Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Immunology and Infection
Click here for the English version

Immunology and Infection

Terapeutisk evaluering af fækal mikrobiotatransplantation i en Interleukin 10-mangelfuld musemodel

Published: April 6, 2022 doi: 10.3791/63350
Automatic Translation
1,2, 1, 2, 1
1Division of Gastroenterology, Department of Internal Medicine, University of Texas Medical Branch at Galveston, 2Department of Gastroenterology, Xiangya Hospital of Central South University

Summary

Samspillet mellem genetisk modtagelighed, slimhindeimmunitet og intestinalt mikroøkologisk miljø er involveret i patogenesen af inflammatorisk tarmsygdom (IBD). I denne undersøgelse anvendte vi fækal mikrobiotatransplantation til IL-10-mangelfulde mus og undersøgte dens indvirkning på tyktarmsbetændelse og hjertefunktion.

Abstract

Med udviklingen af mikroøkologi i de senere år har forholdet mellem tarmbakterier og inflammatorisk tarmsygdom (IBD) tiltrukket sig stor opmærksomhed. Akkumulerende beviser tyder på, at dysbiotisk mikrobiota spiller en aktiv rolle i at udløse eller forværre den inflammatoriske proces i IBD, og at fækal mikrobiotatransplantation (FMT) er en attraktiv terapeutisk strategi, da overførsel af en sund mikrobiota til IBD-patient kunne genoprette den passende værtsmikrobiotakommunikation. De molekylære mekanismer er imidlertid uklare, og effektiviteten af FMT har ikke været særlig veletableret. Der er således behov for yderligere undersøgelser i dyremodeller af IBD. I denne metode anvendte vi FMT fra vildtype C57BL/6J mus til IL-10 mangelfulde mus, en meget anvendt musemodel af colitis. Undersøgelsen uddyber indsamling af fækale pellets fra donormusene, fremstilling af fækal opløsning / suspension, administration af fækalopløsningen og overvågning af sygdommen. Vi fandt ud af, at FMT signifikant afbødede hjerteforringelsen hos IL-10 knockout-mus, hvilket understregede dets terapeutiske potentiale for IBD-styring.

Introduction

Det menneskelige intestinale mikroøkosystem er ekstremt komplekst, med mere end 1000 arter af bakterier i tarmen hos en sund person1. Tarmfloraen er involveret i at opretholde tarmens og immunresponsets normale fysiologiske funktioner og har et uadskilleligt forhold til menneskekroppen. Akkumulerende beviser tyder på, at tarmmikrobiomet udgør det sidste menneskelige organ, som er en del af menneskekroppen, ikke kun en gruppe parasitter2. Et 'sundt' symbiotisk forhold mellem tarmmikrobiotaen, deres metabolitter og værtsimmunsystemet, der blev etableret tidligt i livet, er afgørende for at opretholde tarmhomeostase. I nogle unormale tilstande som kronisk betændelse forstyrrer ændringer i kroppens indre og ydre miljø alvorligt tarmhomeostasen, hvilket resulterer i en vedvarende ubalance i tarmens mikrobielle samfund, kaldet dysbiose3. Faktisk kan eksponering for flere miljøfaktorer, herunder kost, medicin og patogener, føre til ændringer i mikrobiotaen.

Dysbiose er forbundet med patogenesen af en række tarmsygdomme, såsom inflammatorisk tarmsygdom (IBD), irritabel tarmsyndrom (IBS) og pseudomembranøs enteritis samt en voksende liste over ekstra-tarmlidelser, herunder hjerte-kar-sygdomme, fedme og allergi4. Mikrobiotaprofilering afslørede, at patienter med IBD har et dramatisk fald i bakteriel mangfoldighed samt markante ændringer i populationerne af nogle specifikke bakteriestammer 5,6. Disse undersøgelser viste mindre Lachnospiraceae og Bacteroidetes, men flere Proteobacteria og Actinobacteria hos IBD-patienter. Det antages, at patogenesen af IBD er relateret til forskellige patogene faktorer, herunder unormal tarmflora, dysreguleret immunrespons, miljømæssige udfordringer og genetiske varianter7. Rigelige beviser tyder på, at tarmbakterier spiller en rolle i initierings- og påføringsfaserne af IBD8,9, hvilket indikerer, at korrigering af tarmdysbiose kan repræsentere en ny tilgang til behandling og / eller vedligeholdelsesbehandling af IBD.

