Summary
नॉर्मोथर्मिक एक्स विवो मशीन छिड़काव (एनईवीपी) को अग्न्याशय एलोग्राफ्ट्स के संरक्षण के लिए शायद ही खोजा गया है। हम प्रत्यारोपण से पहले अग्न्याशय एलोग्राफ्ट्स के लिए एक अभिनव संरक्षण तकनीक प्रस्तुत करते हैं।
Abstract
अग्न्याशय प्रत्यारोपण (पीटीएक्स) उन लोगों के लिए एक उपचारात्मक उपचार है जो मधुमेह मेलेटस (डीएम) के निदान के बोझ के साथ रहते हैं। हालांकि, अंगों की कमी और पीटीएक्स के लिए सूचीबद्ध किए जा रहे रोगियों की बढ़ती संख्या के कारण, प्रत्यारोपण के लिए उपलब्ध ग्राफ्ट की संख्या बढ़ाने के लिए नई रणनीतियों की आवश्यकता है।
स्टैटिक कोल्ड स्टोरेज (एससीएस) को मानक मानदंड अंगों के लिए स्वर्ण मानक माना जाता है। हालांकि, मानक मानदंड दाता (एससीडी) दुर्लभ होते जा रहे हैं और नई रणनीतियों की तत्काल आवश्यकता है जो विस्तारित मानदंड दाताओं (ईसीडी) से अंग स्वीकृति की दर को बढ़ा सकती हैं।
नॉर्मोथर्मिक एक्स विवो छिड़काव (एनईवीपी) उन रणनीतियों में से एक है जो पिछले कुछ दशकों में तेजी से लोकप्रिय हो गई है। इस संरक्षण विधि का उपयोग पहले से ही अन्य अंगों (यकृत, गुर्दे और फेफड़ों) में सफलतापूर्वक किया गया है, लेकिन अग्न्याशय प्रत्यारोपण में न्यूनतम रूप से पता लगाया गया है। अग्न्याशय के लिए विधि का वर्णन करने वाले कुछ कागजात बहुत कम सफलता दिखाते हैं, एडिमा प्रमुख मुद्दों में से एक है। निम्नलिखित पांडुलिपि सूअर अग्न्याशय को शुद्ध करने के लिए हमारे समूह द्वारा विकसित सफल एनईवीपी विधि और सेटअप का वर्णन करती है।
Introduction
नेशनल डायबिटीज स्टैटिस्टिक्स रिपोर्ट के अनुसार, संयुक्त राज्य अमेरिका में कुल 28.7 मिलियन लोग 2019 में मधुमेह के निदान के साथ रह रहे थे। इनमें से लगभग 1.8 मिलियन में टाइप 1 मधुमेह1 का निदान था। पीटीएक्स वर्तमान में जटिल टाइप 1 मधुमेह मेलेटस2 के लिए सबसे प्रभावी और एकमात्र उपचारात्मक उपचार है, और एक ऐसी प्रक्रिया है जोइन रोगियों की जीवन प्रत्याशा और जीवन की गुणवत्ता दोनों को बढ़ाती है।
अग्न्याशय मृत दाताओं से पुनर्प्राप्ति के बाद सबसे अधिक बार त्याग दिया जाने वाला अंगहै। चल रही अंग की कमी और बढ़ती प्रतीक्षा सूची के समय के साथ, प्रत्यारोपण केंद्र ईसीडी से अधिक अग्न्याशय ग्राफ्ट का उपयोग कर रहे हैं, जिसमें परिसंचरण मृत्यु (डीसीडी) 5 के बाद दान शामिल है। विस्तारित मानदंड दाताओं से आने वाले एलोग्राफ्ट्स को सुरक्षित रूप से संरक्षित करने, संरक्षित करने, आकलन करने और मरम्मत करने के लिए रणनीतियों की आवश्यकता होती है।
एनईवीपी फेफड़े6, यकृत 7,8, और किडनी ग्राफ्ट 9,10 के संरक्षण में सफल साबित हुआ है। हालांकि, अग्न्याशय के लिए मशीन छिड़काव पर काम करने वाले समूहों की संख्या, हाइपोथर्मिक या नॉर्मोथर्मिक दोनों, और प्रकाशनों की संख्या, ग्राफ्ट एडिमा और चोट11,12,13,14 के कारण कम और सीमित है।
