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इस्किमिया-रीपरफ्यूजन रिसर्च के लिए बाएं पूर्वकाल अवरोही कोरोनरी धमनी बंधाव: तकनीकी संशोधनों और गुणवत्ता नियंत्रण के माध्यम से मॉडल सुधार

Published: December 16, 2022 doi: 10.3791/63921
Automatic Translation
1, 2,3,4,5, 5,6, 5,7
1Department of Life Science, Fu Jen Catholic University, 2Department of Medicine, MacKay Medical College, 3Department of Emergency Medicine, MacKay Memorial Hospital, 4Graduate Institute of Injury Prevention and Control, Taipei Medical University, 5MacKay Junior College of Medicine, Nursing, and Management, 6Division of Cardiology, Department of Internal Medicine, Taitung Mackay Memorial Hospital, 7Division of Pulmonary and Critical Care Medicine, Department of Internal Medicine, MacKay Memorial Hospital

Summary

यहां, हम तीव्र मायोकार्डियल इस्किमिया-रीपरफ्यूजन अनुसंधान के लिए चूहों में पारंपरिक प्रक्रिया को तकनीकी रूप से संशोधित करके बाएं पूर्वकाल अवरोही कोरोनरी धमनी बंधाव के गुणवत्ता नियंत्रण पर ध्यान केंद्रित करने वाला एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं।

Abstract

कोरोनरी हृदय रोग विश्व स्तर पर मृत्यु का प्रमुख कारण है। कोरोनरी धमनियों में रक्त प्रवाह की पूर्ण समाप्ति एसटी-सेगमेंट एलिवेशन मायोकार्डियल रोधगलन (एसटीईएमआई) का कारण बनती है, जिसके परिणामस्वरूप कार्डियोजेनिक शॉक और घातक अतालता होती है, जो उच्च मृत्यु दर से जुड़ी होती है। कोरोनरी धमनी को पुन: व्यवस्थित करने के लिए प्राथमिक कोरोनरी हस्तक्षेप (पीसीआई) एसटीईएमआई के परिणामों में काफी सुधार करता है, लेकिन डोर-टू-बैलून समय को छोटा करने में की गई प्रगति अस्पताल में मृत्यु दर को कम करने में विफल रही है, यह सुझाव देते हुए कि अतिरिक्त चिकित्सीय रणनीतियों की आवश्यकता है। चूहों में बाएं पूर्वकाल अवरोही कोरोनरी धमनी (एलएडी) बंधाव तीव्र मायोकार्डियल आईआर अनुसंधान के लिए एक पशु मॉडल है जो नैदानिक परिदृश्य के बराबर है जिसमें एसटीईएमआई के लिए पीसीआई के माध्यम से तेजी से कोरोनरी रिकैनलाइजेशन का उपयोग किया जाता है; हालांकि, पीसीआई-प्रेरित एसटीईएमआई एक तकनीकी रूप से चुनौतीपूर्ण और जटिल ऑपरेशन है जो उच्च मृत्यु दर और रोधगलन के आकार में बड़ी भिन्नता से जुड़ा है। हमने एलएडी लिगेशन के लिए आदर्श स्थिति की पहचान की, एक स्नेयर लूप को नियंत्रित करने के लिए एक गैजेट बनाया, और चूहों के लिए एक विश्वसनीय और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य तीव्र मायोकार्डियल इस्किमिया-रीपरफ्यूजन (आईआर) अनुसंधान प्रोटोकॉल स्थापित करने के लिए एक संशोधित सर्जिकल पैंतरेबाज़ी का समर्थन किया, जिससे ऊतक क्षति कम हो गई। यह एक नॉन-सर्वाइवल सर्जरी है। हम अध्ययन परिणामों की गुणवत्ता को मान्य करने के लिए एक विधि का भी प्रस्ताव करते हैं, जो बाद के जैव रासायनिक विश्लेषणों की सटीकता निर्धारित करने के लिए एक महत्वपूर्ण कदम है।

Introduction

इस्केमिक हृदय रोग दुनिया भर में मौत का एक प्रमुख कारण है 1,2. कोरोनरी हृदय रोग के विकास को रोकने के लिए परिवर्तनीय जोखिम कारकों के नियंत्रण के अलावा, तीव्र कोरोनरी सिंड्रोम 3,4 के लिए चिकित्सीय रणनीतियों की महत्वपूर्ण रूप से आवश्यकता होती है। तीव्र एसटी-सेगमेंट एलिवेशन मायोकार्डियल रोधगलन (एसटीईएमआई) में कार्डियोजेनिक शॉक और घातक अतालता को अस्पताल में मृत्यु दर 5,6,7,8 में वृद्धि करने के लिए पाया गया है। प्राथमिक पर्क्यूटेनियस कोरोनरी इंटरवेंशन (पीसीआई) एसटीईएमआई 9,10,11 के लिए पसंदीदा उपचार है; हालांकि, चिकित्सीय प्रभावों में एक छत होती है जब डोर-टू-बैलून समय <90 मिनट12,13 होता है। रोग 14,15,16,17,18,19 के नैदानिक परिणामों में और सुधार के लिए अतिरिक्त रणनीतियों की आवश्यकता है।

चूहों में बाएं पूर्वकाल अवरोही धमनी (एलएडी) बंधाव को शामिल करने वाला एक तीव्र मायोकार्डियल इस्किमिया-रीपरफ्यूजन (आईआर) प्रयोग नैदानिक परिदृश्य के तुलनीय पशु मॉडल में से एक है, जिसमें एसटीईएमआई वाले रोगियों के लिए इस्केमिक क्षति से दिल को बचाने के लिए छोटे डोर-टू-बैलून समय की आवश्यकता होती है। हालांकि, छोटे जानवरों में सर्जरी-प्रेरित एसटीईएमआई अक्सर तकनीकी रूप से चुनौतीपूर्ण होता है क्योंकि यह उच्च मृत्यु दर और रोधगलन आकार20,21,22,23,24 में उच्च भिन्नता से जुड़ा एक जटिल ऑपरेशन है। तकनीकी चुनौती को दूर करने के लिए, वर्तमान अध्ययन ने चूहों में एक व्यापक और प्रभावी पशु मॉडल विकसित किया (क्योंकि वे चूहों से बड़े हैं) तकनीकी संशोधन के माध्यम से एक विश्वसनीय और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य तीव्र मायोकार्डियल आईआर अनुसंधान प्रोटोकॉल स्थापित करने के लिए। प्रस्तावित प्रोटोकॉल के परिणामस्वरूप कम शल्य चिकित्सा जटिलताओं, कम ऊतक क्षति और सर्जरी के दौरान मृत्यु दर की संभावना कम होती है। इसके अतिरिक्त, एक प्रक्रिया का उपयोग इन्फ्रैक्ट आकार और जोखिम पर क्षेत्र (एएआर) को मापने के लिए किया गया था और इस प्रकार, अध्ययन के परिणामों की गुणवत्ता को सत्यापित किया गया था। प्रस्तावित प्रोटोकॉल का उपयोग क्षति के खिलाफ नई चिकित्सीय रणनीतियों को विकसित करने के लिए तीव्र मायोकार्डियल आईआर तनाव की पैथोफिजियोलॉजिकल प्रक्रियाओं की जांच के लिए किया जा सकता है।

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Protocol

सभी पशु प्रयोग ों को यूएस नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ हेल्थ (एनआईएच प्रकाशन संख्या 85-23, संशोधित 1996) द्वारा प्रकाशित प्रयोगशाला जानवरों की देखभाल और उपयोग के लिए गाइड के अनुसार आयोजित किया गया था। अध्ययन प्रोटोकॉल को फू-जेन कैथोलिक विश्वविद्यालय में संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति के दिशानिर्देशों के अनुसार अनुमोदित किया गया था।

1. सर्जरी से पहले तैयारी

  1. नमकीन गीली कपास की गेंदों की तैयारी
    1. सर्जिकल मास्क और दस्ताने पहनें।
    2. बाँझ कपास के एक छोटे से हिस्से को पिंच करें और इसे एक गेंद बनाने के लिए रोल करें। इस प्रक्रिया को दोहराएं।
    3. कपास की गेंदों को बाँझ 0.9% खारा में डुबोएं और अतिरिक्त खारा निचोड़ें।
    4. कपास की गेंदों को 75% इथेनॉल के साथ निष्फल एक साफ बॉक्स में स्टोर करें।
  2. हुक पकड़ने की तैयारी।
    1. सर्जिकल मास्क और दस्ताने पहनें।
    2. 75% इथेनॉल के साथ क्लिप और रबर बैंड को स्टरलाइज़ करें।
    3. क्लिप को छाती की दीवार और ऊतक के लिए हुक के आकार में मोड़ें।
    4. मुड़े हुए क्लिप को एक, दो, या तीन रबर बैंड के साथ कनेक्ट करें ताकि यह सुनिश्चित हो सके कि सर्जिकल विंडो के घाव से तनाव एलएडी बंधाव के लिए पर्याप्त चौड़ा है।
    5. 75% इथेनॉल के साथ निष्फल एक साफ बॉक्स में कम से कम पांच घर का बना हुक तैयार करें और स्टोर करें।
  3. एक बंधाव लूप की तैयारी।
    1. 7-0 रेशम की सिलाई के बीच में 1/2 सर्कल आकार के 3 स्प्रिंग आई में एक पतली बिना सोढ़ी वाली सर्जिकल सुई रखें।
  4. एक स्नेयर लूप नियंत्रक की तैयारी
    1. कैंची का उपयोग करके 5-मिमी पॉलीथीन (पीई) -10 ट्यूब काट लें।
    2. इसके दोनों किनारों को चिकना करने के लिए ट्यूब को आंच के नीचे गर्म और नरम करें।
  5. चूहों को तैयार करना
    1. 250 ग्राम के न्यूनतम वजन के साथ 8 सप्ताह के स्प्राग-डॉवले नर चूहों का चयन करें।
    2. चूहों को 12 घंटे के प्रकाश / अंधेरे चक्र के तहत नियंत्रित तापमान (21 डिग्री सेल्सियस ± 2 डिग्री सेल्सियस) पर भोजन, मानक माउस छर्रों और नल के पानी तक मुफ्त पहुंच के साथ बनाए रखें।
    3. चूहों को पेंटोबार्बिटल (50 मिलीग्राम / किग्रा, इंट्रापरिटोनियल रूप से प्रशासित) के साथ एनेस्थेटाइज करें।
      नोट: अतिरिक्त एनेस्थेटिक (पेंटोबार्बिटल, 30 मिलीग्राम / किग्रा) हर घंटे के बाद प्रशासित किया जाना चाहिए।
    4. यह सुनिश्चित करने के लिए कि जानवर को पर्याप्त रूप से एनेस्थेटाइज किया गया है, पूंछ और पिछले पैरों को चुटकी लेकर चूहों की सजगता की जांच करें।
    5. कैंची का उपयोग करके ग्लोटिस के नीचे दो कारतूस के छल्ले के बीच ऊतक खोलें और एंडोट्राचेल ट्यूब25 के रूप में कार्य करने के लिए 3 सेमी पीई -10 ट्यूब डालें।
    6. एंडोट्राचेल ट्यूब को मैन्युअल रूप से वेंटिलेटर से कनेक्ट करें।
    7. श्वसन चक्र के साथ सिंक्रनाइज़ किए गए जानवर के वक्ष आंदोलन का निरीक्षण करें ताकि यह सुनिश्चित हो सके कि फेफड़े पर्याप्त रूप से हवादार हैं।
    8. गर्दन के क्षेत्र को खोलें और जुगुलर नस26 को कैनुलेट करें।

2. एलएडी बंधाव

  1. सर्जिकल मास्क और दस्ताने पहनें।
  2. छाती को स्पर्श करें और मैनुब्रियम और उरोस्थि कोण (मनुब्रियम और उरोस्थि शरीर का जंक्शन) खोजें।
  3. बाईं ओर की पसली की पहचान करें जो मैन्युअल रूप से स्पर्श करके उरोस्थि कोण (रिब ए) से जुड़ती है।
  4. रिब ए के ठीक नीचे इंटरकोस्टल स्पेस की पहचान करें। इंटरकोस्टल स्पेस के करीब त्वचा को धीरे से उठाने के लिए फाइन-टिप फोर्सप्स का उपयोग करें, और फिर उरोस्थि शरीर के लगभग 5 मिमी के बाईं ओर के बिंदु से त्वचा तनाव रेखाओं के साथ 1 सेमी तिरछा चीरा बनाने के लिए ब्लेड के साथ एक सर्जिकल स्केलपेल का उपयोग करें।
  5. चीरे से त्वचा और मांसपेशियों की परतों को धीरे से अलग करने के लिए घुमावदार बल का उपयोग करें। पसलियों को उजागर करने के लिए बाईं पूर्ववर्ती छाती की दीवार के बाहर की मांसपेशियों की परतों को नीचे की ओर झुकाएं।
  6. पसली ए (पसली बी) के नीचे की पसली की पहचान करें। रिब बी को पसली उपास्थि के बीच से एक कुंद कैंची से काटें (उरोस्थि शरीर से लगभग 2-3 मिमी)। रक्तस्राव होने पर कई सेकंड के लिए खारा गीली कपास की गेंद के साथ घाव को धीरे से स्पर्श और संपीड़ित करें।
  7. चार झुके हुए क्लिप के साथ पसली बी के कट से वक्ष को सावधानी से खोलें। प्रत्येक झुकी हुई क्लिप को छाती की दीवार को धीरे से चार दिशाओं (अर्थात्, ऊपरी तो बाएं, ऊपरी फिर दाएं, बाएं नीचे और दाएं नीचे) में फैलाने के लिए इंटरकोस्टल मांसपेशियों और पसलियों को हुक करना चाहिए और एक आयताकार सर्जिकल विंडो बनाना चाहिए।
  8. प्रक्रिया के दौरान आकस्मिक ऊतक क्षति को रोकने के लिए पेरिकार्डियम को कवर करने वाले बाएं फेफड़े और अन्य आसन्न ऊतकों के खिलाफ धीरे से हुक करें।
  9. बल के साथ पतली पेरिकार्डियम को धीरे से हटाकर दिल को उजागर करें। बाएं मुख्य कोरोनरी धमनी (एलएमसीए) की पहली शाखा की पहचान करें, जो आमतौर पर फुफ्फुसीय धमनी और बाएं ऑरिकल के बीच होती है। एलएमसीए और एलएडी एक सतही चमकदार लाल रेखा के रूप में मौजूद हैं जो बाएं ऑरिकल के किनारे से शीर्ष की ओर चलती है।
  10. एलएडी के नीचे रेशम की सिलाई को एलएडी के ठीक बाहर एक स्थान पर डालने और पारित करने के लिए तैयार सर्जिकल सुई का उपयोग करें, ताकि गलती से बाएं ऑरिकल को मोड़ने से बचा जा सके। एकल सीवन के साथ, खुला लूप बनाया जाता है। कोरोनरी धमनियों की कल्पना करने के लिए दिल की सतह को धीरे से स्वैप करें यदि हृदय की सतह को कवर करने वाले तरल पदार्थ या रक्त के कारण एलएडी अदृश्य है।
  11. सीवन के एक तरफ पकड़ें और सुई धारक का उपयोग करके धीरे से सुई को सीवन से अलग करें।
  12. खुले लूप के एक तरफ रेशम सीवन के दो सिरों को दूसरी तरफ सर्कल में डालें ताकि स्नेयर लूप बनाया जा सके।
  13. लूप को बंद करने से पहले तैयार स्नेयर कंट्रोलर में स्नेयर लूप के रेशम सीवन के दो सिरों को डालें।
  14. स्नेयर लूप को बंद करने के लिए रेशम को धीरे से खींचते हुए रेशम सीवन के साथ स्नेयर लूप नियंत्रक को स्लाइड करें। 1 घंटे के लिए अस्थायी मायोकार्डियल इस्किमिया को प्रेरित करने के लिए एलएडी के कोरोनरी प्रवाह को रोकें।
  15. लूप को सुरक्षित रूप से बांधने के बाद केली फोर्सप्स के साथ स्नेयर लूप कंट्रोलर की स्थिति को ठीक करने के लिए रेशम को पकड़ें। एलएडी बंधाव के दौरान सर्जिकल टेबल पर केली फोर्सप्स के दूसरे छोर को रखें।
  16. एलएडी बंधाव के दौरान सर्जिकल विंडो को नमकीन गीली कपास की गेंदों से कवर करें।
  17. केली फोर्सेस खोलें।
  18. 2 घंटे के लिए कोरोनरी प्रवाह के रीपरफ्यूजन के लिए स्नेयर लूप कंट्रोलर जारी करें।
  19. आधार और संवहनी सीमाओं के साथ दिल को सावधानी से बचाएं और ऊतक को पकड़ने से बचें।
    नोट: 40% पिंजरे की मात्रा / मिनट की प्रवाह दर पर सीओ2 के साथ चूहे को इच्छामृत्यु करें।

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Representative Results

मायोकार्डियल इस्किमिया और रीपरफ्यूजन के अंत में, आगे के जैव रासायनिक या आणविक विश्लेषण से पहले एलएडी बंधाव की गुणवत्ता का आकलन किया जाना चाहिए।

बंधाव के माध्यम से एलएडी रोड़ा की पर्याप्तता केंद्रीय शिरापरक कैथेटर के माध्यम से 2% इवान की नीली डाई के 1 मिलीलीटर को इंजेक्ट करके निर्धारित की गई थी। फिर, कोरोनरी छिड़काव के साथ मायोकार्डियम गैर-संक्रमित क्षेत्र की तुलना में नीले रंग का था, जो लाल बना रहा (चित्रा 1 ए)। लाल क्षेत्र मायोकार्डियल रोधगलन का एएआर है।

अध्ययन किए गए जानवरों के बीच एएआर प्रतिशत में भिन्नता को निर्धारित करके एलएडी बंधाव के लिए स्थान की सटीकता का मूल्यांकन किया गया था। दिल को क्षैतिज रूप से काटने के बाद, एएआर प्रतिशत को पूरे मायोकार्डियल द्रव्यमान (चित्रा 1 बी) द्वारा एएआर को विभाजित करके निर्धारित किया गया था। अध्ययन किए गए जानवरों के बीच एएआर प्रतिशत में कम भिन्नता ने एलएडी बंधाव के सटीक स्थान का संकेत दिया।

मायोकार्डियल इन्फ्रैक्ट आकार तीव्र मायोकार्डियल आईआर अनुसंधान में प्राथमिक परिणाम है। इस पैरामीटर को निर्धारित करने के लिए, कटा हुआ हृदय वर्गों को 30 मिनट के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर सामान्य खारा में 1% 2,3,5-ट्राइफेनिलटेट्राज़ोलियम क्लोराइड (टीटीसी) में और फिर 3 दिनों के लिए 10% फॉर्मलाडेहाइड में इनक्यूबेट किया गया था। इन्फ्रैक्ट क्षेत्र सफेद था। इन्फ्रैक्ट आकार प्रतिशत की गणना एएआर (चित्रा 2) के लिए इन्फ्रैक्ट क्षेत्र के अनुपात के रूप में की गई थी।

Figure 1
चित्रा 1: इवान के नीले रंग के साथ एलएडी लिगेशन गुणवत्ता का सत्यापन। (ए) मायोकार्डियल रोधगलन के लिए एएआर गैर-संक्रमित मायोकार्डियल द्रव्यमान था जो इवान के नीले रंग को इंजेक्ट किए जाने के बाद भी लाल बना रहा, जिससे सुरक्षित एलएडी बंधाव की पुष्टि हुई। (बी) एएआर प्रतिशत की गणना पूरे मायोकार्डियल द्रव्यमान (लाल और नीले क्षेत्र) से एएआर (लाल क्षेत्र) को विभाजित करके की गई थी; अध्ययन किए गए जानवरों के बीच एएआर प्रतिशत में कम भिन्नता ने एलएडी बंधाव के सटीक स्थान का प्रदर्शन किया। गैर-उपचारित समूहों की तुलना में दवा-उपचारित समूहों में एक छोटा इन्फ्रैक्ट आकार प्रदर्शित किया गया था। एएआर, जोखिम में क्षेत्र; एलएडी, बाएं पूर्ववर्ती अवरोही धमनी। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 2
चित्रा 2: टीटीसी उपचार में मायोकार्डियल इन्फ्रैक्ट आकार का परिमाणीकरण। एलएडी लिगेशन समूह में इन्फ्रैक्ट क्षेत्र (सफेद क्षेत्र) और एएआर (लाल क्षेत्र) के अनुपात के रूप में इन्फ्रैक्ट आकार का अनुमान लगाया गया था। एएआर, जोखिम में क्षेत्र; टीटीसी, ट्राइफेनिलटेट्राज़ोलियम क्लोराइड। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

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Discussion

प्रस्तावित प्रोटोकॉल में कई विशिष्ट विशेषताएं हैं, जैसे कि एलएडी लिगेशन के लिए सटीक स्थिति की पहचान करना, एक ही सीवन में स्नेयर लूप को नियंत्रित करने के लिए एक गैजेट बनाना, और ऊतक क्षति को कम करने के लिए एक संशोधित सर्जिकल पैंतरेबाज़ी का समर्थन करना, इस प्रकार शोधकर्ताओं को एलएडी को सटीक, सुरक्षित और लगातार लिगेट करने में सक्षम बनाता है, साथ ही तीव्र मायोकार्डियल आईआर अनुसंधान के लिए तुरंत स्नेयर लूप की स्थिति को नियंत्रित करता है।

एलएडी बंधाव का स्थान मायोकार्डियल रोधगलन के क्षेत्र और आकार को प्रभावित करता है। लिगेशन आमतौर पर समीपस्थ एलएडी27,28 पर एक निश्चित दूरी पर सुझाया जाता है। कोरोनरी धमनी शाखाओं के पैटर्न में भिन्नता को अनदेखा करने से मायोकार्डियल रोधगलन23,24 में परिवर्तनशीलता बढ़ सकती है। इस अध्ययन में, एलएडी को एलएमसीए की पहली शाखा से तुरंत बाहर ले जाया गया, इस प्रकार बाएं सर्कमफ्लेक्स धमनी या सेप्टल धमनी के आकस्मिक बंधाव को रोका गया और लगातार इन्फ्रैक्ट आकार और घातक अतालता की कम संभावना 29,30,31 हो गई।

एलएडी रोड़ा के लिए सुरक्षित एलएडी बंधाव आवश्यक है। विशेषज्ञों ने सिफारिश की है कि एलएडी को एक से तीन समुद्री मील बनाने के लिए या कोरोनरी धमनी 32,33,34,35,36 को संपीड़ित करने के लिए टयूबिंग के एक छोटे से टुकड़े के साथ बांधा जाना चाहिए। इस पेपर में, हम एलएडी को एक ही सीवन में रखने के लिए स्नेयर लूप के साथ एक नियंत्रणीय गैजेट का सुझाव देते हैं; यह दृष्टिकोण सुरक्षित एलएडी बंधाव और लूप बंद होने और रिलीज के तत्काल नियंत्रण को सक्षम बनाता है, जबकि ऊतक लेसेशन, रक्तस्राव और बार-बार मायोकार्डियल पंचर, धमनी बंधाव और लिगेचर रिलीज के दौरान सीवन की ताकत को तोड़ने से रोकता है। इस प्रकार, दृष्टिकोण तीव्र मायोकार्डियल आईआर अनुसंधान में प्रयोगात्मक और सत्यापन प्रक्रियाओं के लिए उपयोगी है।

सर्जरी के दौरान शारीरिक विशेषताओं और हिस्टोलॉजिकल गुणों को पहचानना ऊतक क्षति को कम करने और अध्ययन प्रतिकृति में सुधार के लिए सहायक है। वक्ष के उद्घाटन के संबंध में, विद्वानों ने छाती की मांसपेशियों और पसली के पिंजरे 32,33,35,37,38 को एक तरफ खींचने के लिए कैंची, एक रिमुंडर, फोर्स, कुंद चिमटी, या टांके का उपयोग करके पेक्टोरल और तीसरे या चौथे इंटरकोस्टल मांसपेशियों को अलग करने का सुझाव दिया है। वर्तमान अध्ययन से पता चलता है कि त्वचा तनाव रेखाओं (त्वचा के संयोजी ऊतक ढांचे) 39,40 के साथ एक चीरा लगता है, जो एक पसली के उपास्थि को काटता है, जिसमें एवास्कुलर लचीला संयोजी ऊतक 41 होता है, और छाती की दीवार को खोलने के लिए वक्ष की मांसपेशियों और पसली के पिंजरों को हुक करता है। यह दृष्टिकोण ऊतक अखंडता को बनाए रखने में मदद करता है और रक्तस्राव के जोखिम को कम करता है। इसके अतिरिक्त, स्पर्श के माध्यम से विश्वसनीय सतह निर्माताओं की पहचान करके दृष्टिकोण शुरू करने का मतलब है कि त्वचा चीरा का उपयोग करने वाली शल्य चिकित्सा प्रक्रिया अत्यधिक दोहराने योग्य और सुसंगत है।

एलएडी लिगेशन द्वारा प्रेरित मायोकार्डियल रोधगलन की गुणवत्ता की पुष्टि करना तीव्र मायोकार्डियल आईआर अनुसंधान में पैथोफिजियोलॉजिकल परिवर्तनों की जांच से पहले एक महत्वपूर्ण कदम है। साहित्य में, एलएडी बंधाव के बाद मायोकार्डियल रोधगलन की घटना की पुष्टि मायोकार्डियम28,33 के अचानक क्षेत्रीय पीलापन को देखकर की जाती है; बेसलाइन33 से इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम ऊंचाई का एक तीव्र एसटी खंड; सीके-एमबी, ट्रोपोनिन आई और ट्रोपोनिन टी 28,32,42 जैसे ऊंचा सीरम कार्डियक एंजाइम स्तर; या मैक्रोस्कोपिक रूप से इन्फ्रैक्ट डे क्षेत्र42. एलएडी लिगेशन की स्थिरता को फ्थालो या इवान की नीली डाई32,35,37,38 का उपयोग करके रोधगलन के लिए एएआर का निर्धारण करके मान्य किया जाना चाहिए। नमूनों के बीच एएआर प्रतिशत में कम परिवर्तनशीलता तीव्र मायोकार्डियल आईआर अनुसंधान के लिए प्रक्रिया की स्थिरता और गुणवत्ता साबित करती है। इसके अलावा, टीटीसी28,36 के साथ मायोकार्डियल रोधगलन क्षेत्रों का सीमांकन करके इन्फ्रैक्ट क्षेत्र को एएआर से अलग किया जा सकता है। टीटीसी डबल स्टेनिंग को पहले मायोकार्डियल आईआर अध्ययन की गुणवत्ता का मूल्यांकन करने के लिए नियोजित किया गया था। पूर्व विवो मूल्यांकन में आवश्यकता की तुलना में कि अलग-थलग दिल को लैंगेंडॉर्फ तंत्र के तहत संक्रमित किया जाना चाहिए, यह अध्ययन विवो मूल्यांकन में पशु प्रोटोकॉल का समर्थन करता है जिसमें परिणाम प्राप्त किए जाते हैं, और अध्ययन की गुणवत्ता तुरंत और सीधे मान्य होती है।

इससे भी महत्वपूर्ण बात यह है कि एएआर के लिए इन्फ्रैक्ट क्षेत्र को परिभाषित करने के लिए इवान के नीले और टीटीसी का उपयोग जैव रासायनिक विश्लेषण के लिए इन्फ्रैक्टेड मायोकार्डियम के उपयोग को रोकता है, जो भ्रामक कारकों को बाहर करने और तीव्र मायोकार्डियल आईआर अनुसंधान में सटीक परिणाम प्राप्त करने की आवश्यकता है।

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Disclosures

लेखक घोषणा करते हैं कि इस लेख के प्रकाशन के संबंध में हितों का कोई टकराव नहीं है।

Acknowledgments

यह मॉडल विज्ञान और प्रौद्योगिकी मंत्रालय, ताइवान (MOST 109-2320-B-030-006-MY3) से वित्तीय सहायता के साथ विकसित किया गया था।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Evan’s blue Sigma Aldrich E2129
Forceps Shinva
Pentobarbital Sigma Aldrich 1507002
Scalpel blades Shinva s2646
Scalpel handles Shinva
Silk sutures SharpointTM DC-2150N
Surgical needle AnchorTM
Triphenyltetrazolium chloride (TTC) solution Solarbio T8170-1
Ventilator Harvard Rodent Ventilator

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

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इस्किमिया-रीपरफ्यूजन रिसर्च के लिए बाएं पूर्वकाल अवरोही कोरोनरी धमनी बंधाव: तकनीकी संशोधनों और गुणवत्ता नियंत्रण के माध्यम से मॉडल सुधार
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Ku, H. C., Chien, D. K., Chao, C.… More

Ku, H. C., Chien, D. K., Chao, C. L., Lee, S. Y. Left Anterior Descending Coronary Artery Ligation for Ischemia-Reperfusion Research: Model Improvement via Technical Modifications and Quality Control. J. Vis. Exp. (190), e63921, doi:10.3791/63921 (2022).

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