Prototypen af fækal mikrobiotatransplantation (FMT) begyndte i det gamle Kina10. I 1958 behandlede Dr. Eiseman og hans kolleger med succes fire tilfælde af alvorlig pseudomembranøs enteritis med fækalt stof fra raske donorer via enema og åbnede et nyt kapitel i moderne vestlig medicin ved hjælp af menneskelig afføring til behandling af menneskelige sygdomme11. Clostridium difficile infektion (CDI) har vist sig at være hovedårsagen til pseudomembranøs enteritis12 , og FMT er yderst effektiv til behandling af CDI. I de sidste otte år er FMT blevet en standardbehandling til behandling af tilbagevendende CDI13, hvilket har givet anledning til yderligere undersøgelser, der undersøger FMT's rolle i andre lidelser, såsom IBD. I løbet af de sidste tyve år har adskillige caserapporter og kohortestudier dokumenteret brugen af FMT hos patienter med IBD14. En metaanalyse, herunder 12 forsøg, viste, at 62% af patienterne med Crohns sygdom (CD) opnåede klinisk remission efter FMT, og 69% af CD-patienterne havde klinisk respons15. På trods af disse opmuntrende resultater er FMT's rolle i håndteringen af IBD fortsat usikker, og de mekanismer, hvormed FMT forbedrer tarmbetændelse, er dårligt forstået. Yderligere undersøgelser er nødvendige, før FMT kan tilslutte sig det nuværende armamentarium af behandlingsmuligheder for IBD i klinikkerne.

I denne protokol anvendte vi FMT på IL-10-/- mus, som udvikler colitis spontant efter fravænning og har fungeret som en guldstandard for at afspejle den multifaktorielle karakter af IBD16,17,18. IL-10−/− mus er i vid udstrækning blevet brugt til at dissekere IBD-ætiologi, fordi de præsenterer lignende molekylære og histologiske træk som IBD-patienter, og ligesom patienter kan sygdommen forbedres med anti-TNFα-terapi16. Aldrende IL10−/− mus (>9 måneder) har en øget hjertestørrelse og nedsat hjertefunktion sammenlignet med aldersmatchede vildtypemus19, hvilket gør det til en fremragende model til undersøgelse af colitis-inducerede hjertesygdomme. Imidlertid kan andre murinmodeller af colitis, såsom dextrannatriumsulfatmodellen og T-celleinduceret colitis-model, også anvendes. Vi administrerede fækal suspension via oral sonde, vist sig at være en effektiv og bedre rute end enema hos mennesker20.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Alle procedurer udført på dyr blev godkendt af Institutional Animal Care and Use Committee ved University of Texas Medical Branch i Galveston (protokol # 1512071A).

1. Indsamling af friske fækale pellets

  1. Forbered sterile papirhåndklæder, stump-ende tang og 50 ml koniske rør.
    1. Læg nogle papirhåndklæder og tang i separate autoklaveposer og autoklave dem ved 180 °C i tør varme i 30 min. Brug også sterile koniske rør. Vej de koniske rør og skriv deres vægt ned på rørene.
  2. Tænd for biosikkerhedsskabet i dyrerummet.
  3. Tag et autoklaveret rent musebur uden strøelse og læg det i biosikkerhedsskabet. Fjern dækslet og madstativet, og læg dem inde i skabet.
  4. Læg nogle sterile papirhåndklæder på bunden af buret og læg metalstativet tilbage oven på buret.
  5. Identificer aldersmatchede fækale donorer, og placer museburet i biosikkerhedsskabet. Åbn buret, og tag forsigtigt en donormus (C57BL/6J) ved halen og læg den på metalstativet oven på det rene bur.
  6. Placer burdækslet oven på stativet, og vent på, at dyret/dyrene skal afføring.
    BEMÆRK: Sæt et par musekuldkammerater på stativet samtidigt.
  7. Saml fækale pellets og læg dem i et sterilt 50 ml konisk rør. Saml pellets efter køn. Bland ikke fækale pellets indsamlet fra mænd og kvinder.
  8. Vægt røret igen og beregn vægten af fækale pellets.

2. Fremstilling af fækal suspension

  1. Forbered en steril opløsning (10% glycerol i normal saltvand).
  2. Tilsæt 10 ml 10% glycerol / normal saltvand til det koniske rør for hvert gram fækale pellets.
    BEMÆRK: Forøg opløsningsvolumenet til 20 ml, hvis det er nødvendigt. Denne undersøgelse brugte også 1 ml opløsning for hver pellet (5-10 mg).
  3. Homogeniser blandingen ved lav hastighed med en stationær homogenisator eller en blender inde i en røghætte for at suspendere afføringen (3 X 30 s).
  4. Filtrer fækalsuspensionen gennem 2 lag sterilt bomuldsgasbind (10,2 cm x 10,2 cm). Filtratet opbevares midlertidigt i køleskab i op til 6 timer, eller det pakkes i sterile kryogene hætteglas og opbevares i en -80 °C fryser.
  5. Rengør homogenisatoren eller blenderen grundigt efter en standardprocedure.

3. Administration af fækal suspension ved oral sonde

  1. Optø den frosne fækale suspension på is, hvis du bruger frosne prøver. Bland den optøede fækale suspension ved hvirveldannelse.
  2. Overfør den friske eller optøede fækale suspension til 1 ml sprøjter.
    BEMÆRK: Hver mus modtager i alt 200 μL fækal suspension, og hver IL-10-/- mus i kontrolgruppen får 200 μL 10% glycerol / normal saltvand17.
  3. Vej musene og vælg den rigtige kanylestørrelse og maksimale doseringsvolumen.
    BEMÆRK: For mus med en kropsvægt mellem 20-25 gram skal du bruge en 20 G 3,81 cm buet sondenål med en 2,25 mm kugle. Se gavageneedle.com for at få flere oplysninger.
  4. Test sondenålen ved at måle længden fra spidsen af musens næse til xiphoidprocessen (bunden af brystbenet). Fyld sprøjten med 10% glycerol/saltvand eller fækal suspension, og fjern luftbobler inde i sprøjten og kanylen.
    BEMÆRK: Hvis nålen er længere end længden, skal du sætte et mærke på nåleakslen/slangen i næseniveau. Før ikke nålen / slangen gennem dyret forbi det punkt for at forhindre gastrisk perforering.
  5. Placer et musebur i biosikkerhedsskabet, fjern plastikburdækslet, og lad metalstativet være på plads.
  6. Tag en mus ved halen og læg den på metalstativet. Hold musen ved halen med den ene hånd og brug tommelfingeren og langfingrene på en anden hånd til at fastholde dyret ved at gribe huden over skuldrene. På denne måde strækkes forbenene ud til siden, hvilket forhindrer forbenene i at skubbe nålen ud. Forlæng forsigtigt dyrets hoved bagud og hold hovedet på plads med den ene hånd.
    BEMÆRK: Øv musehåndtering, indtil eksperimentatoren har fuld tillid, før du fortsætter til eksperimentet.
  7. Placer gavlenålen oven på tungen inde i munden. Gå forsigtigt frem langs den øvre gane, indtil nålen når spiserøret. Før nålen glat i en bevægelse. Tving ikke nålen, hvis der mærkes modstand. Tag nålen ud og prøv igen.
  8. Når nålen er korrekt placeret og verificeret, skal du langsomt administrere materialet ved at skubbe sprøjten, der er fastgjort til nålen. Drej ikke nålen eller skub nålen fremad, hvilket kan sprænge spiserøret. Efter dosering skal du forsigtigt trække nålen ud.
  9. Returner musen til sit hjemmebur. Overvåg dyret i 5-10 minutter ved at lede efter tegn på besværet vejrtrækning eller nød. Overvåg musene igen mellem 12-24 timer efter FMT.

4. Sygdomsovervågning og eutanasi

  1. Overvåg musene i længderetningen for IBD-debut ved okkult fækalt blod og / eller koloskopi21. Evaluer hjertefunktionen ved transthorax ekkokardiografi22,23.
  2. Afliv dyrene ved halshugning under et dybt anæstesiplan med isofluran (1%-4%).
  3. Blodet opsamles i mikrocentrifugerør med antikoagulant og centrifuge ved 1000-2000 x g i 10 minutter i en kølecentrifuge (4 °C). Gem supernatanten, betegnet plasma i en -80 ° C fryser.
  4. Ved aflivning skal du forberede musekolon ved hjælp af swiss-roll-teknikken24 til histopatologisk analyse (H&E-farvning)25.
  5. Mål B-type natriuretisk peptid (BNP) i plasma ved hjælp af et enzymimmunoassay (EIA) kit23.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Vi udførte sund donor FMT 3 gange (en gang om måneden i 3 måneder) på 2 måneder gamle C57BL / 6J vildtype (WT) og IL-10 knockout mus. Aldersmatchede C57BL/6J-mus (aldersforskellen skal være <2 måneder) fungerede som fækale donorer, og der blev brugt friske fækale pellets hver gang. VVM-analyser afslørede, at BNP var markant forhøjet i plasmaet hos IL-10-mangelmus, og at sund donor-FMT signifikant afbødede stigningen i BNP-niveauer (figur 1A, n = 5, p < 0,05). Ekkokardiografi detekterede et signifikant fald i venstre ventrikel udstødningsfraktion (LVEF) i IL-10-/- musene sammenlignet med WT-musene ; faldet blev signifikant ophævet af FMT (figur 1B, n = 5, p < 0,05). Disse resultater tyder på, at sund donor FMT afbødede colitis-induceret hjertefunktion.

Figure 1
Figur 1. BNP-opregulering og LVEF-nedregulering blev afbødet ved fækal mikrobiotatransplantation (FMT) i IL-10 knockout-mus. (A) Plasma BNP-koncentration (pg/ml) i vildtype (WT) og IL-10 knockout (KO) mus behandlet med køretøj (Veh) eller FMT. B) LVEF af WT- og IL-10 KO-mus behandlet med/uden FMT. Resultaterne blev præsenteret som middel ± SD (n = 5). * p < 0,05 vs. WT-mus behandlet med køretøj (Veh). # p < 0,05 vs. IL-10 KO mus behandlet med Veh. Klik her for at se en større version af denne figur.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Som en innovativ undersøgelsesbehandling er FMT blevet et varmt emne i behandlingen af forskellige lidelser i de senere år, da dysbiose af den kommensale mikrobiota er impliceret i patogenesen af flere menneskelige sygdomme, herunder IBD, fedme, diabetes mellitus, autisme, hjertesygdomme og kræft26. Selvom mekanismen ikke er bestemt, menes det, at FMT virker ved at opbygge en ny biologisk flora og forhindre tab af resterende bakterier. Den metode, der præsenteres heri, vedtog oral sonde som leveringsrute, hvilket har vist sig at være effektivt27. Vi valgte den orale vej, fordi oral administration er den mest bekvemme og økonomiske og foretrækkes af de fleste patienter. Desuden har FMT ved orale kapsler vist sig at være en effektiv tilgang til behandling af tilbagevendende CDI i kliniske forsøg28. Andre almindelige øvre GI leveringsruter er nasogastrisk rør, nasojejunal rør, jejunostomi rør, og esophagogastroduodenoscopy. De almindelige nedre GI-leveringsruter inkluderer koloskopi, kolontransendoskopisk enteral slange (TET) og rektal enema. Den optimale rute for FMT er dog fortsat usikker20. I øjeblikket betragtes administration af øvre GI som mest passende29, men der er ingen ideel rute, der passer til alle patienter.

De værktøjer og beholdere, der anvendes til opsamling af fækale pellets, skal være sterile for at forhindre krydskontaminering. Fækale pellets indsamlet fra mænd og kvinder bør ikke blandes på grund af kønsforskelle i immunitet. I dyremodeller og mennesker er der forskelle i mikrobiota mellem kønnene30. Disse kønsforskelle resulterer ofte i kønsafhængige ændringer i lokal GI-betændelse, værtsimmunitet og modtagelighed for en række inflammatoriske lidelser31. Fækalpellets kan homogeniseres i sterilt fosfatbufferet saltvand eller 10-50% glycerol / normal saltvand, og 10% glycerol er blevet bredt vedtaget29. I denne undersøgelse blev 10%, 20% og 50% glycerol / saltvand brugt, og de tilbød alle god bakteriel konservering under fryseforhold. Homogenisering skal ske med lav hastighed og inde i en røghætte for at minimere eksponeringen for respirable aerosoler produceret i denne proces. Den fækale suspension skal filtreres gennem to lag sterilt gasbind eller et 20 μm nylonfilter for at slippe af med store partikler, der kan blokere sondenåle. Den filtrerede fækale suspension til øjeblikkelig brug skal anbringes i køleskab, og resten kan aliquoted og opbevares i en -80 ° C fryser. Frysning er især nødvendig, hvis fækalt stof er fremstillet af humane donorer. Metaanalyse har vist, at frossen FMT er lige så effektiv som frisk FMT hos patienter med tilbagevendende CDI32,33,34. Cui et al. observerede imidlertid også, at responsraten 6 måneder efter FMT var 26,7% højere hos CD-patienter i gruppen af friske fækale bakterier end i den frosne fækale bakteriegruppe35, hvilket tyder på, at frisk FMT i nogle tilfælde er et bedre valg end frossen FMT.