इस अध्ययन का उद्देश्य एक पोर्सिन मॉडल का उपयोग करके नॉर्मोथर्मिक एक्स विवो पैनक्रियाज परफ्यूजन (एनईवीपीपी) के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करना है, जो अंततः प्रत्यारोपण से पहले लंबे समय तक संरक्षण, अंग मूल्यांकन और मरम्मत के लिए एक मंच प्रदान करने के लक्ष्य के साथ है। यह अन्य शोध समूहों को अग्न्याशय एलोग्राफ्ट्स के अध्ययन के लिए एक छिड़काव मॉडल स्थापित करने की अनुमति देगा।
Protocol
इस अध्ययन के लिए उपयोग किए जाने वाले सभी जानवरों को नेशनल सोसाइटी फॉर मेडिकल रिसर्च द्वारा तैयार 'प्रयोगशाला पशु देखभाल के सिद्धांतों' और नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ हेल्थ, ओंटारियो, कनाडा द्वारा प्रकाशित 'प्रयोगशाला जानवरों की देखभाल के लिए गाइड' के अनुसार मानवीय देखभाल प्राप्त हुई। सभी अध्ययनों को टोरंटो जनरल रिसर्च इंस्टीट्यूट की पशु देखभाल समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था।
नोट: यह अध्ययन प्रोटोकॉल एक पोर्सिन मॉडल पर आधारित है। ग्राफ्ट को 2 घंटे के लिए ठंड में संग्रहीत किया जाता है और फिर प्रत्यारोपण से पहले 3 घंटे के लिए नॉर्मोथर्मिक मशीन छिड़काव से गुजरना पड़ता है (चित्रा 1)।
1. जानवर
- नर यॉर्कशायर सूअर (40-50 किलोग्राम) का उपयोग करें।
2. अंग खरीद
नोट: प्रीऑपरेटिव प्रक्रिया और सर्जिकल प्रक्रिया का हिस्सा हमारे समूह15 द्वारा प्रकाशित पिछले पत्रों के समान हैं और निम्नानुसार हैं:
- सूअरों को कम से कम 7 दिनों के लिए अनुसंधान सुविधा में रखें ताकि अनुकूलन की अनुमति मिल सके और उनके तनाव के स्तर को कम किया जा सके।
- संज्ञाहरण के प्रेरण से पहले सूअरों को कम से कम 6 घंटे के लिए उपवास करें।
- सुअर को मिडाज़ोलम (0.15 मिलीग्राम / किग्रा), केटामाइन (25 मिलीग्राम / किग्रा), और एट्रोपिन (0.04 मिलीग्राम / किग्रा) के इंट्रामस्क्युलर (आईएम) इंजेक्शन के साथ सेडेट करें।
नोट: यह आवास सुविधा में किया जाता है। - पशु को आवास सुविधा से ऑपरेटिंग रूम (ओआर) में स्थानांतरित करें, जहां अंग की वसूली की जाएगी।
- सुअर को ओआर टेबल पर लापरवाह स्थिति में रखें और जबड़े को आराम देने तक 2 एल ऑक्सीजन और 5% आइसोफ्लुरेन के साथ एक फेस मास्क रखें।
- लैरींगोस्कोप का उपयोग करके मुखर डोरियों की कल्पना करें और इंटुबैशन के दौरान ऐंठन को रोकने के लिए उन्हें 2% लिडोकेन के साथ स्प्रे करें। इंटुबैशन का प्रयास करने से पहले कम से कम 30 सेकंड के लिए मास्क को ऑक्सीजन और आइसोफ्लुरेन के साथ बदलें।
- 7 मिमी एंडोट्राचेल ट्यूब पेश करें और कफ को 5 मिलीलीटर हवा के साथ अवरुद्ध करें। यह सुनिश्चित करने के लिए कैपनोमेट्री का उपयोग करें कि ट्यूब सही स्थिति में है।
- आइसोफ्लुरेन गैस को 2.5% तक कम करें। वेंटिलेटर चालू करें और इसे 15-20 सांस / मिनट और ज्वारीय मात्रा को 10-15 एमएल / किलोग्राम बॉडीवेट पर सेट करें। हृदय गति और ऑक्सीजन संतृप्ति की लगातार निगरानी करें।
- सेल्डिंगर तकनीक 16 का उपयोग करके, गले की नस (या तो दाएं या बाएं) में 8.5 एफआर एक्स10 सेमी कैथेटर पेश करें।
- 250 एमएल / घंटा पर फेंटेनाइल (500 एमएल रिंगर में 2.5 एमएल) के जलसेक को शुरू करने के लिए जुगुलर नस कैथेटर का उपयोग करें।
- संज्ञाहरण की गहराई निर्धारित करने के लिए मांसपेशियों की सजगता की जांच करें। जबड़े की टोन सबसे विश्वसनीय मांसपेशियों का रिफ्लेक्स 17 है।
नोट: यदि मैंडिबुलर मांसपेशियों की कठोरता पर ध्यान दिया जाता है, तो आइसोफ्लुरेन और / या फेंटेनाइल जलसेक बढ़ाएं।
3. शल्य चिकित्सा प्रक्रिया
- शल्य चिकित्सा क्षेत्र को कीटाणुरहित और कवर करें। जाइफॉइड से जघन सिम्फिसिस तक एक मध्य रेखा चीरा करें। बेहतर एक्सपोजर के लिए बाएं पार्श्व चीरा के साथ सर्जिकल क्षेत्र का विस्तार करें।
- पेट की महाधमनी से अवर वेना कावा (आईवीसी) को विच्छेदित करें। इसके अलावा महाधमनी को आसपास के ऊतक से मुक्त करें और छोटी काठ की महाधमनी शाखाओं को अलग करें। दोनों गुर्दे की धमनियों के चारों ओर लिगेचर को पहचानें और रखें।
नोट: इस समय सीमा ओं को बांधा नहीं जाना चाहिए। - एक बार जब महाधमनी का पिछला हिस्सा मुक्त हो जाता है, तो इसके चारों ओर दो लिगेचर पास करें। निचले लिगेचर को अंततः इलियाक धमनी विभाजन के ठीक ऊपर बांधा जाएगा और ऊपरी लिगेचर को पिछले टाई से 5 सेमी ऊपर बांधा जाएगा।
- हेपेटिक हिलम का विच्छेदन। सभी धमनियों को जितना संभव हो उतना यकृत के करीब बांधें। सामान्य पित्त नली की पहचान करें, यकृत के करीब दो लिगेचर रखें, और संरचना को विभाजित करें।
- महाधमनी के चारों ओर विच्छेदन करें लेकिन इस समय पर न काटें। महाधमनी के सुप्राहेपेटिक भाग के चारों ओर पहचानें और विच्छेदन करें और इसके चारों ओर एक टाई रखें।
नोट: इस समय सीमा ओं को बांधा नहीं जाना चाहिए। - बर्फ को अग्न्याशय को ठंडा करने की अनुमति देने के लिए कम थैली खोलें। फ्लश से पहले अग्न्याशय को जितना संभव हो उतना कम जुटाएं।
- केंद्रीय रेखा के माध्यम से दाता वजन के प्रति किलोग्राम हेपरिन के 500 आईयू का प्रशासन करें। 5 मिनट प्रतीक्षा करें और जुगुलर कैथेटर का उपयोग करके साइट्रेट, फॉस्फेट, डेक्सट्रोज, खारा, एडेनिन, ग्लूकोज और मैनिटोल (सीपीडी / एसएजी-एम) बैग में रक्त संग्रह शुरू करें।
- अवर महाधमनी लिगेचर को बांधें, महाधमनी को इलियाक द्विभाजन टाई के ऊपर एक फ्लश लाइन के साथ प्रवेशनी करें, और ऊपरी टाई के साथ कैनुला को सुरक्षित करें। गुर्दे की दोनों धमनियों को बंद करें।
- पर्याप्त रक्त एकत्र होने के बाद सुप्राहेपेटिक महाधमनी (क्रॉसक्लैंप) को बांधें (600 एमएल)। बलिदान के लिए 10 मिलीलीटर पोटेशियम क्लोराइड का प्रबंध करें।
- विस्कॉन्सिन विश्वविद्यालय (यूडब्ल्यू) संरक्षण समाधान के साथ एक फ्लश शुरू करें। वेंटिंग के लिए पोर्टल नस (जितना संभव हो उतना ऊंचा) और कावा में एक उद्घाटन काटें। पेट की गुहा में बर्फ रखें।
- यूडब्ल्यू समाधान के 1 एल फ्लश करने के बाद अग्न्याशय पूंछ और ग्रहणी सी-लूप का आकलन करें। यदि पर्याप्त फ्लश है, तो विच्छेदन, पहचान और मेसेंटेरिक वाहिकाओं को दबाना शुरू करें। यूडब्ल्यू के दूसरे लीटर के लिए फ्लशिंग को धीमा कर दें।
- पोर्टल नस के विस्तार के लिए अग्नाशयी ग्राफ्ट और कावा या इलियाक नस के एक खंड को पुनः प्राप्त करें।
नोट: अग्नाशय ी ग्राफ्ट को प्लीहा के साथ हटा दिया जाता है। - अंग को एक अंग बैग के अंदर रखें जो बर्फ से भरे बेसिन के अंदर रखा गया है।
4. अग्नाशय ी ग्राफ्ट की बैक टेबल तैयारी (चित्रा 2 ए)।
- महाधमनी के बाहर के हिस्से से फ्लश लाइन को हटा दें और टाई के साथ बंद करें। शेष यूडब्ल्यू समाधान के साथ अंग बैग भरें। अग्न्याशय को तिल्ली सहित अनुयायी ऊतक से मुक्त करें।
- 6-0 प्रोलीन के साथ पहले से बरामद कावा या इलियाक नस का उपयोग करके पोर्टल नस एक्सटेंशन करें। रिड्यूसर में 1/4 x 3/8 के साथ पोर्टल नस और समीपस्थ महाधमनी को प्रवेशनी करें।
- ग्रहणी के बाहर के हिस्से को मालेकोट कैथेटर और टाई के साथ प्रवेशनी करें। ग्रहणी सामग्री के फैलाव से बचने के लिए कैथेटर के अंत को दबाएं 4-0 प्रोलीन के साथ मेसेंटेरिक जहाजों का निरीक्षण किया।
- ग्राफ्ट का वजन दर्ज करें। एनईवीपीपी की शुरुआत तक ग्राफ्ट को स्थैतिक कोल्ड स्टोरेज (एससीएस) में रखें।
5. नॉर्मोथर्मिक एक्स विवो पैनक्रियाज परफ्यूजन (एनईवीपीपी)
नोट: छिड़काव सर्किट नवजात कार्डियोपल्मोनरी बाईपास उपकरण (चित्रा 3) से बना है।
- इसी टयूबिंग को ऑक्सीजनेटर और शिरापरक जलाशय से जोड़ें, साथ ही ऑक्सीजनेटर के बहिर्वाह के लिए धमनी रेखा और बुलबुला फिल्टर को इसके धारक में रखें। बबल फिल्टर से शिरापरक जलाशय तक जाने वाली शुद्ध रेखा को कनेक्ट करें। सभी हवा को बाहर निकालने के लिए बबल फ़िल्टर कैप खोलें।
- शिरापरक रेखा को शिरापरक जलाशय के इनलेट से कनेक्ट करें। डायलिसिस फिल्टर और टयूबिंग को कनेक्ट करें जहां डायलीसेट लगाया जाएगा। प्रवाह मीटर सेंसर, दबाव लाइनों और तापमान जांच को कनेक्ट करें। धमनी और शिरापरक नमूना लाइनों को नमूना बंदरगाहों से कनेक्ट करें।
- अग्न्याशय कक्ष (चित्रा 3) को मेयो टेबल पर रखें और इस उद्देश्य के लिए इच्छित छेद के माध्यम से धमनी और शिरापरक टयूबिंग का परिचय दें। बाहरी हीटर इकाई कनेक्ट करें और चालू करें।
- रोलर पंप के अंदर सक्शन टयूबिंग रखें और तरल पदार्थ इकट्ठा करने के लिए कक्ष से निकलने वाली टयूबिंग में एक छोर को कनेक्ट करें, और दूसरे छोर को शिरापरक जलाशय में सभी अंग हानि को इकट्ठा करने के लिए।
- ऑक्सीजन ट्यूबिंग (हरे) को गैस टैंक से कनेक्ट करें जिसमें कार्बोजेन मिश्रण (95% ओ 2/5% सीओ2) और ऑक्सीजनेटर होता है। हीटर पंप यूनिट ट्यूबिंग को ऑक्सीजनेटर से कनेक्ट करें।
- क्लैंप धमनी और शिरापरक बहिर्वाह रेखाएं, साथ ही शिरापरक जलाशय का बहिर्वाह।
6. परिपथ के परफ्यूसेट और प्राइमिंग की तैयारी
- शिरापरक जलाशय को परफ्यूसेट से भरें (तालिका 1)।
- धमनी रेखा में 8 एमएल / घंटा पर वैसोडिलेटर (एपोप्रोस्टेनॉल) के निरंतर प्रशासन के लिए एक सिरिंज पंप का उपयोग करें। शिरापरक जलाशय (15 मिलीग्राम, 10 एमएल / घंटा) में सीधे एंजाइम अवरोधक के निरंतर प्रशासन के लिए एक दूसरे सिरिंज पंप का उपयोग करें।
- हार्ट लंग मशीन (एचएलएम) चालू करें और दबाव, तापमान और टाइमर पैनल शुरू करें। छिड़काव समाधान को 38 डिग्री सेल्सियस तक गर्म करने के लिए हीटर पंप चालू करें। O 2/CO2 आपूर्ति खोलें।
- शिरापरक जलाशय के बहिर्वाह पर रखे टयूबिंग क्लैंप को हटा दें, केन्द्रापसारक पंप शुरू करें, और इसे 1,500 आरपीएम तक ले जाएं। धमनी फिल्टर को दरकिनार करते हुए ट्यूबिंग को दबाएं और धमनी फिल्टर से हवा छोड़ें। धमनी और शिरापरक दबाव रेखाओं को शून्य करें।
7. अग्न्याशय ग्राफ्ट छिड़काव (चित्रा 2 बी)।
- अंग बैग खोलें जहां अग्न्याशय संग्रहीत है। धमनी प्रवेशनी के माध्यम से एल्बुमिन के 200 एमएल के साथ फ्लश। अग्न्याशय को बर्फ से हटा दें और अंग कक्ष के अंदर स्थिति रखें। पुष्टि करें कि धमनी और शिरापरक टयूबिंग वायु-मुक्त हैं।
- धमनी पक्ष से क्लैंप छोड़ें और धमनी और शिरापरक टयूबिंग के बीच शॉर्टकट दबाएं। एक बार धमनी टयूबिंग से रक्त निकलना शुरू हो जाए, तो लाइन को धमनी प्रवेशनी से कनेक्ट करें। केन्द्रापसारक पंप की गति को विनियमित करके धमनी दबाव को 20-25 मिमीएचजी पर सेट करें। शिरापरक प्रवेशनी से रक्त निकलने के बाद शिरापरक टयूबिंग को कनेक्ट करें।
- वेरापामिल (2.5 मिलीग्राम / एमएल) की एक शीशी को सीधे धमनी की ओर प्रशासित करें, जब अग्न्याशय पूरी तरह से जुड़ा हुआ हो और कोई बड़ा रक्तस्राव न देखा जाए।
- लगातार दबाव, धमनी प्रवाह, तापमान और ग्रहणी स्राव रिकॉर्ड करें। रक्त एकत्र करें, हर घंटे ग्रहणी उत्पादन रिकॉर्ड करें, और एडिमा के लिए प्रति घंटा मैक्रोस्कोपिक रूप से आकलन करें। छिड़काव मापदंडों को रिकॉर्ड करें और विश्लेषण के लिए नमूने लें (शिरापरक और धमनी रक्त गैस के नमूने, साथ ही एमाइलेज, लाइपेस और एलडीएच के लिए नमूने)।
- छिड़काव समाप्त होने पर धमनी और शिरापरक टयूबिंग को डिस्कनेक्ट करें, अंग कक्ष से ग्राफ्ट को हटा दें, और ठंडे यूडब्ल्यू और वजन के साथ फ्लश करें। प्रत्यारोपण के क्षण तक एक बाँझ अंग बैग में बर्फ पर ग्राफ्ट स्टोर करें।
Representative Results
आगामी डेटा दिल की धड़कन दाता अग्न्याशय पुनर्प्राप्ति के एक मॉडल का उपयोग करके सात प्रयोगों के प्रतिनिधि परिणाम दिखाता है। महाधमनी के प्रवेशनी, यूडब्ल्यू समाधान के साथ फ्लश और अग्न्याशय की पुनर्प्राप्ति के बाद, ग्राफ्ट को एससीएस पर 2 घंटे तक रखा गया था, जबकि लाल रक्त कोशिकाओं को तैयार किया गया था। एनईवीपीपी को इस मॉडल में 3 घंटे के लिए प्रदर्शन किया गया था, जिसे हमने भविष्य में ग्राफ्ट मूल्यांकन और मरम्मत का इरादा होने पर छिड़काव के लिए कम से कम समय आवश्यक माना। नमूने और माप प्रति घंटा समय बिंदुओं पर दर्ज किए गए थे। (0 = बेसलाइन, अंग के सर्किट से जुड़ने के ठीक बाद, 1 = 1 घंटे, 2 = 2 घंटे, 3 = 3 घंटे)।
अग्न्याशय ग्राफ्ट को एक अंग कक्ष पर रखा गया था जिसे इस उद्देश्य के लिए कस्टम डिज़ाइन किया गया था और इसमें एक हीटर (पूरक फ़ाइल) शामिल है। एनईवीपीपी का उद्देश्य अंग के लिए एक निकट शारीरिक वातावरण प्रदान करना है। इस उद्देश्य के लिए, धमनी दबाव सभी छिड़काव में 20-25 मिमीएचजी के बीच रहने के लिए निर्धारित किया गया था। पूरे छिड़काव में दबाव और प्रवाह मापा गया और स्थिर रहा (चित्रा 4)। निम्नलिखित सूत्र का उपयोग करके ग्राफ्ट की ऑक्सीजन खपत की गणना करके चयापचय गतिविधि का अनुमान लगाया गया था: [(पीओ 2आर्ट-पीओ2वेन) * प्रवाह / वजन] (चित्रा 5)। पीएच, सोडियम, कैल्शियम और एचसीओ3 के माप पूरे छिड़काव के दौरान शारीरिक मूल्यों के भीतर थे (चित्रा 6)। छिड़काव के दौरान लैक्टेट और पोटेशियम का स्तर कम हो गया, और 3 घंटे (चित्रा 7) पर सामान्य मूल्यों के करीब हासिल किया। चूंकि सर्किट एक बंद प्रणाली है, इसलिए छिड़काव के दौरान एमाइलेज और लाइपेस का स्तर बढ़ने की उम्मीद है (चित्रा 8)। हालांकि, स्तरों में वृद्धि ग्राफ्ट को नुकसान के साथ सहसंबंधित नहीं लगती है (चित्रा 9)। वसा और पैरेन्काइमा नेक्रोसिस के साथ-साथ आइलेट सेल अखंडता को स्कोर करने के लिए एक अर्धमात्रात्मक पैमाने का उपयोग किया गया था। (0 - कोई परिवर्तन नहीं, 1 - हल्के परिवर्तन, 2 - मध्यम परिवर्तन, 3 - गंभीर परिवर्तन)। यह प्रयोगात्मक समूहों में अंधे एक रोगविज्ञानी द्वारा किया गया था, और अग्नाशयशोथ का कोई संकेत नहीं देखा गया था।
एडिमा का आकलन करने के लिए छिड़काव से पहले और बाद में अग्न्याशय एलोग्राफ्ट का वजन किया गया था (तालिका 2)।
चित्र 1. अध्ययन प्रोटोकॉल. कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्र 2. छिड़काव से पहले और बाद में अग्न्याशय। (ए) छिड़काव से पहले। (बी) छिड़काव के बाद। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्र 3. छिड़काव सर्किट का योजनाबद्ध चित्रण। नवजात कार्डियोपल्मोनरी बाईपास तकनीक के उपयोग के साथ; परफ्यूसेट को शिरापरक जलाशय में डाला जाता है और फिर ऑक्सीजनेटर में केन्द्रापसारक पंप की मदद से चलाया जाता है। ऑक्सीजनेटर छोड़ने के बाद, सर्किट ट्यूबिंग में विभाजित हो जाता है जो डायलिसिस कैसेट को परफ्यूसेट भेजता है और जलाशय और टयूबिंग में वापस जाता है जो धमनी फिल्टर में जाता है। धमनी बुलबुला फिल्टर से गुजरने के बाद, परफ्यूसेट को अग्न्याशय में महाधमनी के माध्यम से 20-25 मिमीएचजी के दबाव के साथ संचालित किया जाता है। शिरापरक बहिर्वाह परफ्यूसेट को शिरापरक जलाशय में वापस ले जाता है। ( 18 से अनुकूलित)। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्र 4. मानक विचलन (एमएल / मिनट) के साथ औसत धमनी प्रवाह। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्र 5. मानक विचलन (एमएल / मिनट / जी) के साथ औसत ऑक्सीजन की खपत। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्र 6. (ए) मानक विचलन के साथ औसत पीएच, (बी) एचसीओ3, (सी) सोडियम, और (डी) कैल्शियम माप। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्र 7. (ए) मानक विचलन के साथ औसत लैक्टेट और (बी) पोटेशियम माप। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्र 8. (ए) मानक विचलन के साथ औसत एमाइलेज और (बी) लाइपेज माप। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
चित्र 9. छिड़काव से पहले और बाद में कोर बायोप्सी। (ए) मशीन छिड़काव से पहले सामान्य अग्नाशय पैरेन्काइमा18. (बी) अग्नाशयी एसिनी और आइलेट कोशिकाओं के अच्छे संरक्षण के साथ छिड़काव के बाद बायोप्सी। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.
| घटक | राशि |
| रिंगर का लैक्टेट | 260 एमएल |
| Steen Solution | 195 एमएल |
| धुले हुए एरिथ्रोसाइट्स। | 162.5 एमएल |
| डबल रिवर्स ऑस्मोसिस पानी (डीआरओ) | 35 एमएल |
| हेपरिन (10000 IU / | 1.3 एमएल |
| सोडियम बाइकार्बोनेट (8.4%) | 10.4 एमएल |
| कैल्शियम ग्लूकोनेट (10%) | 1.3 एमएल |
| Metylprednisolone (Solu-Medrol) | 325 मिलीग्राम |
| Aprotinin | 15 मिलीग्राम |
तालिका 1. पर्फ्यूसेट संरचना।
| वजन से पहले | वजन के बाद | लाभ | % का अंतर | |
| केस 1 | 244 ग्राम | 240 ग्राम | -4 ग्राम | -1.63 |
| केस 2 | 154 ग्राम | 164 ग्राम | 10 ग्राम | 6.49 |
| केस 3 | 184 ग्राम | 245 ग्राम | 61 ग्राम | 33.15 |
| केस 4 | 190 ग्राम | 226 ग्राम | 36 ग्राम | 18.94 |
| केस 5 | 198 ग्राम | 307 ग्राम | 109 ग्राम | 55.05 |
| केस 6 | 205 ग्राम | 315 ग्राम | 107 ग्राम | 51.44 |
| केस 7 | 193 ग्राम | 256 ग्राम | 63 ग्राम | 32.64 |
तालिका 2. छिड़काव से पहले और बाद में वजन।
पूरक फ़ाइल: छिड़काव के लिए कस्टम निर्मित अग्न्याशय कक्ष। प्रिंसेस मार्गरेट कैंसर सेंटर में मेडिकल फिजिक्स - रेडिएशन मेडिसिन प्रोग्राम की मशीन शॉप के सहयोग से डिज़ाइन किया गया। कृपया इस फ़ाइल को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें.
Discussion
यह अध्ययन दर्शाता है कि पहले प्रस्तुत सेटअप के साथ छिड़काव के 3 घंटे के बाद न्यूनतम हिस्टोलॉजिकल क्षति के साथ अग्न्याशय एलोग्राफ्ट्स के लिए स्थिर एनईवीपीपी प्राप्त किया जा सकता है। छिड़काव के दौरान धमनी प्रवाह, दबाव, पीएच, एचसीओ3 और एनए जैसे छिड़काव पैरामीटर स्थिर रहते हैं, और हमने के और लैक्टेट की कमी और स्थिरीकरण देखा।
खरीद, बैक टेबल तैयारी और छिड़काव के दौरान ग्राफ्ट को कम से कम हेरफेर करना महत्वपूर्ण है। धमनी दबाव पर कड़ा नियंत्रण रखना भी बहुत महत्वपूर्ण है। चूंकि अग्न्याशय एक कम दबाव वाला अंग है, इसलिए दबाव में वृद्धि से अंग को अपरिवर्तनीय क्षति हो सकती है।
इस अध्ययन के लिए बैक-टेबल तैयारी मानव ग्राफ्ट तैयारी (चित्रा 2 ए) से अलग है। चूंकि अग्न्याशय सूअरों से प्राप्त एकमात्र अंग था, इसलिए हम महाधमनी के उस हिस्से को लेने में सक्षम थे जिसमें सीलिएक ट्रंक और बेहतर मेसेंटेरिक धमनी शामिल है। पोर्टल नस के लिए, इलियाक नस का उपयोग करके एक विस्तार किया गया था। मानव ग्राफ्ट के मामले में, बैक-टेबल तैयारी उसी तरह से की जानी चाहिए जैसे कि प्रत्यारोपण के लिए की जाती है, धमनी पुनर्निर्माण के लिए इलियाक ग्राफ्ट का उपयोग करना और19 को लंबा करना।
यह विधि सेटअप की जटिलता से सीमित हो सकती है। हमने इसके बिना किए जाने पर ग्राफ्ट की गंभीर एडिमा को देखने के बाद डायलिसिस कैसेट जोड़ने का फैसला किया। इन प्रयोगों के लिए एक कस्टम-निर्मित अंग कक्ष का भी निर्माण किया गया था जिसमें एक बाहरी हीटिंग स्रोत शामिल था जो ग्राफ्ट के इष्टतम छिड़काव के लिए सहायक साबित हुआ।
नॉर्मोथर्मिक एक्स विवो अग्न्याशय छिड़काव का वर्णन करने वाले कुछ अध्ययन हैं। इनमें से अधिकांश अध्ययनों में, एडिमा प्रमुख सीमित कारक प्रतीत होता है। हमारे ज्ञान के लिए, यह विधि एडिमा को नियंत्रित करने के लिए डायलिसिस कैसेट का उपयोग करने की एकमात्र रिपोर्ट है।
अग्न्याशय के लिए नॉर्मोथर्मिक एक्स विवो छिड़काव अभी भी अन्य अंगों की तुलना में अपनी प्रारंभिक अवस्था में है। वर्तमान प्रोटोकॉल छिड़काव के दौरान ग्राफ्ट क्षति का आकलन करने के लिए विस्तारित मानदंड दाताओं (डीसीडी), परफ्यूसेट सुधार, लंबे छिड़काव समय और बायोमार्कर पर ध्यान केंद्रित कर रहे हैं। एमाइलेज और लाइपेस स्तर विश्वसनीय मार्कर प्रतीत नहीं होते हैं, क्योंकि हम एक बंद प्रणाली का उपयोग कर रहे हैं, और हिस्टोपैथोलॉजी20 के साथ सहसंबंधित प्रतीत नहीं होते हैं। अब तक, हमारे समूह नेअच्छे परिणामों के साथ छिड़काव के बाद अग्न्याशय एलोग्राफ्ट्स को प्रत्यारोपण करने में भी कामयाबी हासिल की है।
इस तकनीक में निरंतर सुधार के साथ, हमें उम्मीद है कि यह तकनीक नैदानिक प्रत्यारोपण पर लागू होगी और अग्न्याशय एलोग्राफ्ट्स के मूल्यांकन और मरम्मत की अनुमति देगी। यह उम्मीद है कि अंततः अधिक ग्राफ्ट उपयोग, रोगियों के लिए प्रतीक्षा समय में कमी और बेहतर रोगी परिणाम होंगे।
Disclosures
लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है।
Acknowledgments
कोई नहीं।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Alburex 5 | CSL Behring AG | 187337 | 25 g of Albumin (human) in 500 mL of buffered diluent |
| Aprotinin from bovine lung | Sigma-Aldrich | A1153 | |
| Belzer UW Cold storage solution | Bridge to life Ltd | 4055 | |
| Calcium gluconate (10%) | Fresenius Kabi Canada Ltd (Toronto, ON) | C360019 | |
| Composelect (blood collection bags) | Fresenius Kabi Canada Ltd | PQ31555 | |
| Epoprostenol | GlaxoSmithKline Inc. | 218761 | |
| Heart lung machine, Stöckert S3 | Sorin Group Canada Inc. | Custom made | Centrifugal pump, roller pump, control panel (sensors for pressure, flow, temperature, bubbles, and level), oxygen blender, heater unit |
| Hemoflow, Fresenius Polysulfone | Fresenius Medical Care North America | 0520165A | |
| Heparin (10000 IU/10 mL) | Fresenius Kabi Canada Ltd | C504710 | |
| Lactated Ringer's solution | Baxter | JB2324 | |
| Neonatal cardiopulmonary bypass techonolgy | Sorin Group Canada Inc | Custom made | Dideco perfusion tubing systems, centrifugal blood pump (Revolution), arterial blood filter, microporous hollow fibre memebrane oxygenator), cannulas |
| Pancreas chamber | Custom made | With external heater | |
| Percutaneous Sheath Introducer Set with Integral Hemostasis Valve/side Port for use with 7-7.5 Fr Catheters | Arrow International LLC | SI-09880 | |
| Sodium bicarbonate (8.4%) | Fresenius Kabi Canada Ltd | C908950 | |
| Solu-Medrol | Pfizer Canada Inc. | 52246-14-2 | |
| Steen | XVIVO | 19004 | |
| Urethral catheter | Bard Inc | 86020 | 20 Fr, malecot model drain |
| Verapamil | Sandoz Canada Inc. | 8960 |
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