angiosomes: part i. anatomical location. Plastic and Reconstructive Surgery. 132 (6), 1447-1456 (2013).
- Feng, J., Fitz, Y., et al. Catheterization of the carotid artery and jugular vein to perform hemodynamic measures, infusions and blood sampling in a conscious rat model. Journal of Visualized Experiments. (95), e51881 (2015).
- Park, S. O., Cho, J., Imanishi, N., Chang, H. Effect of distal venous drainage on the survival of four-territory flaps with no pedicle vein: Results from a rat model. Journal of Plastic, Reconstructive & Aesthetic Surgery. 71 (3), 410-415 (2018).
- Park, S. O., Chang, H., Imanishi, N. The free serratus anterior artery perforator flap-A case report and anatomic study. Microsurgery. 36 (4), 339-344 (2016).
- Imanishi, N., Nakajima, H., Minabe, T., Chang, H., Aiso, S. Anatomical relationship between arteries and veins in the paraumbilical region. British Journal of Plastic Surgery. 56 (6), 552-556 (2003).
- Schaverien, M., Saint-Cyr, M., Arbique, G., Rohrich, R. J. Three- and four-dimensional arterial and venous anatomies of the thoracodorsal artery perforator flap. Plastic and Reconstructive Surgery. 121 (5), 1578-1587 (2008).
- Schaverien, M., Saint-Cyr, M., Arbique, G., Hatef, D., Brown, S. A., Rohrich, R. J. Three- and Four-Dimensional Computed Tomographic Angiography and Venography of the Anterolateral Thigh Perforator Flap. Plastic and Reconstructive Surgery. 121 (5), 1685-1696 (2008).