Den optimale dosis og hyppighed af FMT-infusion er fortsat ukendt på nuværende tidspunkt. Undersøgelser har vist, at varigheden af klinisk respons på enkelt FMT-behandling er forbigående og utilstrækkelig til at fremkalde grundlæggende ændringer i modtagerens tarmflora, og sekventiel FMT-behandling er nødvendig for at opretholde CD-remission36,37. Vi udførte FMT en gang om måneden i 3 på hinanden følgende måneder, og vores data viste god terapeutisk effekt. I en igangværende undersøgelse udfører vi månedlig FMT i en gruppe IL-10-mangelfulde mus i 12 måneder og vil evaluere tarmmikrobiota, tarmbetændelse og hjertefunktion i slutningen af undersøgelsen. Vi forventer, at sekventiel FMT vil vise bedre terapeutisk effekt end enkelt FMT.

Mens FMT tilbyder et enormt potentiale til at reparere forstyrret tarmmikrobiota, og sikkerhedsdata dukker op38,39, mangler der stadig medicinsk dokumentation for sikkerhed, indgivelsesmåde, bakteriel dosis, hyppighed af administration og langsigtet prognose for FMT til behandling af humane sygdomme. Den 12. marts 2020 udsendte FDA en sikkerhedsadvarsel om, at FMT er forbundet med en potentiel risiko for alvorlige eller livstruende infektioner40. Infektionerne var forårsaget af enteropatogen E. coli og Shiga toksinproducerende E. coli, og FMT-produktet blev leveret af et afføringsbankfirma med base i USA. Der er således stadig behov for yderligere mekanistiske undersøgelser og langsigtede observationer hos dyr for virkelig at forstå brugen af FMT som behandlingsmetode hos patienter. FMT hos gnavere vil forblive et kraftfuldt værktøj i mikrobiomforskning, hvilket i sidste ende kan gøre FMT-proceduren til en let tilgængelig behandling med lavere toksicitet end andre syntetiske stoffer.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne erklærer, at de ikke har nogen konkurrerende interesser.

Acknowledgments

Dette arbejde blev delvist støttet af tilskud fra National Institutes of Health (R01 HL152683 og R21 AI126097 til Q. Li) og af American Heart Association Grant-in-Aid 17GRNT33460395 (til Q. Li) (heart.org).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
BD Syringe, 1 mL Fisher Scientific 14-829-10F
Blunt end forceps Knipex 926443
Brain natriuretic peptide EIA kit Sigma RAB0386
C57BL/6J mice Jackson Lab 000664
Centrifuge Eppendorf 5415R
Conical tubes ThermoFisher 339650
Curved feeding Needles Kent Scientific FNC-20-1.5-2
GLH-115 homogenizer Omni International GLH-115
Glycerol MilliporeSigma G5516
IL-10 knockout mice Jackson Lab 004366
Isoflurane Piramal Critical care NDC66794-017-10
USP normal saline Grainger 6280
Vaporizer Euthanex Corp. EZ-108SA

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. D'Argenio, V., Salvatore, F. The role of the gut microbiome in the healthy adult status. Clinica Chimica Acta. 451, Pt A 97-102 (2015).
  2. Baquero, F., Nombela, C. The microbiome as a human organ. Clinical Microbiology and Infection. 18, Suppl 4 2-4 (2012).
  3. Hawrelak, J. A., Myers, S. P. The causes of intestinal dysbiosis: a review. Alternative Medcine Review. 9 (2), 180-197 (2004).
  4. Carding, S., Verbeke, K., Vipond, D. T., Corfe, B. M., Owen, L. J. Dysbiosis of the gut microbiota in disease. Microbial Ecology in Health and Disease. 26 (1), 26191 (2015).
  5. Ma, H. Q., Yu, T. T., Zhao, X. J., Zhang, Y., Zhang, H. J. Fecal microbial dysbiosis in Chinese patients with inflammatory bowel disease. World Journal of Gastroenterology. 24 (13), 1464-1477 (2018).
  6. Chu, Y., et al. Specific changes of enteric mycobiota and virome in inflammatory bowel disease. Journal of Digestive Diseases. 19 (1), 2-7 (2018).
  7. Manichanh, C., Borruel, N., Casellas, F., Guarner, F. The gut microbiota in IBD. Nature reviews Gastroenterology and Hepatology. 9 (10), 599-608 (2012).
  8. Podolsky, D. K. Inflammatory bowel disease. The New England Journal of Medicine. 347 (6), 417-429 (2002).
  9. Tamboli, C. P., Neut, C., Desreumaux, P., Colombel, J. F. Dysbiosis in inflammatory bowel disease. Gut. 53 (1), 1-4 (2004).
  10. Shi, Y. C., Yang, Y. S. Fecal microbiota transplantation: Current status and challenges in China. JGH Open: An Open Access Journal of Gastroenterology and Hepatology. 2 (4), 114-116 (2018).
  11. Markley, J. C., Carson, R. P., Holzer, C. E. Pseudomembranous enterocolitis: A clinico pathologic study of fourteen cases with a common etiologic factor. AMA Archives of Surgery. 77 (3), 452-461 (1958).
  12. Wilcox, M. H. Clostridium difficile infection and pseudomembranous colitis. Best Practice and Research Clinical Gastroenterology. 17 (3), 475-493 (2003).
  13. Kelly, C. R., de Leon, L., Jasutkar, N. Fecal microbiota transplantation for relapsing Clostridium difficile infection in 26 patients: methodology and results. Journal of Clinical Gastroenterology. 46 (2), 145-149 (2012).
  14. Borody, T. J., Warren, E. F., Leis, S., Surace, R., Ashman, O. Treatment of ulcerative colitis using fecal bacteriotherapy. Journal of Clinical Gastroenterology. 37 (1), 42-47 (2003).
  15. Cheng, F., Huang, Z., Wei, W., Li, Z. Fecal microbiota transplantation for Crohn's disease: a systematic review and meta-analysis. Techniques in Coloproctology. 25 (5), 495-504 (2021).
  16. Scheinin, T., Butler, D. M., Salway, F., Scallon, B., Feldmann, M. Validation of the interleukin-10 knockout mouse model of colitis: antitumour necrosis factor-antibodies suppress the progression of colitis. Clinical and Experimental Immunology. 133 (1), 38-43 (2003).
  17. Keubler, L. M., Buettner, M., Hager, C., Bleich, A. A multihit model: Colitis lessons from the interleukin-10-deficient mouse. Inflammatory Bowel Diseases. 21 (8), 1967-1975 (2015).
  18. Kiesler, P., Fuss, I. J., Strober, W. Experimental models of inflammatory bowel diseases. Cellular and Molecular Gastroenterology and Hepatology. 1 (2), 154-170 (2015).
  19. Sikka, G., et al. Interleukin 10 knockout frail mice develop cardiac and vascular dysfunction with increased age. Experimental Gerontology. 48 (2), 128-135 (2013).
  20. Fecal microbiota transplantation-standardization study group. Nanjing consensus on methodology of washed microbiota transplantation. Chinese Medical Journal (Engl). 133 (19), 2330-2332 (2020).
  21. Kodani, T., et al. Flexible colonoscopy in mice to evaluate the severity of colitis and colorectal tumors using a validated endoscopic scoring system). Journal of Visualized Experiments: JoVE. (80), e50843 (2013).
  22. Cheng, H. -W., et al. Assessment of right ventricular structure and function in mouse model of pulmonary artery constriction by transthoracic echocardiography. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (84), e51041 (2014).
  23. Tang, Y., et al. Chronic colitis upregulates microRNAs suppressing brain-derived neurotrophic factor in the adult heart. PLoS One. 16 (9), 0257280 (2021).
  24. Orner, G. A., et al. Suppression of tumorigenesis in the Apc(min) mouse: down-regulation of beta-catenin signaling by a combination of tea plus sulindac. Carcinogenesis. 24 (2), 263-267 (2003).
  25. Kline, K. T., et al. Neonatal injury increases gut permeability by epigenetically suppressing E-Cadherin in adulthood. The Journal of Immunology. 204 (4), 980-989 (2020).
  26. DeGruttola, A. K., Low, D., Mizoguchi, A., Mizoguchi, E. Current understanding of dysbiosis in disease in human and animal models. Inflammatory Bowel Diseases. 22 (5), 1137-1150 (2016).
  27. Chevalier, G., et al. Effect of gut microbiota on depressive-like behaviors in mice is mediated by the endocannabinoid system. Nature Communications. 11 (1), 6363 (2020).
  28. Kao, D., et al. Effect of oral capsule- vs colonoscopy-delivered fecal microbiota transplantation on recurrent clostridium difficile infection: A randomized clinical trial. JAMA. 318 (20), 1985-1993 (2017).
  29. Cammarota, G., et al. International consensus conference on stool banking for faecal microbiota transplantation in clinical practice. Gut. 68 (12), 2111-2121 (2019).
  30. Vemuri, R., et al. The microgenderome revealed: sex differences in bidirectional interactions between the microbiota, hormones, immunity and disease susceptibility. Seminar Immunopathology. 41 (2), 265-275 (2019).
  31. Wilkinson, N. M., Chen, H. -C., Lechner, M. G., Su, M. A. Sex differences in immunity. Annual Review of Immunology. , (2022).
  32. Lee, C. H., et al. Frozen vs fresh fecal microbiota transplantation and clinical resolution of diarrhea in patients with recurrent clostridium difficile infection: A randomized clinical trial. JAMA. 315 (2), 142-149 (2016).
  33. Hamilton, M. J., Weingarden, A. R., Sadowsky, M. J., Khoruts, A. Standardized frozen preparation for transplantation of fecal microbiota for recurrent clostridium difficile infection. American Journal of Gastroenterology. 107 (5), 761-767 (2012).
  34. Tang, G., Yin, W., Liu, W. Is frozen fecal microbiota transplantation as effective as fresh fecal microbiota transplantation in patients with recurrent or refractory Clostridium difficile infection: A meta-analysis. Diagnostic Microbiology and Infectious Disease. 88 (4), 322-329 (2017).
  35. Cui, B., et al. Fecal microbiota transplantation through mid-gut for refractory Crohn's disease: safety, feasibility, and efficacy trial results. Journal of Gastroenterology and Hepatology. 30 (1), 51-58 (2015).
  36. Li, P., et al. Timing for the second fecal microbiota transplantation to maintain the long-term benefit from the first treatment for Crohn's disease. Applied Microbiology and Biotechnology. 103 (1), 349-360 (2019).
  37. Moayyedi, P. Update on fecal microbiota transplantation in patients with inflammatory bowel disease. Gastroenterology and Hepatology. 14 (5), 319 (2018).
  38. Saha, S., Mara, K., Pardi, D. S., Khanna, S. Long-term safety of fecal microbiota transplantation for recurrent clostridioides difficile infection. Gastroenterology. 160 (6), 1961-1969 (2021).
  39. Perler, B. K., et al. Long-term efficacy and safety of fecal microbiota transplantation for treatment of recurrent clostridioides difficile infection. Journal of Clinical Gastroenterology. 54 (8), 701-706 (2020).
  40. Safety alert regarding use of fecal microbiota for transplantation and risk of serious adverse events likely due to transmission of pathogenic organisms. FDA. , Available from: https://www.fda.gov/vaccines-blood-biologics/safety-availability-biologics/safety-alert-regarding-use-fecal-microbiota-tramsplantation-and-risk-serious-adverse-events-likely (2020).

Tags

Immunologi og infektion udgave 182 inflammatorisk tarmsygdom fækal mikrobiotatransplantation ulcerøs colitis Crohns sygdom dysbiose interleukin 10
Terapeutisk evaluering af fækal mikrobiotatransplantation i en Interleukin 10-mangelfuld musemodel
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Xiao, Y., Zhong, X. S., Liu, X., Li, … More

Xiao, Y., Zhong, X. S., Liu, X., Li, Q. Therapeutic Evaluation of Fecal Microbiota Transplantation in an Interleukin 10-Deficient Mouse Model. J. Vis. Exp. (182), e63350, doi:10.3791/63350 (2022).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter