Summary
هنا هو بروتوكول لدراسة الاكتئاب مثل والسلوك anhedonic في الفئران. فهو يجمع بين طريقتين سلوكيتين راسختين، وهما تفضيل السكروز واختبارات نقص الفقار الناجمة عن الجدة، ونظام مراقبة تلقائي للطعام والمداواة السائلة، للتحقيق بشكل غير مباشر في سلوك القوارض باستخدام معلمات بديلة.
Abstract
ويتزايد انتشار الاضطرابات الاكتئابية وانتشارها في جميع أنحاء العالم، مما يؤثر على نحو 322 مليون شخص، مما يؤكد الحاجة إلى إجراء دراسات سلوكية في النماذج الحيوانية. في هذا البروتوكول ، لدراسة الاكتئاب مثل والسلوك anhedonic في الفئران ، وتتضافر تفضيل السكروز المنشأة واختبارات نقص الفاتجيا الناجمة عن الجدة مع نظام رصد الطعام والسيولة الآلي. قبل الاختبار، في نموذج تفضيل السكروز، يتم تدريب الفئران الذكور لمدة 2 أيام على الأقل على استهلاك محلول السكروز بالإضافة إلى مياه الصنبور. خلال الاختبار، تتعرض الفئران مرة أخرى إلى محلول السكروز والماء. يتم تسجيل الاستهلاك كل ثانية بواسطة النظام الآلي. نسبة السكروز إلى إجمالي كمية المياه (نسبة تفضيل السكروز) هي معلمة بديلة لـ anhedonia. في اختبار نقص الفاتولوجيا الناجم عن الجدة ، تخضع الفئران الذكور لفترة تدريب يتعرضون فيها لتناول وجبة خفيفة مستساغة. أثناء التدريب، تظهر القوارض وجبة خفيفة خط أساس مستقرة. في يوم الاختبار، يتم نقل الحيوانات من أقفاص المنزل إلى قفص جديد وفارغ يمثل بيئة غير معروفة جديدة مع إمكانية الوصول إلى وجبة خفيفة مقبولة معروفة. النظام الآلي يسجل إجمالي المداهمة وصغر البنية الأساسية (على سبيل المثال، الكمون إلى الاقتراب من وجبة خفيفة)، وتوفير نظرة ثاقبة في السلوكيات anhedonic والقلق. ويوفر الجمع بين هذه النماذج ونظام قياس آلي معلومات أكثر تفصيلاً، إلى جانب درجة أعلى من الدقة عن طريق الحد من أخطاء القياس. ومع ذلك، فإن الاختبارات استخدام المعلمات البديلة وتصور فقط الاكتئاب و anhedonia بطريقة غير مباشرة.
Introduction
في المتوسط، 4.4٪ من سكان العالم يتأثرون بالاكتئاب. هذه تمثل 322 مليون شخص في جميع أنحاء العالم، بزيادة 18٪ مقارنة مع عشر سنوات مضت1. وفقا لتقديرات منظمة الصحة العالمية، والاكتئاب سوف يكون في المرتبة الثانية في ترتيب سنوات الحياة الإعاقة المعدلة في 20202. لمعالجة ارتفاع معدل انتشار الاضطرابات العاطفية ووضع استراتيجيات تدخلية جديدة، من الضروري مواصلة دراسة هذا السلوك. قبل وبالإضافة إلى الفحص في البشر، والدراسات الحيوانية ضرورية.
وقد تم إنشاء العديد من النماذج لدراسة مكونات السلوك الاكتئابي (أي، اختبار السباحة القسري، اختبار تعليق الذيل، اختبار تفضيل السكروز، ونابوخا ً الناجم عن الجدة)3،4. يمكن لاختبار تفضيل السكروز (SPT) ونقصف الدم الناجم عن الجدة (NIH) اكتشاف السلوك الشبيه بالاكتئاب في الحيوانات. هذه الاختبارات نفسها لا تحفز حالة من الاكتئاب في القوارض ولكن تصور التغيرات الحادة في السلوك. كل من اللجنة الفرعية و المعاهد القومية للصحة تقييم سمة مميزة للاكتئاب المعروفة باسم anhedonia، وهو فقدان الاهتمام في ما يلي: الأنشطة مكافأة، والأنشطة التي كانت تتمتع مرة واحدة من قبلالفرد 5،وجانب واحد من ظاهرة معقدة من تجهيز والاستجابة لمكافأة6. كلا الاختبارين دراسة الاستجابة لحافز مجزية في شكل الطعام المستساغ. مدى الاستهلاك بمثابة معلمة بديلة ل anhedonia7،8،9.
وتعتمد قيمة الاختبارات التي تحقق في أندونيا اعتماداً شديداً على التحديد الدقيق للاستهلاك الناتج عن القياس الدقيق لوزن المادة. تقليدياً، يتم إجراء هذا القياس يدوياً مرة واحدة قبل وبعد الاختبار. ومع ذلك، هذا عرضة لقياسات خاطئة لعدة أسباب. أولاً ، تميل القوارض إلى اكتناز الطعام ، مما يعني أنها تزيل الطعام دون استهلاكه على الفور ثم تخفيه في مكان آمن. وهكذا، يمكن إدراج هذا الفقدان في الأغذية في حساب الاستهلاك الكلي. ثانياً، سكب الجرذان الطعام والماء، مما يؤدي إلى فقدان الوزن دون استهلاك كل منها. ثالثاً، يحدث فقدان غير مقصود للسائل بسبب مناولة الزجاجات عن طريق إدخالها وإزالتها من الأقفاص.
في نهج للحد من هذه المصادر من الخطأ، ونحن الجمع بين اثنين من الاختبارات المشتركة تقييم anhedonia (SPT3،,4 و9المعاهد القومية للصحة) مع قياس كمية الطعام والماء باستخدام نظام رصد الغذاء والسائل الآلي. هذا الإجراء يسمح بإجراء فحص دقيق لاستهلاك المواد المستساغة، فضلا عن معلومات عن تجربة المتعة في الفئران كميزة من سمات الاكتئاب مثل السلوك. يتم تقليل الأخطاء المذكورة أعلاه المرتبطة بالقياس اليدوي باستخدام أساليب مختلفة، والتي يتم توضيحها لاحقًا بمزيد من التفصيل.
لتوفير معلومات حول البنية المجهرية، نظام رصد المداهم الآلي المستخدم في هذا البروتوكول10 يزن الغذاء (±0.01 غرام) في كل ثانية. وهكذا، يتم توثيق الوزن المستقر بأنه "لا يأكل"، والوزن غير المستقر كـ "الأكل". يتم تعريف "نوبة" على أنها تغيير في الوزن المستقر قبل وبعد الحدث. تتكون الوجبة من نوبة واحدة أو أكثر وتم تعريف الحد الأدنى لحجمها في الفئران على أنه 0.01 جرام. يتم فصل وجبة من وجبة أخرى في الفئران من قبل 15 دقيقة (قيمة موحدة). وهكذا، يعتبر تناول الطعام وجبة واحدة عندما وقعت نوبات في غضون 15 دقيقة وتغيير الوزن يساوي أو أكبر من 0.01 ز. تشمل معلمات الوجبة التي تم تقييمها في هذا البروتوكول مدة الوجبة، والوقت الذي يقضيه في الوجبات، وحجم النوبة، ومدة النوبة، والوقت الذي يقضيه في النوبات، والكمون إلى المباراة الأولى، وعدد النوبات.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
وقد اتبعت الرعاية الحيوانية والإجراءات التجريبية المبادئ التوجيهية المحددة للأخلاقيات المؤسسية، ووافقت عليها سلطة الدولة للبحوث الحيوانية.
1- تشغيل نظام الرصد الآلي
ملاحظة: عند تشغيل نظام المراقبة الآلي، من المهم توثيق كل إجراء في مربع التعليقات المضمنة في البرنامج مباشرة قبل الإجراء. يجب كتابة الوصف في مربع التعليق، وعن طريق الضغط على حفظ، يتم حفظه مع نقطة زمنية محددة. تكون نقاط الوقت هامة عند تحليل البيانات، حيث أن النظام يسجل بشكل مستمر، ويجب الإشارة إلى فترة الاهتمام للتحليل.
- تركيب نظام الرصد الآلي واستخدامه وصيانته
ملاحظة: يستخدم هذا البروتوكول الذكور البالغين الجرذان Doley Sprague وزنها 250-300 غرام (~ 10 أسابيع من العمر). فمن المستحسن لإيواء الفئران في مجموعات خلال فترة التأقلم. يجب التحكم في الظروف البيئية مع المعلمات التالية: 12 ساعة /12 ساعة دورة داكنة / خفيفة مع أضواء على الساعة 6:00 A.M.، والرطوبة من 45٪-65٪، ودرجة الحرارة من 21-23 درجة مئوية، والوصول إلى المياه والغذاء القوارض الإعلانية. التعامل اليومي تمكن الحيوانات من أن تعتاد على المحققين.- فصل الفئران بحيث يكون لكل قفص الفردية. تأكد من أن كل فأر يبقى منفصلاً أثناء البروتوكول.
- املأ أقفاص السكن بأغطية منتظمة بسمك 1-2 سم. هذا المبلغ (المخفض) يقلل من إمكانية تلوث الزانة الدقيقة والنطاط بالانسكاب، وبالتالي تقليل أخطاء القياس. إضافة أنابيب بلاستيكية (على سبيل المثال، قطعة 20 سم طويلة من أنبوب الصرف البلاستيكي مع قطر 8 سم) والخشب القضم والإثراء، مع حذف الأنسجة الورقية للحد من أخطاء القياس.
- إعداد الأقفاص لقياس تناول الطعام الصلبة والسائلة الآلي من خلال إرفاق اثنين من يتصاعد قفص مغلق مع microbalances إلى الثقوب حسب الطلب في الجانب الأمامي من الأقفاص. ضع اثنين من النطاط فارغة على يتصاعد القفص، واحد لتناول الطعام واحد للزجاجة.
ملاحظة: يتم توصيل الزوارق الدقيقة عبر الكابلات إلى نظام تسجيل موصولة إلى جهاز كمبيوتر ويتم تثبيت البرنامج المعني على الكمبيوتر. - لبدء التسجيل، افتح"مراقبة"واضغط على "ابدأ"،ثم اختر مكانًا لحفظ البيانات.
- باستخدام المعايرة (اضغط على "معايرة") وظيفة نظام الرصد الآلي، ومعايرة كل توازن عن طريق إزالة النطاط ووضع اثنين من الأوزان قياس مختلفة على يتصاعد القفص مع الأرصدة. قم بذلك على فترات زمنية منتظمة (ينصحأسبوعياً).
- ملء واحد النطاط تماما مع تشاو (~ 100 ز) وإزالة قطع تشاو وينهار التي هي صغيرة جدا في الحجم. ملء الماء في زجاجة (~ 100 مل) ووضعها في النطاط الأخرى.
- وثيقة موقف الغذاء والماء (على سبيل المثال، التوازن 1: الحيوان الغذاء 1، التوازن 2: الماء 1).
- ضع الجرذ في القفص وافتح كل أبواب القفص حتى يأكل ويشرب اأشـاة الـ 100.
ملاحظة: لقياس دقيق، فمن الضروري للحفاظ على الأرصدة ونطاط يوميا عن طريق تنظيف بلطف مع فرشاة من انسكاب وإزالة فتات الطعام الصغيرة من حاوية الطعام. وهذا سوف يقلل إلى حد كبير من القياس الخاطئ. أغلق جميع البوابات أثناء الصيانة اليومية.
- الوصول إلى البيانات بعد التجارب
- البحث في مربع التعليقات عن نقاط زمنية بداية ونهاية فترة (مثل التدريب والاختبار) التي تحتاج إلى تحليل.
- انقر على "عرض البيانات" على البرنامج لفتح عارض البيانات.
- إدراج نقاط زمنية في المربعات أدناه "وقت البدء" و "وقت الانتهاء". اضغط على المربع في الزاوية العليا اليسرى التي تشير إلى التوازن الذي سجل المعلومات.
- انقر على"PSC Totals"للوصول إلى بيانات البنية المجهرية. اضغط على الزر"تصدير PSC الجدول" لتصدير البيانات.
ملاحظة: لمقارنة البنية المجهرية للحيوانات الفردية (على سبيل المثال، غير مجهدة مقابل الإجهاد) باستخدام المراقبة الآلية، يمكن اختيار الحيوانات الفردية في"عارض البيانات" عن طريق الضغط على المربع المناسب في الزاوية العليا اليسرى. المجاميع PSC يظهر فقط المجهرية للحيوان المحدد. لا يمكن إجراء التحليل الإحصائي مع النظام. البيانات تحتاج إلى استخراج في برنامج جدول البيانات / تحليل البرمجيات.
2- تنفيذ اختبار التفضيل من السكروز
- إجراء فترة التدريب
ملاحظة: قبل الاختبار، يجب أن تكون الحيوانات معتادة على توافر زجاجتين للسوائل على النطاط من خلال البوابات، في حين ينبغي توفير الطعام من قمم الأقفاص (يتم عرض الإعداد في الشكل 1). وينبغي أن تستمر هذه الفترة التدريبية لمدة يومين على الأقل. يتم تنفيذها في الأقفاص المنزلية في الغرفة التي تعقد فيها الحيوانات.- أغلق جميع البوابات إزالة زجاجة المياه والغذاء حاوية من الزبالة الدقيقة.
- ضع الطعام الذي يزن مسبقًا (~ 50 جرامًا) على الجزء العلوي من القفص ووثق وزنه يوميًا باستخدام توازن منتظم لتقييم الاستهلاك اليومي للغذاء. إعادة التعبئة، إذا لزم الأمر.
- تنظيف زجاجة مع المياه واضحة وإعادة ملء مع حوالي 100 مل من الماء. ضعه مرة أخرى على النطاط.
- ملء زجاجة نظيفة الثانية مع 100 مل من الطازجة 1% محلول السكروز. ضعه على النطاط
ملاحظة: ضع علامة على الزجاجات بعناية ووثق مواقعها (على سبيل المثال، التوازن 1: الماء 1، التوازن 2: حل السكروز 1). - افتحوا جميع البوابات توثيق بدء التدريب في نظام الرصد. اترك البوابات مفتوحة لمدة 24 ساعة ، مما يؤدي إلى وصول libitum الإعلاني إلى كلا الزجاجتين. بعد 24 ساعة، أغلق البوابات ووثق نهاية التدريب. ويمكن تقييم البيانات من الفاصل 24 ح باستخدام نظام الرصد الآلي عن طريق إدراج "وقت البدء" و "وقت الانتهاء". الإجراءات هي نفسها عند تقييم فاصل اختبار 1 ساعة.
- تنظيف وإعادة ملء زجاجات كل 24 ساعة. إعداد حل السكروز الطازج 1٪ يوميا. تبديل موقف المياه وقنينة محلول السكروز يوميا لتجنب آثار التعود.
ملاحظة: إجراء التدريب في جميع الحيوانات على الأقل 48 ساعة حتى تصل نسب التفضيل إلى ~1. يتم تقييم نسبة تفضيل السكروز مباشرة بعد التدريب باستخدام "عارض البيانات". وتحسب كنسبة من السكروز المداهمة إلى إجمالي (الماء بالإضافة إلى تناول السكروز). - 24 ساعة قبل الاختبار، وإزالة زجاجة مع محلول السكروز حتى الفئران لديها إمكانية الوصول إلى الطعام القياسية والماء فقط.
- إعداد زجاجة واحدة طازجة مليئة مياه الصنبور واحدة مليئة حل السكروز 1٪ ، وكلاهما مع ~ 100 مل.
- قبل الاختبار، أغلق جميع البوابات.
- إزالة زجاجة مليئة مياه الصنبور من النطاط ووضع زجاجتين طازجة، واحدة مليئة مياه الصنبور واحدة مليئة حل السكروز 1٪، على النطاط.
- افتح جميع البوابات، وثق بداية الاختبار في نظام المراقبة. اترك البوابات مفتوحة لمدة 60 دقيقة. أغلق البوابات بعد 60 دقيقة ووثق نهاية الاختبار.
- تقييم البيانات (على سبيل المثال، نسبة السكروز/إجمالي كمية السوائل).
ملاحظة: يمكن تكرار الاختبار عدة مرات مع فترات من التدريب (على الأقل 2 أيام) بينهما.
3- تنفيذ اختبار نقص في بفا الناجم عن الجدة
- إجراء فترة التدريب
ملاحظة: قبل الاختبار، ينصح بفترة تدريب يومية مدتها 30 دقيقة لمدة 5 أيام (يظهر الإعداد في الشكل 2). والهدف من ذلك هو تحقيق خط أساس مستقر من تناول وجبة خفيفة مستساغة قبل التجربة. يتم تنفيذها في الأقفاص المنزلية في الغرفة التي تعقد فيها الحيوانات.- إغلاق جميع البوابات وإزالة النطاط مع تشاو القياسية.
- املأ النطاط الطازج مع الوجبة الخفيفة (~ 50 غ). إدراج المفرقعات بعناية في النطاط لمنع الانهيار. وضع النطاط على جبل قفص على رأس الزبالة الدقيقة.
- فتح البوابات لمدة 30 دقيقة بحيث الفئران قد الإعلانية libitum الوصول إلى وجبة خفيفة والماء. توثيق بداية التدريب على نظام الرصد.
ملاحظة: يجب أن يكون الفئران لا الوصول إلى الطعام القياسية خلال فترة التدريب. - إغلاق البوابات بعد 30 دقيقة وتوثيق نهاية التدريب في نظام الرصد. استبدال وجبة خفيفة مع الطعام القياسية.
- كرر هذا يوميا حتى 1) ثابت خط الأساس تناول وجبة خفيفة مستساغة يتحقق (على سبيل المثال، 1.5-2.0 ز/30 دقيقة) و 2) المدابل لا تختلف إحصائيا بين أيام التدريب.
- إجراء اختبار نقص بphagia الناجم عن الجدة
- إعداد فارغة، وتنظيف قفص حديثا دون الفراش أو إثراء تعلق على نظام رصد كمية الغذاء الآلي. وضع النطاط مع زجاجة من مياه الصنبور ونطاط مع وجبة خفيفة مستساغة على يتصاعد القفص.
ملاحظة: يجب وضع القفص الجديد في نفس الغرفة التي تعقد فيها الفئران ويتم التدريب. أبق البوابات مغلقة - إزالة الفئران من القفص المنزل ومكان في قفص الرواية.
- افتح جميع البوابات لمدة 30 دقيقة. توثيق بداية الاختبار في نظام المراقبة.
ملاحظة: خلال 30 دقيقة من الوصول إلى وجبة خفيفة، يتم تسجيل حجم تناول وجبة خفيفة ومعلمات البنية المجهرية الكامنة (مثل، الكمون إلى وجبة أولى) باستخدام نظام رصد تناول الطعام الآلي. - أغلق البوابات بعد 30 دقيقة ووثق نهاية الاختبار. ضع الفأر مرة أخرى في القفص المنزلي.
ملاحظة: يمكن تكرار الاختبار عدة مرات مع فترات من التدريب (على الأقل 5 أيام) بينهما.
- إعداد فارغة، وتنظيف قفص حديثا دون الفراش أو إثراء تعلق على نظام رصد كمية الغذاء الآلي. وضع النطاط مع زجاجة من مياه الصنبور ونطاط مع وجبة خفيفة مستساغة على يتصاعد القفص.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
21- وجرى استخدام اختبار كولموغوروف - سميرنوف لاختبار توزيع البيانات. واستخدمت اختبارات T عندما توزع البيانات عادة، واستخدم اختبار مان - ويتني - يو، إن لم يكن كذلك. ANOVA في اتجاه واحد تليها اختبار بعد مخصص Tukey تم استخدامه للمقارنة مجموعة متعددة موزعة عادة. تم استخدام ANOVA في اتجاه واحد متبوعاً باختبار المقارنة المتعددة الذي أجراه دان في حالات التوزيع غير العادي. واعتبرت الاختلافات بين المجموعات كبيرة عندما p < 0.05.
وقد أجريت اللجنة الفرعية لمنع التعذيب على الجرذان الساذجة في هذه الدراسة. وزاد استهلاك محلول السكروز وانخفض استهلاك المياه خلال فترة التدريب(الشكل 3). في اليوم الأول من التدريب، شربت الفئران 24.40 مل ± 3.48 مل من محلول السكروز(الشكل 3A)و4.83 مل ± 0.89 مل من المياه العادية(الشكل 3B)،مما أسفر عن نسبة تفضيل السكروز من 0.80 ± 0.06 (الشكل 3C). في اليوم الثاني من التدريب، وزادت الفئران استهلاك محلول السكروز تصل إلى 33.77 مل ± 4.49 مل (ليست كبيرة، ع = 0.17 مقابلاليوم 1) وانخفض تناول المياه إلى 0.42 مل ± 0.13 مل (p < 0.001 مقابلاليوم 1)، مما أدى إلى نسبة 0.99 ± 0.004 (p & lt; 0.05 مقابلاليوم 1؛ الشكل 3C). ثمانية فئران درست هنا; وهكذا، يتم اشتقاق كل نقطة بيانات من ثمانية. تم تسجيل كمية السوائل بما في ذلك البنية المجهرية تلقائيا. تم استخراج البيانات من إجماليات PSC باستخدام عارض البيانات.
خلال اختبار 60 دقيقة، تستهلك الحيوانات بين 0-6.18 مل من محلول السكروز بقيمة متوسطة قدرها 2.91 مل ± 0.66 (ن = 8) دون استهلاك الماء، مما أدى إلى نسبة تفضيل السكروز من 0.99 ± 0.00. واستبعدت من التحليل الحيوانات التي لم تستهلك أي سائل خلال الاختبار. تمت دراسة ثمانية فئران. تم تسجيل كمية السوائل تلقائيا.
وقدم نظام الرصد الآلي للمجَلَّم بيانات عن البنية المجهرية لمقَدَرة السكروز التي تم تقييمها تلقائيًا أثناء الاختبار، والتي تم استخراجها من PSC Totals باستخدام عارض البيانات. وكانت هذه المعلمات حجم وجبة (الشكل 4A)، مدة الوجبة (الشكل 4B)، الوقت الذي يقضيه في وجبات الطعام في ثوان (الشكل 4C) والنسب المئوية (الشكل 4D) ، تردد الوجبات (الشكل 4E) ، الكمون إلى الوجبة الأولى(الشكل 4F) )، بين الوجبات الفاصلة (الشكل 4G) ، معدل الشرب (الشكل 4H) ، مدة المباراة (الشكل 4I) ، حجم النوبة (الشكل 4J) ، والوقت الذي يقضيه في نوبات في ثوان (الشكل 4K) والنسب المئوية (الشكل 4L).
ولمزيد من الدراسة لمزايا نظام رصد المداجل الآلية، قورنت البيانات المبينة أعلاه بالبيانات المكتسبة باستخدام التقييمات اليدوية التقليدية (وزن الزجاجات يدوياً قبل وبعد فترة التدريب/الاختبار، الجدول 1). في اليوم الأول من التدريب، كانت السكروز(p < 0.01) وتناول المياه(p < 0.01) أعلى بكثير عند تقييمها يدويًا مقارنةً تلقائيًا. في اليوم الثاني من التدريب، اختلف تناول المياه(ص < 0.001) ونسبة تفضيل السكروز(p < 0.01) بين المجموعتين وأثناء الاختبار. وكانت جميع المعلمات، وهي تناول السكروز(p < 0.001)، وكمية المياه(p < 0.001)، ونسبة تفضيل السكروز(p < 0.001) مختلفة بين المجموعات، ربما بسبب ارتفاع القياس أو الانسكاب بشكل خاطئ عند تقييمها يدويًا.
زيادة مطردة في المداهمة الإجمالية للوجبة الخفيفة المستساغة خلال التدريب: 0.48 غرام ± 0.14 غرام (يوم 1)، 1.05 غرام ± 0.32 غرام (يوم 2)، 1.48 غرام ± 0 .56 ز (يوم 3)، 1.1 غرام ± 0.39 غرام (يوم 4)، و 1.91 غرام ± 0.68 غرام (يوم 5)، مما يشير إلى التكيف خلال أول 2-3 أيام. وبالمثل، اتجه حجم الوجبة نحو زيادة بين أيام التدريب(الشكل 5A، p = 0.12)، في حين أن مدة الوجبة(الشكل 5B)لم تكن (p > 0.05). وبالمثل، فإن المعلمات المجهرية الأخرى مثل الوقت الذي يقضيه في الوجبات(الشكل 5C)، الكمون إلى المباراة الأولى (الشكل 5D) ، حجم النوبة (الشكل 5E) ، مدة النوبة (الشكل 5F) ، الوقت الذي يقضيه في نوبات (الشكل 5G) وعدد نوبات (الشكل 5H) لم تكن مختلفة بشكل كبير بين هذه الأيام (p > 0.05). وتمت دراسة ثمانية فئران؛ وهكذا، يتم اشتقاق كل نقطة بيانات من ثمانية. تم تسجيل تناول الوجبات الخفيفة بما في ذلك البنية الدقيقة تلقائيًا. تم استخراج البيانات من إجماليات PSC باستخدام عارض البيانات.
في يوم الاختبار، أظهرت الفئران الساذجة المعرضة للوجبة الخفيفة في بيئة جديدة تناول وجبة خفيفة مستساغة من 0.98 غرام ± 0.34 ز (الشكل 6A). المعلمات من الطعام تناول المجهرية في يوم الاختبار، بما في ذلك مدة وجبة (الشكل 6B)،الوقت الذي يقضيه في وجبات الطعام (الشكل 6C)، الكمون إلى المباراة الأولى (الشكل 6D)، حجم نوبة (الشكل 6E)، مدة نوبة (الشكل 6F) ، الوقت الذي يقضيه في نوبات (الشكل 6G) ، وعدد نوبات (الشكل 6H) ، تم تقييمها تلقائيا واستخراجها من المجاميع PSC باستخدام المشاهد البيانات.
لدراسة خصوصية اختبار نقص الفقار الناجم عن الجدة ، تمت مقارنة البيانات الموصوفة أعلاه من الفئران الساذجة وغير المجهدة بتلك التي تلقت حقنًا وثنائيًا من عامل الافراج عن الكورتيكوتروبين ، مما يحفز محور الإجهاد الغدة النخامية والكظرية ويحفز الإجهاد والقلق11. تم الحصول على البيانات الفردية لكل باستخدامعارض البياناتوPSC Totals، كما هو موضح في قسم البروتوكول. ثم تم تجميع البيانات الفردية وفقا لمجموعات في برنامج جداول البيانات وتحليلها للفروق الإحصائية. تم الكشف عن فرق كبير في حجم الوجبة(p < 0.01) وحجم النوبة(p < 0.01) بين المجموعتين (الجدول 2). ولم يكن الفرق في حجم النوبة قابلاً للكشف عن ذلك باستخدام التقييم اليدوي.
الشكل 1: إعداد اختبار تفضيل السكروز. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 2: إعداد اختبار نقص في بفا الناجم عن الجدة. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 3: فترة التدريب لاختبار تفضيل السكروز. تم تقييم استهلاك محلول السكروز (A) والمياه (B) على مدى 24 ساعة لمدة 2 يوم. تم حساب نسبة تفضيل السكروز (C) وفقا لذلك. يتم عرض البيانات على أنها متوسط ± SEM من ثمانية فئران(p < 0.05, ***p < 0.001). الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 4: اختبار تفضيل السكروز. في يوم الاختبار ، والهياكل المجهرية المداومة السائلة (هنا ، أظهرت لمتناول السكروز) تم تحليل أكثر من 1 ح لحجم وجبة شاملة (A), مدة الوجبة (B), الوقت الذي يقضيه في وجبات الطعام في ق (C) ، الوقت الذي يقضيه في الوجبات في ٪ (D)، عدد الوجبات (E) ، الكمون إلى الوجبة الأولى (F) ، فاصل بين الوجبات (G) ، معدل الشرب (H) ، مدة نوبة (I) ، حجم نوبة (J) ، الوقت الذي يقضيه في نوبات في ق (K) ، والوقت الذي يقضيه في نوبات في ٪ (L). وتقدم البيانات على أنها متوسط ± SEM، n = 8 فئران. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 5: فترة التدريب لاختبار نقص في بفا الناجم عن الجدة. حجم الوجبة (A) ، مدة الوجبة (B) ، الوقت المستغرق في الوجبات في s (C) ، الكمون إلى المباراة الأولى (D) ، حجم النوبة (E) ، مدة النوبة (F) ، الوقت الذي يقضيه في نوبات (G) ، وعدد النوبات (H) تم تقييمها على مدى فترة 5 أيام. وتقدم البيانات على أنها متوسط ± SEM، n = 8 فئران. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 6: اختبار نقص في البلع الناجم عن الجدة. في يوم الاختبار ، تم تحليل البنية المجهرية الغذائية على مدى 1 ساعة لحجم الوجبة الشاملة (A) ، ومدة الوجبة (B) ، والوقت الذي يقضيه في الوجبات (C) ، والكمون إلى المباراة الأولى (D) ، وحجم النوبة (E) ، ومدة النوبة (F) ، والوقت الذي يقضيه في نوبات (G) وعدد النوبات (H). وتقدم البيانات على أنها متوسط ± SEM، n = 8 فئران. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
| المعلمه | التقييم اليدوي | مراقبة المداهمة الآلية |
| فترة التدريب (اليوم 1) | ||
| السكروز تناول (مل) | 63-46 ± 10.2 | 24-4 ± 3.48** |
| المياه inakte (مل) | 12,07 ± 1,62 | 4.83 ± 0.89** |
| نسبة تفضيل السكروز | 0.83 ± 0,03 | 0.8 ± 0.06 |
| فترة التدريب (اليوم الثاني) | ||
| السكروز تناول (مل) | 45,49 ± 5,75 | 33-77 ± 4-49 |
| المياه inakte (مل) | 4.92 ± 0,80 | 0.42 ± 0.13*** |
| نسبة تفضيل السكروز | 0.89 ± 0.02 | 0.99 ± 0.004** |
| اختبار تفضيل السكروز | ||
| السكروز تناول (مل) | 10-15 ± 0.53 | 2.91 ± 0.66**** |
| المياه inakte (مل) | 6.65 ± 0.68 | 0 *** |
| نسبة تفضيل السكروز | 0.61 ± 0.04 | 0.99 ± 0.001*** |
الجدول 1: اختبار تفضيل السكروز في الجرذان الساذجة باستخدام التقييم اليدوي مقابل نظام رصد المداول الآلية. وتم تحديد توزيع البيانات باستخدام اختبار كولموغوروف - سميرنوف. يتم التعبير عن البيانات على أنها متوسط ± SEM وتم تحليل الاختلافات باستخدام اختبارات t أو اختبار مان-ويتني U اعتمادًا على توزيع البيانات (*p < 0.05, **p < 0.01, ***p < 0.001 مقابلالتقييم اليدوي).
| المعلمه | غير مجهدة | اكد |
| (n = 8) | (ن = 11) | |
| حجم الوجبة (g/300g bw) | 0.98 ± 0.29 | 0.35 ± 0.07** |
| مدة الوجبة (ثانية) | 998-29 ± 163-87 | 1209-11 ± 114-67 |
| الوقت المستغرق في الوجبات (ثانية) | 998-29 ± 163-87 | 989-27 ± 174-73 |
| الوقت الذي يقضيه في الوجبات (%) | 55-46± 9-10 | 54-96 ± 9-71 |
| زمن الوصول إلى المباراة الأولى (ثانية) | 241-25 ± 45-96 | 185-50 ± 57-52 |
| حجم النوبة (ز) | 0.21 ± 0.03 | 0.08 ± 0.01** |
| مدة النوبة (ثانية) | 70-70 ± 14.12 | 45-59 ± 4-20 |
| الوقت الذي يقضيه في نوبات (ثانية) | 439-75 ± 125-94 | 208-73 ± 45.01 |
| الوقت الذي يقضيه في نوبات (٪ ) | 24.43 ± 7.00 | 11-6 ± 2.50 |
| نوبات (عدد) | 5.63 ± 0.67 | 4.64 ± 0.80 |
الجدول 2: اختبار نقص في بف التي يسببها الجدة في الفئران غير المجهدة والمجهدة (حقنة نموذج الإبلاغ الموحد) الساذجة. في مجموعة الإجهاد، تم حقن الجرذان ذات التكبيل المجهري بـ 0.6 ميكروغرام/5 ميكرولتر كرفف CRF وتعرضها لنقص الفاتف الناجم عن الجدة بعد ذلك. وتم تحديد توزيع البيانات باستخدام اختبار كولموغوروف - سميرنوف. تم تحليل الاختلافات باستخدام اختبارات t أو اختبار مان ويتني يو اعتمادًا على توزيع البيانات. لتحسين قابلية المقارنة، يتم التعبير عن جميع البيانات على أنها متوسط ± SEM (**p < 0.01 مقابل.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
وتُعَدّ الأفضلية من السكروز واختبارات نقص في البلعوص التي تُستحث الجدة من التقنيات الراسخة لتقييم أنهدونيا في الفئران. ويسمح الجمع بين هذه المكونات ونظام رصد المداومة الغذائية الآلي بتحليل أكثر تفصيلاً في الجرذان غير المُجَرَّضة ويقلل من القياس الخاطئ.
يتم تقليل حدوث الأخطاء من خلال نهج مختلفة. أولاً، لمعالجة الخطأ الذي يحدث بسبب الانسكاب، فإن الفجوة بين النطاط الغذائي والبوابة تسمح للفتات المتولدة أثناء القضم بالسقوط على الصينية المتكاملة. من خلال جمع هذا الانسكاب على الأقفاص يتصاعد، يتم تضمينها في القياس (منذ انسكاب لا يزال على التوازن، فإنه لا يؤثر على القياس). ثانياً، لمنع الاكتناز، فإن فتحة جبل قفص الفئران كبيرة بما يكفي للسماح للحيوان بتناول الطعام من النطاط مع رأسه داخل الفتحة، ولكنه صغير بما يكفي للحد من قدرة الحيوان على استخدام يديه أثناء تناول الطعام. وهذا يحد من قدرتهم على إزالة الطعام وإحضاره إلى القفص.
ثالثا، يقلل النظام من فقدان السائل غير المقصود لأن الزجاجة السائلة، بعد فتيلة، لا تسرب، ويحدث التبخر فقط ببطء (تقريبا < 10 ملغ / ساعة) في الدقة الفولاذ المقاوم للصدأ الكرة / واجهة أنبوب رشف. بالإضافة إلى ذلك، لأن النظام يزن الزجاجات تلقائيا، والتعامل مع الزجاجات أثناء التسجيل ليس من الضروري، وهو سبب شائع للأخطاء. ويُشتبه في أن الاختلافات التي تُرى في المقارنة بين القياسات اليدوية والمقاييس الآلية(الجدول 1) ترجع إلى فقدان غير مقصود أثناء المناولة اليدوية للزجاجات.
ويوفر استخدام نظام رصد المداومة الغذائية الآلي عدة مزايا، مثل التحليل المفصل للطعام الصلب والسائل وتقييم البنية المجهرية الأساسية للكمية الغذائية التي يتم تناولها10. يصف مصطلح "المجهري" نمط تناول الطعام أو السوائل بمزيد من التفصيل. في الدراسات التي لا يوجد بها نظام رصد تلقائي للمآخذ، يتم قياس المداواة عن طريق وزن الطعام/السوائل في بداية ونهاية نقطة زمنية من الاهتمام. والمعلومات الوحيدة التي اكتسبها هذا النهج هي الاستهلاك الكلي على مدى فترة معينة من الزمن.
وعلى النقيض من ذلك، يوفر نظام الرصد الآلي المزيد من المعلومات عن الاستهلاك خلال هذه الفترة، لأنه يسجل التغيرات في وزن الزبالة الدقيقة كل ثانية. يمكن للتسجيلات بالتفصيل عندما يبدأ القوارض في تناول الطعام ، كم مرة يأكل ، كم يأكل ، كم يأكل ، كم من الوقت يأكل ، كم هي فترة الراحة بين الأكل ، إلخ. للحصول على بيانات مماثلة للنظام الآلي باستخدام القياس اليدوي ، سيتعين على المستخدمين قياس المحتوى بشكل متكرر أثناء الاختبار / التدريب وبالتالي إزعاج الحيوانات بشكل كبير. مع النظام الآلي، القوارض لا تزال دون عائق خلال الدورات التدريبية والاختبار.
وبالنظر إلى العدد الكبير من نظم المداواة الآلية المتاحة للقوارض، من المهم ملاحظة أنه لا يوجد حاجة إلى نموذج محدد للبروتوكول الموصوف هنا. ومع ذلك، هذا النظام حساس جداً. لتجنب الأخطاء الناجمة عن الضوضاء البيئية (اهتزاز مستوى منخفض أو اهتزاز الكتلة على مقياس)، خوارزمية النظام تقييم القيم التي تم جمعها على أساس الثانية الثانية، وأنها تقبل فقط تلك التي هي أقل من نقطة محددة ل "الضوضاء" من أجل متوسط القيم 10. إذا تجاوز النظام عتبة الضوضاء هذه، لا يتم استخدام القيم لحساب الأوزان المستقرة، والتي يتم استخدامها لحساب نوبات التغذية.
وفيما يتعلق بتنفيذ الاختبارات، ينبغي أن يوضع في الاعتبار العديد من النقاط الحرجة. يجب إجراء جميع الاختبارات السلوكية في نفس الوقت من اليوم ، حيث أن التعديلات الإيقاعية قد تؤثر على سلوك الحيوانات12،13. معظم الدراسات إجراء الاختبارات السلوكية أثناء مرحلة الضوء، بينما هنا، تم إجراء جميع الاختبارات خلال المرحلة المظلمة. القوارض هي ليلية وبالتالي نشطة في المرحلة المظلمة ، في حين أنها نائمة أو أقل نشاطا12 مع نشاط استكشافي أقل13 خلال مرحلة الضوء. وهكذا ، فإن الاختبار السلوكي هو أكثر من الناحية الفسيولوجية appriopriate خلال فترة الصورة المظلمة.
من المهم أن نلاحظ أنه بالنسبة لاختبار تفضيل السكروز ، تم استخدام تركيزات مختلفة من محلول السكروز ، تتراوح بين 0.5 ٪ - 10 ٪4،7،14. يتم اختيارهم في المقام الأول اعتمادا على الأنواع، سلالة، والجنس، والعمر، ولكن على أساس خاصة على سلوك الشرب لوحظ أثناء التدريب (يجب أن تشرب جميع الحيوانات تقريبا نفس الكمية قبل العلاج / التدخل). ومع ذلك، فإن التركيزات العالية (مثل 10٪ من الانبعاثات، 10٪). قد يتجاوز anhedonia، منذ حتى الحيوانات مع الاكتئاب مثل السلوك لا تزال تشرب السوائل الحلوة جدا4.
بالإضافة إلى ذلك، قد يؤثر المحتوى السعرات الحرارية العالي بسبب التركيزات العالية بشكل أكثر بروزًا على تفضيل محلول السكروز. ولذلك، تم اختيار حل السكروز 1٪ لهذا البروتوكول. بعض الدراسات توصي باستخدام السكرارين بدلا من السكروز15 لتجنب أي تأثير السعرات الحرارية. ومع ذلك، فإن متوسط محتوى السعرات الحرارية من كمية استهلاكها من محلول السكروز ٪ (2 غرام من 1٪ محلول السكروز يحتوي على 0.08 سعرة حرارية) هو أقل بكثير من نفس الكمية من الطعام القياسية (2 ز يحتوي على 7.8 سعرة حرارية). وهكذا، تبدو هذه النقطة ثانوية.
ومن المهم أيضا أن نلاحظ أن نسبة تفضيل السكروز الأساسية التي تم تقييمها هنا باستخدام نظام رصد المداومة الغذائية الآلي أعلى (0.99) مقارنة بالدراسات السابقة التي تستخدم التقييم اليدوي (مع 0.7 في الفئران8، 0.8 في الجرذان البالغة من الشباب ، 0.6 في ذكور المسنين الجرذان داولي16). قد يكون هذا بسبب التعامل مع الزجاجات، لأن الوزن التقليدي يسبب على الأرجح فقدان السوائل أثناء إدخالها إلى الأقفاص وإزالتها منها. وهذا ما يثبت كذلك النتائج الواردة في الجدول 1. ولذلك، قد يكون استخدام نظام الرصد الآلي أكثر ملاءمة للكشف عن الأنهدونية، في حين قد يغيب عن الحفّز مزيد من الجوانب الهدّية من تناول الطعام بسبب آثار السقف.
فيما يتعلق باختبار نقص الفاتولوجيا الناجم عن الجدة ، من المهم السماح للفئران بتطوير خط أساس مستقر لتناول الوجبة الخفيفة قبل إجراء الاختبار. فقط عندما يتم الوصول إلى خط أساس مستقر داخل وفيما بين الفئران يجب أن يتم إجراء الاختبار الفعلي. وإلا، قد تُغفل آثار التدخّل (أي المخدرات، والإجهاد، وما إلى ذلك) أو قد تُساء تفسير تقلبات خط الأساس. من المهم أيضا للتأكد من أن القفص الجديد يؤدي إلى الإجهاد الجدة مما أدى إلى نقص في البلع. على الرغم من أن العديد من البروتوكولات تشير إلى أن استخدام قفص جديد يكفي في حد ذاته ، لاحظنا أن الأقفاص التي لم تستخدم من قبل ولكن تحتوي على الفراش والإثراء قد تفشل في إحداث الإجهاد ، حيث تستخدم الفئران في كثير من الأحيان لتنظيف القفص الأسبوعية / تغيير. لذلك، ينبغي استخدام قفص جديد فارغ. وبما أن تناول الطعام قبل الاختبار قد يؤثر أيضاً على النتائج، ينبغي رصد المداواة الغذائية قبل الاختبار. ويمكن القيام بذلك بسهولة بطريقة آلية.
في الأدب، وتستخدم اختبارات بديلة مختلفة لتقييم جوانب مختلفة من الاكتئاب مثل السلوك (اليأس في كثير من الأحيان بدلا من anhedonia); ومع ذلك، فإن الطرق الموضحة في هذه المخطوطة لها العديد من المزايا. طريقة بديلة شائعة الاستخدام لتقييم اليأس السلوكي كجزء من السلوك الشبيه بالاكتئاب هي اختبار السباحة القسري4. وبموجب هذا، لا يجري تقييم استهلاك الأغذية؛ وبالتالي، لا يوجد خطر من قياس عدم الدقة.
هذا البروتوكول يحمل العديد من العيوب الأخرى. وخلص استعراض مؤخرا إلى أن اختبار السباحة القسري هو اختبار يقيس في الواقع استراتيجيات التكيف الإجهاد وليس سلوك الاكتئاب مثل17. وبالإضافة إلى ذلك، إذا كان يفضل تصميم كروس للحد من عدد الحيوانات وفقا ل "ثلاثة R" من رعاية الحيوان، لا يمكن تطبيق اختبار السباحة القسري، لأنه قد تمارس طويلة الأمد (صدمة) تأثير على سلوك الحيوانات اختبار18.
وعلى النقيض من ذلك، فإن اللجنة الفرعية لمنع التعذيب و المعاهد القومية للصحة ليس لديهما جوانب صدمة ويمكن تكرارهما. ومن الجدير بالذكر أيضاً أن مرحلة التدريب قبل اللجنة الفرعية لمنع التعذيب و المعاهد القومية للصحة تُرسي التعود على الاستهلاك؛ لذلك، تكرار البروتوكول ممكن. بعد الاختبار ، تتم إزالة الطعام المستساغ (محلول السكروز أو وجبة خفيفة) ، ويتم إعادة تقديم التدريب بعد الاختبار حوالي 24 ساعة ؛ وبالتالي، فإن القوارض لديها استراحة دون الوصول إلى التحفيز مستساغة. ومن المفترض أنه بعد الاستراحة، ينبغي أن تحدث فترة تدريب جديدة مع التكيف لضمان نسبة تفضيل تبلغ حوالي 1 أو أن يتم تحقيق وجبة خفيفة أساسية مستقرة قبل تكرار الاختبارات.
اختبار مشابه لاختبار السباحة القسري هو اختبار تعليق الذيل ، وهي فترة إجهاد قصيرة الأجل ولا مفر منها يتم فيها تعليق الحيوانات من ذيلها وتطوير موقف غير متحرك يفسر على أنه علامة على سلوك يشبه الاكتئاب19. لا يمكن استخدام هذا الاختبار إلا في الفئران ، حيث لا ينبغي تعليق الفئران من ذيولها بسبب ارتفاع متوسط الوزن20، في حين يمكن استخدام SPT وNIH في كل من الفئران والجرذان.
ومن المزايا الأخرى للاختبارات المعروضة في هذه المخطوطة أن اختبار نقص في البلع الناجم عن الجدة يعرض صلاحية البناء الجيد؛ ولذلك، فإنه يقيس ما يصل إلى مطالباته جيدا21،22. وبالتالي، فإن كمية المادة المستساغة المستهلكة ترتبط بكثافة الافة، التي تؤكدها مطابقة نتائج SPT وNIH مع الاختبارات السلوكية الأخرى12. بالإضافة إلى ذلك، كل من اختبار تفضيل السكروز واختبار نقص الفاتجيا الناجم عن الجدة يكون لها صحة الوجه جيدة. وينظر إليها ذاتيا على أنها قياس ما هو مقصود (هنا, anhedonia تقييمها على أنها كمية مخفضة من المواد المستساغة)21,22.
القيود الرئيسية لنظام الرصد الآلي هو متطلبات التدريب المناسب وصيانة / تنظيف النظام يوميا ، مما يجعله كثيف العمالة من البروتوكولات اليدوية. في التجارب السابقة10، لوحظ أنه على الرغم من أن الفئران الصغيرة تتكيف مع النظام الآلي ، فإن الفئران القديمة لا تفعل ذلك في بعض الأحيان. ومن الواضح أن تلك الحيوانات ينبغي استبعادها من التجربة.
وفيما يتعلق بالقيود المفروضة على الاختبار السلوكي، تجدر الإشارة إلى أن التدريب يستغرق وقتاً طويلاً أيضاً، وخاصة المعاهد القومية للصحة. وبالإضافة إلى ذلك، فإن البروتوكولات قصيرة الأجل، وقد يؤدي تطبيقها على المدى الطويل إلى سوء التغذية. حتى الآن، لا يبلغ الأدب استخدام هذه الاختبارات في حالات المجاعة (على سبيل المثال، نموذج لفقدان الشهية العصبي، وهو اضطراب الأكل المرتبطة عادة مع أعراض الاكتئاب)، لذلك ليس هناك توصية استخدامها لدول المجاعة.
مع هذا البروتوكول، فمن الممكن فقط للكشف عما إذا كان هناك anhedonia (انخفاض كمية السوائل / وجبة خفيفة). ومع ذلك، فإنه لا يمكن تحديد درجة anhedonia تحديدا. في المستقبل، يمكن أن يكون إدخال عدة زجاجات مع تركيزات السكروز المختلفة إضافة محتملة إلى مزيد من قياس anhedonia. عموما، يمكن استخدام الرصد الآلي المداومة تكون مفيدة في أي تجربة حيث الكشف الدقيق عن المداهمة أمر ضروري، مثل عن طريق رصد تناول عن طريق الفم من الدواء المذاب في مياه الشرب للدراسات الصيدلانية.
وباختصار، فإن اختبار تفضيل السكروز واختبار نقص الفقار الناجم عن الجدة هما بروتوكولان راسخان لتقييم أنهدونيا كجزء من السلوك الشبيه بالاكتئاب في القوارض. عندما يقترن نظام رصد تناول الطعام الآلي، حتى الاختلافات الدقيقة يمكن الكشف عنها بطريقة موثوقة وقابلة للتكرار.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
أ. س. هو مستشار لـ برلين و R، بوهرنجر إنغلهايم، تاكيدا وشوابي. ولا يوجد أي تضارب في المصالح.
Acknowledgments
وقد تم دعم هذا العمل من خلال تمويل من مؤسسة البحوث الألمانية (STE 1765/3-2) وتمويل جامعة شاريتيه (UFF 89/441-176، A.S.).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Assembly LH Cage Mount - RAT-FOOD - includes Stainless cage mount, hopper, blocker, coupling | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BCMPRF01 | |
| Assembly LH Cage Mount unplugged - RAT - FOOD includes stainless steel cage mount, hopper, blocker, unplugged adapter, coupling | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BCMUPRF01 | |
| cage w/ 2 openings - RAT - costum modified cage - includes cage top and standard water bottle | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BCR02 | single housing |
| Data collection Laptop Windows - Configured w/ BioDAQ Software | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BLT003 | |
| enrichment (plastic tubes, gnawing wood) | distributed by the animal facility | ||
| HoneyMaid Graham Cracker Crumbs | Nabisco, East Hanover, NJ, USA | ASIN: B01COWTA98 | palatable snack for NIH test |
| low vibration polymer rack | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BRACKR | |
| male Sprague Dawley rats | Envigo | Order Code: 002 | |
| Model #2210 32x Port BioDAQ Central Controller - includes cables, and calibration kit | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BCC32_03 | |
| Peripheral sensor Controller - includes cable | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BPSC01 | |
| SigmaStat 3.1 | Systat Software, San Jose, CA, USA | statistical analysis | |
| Stainless steel blocker | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | BBLKR | |
| standard rodent diet with 10 kcal% fat | Research Diets, Inc., Jules Lane, New Brunswick, NJ, USA | D12450B | |
| sucrose powder | Roth | 4621.1 | for SPT |
References
- World Health Organization. Depression. , Available from: https://www.who.int/health-topics/depression (2018).
- Reddy, M. S.
- Cryan, J. F., Mombereau, C. In search of a depressed mouse: utility of models for studying depression-related behavior in genetically modified mice. Molecular Psychiatry. 9 (4), 326-357 (2004).
- Overstreet, D. H.
- Moreau, J. -L. Simulating the anhedonia symptom of depression in animals. Dialogues in Clinical Neuroscience. 4 (4), 351-360 (2002).
- Scheggi, S., De Montis, M. G., Gambarana, C. Making Sense of Rodent Models of Anhedonia. The International Journal of Neuropsychopharmacology. 21 (11), 1049-1065 (2018).
- Liu, M. Y., et al. Sucrose preference test for measurement of stress-induced anhedonia in mice. Nature Protocol. 13 (7), 1686-1698 (2018).
- Serchov, T., van Calker, D., Biber, K. Sucrose Preference Test to Measure Anhedonic Behaviour in Mice. Bio-Protocol. 6 (19), 1958 (2016).
- Dulawa, S. C., Hen, R. Recent advances in animal models of chronic antidepressant effects: the novelty-induced hypophagia test. Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 29 (4-5), 771-783 (2005).
- Teuffel, P., et al. Treatment with the ghrelin-O-acyltransferase (GOAT) inhibitor GO-CoA-Tat reduces food intake by reducing meal frequency in rats. Journal of Physiology and Pharmacology. 66 (4), 493-503 (2015).
- Binder, E. B., Nemeroff, C. B. The CRF system, stress, depression and anxiety-insights from human genetic studies. Molecular Psychiatry. 15 (6), 574-588 (2010).
- Marques, M. D., Waterhouse, J. M. Masking and the evolution of circadian rhythmicity. Chronobiology International. 11 (3), 146-155 (1994).
- Valentinuzzi, V. S., et al. Locomotor response to an open field during C57BL/6J active and inactive phases: differences dependent on conditions of illumination. Physiology and Behavior. 69 (3), 269-275 (2000).
- Madiha, S., Haider, S. Curcumin restores rotenone induced depressive-like symptoms in animal model of neurotoxicity: assessment by social interaction test and sucrose preference test. Metabolic Brain Disorder. 34 (1), 297-308 (2019).
- Strouthes, A.
- Inui-Yamamoto, C., et al. Taste preference changes throughout different life stages in male rats. PloS One. 12 (7), 0181650 (2017).
- Commons, K. G., Cholanians, A. B., Babb, J. A., Ehlinger, D. G. The Rodent Forced Swim Test Measures Stress-Coping Strategy, Not Depression-like Behavior. ACS Chemical Neuroscience. 8 (5), 955-960 (2017).
- Slattery, D. A., Cryan, J. F. Using the rat forced swim test to assess antidepressant-like activity in rodents. Nature Protocols. 7 (6), 1009-1014 (2012).
- Cryan, J. F., Mombereau, C., Vassout, A. The tail suspension test as a model for assessing antidepressant activity: review of pharmacological and genetic studies in mice. Neuroscience and Biobehavioral Review. 29 (4-5), 571-625 (2005).
- Can, A., et al.
- Chadman, K. K., Yang, M., Crawley, J. N. Criteria for validating mouse models of psychiatric diseases. American Journal of Medical Genetics B Neuropsychiatric Genetics. 150 (1), 1-11 (2009).
- Powell, T. R., Fernandes, C., Schalkwyk, L. C.
