Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

Otomatik Gıda Alımı İzleme Sistemi Kullanan Sıçanlarda Sakaroz Tercihi ve Yenilik Kaynaklı Hipofaji Testleri

Published: May 8, 2020 doi: 10.3791/60953
Automatic Translation
*1, *1, 1, 1, 1, 1,2,3, 1,4, 1,3
1Charité Center for Internal Medicine and Dermatology, Department for Psychosomatic Medicine, Charité-Universitätsmedizin, Corporate Member of Freie Universität Berlin, Humboldt-Universität zu Berlin and Berlin Institute of Health, 2Department of Internal Medicine, Helios Clinic, 3Department of Psychosomatic Medicine and Psychotherapy, University Hospital Tübingen, 4Department of Quantitative Health Sciences, University of Massachusetts Medical School
* These authors contributed equally

Summary

Burada sunulan sıçanlarda depresyon benzeri ve anhedonik davranış çalışma için bir protokoldür. Bu iki köklü davranış yöntemleri birleştirir, sakaroz tercihi ve yenilik kaynaklı hipofaji testleri, otomatik bir gıda ve sıvı alımı izleme sistemi ile, dolaylı olarak vekil parametreleri kullanarak kemirgen davranışını araştırmak için.

Abstract

Depresif hastalıkların görülme sıklığı ve görülme sıklığı dünya çapında artmakta olup, yaklaşık 322 milyon bireyi etkileyerek hayvan modellerinde davranışsal çalışmalara duyulan ihtiyacın altını çizmektedir. Bu protokolde, sıçanlarda depresyon benzeri ve anhedonik davranışları incelemek için, kurulan sakaroz tercihi ve yeniliği neden olan hipofaji testleri otomatik gıda ve sıvı alımı izleme sistemi ile birleştirilmiştir. Testten önce, sakaroz tercihi paradigmasında, erkek sıçanlar musluk suyuna ek olarak sakaroz solüsyonu tüketmek için en az 2 gün eğitilirler. Test sırasında sıçanlar tekrar su ve sakkaroz çözeltisine maruz kalırlar. Tüketim otomatik sistem tarafından her saniye kaydedilir. Toplam su alımı (sakaroz tercih oranı) sakaroz oranı anhedoni için bir vekil parametre. Yenilik kaynaklı hipofaji testinde, erkek sıçanlar lezzetli bir atıştırmaya maruz kaldıkları bir eğitim döneminden geçerler. Eğitim sırasında, kemirgenler istikrarlı bir temel atıştırmalık alımı göstermektedir. Test günü, hayvanlar ev kafeslerinden taze, boş bir kafese aktarılır ve bilinen lezzetli atıştırmaya erişimi olan bilinmeyen yeni bir ortamı temsil eder. Otomatik sistem toplam alımını ve altta yatan mikro yapısını kaydeder (örneğin, atıştırmaya yaklaşmaya gecikme), anhedonik ve endişeli davranışlarhakkında bilgi sağlar. Bu paradigmaların otomatik bir ölçüm sistemi yle birleşimi, ölçüm hatalarını azaltarak daha yüksek doğrulukla birlikte daha ayrıntılı bilgi sağlar. Ancak, testler vekil parametreleri kullanmak ve sadece dolaylı bir şekilde depresyon ve anhedoni tasvir.

Introduction

Ortalama olarak, dünya nüfusunun% 4.4 depresyon etkilenir. Bu hesap 322 milyon kişi dünya çapında, bir 18% artış on yılönce1 göre. Dünya Sağlık Örgütü tarafından yapılan tahminlere göre, depresyon 2020 yılında Engellilik Düzeltilmiş Yaşam Yılı sıralamasında ikinci olacak2. Duygusal bozuklukların artan yaygınlığını ele almak ve yeni girişimsel stratejiler oluşturmak için bu davranışı daha fazla incelemek gerekir. İnsanlarda önceden ve muayeneye ek olarak hayvan çalışmaları gereklidir.

Çeşitli modeller depresif davranış bileşenleri çalışmak için kurulmuştur (yani, zorla yüzme testi, kuyruk süspansiyon testi, sakaroz tercih testi, ve yenilik kaynaklı hipofaji)3,4. Sakaroz tercih testi (SPT) ve yeniliklere bağlı hipofaji (NIH) hayvanlarda depresyon benzeri davranışları saptayabiliyor. Bu testler kendilerini kemirgenlerde depresyon durumuna neden olmaz ama davranış akut değişiklikler tasvir. Hem SPT ve NIH aşağıdaki ilgi kaybı olarak bilinen depresyon karakteristik bir özelliği değerlendirmek: ödüllendirici faaliyetleri, bir zamanlar bireysel tarafından zevk edildi faaliyetleri5, ve işleme karmaşık fenomenin bir yönü ve ödül yanıt6. Her iki test de lezzetli gıda şeklinde ödüllendirici bir uyarıcı yanıt çalışma. Tüketim in ölçüde anhedoni için bir vekil parametre olarak hizmetvermektedir 7,8,9.

Anhedoniyi araştıran testlerin değeri, maddenin ağırlığının kesin ölçümünden kaynaklanan tüketimin doğru belirlenmesine bağlıdır. Geleneksel olarak, bu ölçüm testten önce ve sonra bir kez el ile yapılır. Ancak, bu çeşitli nedenlerle hatalı ölçümler eğilimli. İlk olarak, kemirgenler gıda istiflemek eğilimindedir, onlar hemen tüketmeden gıda kaldırmak anlamına gelir sonra güvenli bir yerde gizlemek. Böylece, bu gıda kaybı toplam tüketimin hesaplanmasına dahil edilebilir. İkincisi, sıçanlar gıda ve su dökmek, ilgili tüketim olmadan kilo kaybı ile sonuçlanan. Üçüncü olarak, istenmeyen sıvı kaybı, şişelerin kafeslere yerleştirilerek ve çıkarılarak işlenmesine bağlı olarak meydana gelir.

Bu hata kaynaklarını azaltmak için bir yaklaşım olarak, anhedoni (SPT3,,4 ve NIH9)değerlendirilen iki ortak testleri otomatik gıda ve sıvı alımı izleme sistemi kullanarak gıda ve su alımının ölçümü ile birleştirdik. Bu prosedür, lezzetli maddelerin tüketiminin doğru araştırılmasını sağlar ve depresyon benzeri davranışların bir özelliği olarak sıçanlarda zevk deneyimi hakkında bilgi sağlar. Manuel ölçümle ilişkili yukarıda belirtilen hatalar, daha sonra daha ayrıntılı olarak gösterilen farklı yaklaşımlar kullanılarak azaltılır.

Mikroyapı hakkında bilgi vermek için, bu protokolde kullanılan otomatik alım izleme sistemi10 her saniye gıda (±0.01 g) ağırlığındadır. Böylece, istikrarlı bir ağırlık olarak belgelenmiştir "yeme değil", ve "yeme" olarak kararsız bir ağırlık. "Bout" bir olaydan önce ve sonra kararlı ağırlık değişimi olarak tanımlanır. Bir öğün bir veya daha fazla nöbetten oluşur ve sıçanlarda minimum boyutu 0.01 g olarak tanımlanmıştır. Bir öğün farelerde başka bir yemekten 15 dakika (standart değer) ile ayrılır. Böylece, gıda alımı nöbetleri 15 dakika içinde meydana gelen ve kilo değişimi olarak eşit veya 0,01 g daha büyük bir yemek olarak kabul edilir. Bu protokolde değerlendirilen yemek parametreleri arasında yemek süresi, öğünlerde geçirilen süre, müsabaka boyutu, nöbet süresi, nöbetlerde geçirilen süre, ilk müsabakaya geç kalma ve nöbet sayısı yer almaktadır.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Hayvan bakımı ve deneysel prosedürler belirli kurumsal etik yönergeleri izledi ve hayvan araştırma için devlet otoritesi tarafından onaylandı.

1. Otomatik izleme sisteminin çalışması

NOT: Otomatik izleme sistemini çalıştırırken, eylemden hemen önce yazılımda yer alan yorum kutusundaki her eylemi belgelemek çok önemlidir. Açıklama yorum kutusuna yazılmalıdır ve Kaydettuşuna basılarak, belirli bir zaman dilimi ile kaydedilir. Sistem sürekli olarak kaydedildiğinden, verileri analiz ederken zaman puanları önemlidir ve analiz için ilgi süresi belirtilmelidir.

  1. Otomatik izleme sisteminin kurulumu, kullanılması ve bakımı
    NOT: Bu protokolde 250-300 g (~10 haftalık) ağırlığında yetişkin erkek Sprague Dawley sıçanları kullanılmıştır. Bu alışma döneminde gruplar halinde sıçanlar ev için tavsiye edilir. Çevre koşulları aşağıdaki parametrelerle kontrol edilmelidir:.M 12 saat/12 saat karanlık/ışık döngüsü, %6:00'da ışıklar açık, nem %45-65, sıcaklık 21-23 °C, ve su ve standart kemirgen diyetine reklam libitum erişimi. Günlük kullanım, hayvanların araştırmacılara alışmasını sağlar.
    1. Fareleri ayırın, böylece her hayvanın ayrı bir kafesi vardır. Protokol sırasında her farenin ayrı kaldığından emin olun.
    2. 1-2 cm kalınlığında bir tabaka ile düzenli yatak ile konut kafesleri doldurun. Bu (azaltılmış) miktar, mikroterazilerin ve haznelerin dökülme ile kirlenme olasılığını azaltarak ölçüm hatalarını azaltır. Ölçüm hatalarını azaltmak için kağıt dokuları atlarken, plastik tüpler (örneğin, 8 cm çapında plastik bir drenaj borusu 20 cm uzunluğunda bir parça) ve zenginleştirme olarak odun kemirme ekleyin.
    3. Kafeslerin ön tarafındaki özel deliklere mikro terazili iki kapalı kafes yuvası takarak otomatik katı ve sıvı gıda alımı ölçümü için kafesleri hazırlayın. Kafes bağlar üzerinde iki boş hazneler yerleştirin, bir yemek için ve şişe için bir.
      NOT: Mikro teraziler kablolar aracılığıyla bilgisayara bağlı bir kayıt sistemine bağlanır ve ilgili yazılım bilgisayara yüklenir.
    4. Kayda başlamak için "Monitor" tuşuna basın ve "Başlat" tuşuna basın, ardından verileri kaydetmek için bir yer seçin.
    5. Otomatik alım izleme sisteminin kalibrasyon ("Calibratlet") işlevini kullanarak, hazneleri çıkararak ve terazi ile kafes yuvalarına iki farklı ölçülü ağırlık yerleştirerek her dengeyi ayarlayın. Bunu düzenli zaman aralıklarında yapın (haftalık önerilir).
    6. Bir hazneyi tamamen chow (~100 g) ile doldurun ve boyutu çok küçük olan chow parçalarını ve ufaları çıkarın. Suyu şişeye doldurun (~100 mL) ve diğer hazneye yerleştirin.
    7. Gıda ve suyun konumunu belgeleyin (örn. denge 1: gıda hayvanı 1, denge 2: su hayvanı 1).
    8. Kafese sıçan yerleştirin ve yemek ve reklam libitumiçmek böylece kafes bağlar tüm kapılarını açın.
      NOT: Doğru bir ölçüm için, dökülme bir fırça ile hafifçe temizlik ve gıda kabından küçük gıda kırıntıları kaldırarak günlük dengeleri ve hazneler korumak için gereklidir. Bu büyük ölçüde hatalı ölçüm azaltacaktır. Günlük bakım sırasında tüm kapıları kapatın.
  2. Denemelerden sonra verilere erişim
    1. Analiz edilmesi gereken bir dönemin başlangıç ve bitiş zaman noktalarını (örn. eğitim, test) için yorum kutusunda arama yapın.
    2. Veri Görüntüleyicisi'ni açmak için yazılımdaki "Verileri Görüntüle" üzerine tıklayın.
    3. Saat noktalarını aşağıdaki kutulara "Başlangıç zamanı" ve "Bitiş zamanı" ekleyin. Bilgileri kaydeden bakiyeyi gösteren sol üst köşedeki kareye basın.
    4. Mikroyapı verilerine erişmek için "PSC Toplamları" üzerine tıklayın. Verileri dışa aktarmak için"PSC Tablosunu Dışa Aktar"düğmesine basın.
      NOT: Otomatik izleme kullanarak hayvanların mikro yapısını karşılaştırmak için (örn. vurgusuz vs. stresli) sol üst köşedeki uygun kareye basılarak"Veri görüntüleyici" seçilebilir. PSC Toplamları yalnızca seçilen hayvanın mikro yapısını gösterir. Sistemle istatistiksel analiz yapılamaz. Verilerin bir elektronik tablo programı/analiz yazılımına ayıklanması gerekir.

2. Sakkaroz tercih testinin uygulanması

  1. Eğitim döneminin yürütülmesi
    NOT: Testten önce, hayvanlar kapılardan silolarda sıvılar için iki şişe nin bulunmasına alışkın olmalıdır, kafeslerin üstlerinden yiyecek sağlanmalıdır (kurulum Şekil 1'degösterilmiştir). Bu eğitim süresi en az 2 gün sürmelidir. Hayvanların tutulduğu odadaki kafeslerde yapılır.
    1. Bütün kapıları kapatın. Su şişesini ve gıda kabını mikro dengelerden çıkarın.
    2. Önceden tartılmış yiyecekleri (~50 g) kafesin üstüne yerleştirin ve günlük gıda tüketimini değerlendirmek için düzenli bir denge kullanarak ağırlığını günlük olarak belgeleyin. Gerekirse yeniden doldurun.
    3. Bir şişeyi temiz suyla temizleyin ve yaklaşık 100 mL su yla doldurun. Hazneye geri koy.
    4. İkinci temiz şişeyi 100 mL taze yapılmış %1 sakaroz çözeltisi ile doldurun. Hazneye koy.
      NOT: Şişeleri dikkatlice işaretleyin ve konumlarını belgeleyin (örn. denge 1: su hayvanı 1, denge 2: sakkaroz çözeltisi hayvan 1).
    5. Tüm kapıları aç. İzleme sisteminde eğitimin başlangıcını belgele. Kapıları 24 saat açık bırakın ve her iki şişeye de reklam libitum erişimi elde edin. Saat 24'ten sonra kapıları kapatın ve eğitimin sonunu belgele. 24 saat aralığından elde edilen veriler , "başlangıç zamanı" ve "bitiş saati" ekleyerek otomatik izleme sistemi kullanılarak değerlendirilebilir. 1 saatlik bir test aralığı değerlendirildiğinde yordamlar aynıdır.
    6. Temiz ve her 24 saat şişe leri yeniden doldurun. Taze % 1 sakaroz çözeltisi günlük hazırlayın. Alışkanlık etkilerini önlemek için su ve sakaroz çözeltisi şişesinin konumunu günlük olarak değiştirin.
      NOT: Tercih oranları ~1'e ulaşana kadar tüm hayvanlarda en az 48 saat eğitim edin. Sakaroz tercih oranı eğitimden hemen sonra "Veri görüntüleyici" kullanılarak değerlendirilir. Sakaroz alımının genel alıma oranı olarak hesaplanır (su artı sakaroz alımı).
    7. Testten 24 saat önce, sakaroz solüsyonu ile şişeyi çıkarın, böylece sıçan sadece standart chow ve suya erişebilsin.
    8. Musluk suyu ile dolu bir taze şişe ve her ikisi de ~100 mL ile %1 sakaroz çözeltisi ile doldurulmuş bir şişe hazırlayın.
    9. Testeden önce tüm kapıları kapatın.
    10. Musluk suyu ile dolu şişeyi hazneden çıkarın ve biri musluk suyu yla dolu diğeri %1'lik sakaroz çözeltisi ile dolu iki taze şişeyi hazneye yerleştirin.
    11. Tüm kapıları açın, testin başlangıcını izleme sisteminde belgele. Kapıları 60 dakika açık bırakın. 60 dk sonra kapıları kapatın ve testin sonunu belgele.
    12. Verileri değerlendirin (örn. sakaroz/toplam sıvı alım oranı).
      NOT: Test, arada eğitim aralıkları (en az 2 gün) ile birkaç kez tekrarlanabilir.

3. Yenilik kaynaklı hipofaji testinin uygulanması

  1. Eğitim döneminin yürütülmesi
    NOT: Test öncesinde günlük 30 dk eğitim süresi 5 gün önerilir (kurulum Şekil 2'degösterilmiştir). Amaç deney öncesi lezzetli atıştırmalık alımı istikrarlı bir taban çizgisi elde etmektir. Hayvanların tutulduğu odadaki kafeslerde yapılır.
    1. Tüm kapıları kapatın ve standart chow ile huni çıkarın.
    2. Taze bir hazneyi lezzetli atıştırmalık (~50 g) ile doldurun. Parçalanmayı önlemek için krakerleri hazneye dikkatlice yerleştirin. Hazneyi mikro terazinin üzerine kafes yuvasına yerleştirin.
    3. Fare atıştırma ve su reklam libitum erişimi böylece 30 dakika için kapıları açın. İzleme sisteminde eğitimin başlangıcını belgele.
      NOT: Sıçan eğitim süresi boyunca standart chow erişimi olmamalıdır.
    4. 30 dakika sonra kapıları kapatın ve izleme sisteminde eğitimin sona erini belgelayın. Aperatifi standart yemekle değiştirin.
    5. 1) kararlı temel lezzetli atıştırma alımı elde edilene kadar (örn. 1.5-2.0 g/30 dk) ve 2) alım istatistiksel olarak eğitim günleri arasında farklılık göstermez.
  2. Yenilik kaynaklı hipofaji testinin ifası
    1. Otomatik gıda alımı izleme sistemine bağlı yatak veya zenginleştirme olmadan boş, taze temizlenmiş bir kafes hazırlayın. Kafes bağlar üzerinde lezzetli bir aperatif ile musluk suyu ve huni bir şişe ile bir huni yerleştirin.
      NOT: Roman kafesi farelerin tutulduğu ve eğitimin yapıldığı aynı odaya yerleştirilmelidir. Kapıları kapalı tut.
    2. Ev kafesi ve roman kafesyer sıçan çıkarın.
    3. 30 dakika boyunca tüm kapıları açın. İzleme sistemindeki testin başlangıcını belgele.
      NOT: Atıştırmaya erişimin 30 dakikası boyunca, atıştırmalık alımının büyüklüğü ve altta yatan mikroyapı parametreleri (örn. ilk öğüne gecikme) otomatik gıda alımı izleme sistemi kullanılarak kaydedilir.
    4. 30 dakika sonra kapıları kapatın ve test in sonunu belgele. Fareyi ev kafesine geri yerleştirin.
      NOT: Test, arada eğitim aralıkları (en az 5 gün) ile birkaç kez tekrarlanabilir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Veri dağıtımını test etmek için Kolmogorov-Smirnov testi kullanıldı. Veriler normal olarak dağıtıldığında T-testleri kullanıldı ve değilse Mann-Whitney-U testi kullanıldı. Tek yönlü ANOVA ve ardından Tukey post-hoc testi normalde dağıtılan birden fazla grup karşılaştırması için kullanılmıştır. Tek yönlü ANOVA ve ardından Dunn'ın çoklu karşılaştırma testi normal olmayan dağılım durumlarında kullanıldı. P < 0.05'te gruplar arasındaki farklar anlamlı kabul edildi.

SPT bu çalışmada naif sıçanlar üzerinde yapıldı. Sakaroz çözeltisi tüketimi artmış ve eğitim süresi içinde su alımı azalmıştır(Şekil 3). Eğitimin ilk gününde sıçanlar 24.40 mL ± 3.48 mL sakaroz çözeltisi(Şekil 3A)ve 4.83 mL ± 0.89 mL normal su(Şekil 3B)içtiler ve 0,80 ± 0,06 sakaroz tercih oranı elde ettiler (Şekil 3C). Eğitimin ikinci gününde, sıçanlar sakaroz çözeltisi tüketimini 4,49 mL ± 33,77mL'ye (önemli değil, p = 0,17 vs. gün 1) yükselttiler ve su alımını 0,42 mL ± 0,13 mL 'ye(p < 0,001 vs. gün 1) düşürerek 0,99 ± 0,004(p < 0,05 vs1; Şekil 3C). Burada sekiz sıçan incelendi; böylece, her veri noktası sekiz hayvantüretilmiştir. Mikro yapısı da dahil olmak üzere sıvı alımı otomatik olarak kaydedildi. Veriler, Data görüntüleyicikullanılarak PSC Toplamları'ndan çıkarıldı.

60 dk testi sırasında ortalama değeri 2,91 mL ± su tüketilmeden 0-6,18 mL arasında tüketilen hayvanlar su tüketerek 0,99 ± 0,00 oranında sakaroz tercih oranı elde ettiler. Test sırasında sıvı tüketmeyen hayvanlar analiz dışı bırakıldı. Sekiz sıçan incelendi. Sıvı alımı otomatik olarak kaydedildi.

Otomatik alım izleme sistemi, test sırasında otomatik olarak değerlendirilen sakaroz alımı mikroyapısı hakkında veri sağladı ve bu veriler Veri görüntüleyicikullanılarak PSC Toplamlarından çıkarıldı. Bu parametreler öğün büyüklüğü(Şekil 4A), öğün süresi(Şekil 4B),öğünlerde saniyecinsinden geçirilen süre(Şekil 4C)ve yüzdeleri(Şekil 4D),öğün sıklığı (Şekil 4E), ilk öğüne gecikme (Şekil 4F), öğünler arası aralık (Şekil 4G), içme oranı (Şekil 4H), bout süresi (Şekil 4J), saniye içinde nöbetlerde harcanan süre(Şekil 4K) ve yüzdeleri (Şekil 4L).Figure 4J

Otomatik alım izleme sisteminin avantajlarını daha fazla incelemek için, yukarıda gösterilen veriler geleneksel manuel değerlendirmeler kullanılarak elde edilen verilerle karşılaştırıldı (şişelerin eğitim/test döneminden önce ve sonra el ile tartımı, Tablo 1). Eğitimin ilk gününde, sakaroz(p < 0.01) ve su alımı(p < 0.01) otomatik olarak manuel olarak değerlendirildiğinde önemli ölçüde daha yüksekti. Eğitimin ikinci gününde su alımı(p < 0.001) ve sakaroz tercih oranı(p < 0.01) iki grup arasında ve test sırasında farklılık göstermektedir. Tüm parametreler, yani sakaroz alımı(p < 0.001), su alımı(p < 0.001) ve sakaroz tercih oranı(p < 0.001) gruplar arasında farklıydı, muhtemelen hatalı olarak yüksek ölçüm veya dökülme nedeniyle el ile değerlendirildi.

Eğitim sırasında lezzetli atıştırmalık genel alımı sürekli arttı: 0.48 g ± 0.14 g (gün 1), 1.05 g ± 0.32 g (gün 2), 1.48 g ± 0.56 g (gün 3), 1.1 g ± 0.39 g (gün 4) ve 1.91 g ± 0.68 g (gün 5), ilk 2-3 gün boyunca bir adaptasyon gösteren. Benzer şekilde, öğün boyutu eğitim günleri arasında bir artışa doğru eğilimle(Şekil 5A, p = 0,12), yemek süresi ise(Şekil 5B) değildi (p > 0.05). Aynı şekilde, öğünlerde harcanan zaman(Şekil 5C),gecikme süresi (Şekil 5D), bout boyutu (Şekil 5E), bout süresi (Şekil 5F), nöbetlerde harcanan süre (Şekil 5G) ve nöbet sayısı(Şekil 5H)gibi diğer mikroyapısal parametreler bu günler arasında anlamlı olarak farklı değildi(p > 0.05). Sekiz sıçan incelendi; böylece, her veri noktası sekiz hayvantüretilmiştir. Mikroyapı da dahil olmak üzere atıştırmalık alımı otomatik olarak kaydedildi. Veriler, Data görüntüleyicikullanılarak PSC Toplamları'ndan çıkarıldı.

Test gününde, yeni bir ortamda atıştırmaya maruz kalan naif sıçanlar 0,98 g ± 0,34 g(Şekil 6A)lezzetli atıştırmalık alımı gösterdi. Yemek süresi(Şekil 6B),öğünlerde geçirilen süre(Şekil 6C),gecikme süresi (Şekil 6D), bout boyutu (Şekil 6E), bout süresi (Şekil 6F), nöbetlerde geçirilen süre ( Şekil 6G ), ve nöbet sayısı(Şekil6G),otomatik olarak değerlendirildi ve PSC Toplamlarından Veri görüntüleyicisikullanılarak çıkarıldı.Figure 6G

Yenilik kaynaklı hipofaji testinin özgüllüğünü incelemek için, naif ve stressiz sıçanlardan yukarıda açıklanan veriler, hipotalamus-hipofiz-adrenal stres eksenini uyaran ve stres veanksiyeteyitetikleyen kortikotropin salınımfaktörünün intracerebroventricular enjeksiyonu yapılanlarla karşılaştırıldı. Protokol bölümünde açıklandığı gibi her hayvanın tek tek verileri "Veri görüntüleyici" ve "PSC Toplamları" kullanılarak elde edilebildi. Tek tek veriler daha sonra bir elektronik tablo programındaki gruplara göre bir araya getirilmiş ve istatistiksel farklılıklar açısından çözümlenmiştir. Her iki grup arasında öğün büyüklüğü(p < 0.01) ve bout boyutu(p < 0.01) arasında anlamlı bir fark saptırıldı(Tablo 2). Müsabaka boyutundaki fark manuel değerlendirme kullanılarak tespit edilemezdi.

Figure 1
Şekil 1: Sakaroz tercih testinin kurulumu. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 2
Şekil 2: Yenilik kaynaklı hipofaji testinin kurulumu. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 3
Şekil 3: Sakaroz tercih itercihi için eğitim dönemi. Sakaroz çözeltisi (A) ve su(B)tüketimi 2 gün boyunca 24 saat üzerinden değerlendirildi. Sakaroz tercih oranı(C)buna göre hesaplanmıştır. Veriler sekiz sıçandan ortalama ± SEM olarak sunulur (*p < 0.05, ***p < 0.001). Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 4
Şekil 4: Sakkaroz tercih testi. Test günü, sıvı alımı mikroyapısı (burada, sakaroz alımı için gösterilen) kuşkulanan yemek boyutu(A),yemek süresi(B), öğünlerde harcanan zaman için 1 saat üzerinden analiz edildi (C), öğünlerde harcanan zaman % (D), öğün sayısı (E), ilk öğüne gecikme (F), öğün aralığı (G), içme oranı (H), süre (I), bout boyutu (J), s (K) nöbetlerinde geçirilen süre (L). Veriler ortalama sem ± olarak sunulur, n = 8 sıçan. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 5
Şekil 5: Yenilik kaynaklı hipofaji testi için eğitim dönemi. Öğün büyüklüğü(A), yemek süresi(B), öğünlerde geçirilen süre s (C), gecikme süresi ilk müsabaka(D), bout boyutu (E), bout süresi (F), nöbetlerde geçirilen süre(G),ve nöbet sayısı (H) 5 günlük bir süre içinde değerlendirildi. Veriler ortalama sem ± olarak sunulur, n = 8 sıçan. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 6
Şekil 6: Yenilik kaynaklı hipofaji testi. Test gününde, gıda alımı mikroyapısı, kuşklanan öğün boyutu (A), öğün süresi (B), öğünlerde geçirilen süre (C), ilk nöbete gecikme (D), bout boyutu (E), nöbet süresi (F), nöbetlerde harcanan süre (G) ve nöbet sayısı (H) için 1 saatin üzerinde analiz edildi. Veriler ortalama sem ± olarak sunulur, n = 8 sıçan. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Parametre Manuel değerlendirme Otomatik alım izleme
Eğitim süresi (gün 1)
Sakaroz alımı (ml) 63,46 ± 10,2 24.4 ± 3.48**
Su inakte (ml) 12,07 ± 1,62 4.83 ± 0.89**
Sakaroz tercih oranı 0,83 ± 0,03 0.8 ± 0.06
Eğitim süresi (gün 2)
Sakaroz alımı (ml) 45,49 ± 5,75 33,77 ± 4,49
Su inakte (ml) 4,92 ± 0,80 0,42 ± 0,13***
Sakaroz tercih oranı 0,89 ± 0,02 0,99 ± 0,004**
Sakaroz tercih testi
Sakaroz alımı (ml) 10.15 ± 0.53 2,91 ± 0,66****
Su inakte (ml) 6,65 ± 0,68 0 ***
Sakaroz tercih oranı 0,61 ± 0,04 0,99 ± 0,001***

Tablo 1: Naif sıçanlarda sakaroz tercih testi manuel değerlendirme ve otomatik alım izleme sistemi kullanılarak test edilebilmektedir.. Verilerin dağılımı Kolmogorov-Smirnov testi kullanılarak belirlendi. Veriler ortalama ± SEM olarak ifade edilir ve farklılıklar t-testleri veya Mann-Whitney U testi kullanılarak analiz edilmiştir (*p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001 vs. manuel değerlendirme). 

Parametre stressiz Vurguladı
(n=8) (n=11)
Yemek boyutu (g/300g bw) 0,98 ± 0,29 0,35 ± 0,07**
Yemek süresi (sn) 998,29 ± 163,87 1209,11 ± 114,67
Öğünlerde harcanan süre (sn) 998,29 ± 163,87 989,27 ± 174,73
Öğünlerde harcanan zaman (%) 55,46± 9,10 54,96 ± 9,71
İlk müsabakaya gecikme (sn) 241,25 ± 45,96 185,50 ± 57,52
Müsabaka boyutu (g) 0,21 ± 0,03 0,08 ± 0,01**
Müsabaka süresi (sn) 70,70 ± 14,12 45,59 ± 4,20
Nöbetlerde geçirilen süre (sn) 439,75 ± 125,94 208,73 ± 45,01
Nöbetlerde harcanan süre (%) 24.43 ± 7.00 11.6 ± 2.50
Nöbetler (sayı) 5,63 ± 0,67 4,64 ± 0,80

Tablo 2: Naif unstressed ve stresli (CRF enjekte) sıçanlarda yenilik kaynaklı hipofaji testi. Stres grubunda icv-kanüle sıçanlara 0.6 μg/5μL CRF enjekte edildi ve daha sonra yenilik kaynaklı hipofajiye maruz kaldı. Verilerin dağılımı Kolmogorov-Smirnov testi kullanılarak belirlendi. Farklılıklar, verilerin dağılımına bağlı olarak t-testleri veya Mann-Whitney U testi kullanılarak analiz edildi. Daha iyi karşılaştırılabilirlik için, tüm veriler ortalama ± SEM (**p < 0,01 vs. stressedsiz) olarak ifade edilir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Sakaroz tercihi ve yeniliği neden olan hipofaji testleri sıçanlarda anhedoniyi değerlendirmek için kullanılan iki tekniktir. Otomatik gıda alımı izleme sistemi ile bunların kombinasyonu bozulmamış sıçanlarda daha ayrıntılı analiz sağlar ve hatalı ölçüm azaltır.

Hataların görülme sıklığı farklı yaklaşımlarla azalır. İlk olarak, dökülme nedeniyle meydana gelen hatayı gidermek için, gıda haznesi ve kapı arasındaki boşluk, kemirme sırasında oluşan kırıntıların entegre tepsiye düşmesini sağlar. Kafes yuvalarında bu dökülme toplayarak, ölçüme dahil edilirler (dökülme hala dengede olduğundan, ölçümü etkilemez). İkinci olarak, istifleme önlemek için, sıçan kafesi montaj açılması açılış içinde kafası ile gıda haznesi hayvan yemek için izin vermek için yeterince büyük, ama yemek sırasında ellerini kullanmak için hayvan Yeteneğini sınırlamak için yeterince küçük. Bu, yiyecekleri alıp kafese getirme yeteneklerini kısıtlar.

Üçüncü olarak, sistem sıvı kaybını azaltır, çünkü sıvı şişe, astarlama sonra, sızıntı yapmaz, ve buharlaşma sadece yavaş oluşur (yaklaşık <10 mg /h) hassas paslanmaz çelik top / sipper tüp arayüzü. Ayrıca, sistem şişeleri otomatik olarak tarttığı için, kayıt sırasında şişelerin işlenmesi gerekli değildir, bu da hataların yaygın bir nedenidir. Manuel ve otomatik ölçümler arasındaki karşılaştırmada görülen farklılıkların(Tablo 1) şişelerin manuel kullanımı sırasında kasıtsız kayıplardan kaynaklandığından şüpheleniliyor.

Otomatik gıda alımı izleme sisteminin kullanımı, katı ve sıvı gıda alımının ayrıntılı analizi ve altta yatan gıda alımı mikroyapısı nın değerlendirilmesi10gibi çeşitli avantajlar sağlar. "Mikroyapı" terimi gıda veya sıvı alımı modelini daha ayrıntılı olarak açıklar. Otomatik alım izleme sistemi olmayan çalışmalarda, alım, ilgi çekici bir zaman diliminin başında ve sonunda gıda/sıvı tartılarak ölçülür. Bu yaklaşımla elde edilen tek bilgi, belirli bir süre içinde toplam tüketimdir.

Buna karşılık, otomatik izleme sistemi bu dönemde tüketim hakkında daha fazla bilgi sağlar, çünkü her saniye mikro dengelerin ağırlığındaki değişiklikleri kaydeder. Kayıtlar, kemirgenin ne zaman yemeye başladığını, ne sıklıkta yediğini, ne kadar süre yediğini, ne kadar yediğini, yemek arasındaki molaların ne kadar sürdüğünü vb. ayrıntılarıyla anlatabilir. Manuel ölçüm kullanarak otomatik sisteme benzer veriler elde etmek için, kullanıcıların test/eğitim sırasında içeriği sık sık ölçmeleri ve bu nedenle hayvanları önemli ölçüde rahatsız etmesi gerekir. Otomatik sistem ile, kemirgenler eğitim oturumları ve test sırasında rahatsız edilmeden kalır.

Kemirgenler için kullanılabilir otomatik alım sistemlerinin çok sayıda göz önüne alındığında, burada açıklanan protokol için belirtilen bir model gerekli olduğunu unutmayın. Ancak, bu sistem çok hassastır. Çevresel gürültüden (ölçekte düşük düzeyde titreşim veya kütlenin titremesi) kaynaklanan hataları önlemek için, sistemin algoritması toplanan değerleri saniye saniye değerlendirir ve yalnızca ortalama 10 değer için "gürültü" için belirlenen noktanın altında olanları kabul eder. Sistem bu gürültü eşiğini aşarsa, değerler besleme nöbetlerini hesaplamak için kullanılan kararlı ağırlıkları hesaplamak için kullanılmaz.

Testlerin yürütülmesi ile ilgili olarak, birkaç kritik noktaları akılda tutulmalıdır. Tüm davranıştestleri günün aynı saatinde yapılmalıdır, sirkadiyen değişiklikler hayvanların davranışlarını etkileyebilir gibi12,13. Çoğu çalışma ışık evresinde davranışsal testler gerçekleştirirken, burada tüm testler karanlık evrede yapılmıştır. Kemirgenler gece hayvanlarıdır ve bu nedenle karanlık evrede aktiftirler, ışık evresinde daha düşük keşif aktivitesi13 ile uykuda veya daha az aktifolan 12. Böylece, davranışsal testler daha fizyolojik karanlık fotoğraf döneminde appriopriate olduğunu.

Sakaroz tercih testi için% 0.5-10 arasında değişen sakaroz çözeltisinin farklı konsantrasyonlarda kullanılmıştır dikkat4etmek önemlidir4 ,7,14. Bunlar öncelikle türlere, suşa, cinsiyete ve yaşa bağlı olarak seçilir, ancak özellikle eğitim sırasında gözlemlenen içme davranışına göre seçilirler (tüm hayvanlar tedavi/müdahaleden önce yaklaşık olarak aynı miktarda içmelidir). Ancak, yüksek konsantrasyonlar (örn. % 10) depresyon benzeri davranışile bile hayvanlar hala çok tatlı sıvılar4içmek beri anhedoni geçersiz kılabilir.

Ayrıca, yüksek konsantrasyonlar nedeniyle yüksek kalori içeriği daha belirgin sakaroz çözeltisi için tercih etkileyebilir. Bu nedenle bu protokol için %1 sakaroz çözeltisi seçilmiştir. Bazı çalışmalarda herhangi bir kalori etkisi önlemek için sakaroz15 yerine sakarin kullanılmasını öneririz. Ancak tüketilen % sakaroz çözeltisinin ortalama kalori içeriği (2 g %1 sakaroz çözeltisi 0,08 kcal içerir) aynı miktardaki standart chow'dan çok daha düşüktür (2 g 7,8 kcal içerir). Böylece, bu nokta ikincil görünüyor.

Ayrıca, otomatik gıda alımı izleme sistemi kullanılarak burada değerlendirilen temel sakaroz tercih oranının manuel değerlendirme (farelerde0,7 ile 8,genç erişkin sıçanlarda 0,6, yaşlı erkek Sprague Dawley sıçanlarda0,6 16)ile daha yüksek (0,99) olduğunu da belirtmek önemlidir. Konvansiyonel tartım kafeslere takılması ve çıkarılması sırasında sıvı kaybına neden olduğundan, bu durum şişelerin işlenmesinden kaynaklanıyor olabilir. Bu durum Tablo 1'de gösterilen sonuçlarla daha da kanıtlanır. Bu nedenle, otomatik izleme sisteminin kullanımı anhedoni tespit etmek için daha uygun olabilir, gıda alımının hedonik yönlerini daha fazla stimülasyon tavan etkileri nedeniyle cevapsız olabilir.

Yenilik kaynaklı hipofaji testi ile ilgili olarak, fareler test gerçekleştirmeden önce lezzetli aperatif alımı için istikrarlı bir temel geliştirmek için izin vermek çok önemlidir. Sadece farelerin içinde ve arasında kararlı bir taban çizgisine ulaşıldığında gerçek test yapılmalıdır. Aksi takdirde, müdahalenin etkileri (örneğin, ilaç, stres, vb.) gözden kaçabilir veya taban çizgisindeki dalgalanmalar yanlış yorumlanabilir. Ayrıca yeni kafes hipofaji ile sonuçlanan bir yenilik stresine neden olduğundan emin olmak önemlidir. Çeşitli protokoller yeni bir kafes kullanımının tek başına yeterli olduğunu gösterse de, sıçanların genellikle haftalık kafes temizliği/değişiminde kullanılması nedeniyle, daha önce kullanılmayan ancak yatak ve zenginleştirme içeren kafeslerin strese yol açamayabileceğini gözlemledik. Bu nedenle, boş, yeni bir kafes kullanılmalıdır. Test öncesi gıda alımı da sonuçları etkileyebileceğinden, testten önce gıda alımı izlenmelidir. Bu kolayca otomatik bir şekilde yapılabilir.

Literatürde, çeşitli alternatif testler depresyon benzeri davranışın farklı yönlerini değerlendirmek için kullanılır (genellikle umutsuzluk yerine anhedoni); ancak, bu el yazması içinde gösterilen yöntemlerin çeşitli avantajları vardır. Depresyon benzeri davranışın bir parçası olarak davranışsal umutsuzluğu değerlendirmek için yaygın olarak kullanılan alternatif bir yöntem zorunlu yüzme testi4'tür. Bu vesileyle, hiçbir gıda tüketimi değerlendirilir; bu nedenle, yanlışlığı ölçme riski yoktur.

Bu protokol diğer birçok dezavantajları taşır. Yeni bir inceleme, zorunlu yüzme testi aslında stres başa çıkma stratejileri değil, depresyon benzeri davranış 17 ölçen bir test olduğusonucunavardı. Buna ek olarak, bir crossover tasarım hayvan refahı "üç R" göre hayvan sayısını azaltmak için tercih edilirse, zorla yüzme testi uygulanamaz, test hayvanların davranışı üzerinde uzun ömürlü (travmatik) etkisi uygulayabilir çünkü18.

Buna karşılık, SPT ve NIH hem hiçbir travmatik yönleri var ve tekrarlanabilir. Ayrıca, spt ve NIH önce eğitim aşaması tüketim için bir alışkanlık kurmak unutmayın; bu nedenle, protokolü yinelemek mümkündür. Testten sonra, lezzetli gıda (sakkaroz çözeltisi veya aperatif) kaldırılır ve eğitim testten sonra yaklaşık 24 saat yeniden getirilir; böylece, kemirgenler lezzetli uyarıcı erişimi olmadan bir mola var. Aradan sonra, adaptasyon ile yeni bir eğitim dönemi yaklaşık 1 bir tercih oranı sağlamak için gerçekleşmesi gerektiğini varsayılır veya istikrarlı bir temel atıştırma alımı testleri tekrarlamadan önce elde edilir.

Zorunlu yüzme testi benzer bir test kuyruk süspansiyon testi, hayvanların kuyruk tarafından askıya alınır ve depresyon benzeri davranış bir işareti olarak yorumlanan bir hareketsiz duruş geliştirmek kısa vadeli ve kaçınılmaz stres dönemi19. SPT ve NIH hem fare lerde hem de sıçanlarda kullanılabilirken, sıçanlar ortalama20'nindaha yüksek olması nedeniyle kuyrukları tarafından askıya alınmamalıdır, bu test sadece farelerde kullanılabilir.

Bu el yazmasında sunulan testlerin diğer avantajları yenilik kaynaklı hipofaji testinin iyi yapı geçerliliği sergilemesidir; bu nedenle, iddialarını iyi21,22kadar ölçer . Sonuç olarak, tüketilen lezzetli madde miktarı anhedoni yoğunluğu ile ilişkilidir, diğer davranış testleri ile SPT ve NIH sonuçlarının uygunluğu ile doğrulanan12. Ayrıca, hem sakaroz tercih testi ve yenilik kaynaklı hipofaji testi iyi yüz geçerliliği var. Onlar subjektif ne amaçlanmıştır ölçme olarak görülüyor (burada, anhedonia lezzetli maddelerin azaltılmış alımı olarak değerlendirilir)21,22.

Otomatik alım izleme sisteminin en önemli sınırlamaları, sistemin uygun eğitim ve günlük bakımı/temizliği için gerekliliklerdir ve bu da onu manuel protokollerden daha yoğun bir çalışma haline getirir. Önceki deneylerde10, bu genç sıçanlar otomatik sisteme uyum rağmen, yaşlı sıçanlar bazen yok gözlenmiştir. Bu hayvanlar belli ki deneyden dışlanmalıdır.

Davranış testinin sınırlamaları ile ilgili olarak, eğitimin de zaman alıcı olduğu belirtilmelidir, özellikle NIH. Ayrıca, protokoller hem kısa vadeli, hem de uzun vadeli uygulama yetersiz beslenmeye yol açabilir. Şimdiye kadar, literatür açlık durumlarında bu testlerin kullanımını rapor etmez (örneğin, anoreksiya nervoza için bir model, yaygın depresyon belirtileri ile ilişkili bir yeme bozukluğu), bu yüzden açlık durumları için kullanımları hiçbir öneri yoktur.

Bu protokol ile, sadece anhedoni (sıvı / aperatif azaltılmış alımı) olup olmadığını tespit etmek mümkündür. Ancak, özellikle anhedoni derecesini ölçmek mümkün değildir. Gelecekte, farklı sakaroz konsantrasyonları ile birkaç şişe giriş daha fazla anhedoni ölçmek için olası bir ek olabilir. Genel olarak, otomatik alım izleme kullanımı, ilaç çalışmaları için içme suyunda çözünmüş ilaçların oral alımını izlemek gibi, alımının doğru bir şekilde saptanması gerekli olan her deneyde yararlı olabilir.

Özetle, sakaroz tercih testi ve yenilik kaynaklı hipofaji testi kemirgenlerde depresyon benzeri davranışın bir parçası olarak anhedoniyi değerlendirmek için kurulmuş protokollerdir. Otomatik gıda alımı izleme sistemi ile birleştirildiğinde, hatta ince farklılıklar güvenilir ve tekrarlanabilir bir şekilde tespit edilebilir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

A.S. a & r Berlin, Boehringer-Ingelheim, Takeda ve Schwabe için danışmandır. Çıkar çatışması yok.

Acknowledgments

Bu çalışma Alman Araştırma Vakfı (STE 1765/3-2) ve Charité Üniversitesi Finansmanı (UFF 89/441-176, A.S.) tarafından desteklenmiştir.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Assembly LH Cage Mount - RAT-FOOD - includes Stainless cage mount, hopper, blocker, coupling Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA BCMPRF01
Assembly LH Cage Mount unplugged - RAT - FOOD includes stainless steel cage mount, hopper, blocker, unplugged adapter, coupling Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA BCMUPRF01
cage w/ 2 openings - RAT - costum modified cage - includes cage top and standard water bottle Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA BCR02 single housing
Data collection Laptop Windows - Configured w/ BioDAQ Software Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA BLT003
enrichment (plastic tubes, gnawing wood) distributed by the animal facility
HoneyMaid Graham Cracker Crumbs Nabisco, East Hanover, NJ, USA ASIN: B01COWTA98 palatable snack for NIH test
low vibration polymer rack Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA BRACKR
male Sprague Dawley rats Envigo Order Code: 002
Model #2210 32x Port BioDAQ Central Controller - includes cables, and calibration kit Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA BCC32_03
Peripheral sensor Controller - includes cable Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA BPSC01
SigmaStat 3.1 Systat Software, San Jose, CA, USA statistical analysis
Stainless steel blocker Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA BBLKR
standard rodent diet with 10 kcal% fat Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA D12450B
sucrose powder Roth 4621.1 for SPT

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. World Health Organization. Depression. , Available from: https://www.who.int/health-topics/depression (2018).
  2. Reddy, M. S. Depression: the disorder and the burden. Indian Journal of Psychological Medicine. 32 (1), 1-2 (2010).
  3. Cryan, J. F., Mombereau, C. In search of a depressed mouse: utility of models for studying depression-related behavior in genetically modified mice. Molecular Psychiatry. 9 (4), 326-357 (2004).
  4. Overstreet, D. H. Modeling depression in animal models. Methods in Molecular Biology. 829, 125-144 (2012).
  5. Moreau, J. -L. Simulating the anhedonia symptom of depression in animals. Dialogues in Clinical Neuroscience. 4 (4), 351-360 (2002).
  6. Scheggi, S., De Montis, M. G., Gambarana, C. Making Sense of Rodent Models of Anhedonia. The International Journal of Neuropsychopharmacology. 21 (11), 1049-1065 (2018).
  7. Liu, M. Y., et al. Sucrose preference test for measurement of stress-induced anhedonia in mice. Nature Protocol. 13 (7), 1686-1698 (2018).
  8. Serchov, T., van Calker, D., Biber, K. Sucrose Preference Test to Measure Anhedonic Behaviour in Mice. Bio-Protocol. 6 (19), 1958 (2016).
  9. Dulawa, S. C., Hen, R. Recent advances in animal models of chronic antidepressant effects: the novelty-induced hypophagia test. Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 29 (4-5), 771-783 (2005).
  10. Teuffel, P., et al. Treatment with the ghrelin-O-acyltransferase (GOAT) inhibitor GO-CoA-Tat reduces food intake by reducing meal frequency in rats. Journal of Physiology and Pharmacology. 66 (4), 493-503 (2015).
  11. Binder, E. B., Nemeroff, C. B. The CRF system, stress, depression and anxiety-insights from human genetic studies. Molecular Psychiatry. 15 (6), 574-588 (2010).
  12. Marques, M. D., Waterhouse, J. M. Masking and the evolution of circadian rhythmicity. Chronobiology International. 11 (3), 146-155 (1994).
  13. Valentinuzzi, V. S., et al. Locomotor response to an open field during C57BL/6J active and inactive phases: differences dependent on conditions of illumination. Physiology and Behavior. 69 (3), 269-275 (2000).
  14. Madiha, S., Haider, S. Curcumin restores rotenone induced depressive-like symptoms in animal model of neurotoxicity: assessment by social interaction test and sucrose preference test. Metabolic Brain Disorder. 34 (1), 297-308 (2019).
  15. Strouthes, A. Thirst and saccharin preference in rats. Physiology and Behavior. 6 (4), 287-292 (1971).
  16. Inui-Yamamoto, C., et al. Taste preference changes throughout different life stages in male rats. PloS One. 12 (7), 0181650 (2017).
  17. Commons, K. G., Cholanians, A. B., Babb, J. A., Ehlinger, D. G. The Rodent Forced Swim Test Measures Stress-Coping Strategy, Not Depression-like Behavior. ACS Chemical Neuroscience. 8 (5), 955-960 (2017).
  18. Slattery, D. A., Cryan, J. F. Using the rat forced swim test to assess antidepressant-like activity in rodents. Nature Protocols. 7 (6), 1009-1014 (2012).
  19. Cryan, J. F., Mombereau, C., Vassout, A. The tail suspension test as a model for assessing antidepressant activity: review of pharmacological and genetic studies in mice. Neuroscience and Biobehavioral Review. 29 (4-5), 571-625 (2005).
  20. Can, A., et al. The tail suspension test. Journal of Visualized Experiments. (59), e3769 (2012).
  21. Chadman, K. K., Yang, M., Crawley, J. N. Criteria for validating mouse models of psychiatric diseases. American Journal of Medical Genetics B Neuropsychiatric Genetics. 150 (1), 1-11 (2009).
  22. Powell, T. R., Fernandes, C., Schalkwyk, L. C. Depression-Related Behavioral Tests. Current Protocols in Mouse Biology. 2 (2), 119-127 (2012).

Tags

Tıp Sayı 159 anhedoni testleri hayvan modeli davranış depresyon otomatik gıda ve sıvı alım sistemi sıçanlar
Otomatik Gıda Alımı İzleme Sistemi Kullanan Sıçanlarda Sakaroz Tercihi ve Yenilik Kaynaklı Hipofaji Testleri
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Schalla, M. A., Kühne, S. G.,… More

Schalla, M. A., Kühne, S. G., Friedrich, T., Hanel, V., Kobelt, P., Goebel-Stengel, M., Rose, M., Stengel, A. Sucrose Preference and Novelty-Induced Hypophagia Tests in Rats using an Automated Food Intake Monitoring System. J. Vis. Exp. (159), e60953, doi:10.3791/60953 (2020).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter