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कार्डियक अरेस्ट, पुनर्जीवन, और सहज परिसंचरण की वापसी के बाद कार्डियक चोट और हेमोडायनामिक्स का अध्ययन करने के लिए एक पिगलेट पेरिनेटल एस्फिक्सिया मॉडल

Published: January 13, 2023 doi: 10.3791/64788
Automatic Translation
1,2, 2, 3, 3,4, 5, 6,7, 6,7, 8,9, 10,11, 1,2, 2
1Institute of Clinical Medicine, Faculty of Medicine, University of Oslo, 2Department of Neonatal Intensive Care, Division of Pediatric and Adolescent Medicine, Oslo University Hospital Rikshospitalet, 3Department of Pediatric Research, Division of Paediatric and Adolescent Medicine, Oslo University Hospital Rikshospitalet, 4Department of Pediatrics, Vestfold Hospital Trust, 5Department of Anesthesiology, Oslo University Hospital Rikshospitalet, 6Department of Pediatrics, Faculty of Medicine and Dentistry, University of Alberta, 7Centre for the Studies of Asphyxia and Resuscitation, Neonatal Research Unit, Royal Alexandra Hospital, 8Division of Paediatric and Adolescent Medicine, Institute of Clinical Medicine, University of Oslo, 9Department of Paediatrics and Adolescent Health, University of Botswana, 10Department of Pediatric Research, Oslo University Hospital, University of Oslo, 11Department of Pediatrics, Robert H Lurie Medical Research Center, Northwestern University Chicago

Summary

इस पिगलेट मॉडल में सर्जिकल इंस्ट्रूमेंटेशन, कार्डियक अरेस्ट, पुनर्जीवन और पोस्ट-पुनर्जीवन अवलोकन तक श्वासावरोध शामिल है। मॉडल प्रति पशु कई नमूने लेने की अनुमति देता है, और निरंतर आक्रामक धमनी रक्तचाप, ईसीजी, और गैर-इनवेसिव कार्डियक आउटपुट मॉनिटरिंग का उपयोग करके, यह प्रसवकालीन श्वासावरोध और नवजात कार्डियोपल्मोनरी पुनर्जीवन में हेमोडायनामिक्स और कार्डियक पैथोफिज़ियोलॉजी के बारे में ज्ञान प्रदान करता है।

Abstract

नवजात पिगलेट को प्रसवकालीन श्वासावरोध के लिए ट्रांसलेशनल मॉडल के रूप में बड़े पैमाने पर उपयोग किया गया है। 2007 में, हमने कार्डियक अरेस्ट पेश करके एक अच्छी तरह से स्थापित पिगलेट एस्फिक्सिया मॉडल को अनुकूलित किया। इसने हमें प्रमुख परिणामों पर गंभीर श्वासावरोध के प्रभाव का अध्ययन करने में सक्षम बनाया, जिसमें सहज परिसंचरण (आरओएससी) की वापसी के लिए लगने वाला समय, साथ ही कार्डियोपल्मोनरी पुनर्जीवन के लिए वैकल्पिक प्रोटोकॉल के अनुसार छाती संपीड़न का प्रभाव शामिल है। पिगलेट और मानव नवजात शिशुओं के बीच शारीरिक और शारीरिक समानता के कारण, पिगलेट कार्डियोपल्मोनरी पुनर्जीवन और हेमोडायनामिक निगरानी के अध्ययन में अच्छे मॉडल के रूप में काम करते हैं। वास्तव में, इस कार्डियक अरेस्ट मॉडल ने पुनर्जीवन प्रोटोकॉल, पैथोफिज़ियोलॉजी, बायोमाकर्स और हेमोडायनामिक निगरानी के लिए नए तरीकों पर शोध के माध्यम से दिशानिर्देश विकास के लिए सबूत प्रदान किए हैं। विशेष रूप से, आकस्मिक खोज कि कार्डियक अरेस्ट के दौरान पिगलेट के एक बड़े अंश में पल्सलेस इलेक्ट्रिकल गतिविधि (पीईए) होती है, मॉडल की प्रयोज्यता को बढ़ा सकती है (यानी, इसका उपयोग प्रसवकालीन अवधि से परे फैले पैथोफिज़ियोलॉजी का अध्ययन करने के लिए किया जा सकता है)। हालांकि, मॉडल पीढ़ी तकनीकी रूप से चुनौतीपूर्ण है और जीवित रहने की उचित दर सुनिश्चित करने के लिए सर्जिकल प्रोटोकॉल और शामक / एनाल्जेसिक के उपयोग सहित विभिन्न कौशल सेट, समर्पित कर्मियों और उपायों के एक अच्छे संतुलन की आवश्यकता होती है। इस पेपर में, प्रोटोकॉल को विस्तार से वर्णित किया गया है, साथ ही वर्षों से प्रोटोकॉल के अनुकूलन के साथ अनुभव भी हैं।

Introduction

प्रसवकालीन श्वासावरोध जन्म से पहले, दौरान और / या बाद में गैस विनिमय (हाइपोक्सिमिया और हाइपरकेनिया) के कारण होता है। इसके परिणामस्वरूप महत्वपूर्ण अंगों में रक्त प्रवाह (इस्किमिया) कम हो जाता है और बाद में मिश्रित श्वसन और चयापचय एसिडोसिस होता है। प्रसवकालीन श्वासावरोध एक आम जन्म जटिलता है जोसालाना दुनिया भर में 580,000 शिशु मृत्यु का कारण बनती है। नवजात शिशुओं और 5 वर्ष से कम उम्र के बच्चों में मृत्यु दर को कम करने के लिए इस संख्या को कम करना आवश्यक है, जैसा कि संयुक्त राष्ट्र के सतत विकास लक्ष्य संख्या 3.2 (यानी, नवजात मृत्यु दर <12 प्रति 1,000 जीवित जन्मों और 5 वर्ष से कम आयु के बच्चों की मृत्यु दर <25 प्रति 1,000 जीवित जन्म) में कहा गया है।

नैदानिक रूप से, श्वासावरोध नवजात शिशु3 (यानी, महत्वपूर्ण अंग हाइपोक्सिया-इस्किमिया के लक्षण और संकेत) में हाइपोक्सिक-इस्केमिक एन्सेफैलोपैथी (एचआईई), श्वसन अवसाद और संचार विफलता के रूप में प्रस्तुत करता है। नतीजतन, एक श्वासावरोध शिशु को एन्सेफैलोपैथी के लिए उपचार की आवश्यकता हो सकती है, जिसमें दौरे, और उन्नत श्वसन और संचार समर्थन शामिल हैं। विश्व स्तर पर, प्रत्येक वर्ष, 10 मिलियन शिशुओं को स्पर्श उत्तेजना जैसे किसी न किसी प्रकार के हस्तक्षेप की आवश्यकता होती है, और 6-7 मिलियन शिशुओंको जन्म के समय सहायक वेंटिलेशन की आवश्यकता होती है। इस प्रकार, प्रसवकालीन श्वासावरोध स्वास्थ्य देखभाल प्रणाली पर एक बड़ा तनाव डालता है, जिसमें संबंधित सामाजिक आर्थिक निहितार्थ होते हैं। प्रसवकालीन श्वासावरोध के लिए जिम्मेदार वैश्विक रोग के बोझ को कम करने के लिए, हमारे शोध समूहों का मानना है कि वैज्ञानिक अध्ययनों में निम्नलिखित फोकस क्षेत्रों की जांच की जानी चाहिए: रोकथाम, प्रसवपूर्व और प्रसूति देखभाल और अनुवर्ती में सुधार सहित; रोगसूचक बायोमार्कर; और अनुकूलित प्रसव कक्ष पुनर्जीवन और स्थिरीकरण6.

नवजात पिगलेट और निकट अवधि के गर्भ में मानव शिशुओं में समान शरीर रचना विज्ञान और पैथोफिज़ियोलॉजी7 होते हैं। यद्यपि प्रसवकालीन श्वासावरोध और कार्डियक अरेस्ट का कोई भी पशु मॉडल असफल प्रसवकालीन संक्रमण का पूरा पहलू नहीं बना सकता है जिससे श्वासावरोध और कार्डियक अरेस्ट होता है, पिगलेट अच्छे ट्रांसलेशनल मॉडल हैं।

1970 के दशक की शुरुआत में, हमने वयस्क सूअरों8 में एक हाइपोक्सिया मॉडल विकसित किया। इसे अनुसंधान समूहों9 द्वारा सफलतापूर्वक परिष्कृत किया गया था, इस प्रकार प्रसवकालीन श्वासावरोध10,11,12,13,14,15,16,17,18 का एक पिगलेट मॉडल प्रदान किया गया था। 2007 में, पिगलेट में कार्डियक अरेस्ट के साथ पहला प्रयोग ओस्लो यूनिवर्सिटी अस्पताल11,13,15,16 में इंस्टीट्यूट फॉर सर्जिकल रिसर्च में किया गया था। गिरफ्तारी मॉडल ने दिशानिर्देश विकास 10,13,15,16,19,20 के साथ-साथ शारीरिक अध्ययन और उपकरण / नैदानिक उपकरणों के परीक्षण के लिए विशाल अवसर प्रदान किए हैं 14,21, पुनर्जीवन प्रोटोकॉल (यादृच्छिक नियंत्रित अध्ययन) 13,15,16,22, और रक्त और ऊतक बायोमार्कर10,12,20। इस प्रकार, मॉडल बहुमुखी साबित हुआ है, और एक एकल प्रयोगात्मक श्रृंखला का उपयोग पारंपरिक रूप से कई शोध प्रश्नों के उत्तर देने के लिए किया गया है। यह महत्वपूर्ण है और प्रयोगात्मक पशु अनुसंधान23 (यानी, वैज्ञानिक उद्देश्यों के लिए बलिदान किए जा रहे जानवरों की संख्या को कम करने के सिद्धांत) के तीन आरएस (कमी, प्रतिस्थापन और शोधन) के साथ सहमति में है।

निम्नलिखित प्रोटोकॉल में, प्रसवकालीन श्वासावरोध के पिगलेट मॉडल को विस्तार से वर्णित किया गया है, जिसमें कार्डियक अरेस्ट को प्रेरित, परिभाषित और सुनिश्चित करना शामिल है। मॉडल को शामक और सर्जिकल हस्तक्षेप के संपर्क को कम करने के लिए परिष्कृत किया गया है और इसमें यांत्रिक वेंटिलेशन, श्वासावरोध, पुनर्जीवन, पोस्ट-पुनर्जीवन अवलोकन और रक्त, मूत्र और मस्तिष्कमेरु द्रव के नमूनों का संग्रह शामिल है। हमारे समूह पारंपरिक रूप से महत्वपूर्ण अंगों के पोस्टमॉर्टम से ऊतक ों को इकट्ठा करते हैं, लेकिन ऊतक संग्रह की प्रक्रिया इस प्रोटोकॉल में विस्तार से वर्णित नहीं है। मॉडल मिश्रित श्वसन और चयापचय एसिडोसिस के साथ एक हाइपोक्सिक अपमान का अनुकरण करता है, जो श्वासावरोध मानव नवजात शिशुओं की जैव रसायन को दर्शाता है। इनवेसिव ब्लड प्रेशर (बीपी) और हार्ट रेट (एचआर), पल्स ऑक्सीमेट्री (पीओ), इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम (ईसीजी), प्रतिबाधा कार्डियोग्राफी (आईसीजी), और नियर-इन्फ्रारेड स्पेक्ट्रोस्कोपी (एनआईआरएस) आकलन के साथ पिगलेट्स की करीबी निगरानी द्वारा, हृदय पर विशेष ध्यान देने के साथ प्रसवकालीन एस्फिक्सिया के शरीर विज्ञान का विस्तार से अध्ययन किया जा सकता है।

मॉडल तकनीकी रूप से चुनौतीपूर्ण है, क्योंकि दवाओं, सर्जिकल हस्तक्षेपों और कार्डियक अरेस्ट को प्रेरित करने की विधि में बहुत अच्छा संतुलन जीवित रहने की उचित दर सुनिश्चित करने के लिए आवश्यक है। प्रयोगों का संचालन करने के लिए पूरी तरह से तैयारी और एक समर्पित और अच्छी तरह से काम करने वाली टीम की आवश्यकता होती है। प्रयोगात्मक जानवरों का चयन भी सफल प्रयोगों को सुनिश्चित करने में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। इस पेपर में, हम प्रोटोकॉल और इसके साथ हमारे अनुभवों का विस्तार से वर्णन करते हैं।

Protocol

प्रोटोकॉल को नॉर्वेजियन खाद्य सुरक्षा प्राधिकरण (अनुमोदन एनआर 25030) द्वारा अनुमोदित किया गया था, और प्रयोग यूरोपीय, नॉर्वेजियन और संस्थागत नियमों के अनुसार आयोजित किए गए थे। इस मॉडल की प्रतिकृति के लिए संस्थागत और राष्ट्रीय नियमों के अनुरूप पशु प्रयोगों के लिए नैतिक अनुमोदन प्राप्त करने और तीन रुपये23 रुपये के अनुसार प्रयोगों का संचालन सुनिश्चित करने की आवश्यकता होती है। जानवरों को संभालने वाले सभी कर्मियों को यूरोपीय संघ के निर्देश 2010/63 / ईयू 24, या समकक्ष के अनुच्छेद 23 और अनुच्छेद24 के अनुसार कार्य ए, बी और डी के साथ प्रमाणित करने की आवश्यकता है। पूरे प्रयोग के दौरान जानवरों की सावधानीपूर्वक निगरानी करें, और जानवरों की भलाई सुनिश्चित करने के लिए संज्ञाहरण, वेंटिलेटर सेटिंग्स, तापमान और पशु स्थिति को समायोजित करें। मॉडल और उसके आवेदन का नियमित रूप से गंभीर रूप से आकलन करें, और आवश्यकतानुसार और संभव रूप से परिष्कृत करें।

नोट: इस अध्ययन में इस्तेमाल किए गए पिगलेट 12-36 घंटे की आयु के थे, वजन 1.7-2.3 किलोग्राम था, समान लिंग वितरण था, मिश्रित नॉर्वेजियन लैंडरेस, ड्यूरोक और यॉर्कशायर जाति के थे, और आनुवंशिक रूप से अपरिवर्तित थे। प्रोटोकॉल के चरण 1 और चरण 2 में सामान्य संज्ञाहरण और डेटा नमूना करण प्रक्रियाएं शामिल हैं जो पूरे प्रयोग में लागू होती हैं, और चरण 3-10 प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं का विस्तार करते हैं, जिसमें जानवरों की तैयारी, सर्जिकल हस्तक्षेप, कार्डियक अरेस्ट तक श्वासावरोध, पुनर्जीवन और पोस्ट-पुनर्जीवन अवलोकन शामिल हैं।

1. संज्ञाहरण प्रोटोकॉल (समय: पूरे प्रयोग पर लागू होता है)

  1. कान की नस में परिधीय शिरापरक कैथेटर में IV फेंटानिल (50 μg / kg) और पेंटोबार्बिटल (15-20 mg / kg) के बोलस के साथ संज्ञाहरण को प्रेरित करें।
    सावधानी: फेंटानिल हानिकारक है यदि साँस ली जाती है या निगला जाता है और आंखों और त्वचा को परेशान करता है। यह भी एक प्रतिबंधित दवा है। इसकी आपूर्ति और उपयोग की निगरानी की जानी चाहिए और प्रतिबंधित दवाओं के लिए नियमों के अनुसार विनियमित किया जाना चाहिए। पेंटोबार्बिटल हानिकारक है यदि निगला जाता है और आंखों और त्वचा को परेशान करता है।
  2. श्वासावरोध तक IV फेंटेनाइल (50 μg / kg / h) के साथ संज्ञाहरण बनाए रखें, और फिर श्वासावरोध के दौरान बंद करें, और सहज परिसंचरण (ROSC) की वापसी के बाद 25 μg / kg / h पर पुन: स्थापित करें।
    नोट: इस मॉडल में उपयोग की जाने वाली उच्च खुराक फेंटानिल संज्ञाहरण नियोनेटोलॉजिस्ट और बाल चिकित्सा एनेस्थेसियोलॉजिस्ट से जुड़े एक सहयोगी प्रयास में मॉडल को परिष्कृत करने के दसियों वर्षों से उपजा है। उच्च खुराक फेंटानिल संज्ञाहरण मानव वयस्कों और नवजात शिशुओं में कार्डियोवैस्कुलर और हेमोडायनामिक स्थिरता25,26 से जुड़ा हुआ है। हालांकि, नवजात पिगलेट्स में एक अध्ययन से पता चला है कि फेंटेनाइल का उपयोग कम एचआर और कार्डियक आउटपुट (सीओ) और औसत धमनी दबाव (एमएपी), बाएं वेंट्रिकुलर एंड-डायस्टोलिक दबाव और कुल परिधीय प्रतिरोध सूचकांक27 में वृद्धि के साथ जुड़ा हुआ था।
  3. पूरे प्रयोग के दौरान पिगलेट की भलाई की निगरानी करें। मांसपेशियों की टोन की जांच करें और यह सुनिश्चित करने के लिए महत्वपूर्ण तत्वों का आकलन करें कि पिगलेट को अच्छी तरह से एनेस्थेटाइज किया गया है। यदि पिगलेट संकट के लक्षण दिखाता है, तो नैदानिक निर्णय के अनुसार अतिरिक्त IV फेंटानिल या IV पेंटोबार्बिटल का प्रशासन करें।

2. डेटा नमूनाकरण और पंजीकरण (समय: पूरे प्रयोग पर लागू होता है)

  1. प्रत्येक पिगलेट के लिए एक पेपर केस पंजीकरण फॉर्म (सीआरएफ) प्रिंट करें। सीआरएफ में एचआर, बीपी (एमएपी सहित), ऑक्सीजन संतृप्ति (एसपीओ2), क्षेत्रीय सेरेब्रल ऑक्सीजन संतृप्ति (एनआईआरएस), तापमान, प्रदान की गई अतिरिक्त दवा और कंपकंपी के बारे में जानकारी होती है।
  2. सीआरएफ पर, पिगलेट को एक आईडी नंबर दें, और सामने के पृष्ठ पर पिगलेट का वजन और लिंग रिकॉर्ड करें।
  3. स्थिरीकरण अवधि के दौरान और श्वासावरोध के प्रेरण से ठीक पहले हर 5 मिनट में पंजीकरण करें। श्वासावरोध के प्रेरण के बाद, 10 मिनट के बाद और फिर कार्डियक अरेस्ट तक हर 5 मिनट में पहला पंजीकरण करें। यदि आरओएससी प्राप्त हो जाता है, तो आरओएससी के बाद जितनी जल्दी हो सके पंजीकरण करें, आरओएससी के बाद पहले घंटे के लिए हर 5 मिनट, और फिर शेष अवलोकन अवधि के लिए हर 30 मिनट।
  4. सीआरएफ पर, बताएं कि विभिन्न नमूने कब एकत्र किए जाएं।
    1. स्थिरीकरण की शुरुआत में, श्वासावरोध के प्रेरण से ठीक पहले, कार्डियक अरेस्ट पर, आरओएससी में 30 मिनट, 60 मिनट, 120 मिनट, 240 मिनट, और 540 मिनट के बाद आरओएससी में और अध्ययन के अंत में (570 मिनट) पूर्ण रक्त और प्लाज्मा एकत्र करें।
      नोट: यह गणना करना महत्वपूर्ण है कि प्रत्येक पिगलेट से कितना रक्त निकाला जा सकता है। एक उदाहरण के रूप में, छोटे पिगलेट, अस्थिर पिगलेट और पिगलेट से कम रक्त खींचा जा सकता है जिन्हें गर्दन की सर्जरी से कुछ रक्त हानि का सामना करना पड़ा है। पूरे प्रयोग के दौरान एसिड-बेस स्थिति से हीमोग्लोबिन (एचबी) को देखना भी महत्वपूर्ण है। इस अध्ययन में, एचबी <6 ग्राम / डीएल वाले पिगलेट को बाहर रखा गया था।
    2. आरओएससी के बाद 240 मिनट और अध्ययन के अंत में (570 मिनट) मूत्र एकत्र करें।
    3. स्थिरीकरण की शुरुआत में एसिड-बेस स्थिति लें, श्वासावरोध के प्रेरण से ठीक पहले, श्वासावरोध के प्रेरण के 10 मिनट बाद, और फिर कार्डियक अरेस्ट तक हर 5 मिनट। आरओएससी में कार्डियक अरेस्ट पर एसिड-बेस स्थिति लें, 5 मिनट, 15 मिनट, 30 मिनट, 60 मिनट, 120 मिनट, 240 मिनट और 540 मिनट के बाद, और अध्ययन के अंत में (570 मिनट)।
    4. अध्ययन के अंत में मस्तिष्कमेरु द्रव (सीएसएफ) एकत्र करें (570 मिनट)।
  5. केंद्रीय धमनी कैथेटर से पूर्ण रक्त और प्लाज्मा एकत्र करें।
    1. केंद्रीय धमनी कैथेटर से 2 मिलीलीटर रक्त को हेपरिनाइज्ड सिरिंज में निकालें, और साइड में डाल दें।
    2. फिर, एक नए हेपरिनाइज्ड सिरिंज में 2.5 एमएल रक्त निकालें। एक माइक्रोसेंट्रीफ्यूज ट्यूब में अंतिम खींचे गए पूर्ण रक्त के 0.5 एमएल रखें, और तरल नाइट्रोजन में स्नैप-फ्रीज करें।
    3. शेष 2 एमएल को उचित आकार की ईडीटीए शीशी में रखें, और 10 मिनट के लिए 4 डिग्री सेल्सियस पर 1,700 x g पर सेंट्रीफ्यूज करें। प्लाज्मा (जो शीर्ष परत के रूप में बफी कोट और एरिथ्रोसाइट्स से अलग होता है) को माइक्रोसेंट्रीफ्यूज ट्यूबों में पिपेट करें, और तरल नाइट्रोजन में स्नैप-फ्रीज करें।
    4. केंद्रीय धमनी कैथेटर से एक नए हेपरिनाइज्ड सिरिंज में एक और 0.2 एमएल रक्त निकालें। सिरिंज को एसिड-बेस मशीन में रखें ( सामग्री की तालिका देखें), और प्रासंगिक जानकारी (आईडी, समय बिंदु और पिगलेट का तापमान) भरें।
    5. पहले हेपरिनाइज्ड सिरिंज में वापस लिए गए रक्त को धमनी कैथेटर में वापस धकेलें। धमनी कैथेटर को हेपरिनाइज्ड सामान्य खारा के साथ फ्लश करें ताकि यह सुनिश्चित हो सके कि सभी रक्त पिगलेट के परिसंचरण में वापस आ गए हैं।
  6. मूत्र की सुप्राप्यूबिक एस्पिरेशन द्वारा मूत्र एकत्र करें।
    1. स्थलों का पता लगाएं: निपल्स के तीसरे-सबसे कम और दूसरे-सबसे कम जोड़े के बीच का क्षेत्र, उम्बिलिकस से लगभग 2 सेमी नीचे, और मध्य रेखा के कुछ मिलीमीटर पार्श्व।
    2. 23 ग्राम प्रवेशनी के साथ 10 एमएल सिरिंज का उपयोग करें। कैनुला को लंबवत रूप से लगभग 1 सेमी आगे बढ़ाएं, और तब तक एस्पिरेट करें जब तक कि सिरिंज मूत्र से भर न जाए। मूत्र को क्रायोजेनिक ट्यूब में डालें, और तरल नाइट्रोजन में स्नैप-फ्रीज करें।
  7. एक काठ पंचर द्वारा सीएसएफ एकत्र करें।
    1. पिगलेट को इसके किनारे रखें, और पिछले अंगों को छाती की ओर खींचें। स्थलों का पता लगाएं: पिगलेट के इलियाक शिखा के स्तर पर रीढ़ की हड्डी के टैग के बीच।
    2. सीएसएफ उभरने तक रीढ़ की हड्डी के टैग के बीच 21 ग्राम कैनुला को थोड़ा कपाल रूप से आगे बढ़ाएं। सीएसएफ को माइक्रोसेंट्रीफ्यूज ट्यूबों में रखें, और तरल नाइट्रोजन में स्नैप-फ्रीज करें।
    3. डेटा अधिग्रहण और विश्लेषण सॉफ्टवेयर का उपयोग करके निरंतर ईसीजी और इनवेसिव धमनी बीपी डेटा एकत्र करें (चरण 6 और चरण 7 देखें)। व्यावसायिक रूप से उपलब्ध एनआईआरएस मशीन के साथ एनआईआरएस (चरण 7 देखें) निष्पादित करें (सामग्री की तालिका देखें)।

3. तैयारी (समय: हफ्तों से महीनों तक, जब तक आवश्यक हो)

  1. पशु प्रयोगों के लिए नैतिक अनुमोदन प्राप्त करें।
  2. एक किसान से संपर्क करें, और पिगलेट के चयन को व्यवस्थित करें (आयु: 12-36 घंटे, समान लिंग वितरण, वजन: 1.7-2.3 किलोग्राम), वितरण की तारीख और परिवहन व्यवस्था।
    नोट: एक ही जाति (इस अध्ययन में, नॉर्वेजियन लैंडरेस, ड्यूरोक और यॉर्कशायर का मिश्रण) और खेत से पिगलेट का चयन करना, आदर्श रूप से एक ही कूड़े से और एक संकीर्ण आयु सीमा के भीतर, जैविक और शारीरिक भिन्नता को कम करने के लिए महत्वपूर्ण है।
  3. सुनिश्चित करें कि कार्मिक निर्धारित तिथि (दिनों) पर उपलब्ध हैं।
  4. जांचें कि सभी आवश्यक उपकरण उपलब्ध हैं और सभी उपकरण और अवलोकन उपकरण काम कर रहे हैं। एस्फिक्सिया गैस की समाप्ति तिथि (8% ओ 2, 92% एन2) की जांच करें और यह खाली नहीं है।
  5. प्रयोगशाला और सभी उपकरण स्थापित करें ताकि यह पिगलेट के स्वागत के लिए तैयार हो। सभी आवश्यक उपकरणों को कैलिब्रेट करें।
  6. यादृच्छिक नियंत्रित परीक्षण के मामले में नमूना आकार का अनुमान लगाएं, और पिगलेट के यादृच्छिककरण को तैयार करें।

4. पिगलेट का रिसेप्शन (समय: 10 मिनट से 2 घंटे तक, पिगलेट की संख्या के आधार पर)

  1. प्रयोगों के दिन खेत से शल्य चिकित्सा सुविधा तक घरेलू पिगलेट के परिवहन को व्यवस्थित करें। पिगलेट के तापमान को बनाए रखने के लिए कंटेनर "फर्श" को ठीक लकड़ी के चिप्स और गर्म पानी की बोतलों के साथ कवर करें। हवा के परिसंचरण को सुनिश्चित करने के लिए कंटेनर में बर्र छेद बनाएं।
  2. किसान से पिगलेट की उम्र और वजन के बारे में जानकारी प्राप्त करें। आगमन पर उनके वजन की पुष्टि करें।
  3. पिगलेट के हिंदलिंब पर पल्स ऑक्सीमीटर (पीओ) जांच (सामग्री की तालिका देखें) रखकर एसपीओ2 और एचआर को मापें, जबकि पिगलेट कंटेनर में शांत और आसानी से है।
  4. सभी उपकरणों को तैयार करें, और सर्जिकल टेबल पर इलेक्ट्रिक हीटिंग गद्दे पर गर्मी चालू करें।
  5. पिगलेट को कंटेनर में आराम करने दें जब तक कि टीम में हर कोई संज्ञाहरण और सर्जिकल हस्तक्षेप के प्रेरण के लिए तैयार न हो।

5. संज्ञाहरण, इंटुबैशन और यांत्रिक वेंटिलेशन का प्रेरण (समय: 15 मिनट)

  1. IV पहुंच और इंटुबैशन के लिए उपकरण तैयार करें।
  2. संज्ञाहरण और इंटुबैशन के प्रेरण के दौरान ऑक्सीजन और एचआर की निगरानी के लिए एक हिंदलिम्ब पर पीओ जांच लागू करें।
  3. सुनिश्चित करें कि वह व्यक्ति अभी भी और शांत पिगलेट को पकड़े हुए है। सुनिश्चित करें कि व्यक्ति दो कान की नस में एक परिधीय अंतःशिरा कैथेटर डालें। प्लेसमेंट की पुष्टि करने के लिए कैथेटर को लगभग 1 मिलीलीटर सामान्य खारा के साथ फ्लश करें। कैथेटर को टेप से सुरक्षित करें।
  4. कान की नस में फेंटेनाइल और पेंटोबार्बिटल की एक बोलस खुराक इंजेक्ट करें (जैसा कि चरण 1.1 में वर्णित है)। कैथेटर को 1 एमएल सामान्य खारा के साथ फ्लश करें। जांच ें कि वापसी सजगता का आकलन करके पिगलेट को एनेस्थेटाइज किया गया है।
  5. सुनिश्चित करें कि वह व्यक्ति पिगलेट को लापरवाह स्थिति में रखता है। मुंह खोलें, और जीभ को 10 सेमी x 10 सेमी धुंध स्वैब के साथ बाहर खींचें। स्वरयंत्र को एक सीधी रेखा में रखें।
  6. सुनिश्चित करें कि व्यक्ति दो जीभ को उठाने के लिए लैरींगोस्कोप ( सामग्री की तालिका देखें) का उपयोग करता है। एपिग्लोटिस को उठाने और मुखर डोरियों की कल्पना करने के लिए लैरींगोस्कोप को आगे बढ़ाएं। मुखर डोरियों के माध्यम से एंडोट्रेकियल ट्यूब (ईटीटी, सामग्री की तालिका देखें) को आगे बढ़ाएं।
    नोट: कफ ्ड ईटीटी का उपयोग करने से मुखर डोरियों के माध्यम से ईटीटी की प्रगति अधिक चुनौतीपूर्ण हो सकती है। यदि इंटुबैशन मुश्किल है, तो पिगलेट के महत्वपूर्ण संकेतों को देखना विशेष रूप से महत्वपूर्ण है। यदि वाइटल्स गिर जाते हैं, तो पिगलेट के स्नूट के ऊपर एक मास्क रखें, मास्क को एक स्व-फुलाने वाले बैग से कनेक्ट करें, और वाइटल्स सामान्य होने तक पिगलेट को मैन्युअल रूप से हवादार करें। फिर, पुन: प्रयास करें। यदि यह अभी भी चुनौतीपूर्ण है, तो पेंटोबार्बिटल की एक अतिरिक्त खुराक देने पर विचार करें। दुर्लभ मामलों में (जैसे, ऊपरी वायुमार्ग विसंगति), एक ट्रेकियोस्टोमी किया जाना चाहिए। हालांकि, अनुभवी कर्मचारियों के साथ, इंटुबैशन आमतौर पर आसानी से किया जाता है।
  7. ईटीटी को एक स्व-फुलाने वाले बैग से कनेक्ट करें ( सामग्री की तालिका देखें), और मैन्युअल वेंटिलेशन शुरू करें।
  8. 1) वेंटिलेशन पर द्विपक्षीय और सममित छाती में वृद्धि, 2) फेफड़ों के क्षेत्रों पर द्विपक्षीय और सममित सांस की आवाज़ जिसमें एपिगैस्ट्रियम पर हवा के प्रवेश की कोई आवाज़ नहीं है, 3) एसपीओ2 और एचआर प्रतिक्रियाएं, और 4) ईटीटी के अंदर संघनन। यदि संदेह हो तो समाप्त सीओ2 को मात्रात्मक रूप से (अर्ध) भी मापा जा सकता है।
  9. ईटीटी कफ को फुलाएं। ईटीटी को टेप के साथ 12-13 सेमी (2 किलो पिगलेट के लिए) की गहराई पर सुरक्षित करें जिसे आधे में अनुदैर्ध्य रूप से विभाजित किया गया है। ईटीटी के हिस्से के चारों ओर टेप को तुरंत सामने के दांतों से दूर रखें, और स्नूट के चारों ओर जारी रखें।
  10. पिगलेट को मैन्युअल रूप से हवादार करना जारी रखें जब तक कि इसे सर्जिकल हस्तक्षेप तालिका में स्थानांतरित नहीं किया जाता है जहां यह एक यांत्रिक वेंटिलेटर से जुड़ा होता है। तालिका पर, ईटीटी को निम्नलिखित सेटिंग्स के साथ मैकेनिकल वेंटिलेटर (सामग्री की तालिका देखें) से कनेक्ट करें: पी इंस्प = 15-20 सेमी एच 2 ओ, पीप = 5.0 सेमी एच2ओ, फ्लो इंस्प =8.0 एल / मिनट, आवृत्ति = 30 बीपीएम, और टीइंस्प = 0.34 एस।
    नोट: यदि पिगलेट में एसपीओ 2 <90% है, तो पीइंस्प और आवृत्ति को तब तक बढ़ाया जा सकता है जब तक कि एसपीओ2 ≥90% न हो। पूरक ऑक्सीजन का उपयोग किया जा सकता है यदि पुनर्जीवन प्रोटोकॉल में विभिन्न एफआईओ2एस की तुलना शामिल नहीं है।
  11. एक रेक्टल थर्मामीटर रखें, और इसे पिगलेट की पूंछ के चारों ओर सर्जिकल टेप के साथ सुरक्षित करें।
  12. पिगलेट के चारों ओर घोंसले की तरह लिपटे गर्म कंबल/तौलिए के साथ पिगलेट के तापमान (38.5-39.0 डिग्री सेल्सियस) को बनाए रखें, पिगलेट के नीचे हीटिंग गद्दे के तापमान को समायोजित करके, और / या गर्म नल के पानी के साथ रबर / लेटेक्स दस्ताने भरकर और उन्हें पिगलेट के आसपास के तौलिए में रखकर। सर्जिकल हस्तक्षेप के दौरान पिगलेट के तापमान को देखें, और आवश्यकतानुसार तापमान-स्थिर करने के उपाय करें।

6. सर्जिकल हस्तक्षेप (समय: 20 मिनट)

  1. सभी आवश्यक उपकरण तैयार करें, और सभी कैथेटर को सामान्य खारा (चित्रा 1) से भरें। सीआरएफ पर सर्जिकल हस्तक्षेप शुरू होने का समय लिखें।
  2. 3-5 सर्जिकल स्पंज का उपयोग करके 5 मिलीग्राम / एमएल रंगीन क्लोरहेक्सिडाइन के साथ एनेस्थेटाइज्ड पिगलेट की त्वचा को निष्फल करें।
  3. स्केलपेल का उपयोग करके पिगलेट की गर्दन के दाईं ओर 2.5 सेमी लंबा त्वचा चीरा लगाएं।
  4. चीरे के दोनों किनारों पर त्वचा को वापस लेने के लिए पलक रिट्रैक्टर का उपयोग करें।
  5. आंतरिक जुगुलर नस को विच्छेदित और उजागर करने के लिए धमनी बल का उपयोग करें (चित्रा 2)।
  6. इसे स्थिर रखने के लिए जुगुलर नस के नीचे दो नायलॉन 3-0 सीवन धागे रखें।
  7. एक हाथ में सीवन और दूसरे में केंद्रीय शिरापरक कैथेटर पकड़ें (चित्रा 3)। केंद्रीय शिरापरक कैथेटर डालें, और सुई को वापस लें।
  8. सीवन धागे में से एक को बांधें जिसका उपयोग नस (और कैथेटर) के चारों ओर नस को पकड़ने के लिए किया गया था, उस क्षेत्र में जहां कैथेटर नस के अंदर है (चित्रा 4)।
    नोट: सुनिश्चित करें कि होल्डिंग सीवन कैथेटर के चारों ओर बहुत कसकर बंधा नहीं है और गाँठ कैथेटर के डिस्टल सिरे के समीपस्थ है।
  9. कैथेटर के सही प्लेसमेंट की पुष्टि करने के लिए सामान्य खारा के 1 मिलीलीटर के साथ फ्लश करें।
  10. अवशोषित 4-0 सीवन के साथ त्वचा को बंद करें।
  11. फेंटानिल 50 μg / kg / h और एक संतुलित कार्बोहाइड्रेट-इलेक्ट्रोलाइट समाधान (10 मिलीग्राम / एमएल ग्लूकोज, सामग्री की तालिका देखें) को केंद्रीय शिरापरक कैथेटर से कनेक्ट करें।
  12. स्केलपेल का उपयोग करके पिगलेट की गर्दन के बाईं ओर 2.5 सेमी लंबा त्वचा चीरा लगाएं। गर्दन के दाईं ओर चीरे की तुलना में चीरे को थोड़ा अधिक उपचारात्मक बनाएं।
  13. चीरे के दोनों किनारों पर त्वचा को वापस लेने के लिए पलक रिट्रैक्टर का उपयोग करें।
  14. फिर, सामान्य कैरोटिड धमनी को विच्छेदित करने और उजागर करने के लिए धमनी बल का उपयोग करें (स्टर्नोक्लीडोमास्टोइड मांसपेशी के लिए उपचारात्मक)।
  15. इसे स्थिर रखने के लिए सामान्य कैरोटिड धमनी के नीचे दो नायलॉन 3-0 सीवन धागे रखें।
  16. एक हाथ में सीवन और दूसरे में केंद्रीय धमनी कैथेटर पकड़ें। केंद्रीय धमनी कैथेटर डालें, और सुई वापस लें।
  17. सीवन धागे में से एक को बांधें जिसका उपयोग धमनी (और कैथेटर) के चारों ओर धमनी को पकड़ने के लिए किया गया था, उस क्षेत्र में जहां कैथेटर धमनी के अंदर है।
    नोट: सुनिश्चित करें कि होल्डिंग सीवन कैथेटर के चारों ओर बहुत कसकर बंधा नहीं है और गाँठ कैथेटर के डिस्टल सिरे के समीपस्थ है।
  18. कैथेटर के सही प्लेसमेंट की पुष्टि करने के लिए सामान्य खारा के 1 मिलीलीटर के साथ फ्लश करें।
  19. त्वचा पर कैथेटर पंखों को सुरक्षित करने और त्वचा को बंद करने के लिए अवशोषक 4-0 सीवन का उपयोग करें।
  20. आक्रामक धमनी बीपी निगरानी से कनेक्ट करें ( सामग्री की तालिका देखें), और डेटा अधिग्रहण और विश्लेषण सॉफ्टवेयर का उपयोग करके रिकॉर्डिंग शुरू करें।
    नोट: सुनिश्चित करें कि इनवेसिव धमनी बीपी ट्रांसड्यूसर को सही बीपी रीडिंग प्राप्त करने के लिए हृदय स्तर पर कैलिब्रेट किया गया है।
  21. एक पारदर्शी ड्रेसिंग के साथ कवर करें। अब, केंद्रीय धमनी कैथेटर जगह पर है।
  22. सर्जरी समाप्त होने के समय सीआरएफ पर लिखें।

7. स्थिरीकरण (समय: न्यूनतम 1 घंटे, लेकिन जब तक सर्जरी के बाद पिगलेट को स्थिर करने के लिए और कर्मचारियों के लिए श्वासावरोध के प्रेरण की तैयारी के लिए आवश्यक हो)

  1. पिगलेट को ईसीजी निगरानी उपकरण से कनेक्ट करें ( सामग्री की तालिका देखें)।
    1. इलेक्ट्रोड रखने से पहले बालों को आवश्यकतानुसार शेव करें और हटा दें। वक्ष के प्रत्येक तरफ दो इलेक्ट्रोड रखें- प्रत्येक ऊपरी अंग के मध्यवर्ती पक्ष पर। तीसरे इलेक्ट्रोड को उम्बिलिकस के बाईं ओर रखें।
    2. लीड को इलेक्ट्रोड से कनेक्ट करें, और डेटा अधिग्रहण और विश्लेषण सॉफ्टवेयर का उपयोग करके रिकॉर्डिंग शुरू करें।
  2. पिगलेट को एक गैर-इनवेसिव सीओ निगरानी उपकरण से कनेक्ट करें ( सामग्री की तालिका देखें)।
    1. इलेक्ट्रोड रखने से पहले आवश्यकतानुसार बालों को शेव करें और हटा दें ( सामग्री की तालिका देखें)। पहला इलेक्ट्रोड पिगलेट के सिर के ऊपर, आंखों के ठीक पीछे, दूसरा गर्दन के बाईं ओर, तीसरा पेट के बाईं ओर, मिडएक्सिलरी को उम्बिलिकस के स्तर पर और चौथा इलेक्ट्रोड बाईं जांघ पर रखें।
    2. डिवाइस पर प्रासंगिक जानकारी भरें, और रिकॉर्डिंग शुरू करें। सीमित आंतरिक स्मृति के कारण, प्रयोग की अवधि के अनुसार नमूना दर समायोजित करें।
  3. पिगलेट को एनआईआरएस निगरानी से कनेक्ट करें।
    1. इलेक्ट्रोड रखने से पहले बालों को आवश्यकतानुसार शेव करें और हटा दें। एनआईआरएस इलेक्ट्रोड (सामग्री की तालिका देखें) को पिगलेट के सिर के शीर्ष पर, गैर-इनवेसिव सीओ इलेक्ट्रोड के पीछे, और प्रकाश से बचाने के लिए गैर-पारदर्शी टेप के साथ सुरक्षित रखें।
  4. यदि लागू हो तो पिगलेट को अतिरिक्त निगरानी उपकरण से कनेक्ट करें, और यदि यह प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल का हिस्सा है तो इकोकार्डियोग्राफी करें।
  5. पिगलेट को आरामदायक स्थिति में रखें, अधिमानतः प्रवण।
  6. माप और पंजीकरण का संचालन करें, और स्थिरीकरण अवधि के दौरान सीआरएफ पर रिकॉर्ड करें (चरण 2 देखें)।
  7. स्थिरीकरण अवधि के दौरान तापमान, एसपीओ2, एचआर, बीपी और कंपकंपी के संबंध में पिगलेट का निरीक्षण करें। यांत्रिक वेंटिलेटर सेटिंग्स और पिगलेट के तापमान को समायोजित करें, और उपयुक्त रूप से अतिरिक्त संज्ञाहरण दें।

8. श्वासावरोध और कार्डियक अरेस्ट का प्रेरण (समय: 15-60 मिनट, पिगलेट के बीच भिन्न होता है)

नोट: इसमें शामिल सभी कर्मियों को श्वासावरोध के प्रेरण से पहले अपनी भूमिकाओं को जानना होगा।

  1. श्वासावरोध शुरू करने के लिए एक समय तय करें (स्थिरीकरण की अवधि और कर्मियों की उपलब्धता के आधार पर), और इसे सीआरएफ पर लिखें।
  2. सीआरएफ पर पिगलेट के शारीरिक माप को लिखें, और श्वासावरोध के प्रेरण से ठीक पहले रक्त के नमूने लें।
  3. एस्फिक्सिया की शुरुआत से ठीक पहले फेंटेनाइल IV को रोक दें।
  4. श्वासावरोध शुरू करने के लिए, यांत्रिक वेंटिलेटर पर ऑक्सीजन डायल को 100% तक चालू करें, और वेंटिलेटर पर ऑक्सीजन नली को श्वासावरोध गैस (8% ओ 2, 92% एन2) में स्विच करें।
  5. वेंटिलेटर दर को 10 मुद्रास्फीति/ मिनट तक कम करें।
  6. सुनिश्चित करें कि पिगलेट का एसपीओ2 यह सुनिश्चित करने के लिए गिर रहा है कि प्रेरण सफल है।
  7. एस्फिक्सिया के 10 मिनट के बाद, वेंटिलेटर दर को 10 मुद्रास्फीति / मिनट तक कम करें।
  8. श्वासावरोध के 10 मिनट के बाद, और उसके बाद हर 5 मिनट में, एसिड-बेस स्थिति लें, और सीआरएफ पर पिगलेट के शारीरिक माप लिखें। कार्डियक अरेस्ट तक जारी रखें।
  9. एस्फिक्सिया के 20 मिनट के बाद, वेंटिलेटर दर को 10 मुद्रास्फीति / मिनट तक कम करें।
  10. श्वासावरोध के 30 मिनट के बाद, ईटीटी को धमनी बल के साथ दबाएं।
  11. जब एमएपी 20 मिमी एचजी से नीचे गिर जाता है, तो दिल की निरंतर उत्तेजना शुरू करें।
    नोट: कार्डियक अरेस्ट को धमनी रेखा स्पंदन के नुकसान और / या धमनी रेखा स्पंदन के नुकसान द्वारा गैर-श्रव्य दिल की धड़कन के रूप में परिभाषित किया गया है। ध्यान दें कि ईसीजी पर पल्सलेस इलेक्ट्रिकल एक्टिविटी (पीईए) हो सकती है।
  12. सुनिश्चित करें कि वह व्यक्ति दिल को खुश करता है। ईटीटी क्लैंप को हटाते समय जब दिल की धड़कन सुनाई न दे (कार्डियक अरेस्ट) तो जोर से पुकारें। सुनिश्चित करें कि व्यक्ति दो वेंटिलेटर पर एस्फिक्सिया गैस की नली को वापस ऑक्सीजन आउटलेट पर स्विच करें। सीआरएफ पर कार्डियक अरेस्ट का समय रिकॉर्ड करें, और टाइमर शुरू करें।
  13. प्रोटोकॉल द्वारा सौंपे गए एफआईओ 2 को सेट करें (इस अध्ययन में, पिगलेट्स को 0.21 या 1.0 के एफआईओ2 प्राप्त करने के लिए यादृच्छिक किया गया था)। वेंटिलेटर सेटिंग्स को निम्नानुसार सेट करें: पी इंस्प = 30 सेमी एच 2 ओ, पीप = 5.0 सेमीएच2ओ, फ्लो इंस्प = 8.0 एल /मिनट, आवृत्ति = 40 बीपीएम, और टीइंस्प = 0.34 एस।
  14. कार्डियक अरेस्ट समय बिंदु से रक्त के नमूने लें, जैसा कि चरण 2.5 में वर्णित है।

9. कार्डियोपल्मोनरी पुनर्जीवन (सीपीआर) (समय: 0-15 मिनट)

नोट: सीपीआर पुनर्जीवन पर अंतर्राष्ट्रीय संपर्क समिति (आईएलसीओआर) दिशानिर्देशों28 के अनुसार आयोजित किया जा सकता है, जिसमें अध्ययन के उद्देश्य के आधार पर वेंटिलेशन अनुपात में 3: 1 छाती संपीड़न या छाती संपीड़न से वेंटिलेशन के विभिन्न अनुपात होते हैं।

  1. यदि ILCOR-अनुशंसित 3: 1 CPR का उपयोग कर रहे हैं, तो निम्न चरणों का संचालन करें।
    1. कार्डियक अरेस्ट के बाद 30 सेकंड के लिए पिगलेट को यांत्रिक रूप से हवादार करें। फिर, छाती संपीड़न शुरू करें, और वेंटिलेशन अनुपात के लिए 3: 1 छाती संपीड़न का लक्ष्य रखें।
      नोट: चूंकि वेंटिलेटर वेंटिलेशन करता है और एक व्यक्ति नहीं, छाती संपीड़न और वेंटिलेशन कभी-कभी एक साथ / असमन्वित हो सकते हैं।
    2. छाती को थोरेसिक एंटेरोपोस्टीरियर व्यास के 1/3 की गहराई तक संपीड़ित करें, पूर्ण छाती पुनरावृत्ति की अनुमति दें, और दो-अंगूठे को घेरने वाली हाथ तकनीक का उपयोग करें। सिस्टोलिक धमनी दबाव ≥ 20 मिमी एचजी उत्पन्न करने का लक्ष्य रखें।
    3. छाती के संपीड़न के 30 सेकंड के बाद एड्रेनालाईन (0.02-0.03 मिलीग्राम / किग्रा) IV का प्रबंधन करें और फिर सीपीआर के हर 3 मिनट (अधिकतम चार खुराक) दें। प्रत्येक एड्रेनालाईन प्रशासन के बाद सामान्य खारा के 1 मिलीलीटर के साथ फ्लश।
  2. धमनी बीपी ट्रेसिंग और ईसीजी को देखकर आरओएससी निर्धारित करें, और कार्डियक ऑस्कल्टेशन द्वारा पुष्टि करें। आरओएससी की परिभाषा एक स्थिर, बिना सहायता वाले एचआर ≥ 100 बीपीएम है।
  3. आरओएससी तक या अधिकतम 15 मिनट के लिए पुनर्जीवन प्रयासों को जारी रखें। यदि सीपीआर 15 मिनट के भीतर सफल नहीं होता है, तो पुनर्जीवन प्रयासों को रोकें, मृत्यु का समय बताएं, और सीआरएफ पर रिकॉर्ड करें।
  4. यदि पुनर्जीवन के प्रयास सफल होते हैं, तो सीआरएफ पर आरओएससी का समय, सेकंड में सीपीआर की अवधि और प्रशासित एड्रेनालाईन खुराक की संख्या लिखें।
  5. आरओएससी के बाद जितनी जल्दी हो सके रक्त के नमूने और सीआरएफ पंजीकरण लें, और एक और 9.5 घंटे (570 मिनट) के लिए चरण 2 में वर्णित पंजीकरण जारी रखें।

10. पोस्ट-आरओएससी अवलोकन (समय: 9.5 घंटे)

  1. प्रारंभ में 25 μg /kg/h पर फेंटानिल IV इन्फ्यूजन को पुन: स्थापित करें, और नैदानिक प्रभावों / आवश्यकताओं के अनुसार टाइटरेट करें।
    नोट: श्वासावरोध के दौरान और बाद में, चयापचय दर कम हो जाती है, इसलिए फेंटानिल IV की कम खुराक। हालांकि, कुछ पिगलेट को उच्च जलसेक दर की आवश्यकता हो सकती है, और इस प्रकार, पिगलेट के जीवन और सजगता का निरीक्षण करना महत्वपूर्ण है।
  2. 9.5 घंटे के लिए पिगलेट की सावधानीपूर्वक निगरानी करें। एसपीओ 2 ≥90% रखने के लिए आवश्यक यांत्रिक वेंटिलेटर सेटिंग्स को समायोजित करें और नॉर्मोकेनिया (5-7.5 केपीए के सीओ 2 (पीसीओ2) का तापमान-समायोजित आंशिक दबाव) बनाए रखें।
  3. पिगलेट के तापमान को 38.5-39.0 डिग्री सेल्सियस पर बनाए रखें, और संकेतके अनुसार तापमान-सुधारात्मक उपाय करें।
    नोट: पिगलेट को श्वासावरोध के दौरान और बाद में हाइपोथर्मिक हो जाता है।
  4. सीआरएफ (चरण 2) द्वारा निर्धारित पूर्व निर्धारित समय बिंदुओं पर नमूने और सीआरएफ पंजीकरण लें।
  5. आरओएससी अवलोकन के 9.5 घंटे पर, पिगलेट को इच्छामृत्यु दें (चरण 11)।
    नोट: कुछ पिगलेट पोस्ट-आरओएससी अवलोकन के पूरे 9.5 घंटे तक जीवित नहीं रह सकते हैं। यदि पिगलेट महत्वपूर्ण संकट और बिगड़ती स्थिति के लक्षण दिखाता है, तो पहले इच्छामृत्यु करें।

11. इच्छामृत्यु (समय: 10 मिनट)

  1. आवश्यक शल्य चिकित्सा उपकरण, ऊतक के नमूनों को संग्रहीत करने के लिए शीशियों, और नमूनों को स्नैप-फ्रीज करने के लिए तरल नाइट्रोजन के साथ विच्छेदन तालिका तैयार करें।
  2. चरण 2 में वर्णित अध्ययन के अंत (570 मिनट) नमूने एकत्र करें।
  3. IV पेंटोबार्बिटल 150 मिलीग्राम / किग्रा का प्रशासन करें। विच्छेदन करें, चिह्नित क्रायोजेनिक ट्यूबों में अंग के नमूने रखें, और तरल नाइट्रोजन में स्नैप-फ्रीज करें। यदि वांछित हो तो फॉर्मेलिन में एक मस्तिष्क-आधा स्टोर करें।
  4. प्रयोग (पूर्ण रक्त, प्लाज्मा, मूत्र, सीएसएफ और अंग नमूने) से नमूने -80 डिग्री सेल्सियस फ्रीजर में रखें, या योजनाबद्ध विश्लेषण द्वारा निर्धारित किसी अन्य तरीके से स्टोर करें।

Figure 1
चित्र 1: सर्जिकल उपकरणों के साथ बाँझ तालिका। गर्दन की सर्जरी शुरू होने से पहले सर्जिकल उपकरण तैयार किए जाते हैं और एक बाँझ मेज पर संग्रहीत किए जाते हैं। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 2
चित्र 2: आंतरिक जुगुलर नस। आंतरिक जुगुलर नस को विच्छेदित करने के बाद मुक्त और उजागर किया गया है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 3
चित्रा 3: केंद्रीय शिरापरक कैथेटर का सम्मिलन। केंद्रीय शिरापरक कैथेटर के सम्मिलन से ठीक पहले सीवन धागे आयोजित किए जाते हैं। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 4
चित्रा 4: केंद्रीय शिरापरक कैथेटर को सुरक्षित करने के लिए सीवन। नस के अंदर कैथेटर को सुरक्षित करने के लिए सीवन को नस (और कैथेटर) के चारों ओर बांधा जाता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Representative Results

पिगलेट्स को यंत्रीकृत और स्थिर करने के बाद, ईसीजी और बीपी माप लगातार डेटा अधिग्रहण और विश्लेषण सॉफ्टवेयर का उपयोग करके एकत्र किए जाते हैं। एस्फिक्सिया के दौरान हेमोडायनामिक परिवर्तन आसानी से सॉफ्टवेयर में देखा जा सकता है (चित्रा 5)। बीपी = 0 होने पर कार्डियक अरेस्ट तक श्वासावरोध के दौरान बीपी धीरे-धीरे गिरता है। आरओएससी प्राप्त करने के बाद, बीपी बढ़ता है, और फिर कुछ समय बाद, यह फिर से सामान्य हो जाता है। बीपी और ईसीजी डेटा का उपयोग विभिन्न प्रकार के विश्लेषणों के लिए किया जा सकता है, उदाहरण के लिए, सीपीआर के दौरान कोरोनरी छिड़काव दबाव की गणना और श्वासावरोध से पहले, दौरान और / या बाद में बीपी और ईसीजी ताल और आकृति विज्ञान में परिवर्तन।

कार्डियक स्ट्रोक वॉल्यूम और कार्डियक इंडेक्स को प्रतिबाधा कार्डियोग्राफी (एक गैर-इनवेसिव कार्डियक आउटपुट माप) के साथ लगातार निगरानी की जाती है। हृदय की चोट का अध्ययन करने के लिए, ऑक्सीडेटिव तनाव और एनारोबिक चयापचय के मायोकार्डियल मार्करोंको मापा जाता है। इसके अलावा, कार्डियक ट्रोपोनिन टी सहित कार्डियक एंजाइमों को प्लाज्मा में मापा जा सकता है (परिणाम अभी तक प्रकाशित नहीं हुए हैं)।

श्वासावरोध पिगलेट के शरीर विज्ञान को बदलता है। चित्रा 6 एक उदाहरण दिखाता है कि कैसे एचआर (चित्रा 6 ए), एमएपी (चित्रा 6 बी), पीएच (चित्रा 6 सी), पीसीओ2 (चित्रा 6 डी), आधार अतिरिक्त (चित्रा 6 ई), और लैक्टेट (चित्रा 6 एफ) पूरे प्रयोग में बदलते हैं। जैसा कि अपेक्षित था, एस्फिक्सिया के दौरान एमएपी, पीएच और बेस अतिरिक्त कम हो जाते हैं, जबकि पीसीओ2 और लैक्टेट में वृद्धि (मिश्रित श्वसन और चयापचय एसिडोसिस)। प्रयोग के अंत में, मान सामान्य हो जाते हैं।

ऐतिहासिक रूप से, प्रयोग ट्रेकोस्टोमाइज्ड पिगलेट 11,13,15,16,19 (यानी, रिसाव-मुक्त वायुमार्ग के साथ) के साथ किए गए थे। सर्जिकल तनाव को सीमित करने के लिए, 2019 से प्रयोगों में पिगलेट्स को अनकफ्ड ईटीटी के साथ एंडोट्रैकियल रूप से इंजेक्ट किया गया था। उन प्रयोगों में21, विशेष रूप से कम आरओएससी दर देखी गई थी। इस प्रकार, हाल के प्रयोगों में, हमने अनकफ्ड बनाम कफ ईटीटी का उपयोग करके आरओएससी दरों की तुलना की। अनकफ्ड ईटीटी का उपयोग करते समय, 7/19 पिगलेट ने आरओएससी हासिल किया, और कफ ईटीटी का उपयोग करते समय, 5/5 पिगलेट ने आरओएससी (पी = 0.012) (अप्रकाशित परिणाम) हासिल किए। यह खोज इस मॉडल में लीक-मुक्त वायुमार्ग के महत्व का समर्थन करती है।

Figure 5
चित्रा 5: डेटा अधिग्रहण और विश्लेषण सॉफ्टवेयर का उपयोग करके निरंतर डेटा नमूनाकरण। डेटा अधिग्रहण और विश्लेषण सॉफ्टवेयर में निरंतर डेटा नमूनाकरण कैसा दिखता है, इसका एक उदाहरण। (ए) पूरे प्रयोग के लिए बीपी। (बी) बीपी और ईसीजी के बीट-टू-बीट कॉम्प्लेक्स। प्रयोग के विभिन्न हिस्सों को पैनल (ए) में चिह्नित किया गया है: 1) श्वासावरोध की शुरुआत, 2) कार्डियक अरेस्ट और सीपीआर, 3) आरओएससी। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 6
चित्रा 6: पूरे प्रयोग में कार्डियोवैस्कुलर और चयापचय चर में परिवर्तन। प्रयोग के दौरान विभिन्न चर कैसे बदलते हैं, इसका एक प्रदर्शन। दिखाए गए छह समय बिंदु इस प्रकार हैं: हाइपोक्सिया (बेसलाइन) की शुरुआत से ठीक पहले, हाइपोक्सिया के 10 मिनट, कार्डियक अरेस्ट, आरओएससी, 120 मिनट पोस्ट आरओएससी, और अध्ययन के अंत (570 मिनट पोस्ट आरओएससी)। (ए) हृदय गति (एचआर), (बी) औसत धमनी दबाव (एमएपी), (सी) पीएच, (डी) सीओ 2 (पीसीओ2) का आंशिक दबाव, (ई) बेस अधिक, और (एफ) लैक्टेट। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Discussion

यह पिगलेट मॉडल कई महत्वपूर्ण चरणों के साथ समय लेने वाला और तकनीकी रूप से चुनौतीपूर्ण है। जीवित रहने की उचित दर सुनिश्चित करने के लिए दवाओं, सर्जिकल हस्तक्षेपों और कार्डियक अरेस्ट को प्रेरित करने की विधि में एक अच्छा संतुलन आवश्यक है। चूंकि प्रोटोकॉल अपेक्षाकृत लंबी अवधि का है और इसमें कई महत्वपूर्ण कदम शामिल हैं, प्रयोगों के संचालन के लिए पूरी तरह से तैयारी और एक समर्पित और अच्छी तरह से काम करने वाली टीम की आवश्यकता होती है, और प्रयोगों को उन सुविधाओं में आयोजित किया जाना चाहिए जिनके पास बड़े पशु अनुसंधान के साथ अनुभव है। हमारी शोध टीमों ने समानांतर में एक से तीन पिगलेट पर प्रयोग किए हैं। प्रयोगों के दौरान हर समय कम से कम दो लोगों को मौजूद रखने की सिफारिश की जाती है और कम से कम तीन लोग यदि प्रयोग ों को एक ही समय में तीन पिगलेट के साथ आयोजित किया जाना है।

प्रयोगों के विशेष रूप से महत्वपूर्ण और तकनीकी रूप से चुनौतीपूर्ण भागों में निम्नलिखित शामिल हैं: 1) यह सुनिश्चित करना कि सभी उपकरण काम कर रहे हैं और सभी डेटा नमूना उपकरण उपलब्ध हैं, काम कर रहे हैं और कैलिब्रेटेड हैं; 2) अच्छा और संतोषजनक यांत्रिक वेंटिलेशन, विशेष रूप से श्वासावरोध से पहले और सीपीआर के दौरान; 3) सर्जिकल हस्तक्षेप; 4) श्वासावरोध का प्रेरण; 5) कार्डियक अरेस्ट का पता लगाना; 6) सीपीआर; और 7) नमूनों का नमूना, विशेष रूप से कार्डियक अरेस्ट और आरओएससी जैसे समय-महत्वपूर्ण बिंदुओं पर। प्रोटोकॉल में सबसे महत्वपूर्ण कदम श्वासावरोध का प्रेरण और कार्डियक अरेस्ट का पता लगाना है। पहले प्रयोगों में, प्रसवकालीन श्वासावरोध 10,11,13,14,15,16,20 के मिश्रित श्वसन और चयापचय एसिडोसिस की बारीकी से नकल करने के लिए सीओ2 को एस्फिक्सिया गैस में जोड़ा गया था। हालांकि, बाद के प्रयोगों में 7,21,22 जहां सीओ2 गैस अनुपलब्ध थी, यांत्रिक वेंटिलेशन दर में कमी के बाद 20-30 मिनट के बाद ईटीटी के क्लैंपिंग के परिणामस्वरूप मिश्रित श्वसन और चयापचय एसिडोसिस भी देखा गया। कार्डियक अरेस्ट पर उच्च सीओ2 स्तर न केवल नैदानिक स्थिति की नकल करने के लिए महत्वपूर्ण हैं, बल्कि आरओएससी को भी प्रभावित कर सकते हैं। इसका कारण यह हो सकता है कि कार्डियक अरेस्ट एक विशिष्ट पीएच पर होता है, और पीएच लैक्टेट और सीओ2 दोनों पर निर्भर है। चूंकि लैक्टिक एसिडोसिस की तुलना में हाइपरकेनिया अधिक आसानी से उलट होता है, मुख्य रूप से श्वसन बनाम चयापचय एसिडोसिस यह निर्धारित कर सकता है कि पिगलेट श्वासावरोध से कितनी जल्दी ठीक हो जाते हैं। प्रसवकालीन श्वासावरोध या एचआईई के अन्य पिगलेट मॉडल अक्सर कार्डियक अरेस्ट से पहले पुन: ऑक्सीकरण / पुनर्जीवन शुरू करते हैं, आमतौर पर एमएपी मूल्यों या एस्फिक्सिया की अवधि के अनुसार (उदाहरण के लिए, एस्फिक्सिया 29 का 45 मिनट, एस्फिक्सिया30 का 2 एच, 20 मिमीएचजी 31 का एमएपी, 30-35 मिमीएचजी 30 का एमएपी, बेसलाइन29,32 से नीचे एमएपी70%)।). इस मॉडल का लाभ यह है कि कार्डियक अरेस्ट को प्रेरित करके, कार्डियक अरेस्ट से पहले, दौरान और ठीक बाद नवजात सीपीआर और नमूना डेटा का अध्ययन करना संभव है। विशेष रूप से, आकस्मिक खोज कि कार्डियक अरेस्ट के दौरान पिगलेट के एक बड़े अंश में पीईए 7,33 होता है, पेरिनेटोलॉजी क्षेत्र 34 से परे मॉडल की प्रयोज्यता को बढ़ा सकता है।

वर्षों से, मॉडल को शामक और सर्जिकल हस्तक्षेप के लिए पिगलेट जोखिम को कम करने और डेटा नमूनाकरण और पंजीकरण में सुधार करने के लिए परिष्कृत किया गया है। पूर्व प्रोटोकॉल 10,11,13,14,15,16,20 में सेवोफ्लुरेन के साथ संज्ञाहरण को शामिल करना शामिल था। इसे अब छोड़ दिया गया है, क्योंकि वर्तमान प्रोटोकॉल में कान की नस और आईवी दवाओं के माध्यम से आईवी पहुंच स्थापित करना शामिल है। यह संभव है क्योंकि एक प्रशिक्षित प्रदाता द्वारा परिधीय अंतःशिरा कैथेटर सम्मिलन से पहले पिगलेट को तौलिया में लपेटकर पिगलेट संकट से बचा जाता है। मिडाज़ोलम का उपयोग पहले प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल में भी किया गया था; हालांकि, शोधकर्ता (आर.एस.) का व्यक्तिपरक मूल्यांकन जिसने ऑटोप्सी के विशाल बहुमत का प्रदर्शन किया था, यह था कि ऑटोप्सी के दौरान मस्तिष्क बदतर स्थिति में था यदि मिडाज़ोलम को निरंतर जलसेक के रूप में इस्तेमाल किया गया था। इसलिए, अब हम केवल संज्ञाहरण बनाए रखने के लिए फेंटानिल IV का उपयोग करते हैं। मिडाज़ोलम का उपयोग बोलस खुराक में किया जा सकता है यदि पिगलेट संकट के लक्षण दिखाता है और फेंटेनाइल और / या पेंटोबार्बिटल कोई प्रभाव नहीं दिखाता है; हालांकि, हमें लगभग कभी भी इसे प्रशासित नहीं करना पड़ा है।

अन्य परिशोधनों के संदर्भ में, पिछले प्रयोगों में, पिगलेट्स को एक कसकर सुरक्षित एंडोट्राचेल ट्यूब के साथ ट्रेकियोस्टोमाइज्ड किया गया था, जिसे एक सबग्लोटिक चीरा के माध्यम से रखा गया था। यह प्रक्रिया एक रिसाव मुक्त वायुमार्ग प्रदान करती है लेकिन पिगलेट के लिए सर्जिकल तनाव का कारण बनती है। दूसरी ओर, पिगलेट के बड़े ऊपरी वायुमार्ग के कारण, अनकफ्ड ईटीटी का उपयोग करते समय एंडोट्रेकियल इंटुबैशन महत्वपूर्ण रिसाव से जुड़ा होता है। इसलिए, हमने कफ ईटीटी का उपयोग करना शुरू कर दिया है, जिसके परिणामस्वरूप शून्य रिसाव और काफी अधिक आरओएससी दर है, जो ट्रेकोस्टोमाइज्ड पिगलेट के साथ प्रयोगों की तुलना में है। इसके अलावा, डेटा नमूनाकरण के संबंध में कुछ समायोजन किए गए हैं। पिछले प्रयोगों में से कुछ 7,19,22,33,35,36 में बाएं आम कैरोटिड धमनी के चारों ओर रखे गए प्रवाह जांच का उपयोग शामिल था। यह प्रवाह जांच पिछले वर्षों में ओस्लो में हमारे संस्थान में आसानी से उपलब्ध नहीं है। एडमोंटन में हमारी प्रयोगशाला अभी भी एक कैरोटिड प्रवाह जांच का उपयोग करती है, और इसका उपयोग मॉडल को मूल्यवान अतिरिक्त हेमोडायनामिक डेटा प्रदान कर सकता है। पिछले कुछ प्रयोगों में कैरोटिड में से एक के माध्यम से इसे आगे बढ़ाकर बाएं वेंट्रिकल में रखे गए दबाव-मात्रा कैथेटर का उपयोग भी शामिल था। छाती के संपीड़न के प्रशासन ने दबाव-मात्रा कैथेटर पंजीकरण को उलझन में डाल दिया और, कुछ उदाहरणों में, कैथेटर विफलता और टूटने का कारण भी बना। इस प्रकार, गिरफ्तारी मॉडल में इसका उपयोग छोड़ दिया गया था। हाल ही में, प्रोटोकॉल में गैर-इनवेसिव सीओ मॉनिटर जोड़े गए हैं, और हम कार्डियक अरेस्ट और सीपीआर के दौरान ईसीजी संकेतों को अनुकूलित करने पर ध्यान केंद्रित कर रहे हैं, क्योंकि वे ईसीजी आकृति विज्ञान और पीईए पर मूल्यवान जानकारी दे सकते हैं। अंत में, पोस्ट-आरओएससी अवलोकन समय को 4 घंटे से 9.5 घंटे तक बढ़ा दिया गया है, क्योंकि हिस्टोपैथोलॉजिकल परिवर्तन, कोशिका मृत्यु और कुछ बायोमाकर्स में परिवर्तन का पता लगाने में सक्षम होने के लिए 4 घंटे बहुत छोटा है।

इस मॉडल की सबसे महत्वपूर्ण सीमाओं में से एक, और एक ट्रांसलेशनल मॉडल के रूप में सामान्य रूप से पिगलेट का उपयोग यह है कि प्रसव कक्ष सीपीआर के विपरीत, प्रसवोत्तर कार्डियो-पल्मोनरी संक्रमण पहले से ही पिगलेट्स में हो चुका है। यह असंभव है कि पिगलेट्स में खुले भ्रूण कार्डियोवैस्कुलर शंट और उच्च फुफ्फुसीय दबाव होते हैं, जैसा कि एक श्वासावरोध नवजात शिशु में होता है। हालांकि फुगेल्सेथ एट अल.37 के एक अध्ययन, जिसमें इस पिगलेट एस्फिक्सिया मॉडल (कार्डियक अरेस्ट नहीं) के पिछले संस्करण का उपयोग किया गया था, से पता चला है कि श्वासावरोध के दौरान पिगलेट में संवहनी शंट फिर से खुलने की संभावना है, वेंटिलेशन और हेमोडायनामिक समर्थन के लिए उनकी प्रतिक्रियाएं भिन्न हो सकती हैं। इसलिए, शारीरिक माप हमेशा एक संक्रमणमानव नवजात शिशु का प्रतिनिधि नहीं हो सकता है। पिगलेट और नवजात शिशुओं के बीच कुछ शारीरिक अंतर भी मौजूद हैं, जैसे कि पिगलेट में बड़े ऊपरी वायुमार्ग, जो ईटीटी रिसाव का कारण बनते हैं (जिसका अर्थ है कि कफ ईटीटी का उपयोग करना महत्वपूर्ण है) और उच्च बेसल तापमान।

इन सीमाओं के बावजूद, प्रसवकालीन श्वासावरोध के लिए एक ट्रांसलेशनल मॉडल के रूप में पिगलेट का उपयोग करने की वैश्विक अनुसंधान समुदाय में एक लंबी परंपरा है। सुअर अपने शरीर रचना विज्ञान, शरीर विज्ञान, ऊतक विज्ञान, जैव रसायन और सूजन38 के मामले में मनुष्यों के समान है, और कम जन्म वजन (1.5-2.5 किलोग्राम) के अलावा, नवजात पिगलेट का आकार मानव नवजात शिशु के समान है। आकार और शरीर रचना विज्ञान इंस्ट्रूमेंटेशन, निगरानी, इमेजिंग और मानव नवजात शिशु की तुलना में जैविक नमूनों के संग्रह को सक्षम करता है। यह मॉडल पुनर्जीवन अध्ययन के लिए भी अनुमति देता है क्योंकि छाती संपीड़न मानव नवजात शिशुओं के समान प्रदर्शन करने के लिए अपेक्षाकृत आसान हैं, और सूअरों में हृदय शरीर रचना विज्ञान और शरीर विज्ञान मनुष्यों के समान होता है, जिसमें कोरोनरी रक्तवितरण, चालन प्रणाली को रक्त की आपूर्ति, मायोकार्डियम की हिस्टोलॉजिकल उपस्थिति और इस्केमिक चोटके लिए जैव रासायनिक और चयापचय प्रतिक्रियाएं शामिल हैं।. एक और महत्वपूर्ण कारक यह है कि नवजात पिगलेट में मानव नवजात शिशु41 के साथ प्रसवकालीन मस्तिष्क का विकास तुलनीय होता है, और श्वासावरोध के परिणामस्वरूप हाइपरकेनिया और मिश्रित श्वसन और चयापचय एसिडोसिस के साथ जैव रासायनिक प्रतिक्रिया होती है, जो श्वासावरोध नवजात शिशु के समान होती है।

निष्कर्ष निकालने के लिए, प्रसवकालीन श्वासावरोध का यह मॉडल तकनीकी रूप से चुनौतीपूर्ण और समय लेने वाला है। हालांकि, यह प्रसवकालीन श्वासावरोध के दौरान शारीरिक और हेमोडायनामिक परिवर्तनों के बारे में मूल्यवान जानकारी प्रदान करता है, नवजात पुनर्जीवन अध्ययन की अनुमति देता है, और कार्डियक अरेस्ट से पहले, दौरान और बाद में शारीरिक परिवर्तनों पर मूल्यवान जानकारी प्रदान करता है, जो पेरिनेटोलॉजी के अलावा चिकित्सा में अन्य शोध क्षेत्रों के लिए भी रुचि हो सकती है।

Disclosures

लेखकों के पास खुलासा करने के लिए इस लेख से संबंधित हितों का कोई टकराव नहीं है।

Acknowledgments

हम उन सभी रिसर्च फेलो और शोधकर्ताओं को धन्यवाद देना चाहते हैं जिन्होंने हमारी सुविधाओं में प्रसवकालीन श्वासावरोध और कार्डियक अरेस्ट के इस पिगलेट मॉडल को स्थापित, विकसित और परिष्कृत करने में मदद की है। हम इंस्टीट्यूट फॉर सर्जिकल रिसर्च एंड इंस्टीट्यूट फॉर कम्पैरेटिव मेडिसिन, ओस्लो विश्वविद्यालय, नॉर्वे में पशु अनुसंधान सुविधाओं के कर्मचारियों और अल्बर्टा विश्वविद्यालय, एडमोंटन, कनाडा में अनुसंधान तकनीशियनों को वर्षों के दौरान उनके सहयोग के लिए धन्यवाद देना चाहते हैं। हम इस प्रकाशन के लिए आर्थिक समर्थन के लिए ओस्लो विश्वविद्यालय, नॉर्वे की अनुसंधान परिषद और नॉर्वेजियन एसआईडीएस और स्टिलबर्थ सोसाइटी में मेडिकल स्टूडेंट रिसर्च प्रोग्राम को धन्यवाद देते हैं।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Acid-base machine (ABL 800 Flex) Radiometer Medical ApS, Brønshøj, Denmark 989-963
AcqKnowledge 4.0 software for PC Biopac Systems Inc., Goleta, CA, USA ACK100W
Adhesive aperture drape OneMed Group Oy, Helsinki, Finland 1505-01
Adrenaline (1 mg/mL) Takeda AS, Asker, Norway Vnr 00 58 50 Dilute 1:10 in normal saline to 0.1 mg/mL
Arterial cannula 20 G 1,10 mm x 45 mm Becton Dickinson Infusion Therapy, Helsingborg, Sweden 682245
Arterial forceps Any
Asphyxia gas, 8% oxygen in nitrogen Linde Gas AS (AGA AS), Oslo, Norway 110093
Benelyte, 500 mL Fresenius Kabi, Norge AS, Halden, Norway 79011
Biopac ECG and invasive blood pressure modules, Model MP 150 Biopac Systems Inc., Goleta, CA 93117, USA ECG100C, MP150WSW
Box of cardboard for sample storage Syhehuspartner HF, Oslo, Norway 2000076
Cannula , 23G x 1 1/4"- Nr.14 Beckton Dickinson S.A., Fraga, Spain 300700
Cannula, 18G x 2" Beckton Dickinson S.A., Fraga, Spain 301900
Cannula, 21G x 1 1/2"- Nr.2 Beckton Dickinson S.A., Fraga, Spain 304432
Centrifuge (Megafuge 1.0R)  Heraeus instruments, Kendro Laboratory Products GmbH, Hanau, Germany 75003060
Chlorhexidin colored 5 mg/mL Fresenius Kabi Norge AS, Halden, Norway 00 73 24
Combi-Stopper B. Braun Melsungen AG,  Melsungen, Germany 4495101
CRF form Self-made
Desmarres eyelid retractor 13 cm x 18 mm Any
Digital Thermometer ama-digit ad 15 th Amarell, Kreuzwertheim, Germany 9243101
ECG electrodes, Skintact Leonhard Lang, Innsbruck, Austria FS-TC1 /10
Electric heating mattress Any
Extension set Codan Medizinische Geräte GmbH & Co KG, Lensahn, Germany 71.4021
Fentanyl (50 µg/mL) Hameln, Saksa, Germany 00 70 16
Fine wood chips Any
Finnpipette F1, 100-1000 µL VWR, PA, USA 613-5550
Fully equipped surgical room
Gas hose Any
Gauze swabs 5 cm x 5 cm Bastos Viegas,.a., Penafiel, Portugal
Heparin, heparinnatium 5000 IE/a.e./mL LEO Pharma AS, Ballerup, Denmark 46 43 27
HighClean Nonwoven Swabs, 10 cm x 10 cm Selefa, OneMed Group Ay, Helsinki, Finland 223003
ICON  Osypka Medical GmbH, Berlin, Germany Portable non-invasive cardiometer
ICON electrodes/ECG electrodes, Ambu WhiteSensor WSP25 Ambu A/S, Ballerup, Denmark WsP25-00-S/50
Infusomat Space medical pump B. Braun Melsungen AG,  Melsungen, Germany 8713050
Invasive blood pressure monitoring system Codan pvb Critical Care GmbH, Forstinning, Germany 74.6604
Laryngoscope SunMed Greenlinen blade No 2  KaWe Medical, Asperg, Germany
Leoni plus mechanical ventilator  Löwenstein Medical SE & Co. KG, Bad Ems, Germany
Liquid nitrogen 230 L Linde Gas AS (AGA AS), Oslo, Norway 102730
Microcentrifuge tubes, 1.5 ml Forsyningssenteret, Trondheim, Norway 72.690.001
Microcuff endotracheal tube, size 3.5 Avanos, GA, USA 35162
Needle holder Any
Neoflon, peripheral venous catheter, 24 G 0.7 mm x 19 mm Becton Dickinson Infusion Therapy AB, Helsingborg, Sweden 391350
Neonatal piglets 12-36 h of age As young as possible
NIRS electrodes, FORE-SIGHT Single Non-Adhesive Sensor Kit Small Cas Medical systems Inc., Branford Connecticut, USA 01-07-2000
NIRS machine, FORE-SIGHT Universal, Cerebral Oximeter MC-202, Benchtop regional oximeter FORE-SIGHT Cas Medical systems Inc., Branford Connecticut, USA 01-06-2020 May also use INVOS, Covidien
Normal saline, NaCl 9 mg/mL, 500 mL. Fresenius Kabi Norge AS, Halden, Norway Vare nr. 141387 Unmixed
Normal saline, NaCl 9 mg/mL, 500 mL. Fresenius Kabi Norge AS, Halden, Norway 141388 For IV blood pressure monitoring, add heparin (0.2 ml heparin 5000 IE/a.e./mL in 500 mL of 0.9% NaCl)
Nunc Cryogenic Tubes 1.8 mL VWR, PA, USA 479-6847
Original Perfusor Line, I Standard PE B. Braun Melsungen AG,  Melsungen, Germany 8723060
Oxygen saturation monitor, MasimoSET, Rad 5 Masimo, Neuchâtel, Switzerland 9196
Oxygen saturation monitor, OxiMax N-65 Covidien LP (formerly Nellcor Puritan Bennett Inc.), Boulder, CO, USA N65-PDN1
Pentobarbital (100 mg/mL) Norges Apotekerforening, Oslo, Norway Pnr 811602
Pipette tips VWR, PA, USA 732-2383
Plastic container with holes Any Has to allow for circulation of air
Printer labels B-492, hvit, 25 mm x 9 mm, 3000 labels VWR, PA, USA BRDY805911 For nunc tubes
Razor, single use disposable Any
Rubber gloves Any
Rubber hot water bottles Any
Self-inflating silicone pediatric bag 500 ml Laerdal Medical, Stavanger, Norway 86005000
Smallbore T-Port Extension Set B. Braun Melsungen AG,  Melsungen, Germany 471954
Sterile surgical gloves latex, Sempermed supreme Semperit Technische Produkte Ges.m.b.H., Vienna, Austria size 7: 822751701 Different sizes
Stethoscope  Any
Stopcocks, 3-way, Discofix B. Braun Melsungen AG,  Melsungen, Germany 16494C
Stylet size 3.5  Any
SunMed Greenlinen laryngoscope blade No 2  KaWe Medical, Asperg, Germany
Surgical blade, size 15 Swann Morton LTD, Sheffield England 205
Surgical forceps Any
Surgical scissors Any
Surgical sponges, sterile Mölnlycke Health Care, Göteborg, Sweden C0130-3025
Surgical swabs Mölnlycke Health Care, Göteborg, Sweden 159860-00
Surgical tape Micropore 2.5 cm x 9.1 m  3M Norge AS, Lillestrøm, Norway 153.5
Suture, Monsoft Monofilament Nylon 3-0 Covidien LP (formerly Nellcor Puritan Bennett Inc.), Boulder, CO, USA SN653
Suture, Polysorb Braided Absorbable Covidien LP (formerly Nellcor Puritan Bennett Inc.), Boulder, CO, USA GL884
Syringe 0.01-1 mL Omnifix F Luer Solo B. Braun Melsungen AG,  Melsungen, Germany 9161406V Used for acid base blood sampling. Flush with heparin
Syringe 10 mL Omnifix Luer Solo B. Braun Melsungen AG,  Melsungen, Germany 4616103V
Syringe 2.5 mL BD Plastipak Beckton Dickinson S.A., Madrid, Spain 300185 Used for blood sampling. Flush with heparinized NaCl
Syringe 20 mL Omnifix Luer Loc Solo B. Braun Melsungen AG,  Melsungen, Germany 4617207V
Syringe 20 mL Omnifix Luer Solo B. Braun Melsungen AG,  Melsungen, Germany 4616200V
Syringe 5 mL Omnifix Luer Solo B. Braun Melsungen AG,  Melsungen, Germany 4616057V
Syringe 50 mL Omnifix Luer Lock Solo B. Braun Melsungen AG,  Melsungen, Germany 4617509F
Syringe 50 mL Omnifix Luer Solo B. Braun Melsungen AG,  Melsungen, Germany 4616502F
Table drape sheet, asap drytop Asap Norway AS, Skien, Norway 83010705
Tape Tensoplast 2.5 cm x 4.5 m  BSN Medical, Essity Medical Solutions, Charlotte, NC, USA 66005305, 72067-00
Timer Any
Towels Any
Transparent IV-fixation Mediplast AB, Malmö, Sweden 60902106
Ultrasound gel Optimu Medical Solutions Ltd. Leeds, UK 1157
Ultrasound machine, LOGIQ e GE Healthcare, GE Medical Systems, WI, USA 5417728-100
Utility drape, sterile OneMed Group Oy, Helsinki, Finland 1415-01
Vacuette K3E K3EEDTA 2mL Greiner Bio-One GmbH, Kremsmünster, Austria 454222
Venflon Pro Safety 22 G 0.9 mm x 25 mm Becton Dickinson Infusion Therapy, Helsingborg, Sweden 393222
Ventilation mask made to fit tightly around a piglet snout Any Typically cone shaped
Weight Any

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References

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चिकित्सा अंक 191
कार्डियक अरेस्ट, पुनर्जीवन, और सहज परिसंचरण की वापसी के बाद कार्डियक चोट और हेमोडायनामिक्स का अध्ययन करने के लिए एक पिगलेट पेरिनेटल एस्फिक्सिया मॉडल
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Stenersen, E. O., Olsen, A.,… More

Stenersen, E. O., Olsen, A., Melheim, M., Solberg, R., Dannevig, I., Schmölzer, G., Cheung, P. Y., Nakstad, B., Saugstad, O. D., Rønnestad, A., Solevåg, A. L. A Piglet Perinatal Asphyxia Model to Study Cardiac Injury and Hemodynamics after Cardiac Arrest, Resuscitation, and the Return of Spontaneous Circulation. J. Vis. Exp. (191), e64788, doi:10.3791/64788 (2023).

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