Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Bioengineering

نظام اختبار انثناء ظهر الكاحل السلبي لنموذج في الجسم الحي لاعتلال الأوتار الناجم عن الإفراط في الاستخدام

Published: March 1, 2024 doi: 10.3791/65803

Summary

يقدم هذا البروتوكول نظام اختبار يستخدم للحث على إصابات التعب القابلة للقياس الكمي والخاضعة للرقابة في وتر أخيل الفئران لنموذج في الجسم الحي لاعتلال الأوتار الناجم عن الإفراط في الاستخدام. يتكون الإجراء من تثبيت كاحل الجرذ بمشغل مفصل يقوم بثني ظهر الكاحل السلبي باستخدام برنامج MATLAB مكتوب خصيصا.

Abstract

اعتلال الأوتار هو حالة وترية مزمنة تؤدي إلى الألم وفقدان الوظيفة وتنتج عن الحمل الزائد المتكرر للوتر ووقت الشفاء المحدود. يصف هذا البروتوكول نظام اختبار يطبق دوريا الأحمال الميكانيكية عبر الانثناء الظهري السلبي على وتر أخيل الفئران. يتكون الكود المكتوب خصيصا من قياسات التحميل قبل وبعد التحميل الدوري لتقييم تأثيرات بروتوكول التحميل جنبا إلى جنب مع نظام تحميل التعب الدوري القائم على التحكم في التغذية المرتدة.

استخدمنا 25 فأرا من Sprague-Dawley لهذه الدراسة ، مع 5 فئران لكل مجموعة تتلقى إما 500 أو 1,000 أو 2,000 أو 3,600 أو 7,200 دورة من أحمال التعب. تم حساب النسبة المئوية للفروق بين قياسات التحميل قبل وبعد الدورة الدورية للتباطؤ ، وإجهاد الذروة ، ووحدات التحميل والتفريغ. توضح النتائج أن النظام يمكن أن يحدث درجات متفاوتة من الضرر لوتر العرقوب بناء على عدد الأحمال المطبقة. يقدم هذا النظام نهجا مبتكرا لتطبيق درجات متفاوتة من الأحمال الدورية الكمية والفسيولوجية على وتر العرقوب للحصول على نموذج في الجسم الحي لإصابة وتر الإفراط في الاستخدام الناجم عن التعب.

Introduction

نظرا لأن الأوتار تربط العضلات بالعظام وتعاني من حركات متكررة يومية طوال حياتها ، فهي معرضة بشدة لإصابات الإفراط في الاستخدام المؤلمة والمحدودة وتؤدي إلى ضعف الوظيفة الميكانيكية ، مما يؤثر على 30-50٪ من السكان1. اعتلال الأوتار هي حالات مزمنة تعتبر إصابات الإفراط في الاستخدام بسبب حركات التعب المتكررة وعدم كفاية الشفاء لمستويات ما قبل الإصابة. يتأثر كل من الأطراف العلوية والسفلية بشكل شائع ، بما في ذلك الكفة المدورة والكوع ووتر العرقوب والوتر الرضفي2،3،4،5. اعتلال وتر العرقوب شائع في الأنشطة التي تنطوي على الجري والقفز ، وخاصة الرياضيين المشاركين في سباقات المضمار والميدان ، والجري لمسافات متوسطة وطويلة ، والتنس ، ورياضات الكرة الأخرى ، مما يؤثر على 7-9٪ من العدائين 6,7. قد تتسبب الإصابات الناتجة عن الجري والقفز أيضا في انثناء ظهر الكاحل المحدود ، وهو عامل خطر لاعتلال العرقوب واعتلال الأوتار الرضفي8،9،10. وبالتالي ، هناك حاجة إلى تقييم وتوصيف أفضل لاعتلال الأوتار ، والذي يمكن أن توفره هذه الدراسة كنموذج للفئران من الانثناء الظهري السلبي للكاحل للإفراط في إصابات وتر العرقوب.

كان العمل السابق باستخدام نماذج الصغيرة يهدف إلى دراسة تطور وعلامات اعتلال الأوتار. وتشمل هذه التمارين جهاز المشي ، والوصول المتكرر ، وتحميل الأوتار المباشر ، وحقن الكولاجيناز ، والجراحة ، والدراسات في المختبر 11،12،13،14،15،16. على الرغم من أن الأدبيات قد استفادت من تحديد علامات الضرر من استخدام نماذج اعتلال الأوتار هذه ، إلا أن القيود تشمل تحميل الوتر في حركات مشتركة غير ذات صلة من الناحية الفسيولوجية ، كما في حالة التحميل المباشر للوتر ، وليس قياس الأحمال المطبقة مباشرة ، مثل دراسات جهاز المشي ، وعدم استخدام الإفراط الفسيولوجي ، كما هو الحال بالنسبة لحقن الكولاجيناز ، من بين أمور أخرى. تحقيقا لهذه الغاية ، تهدف هذه الدراسة إلى تطوير نظام يطبق الأحمال الكمية غير الغازية على وتر العرقوب مع تطبيق دراسات اعتلال الأوتار الناجم عن الإفراط في الاستخدام لسد الفجوات في النماذج الحيوانية الصغيرة المطورة سابقا لاعتلال الأوتار. أجرينا دراسة تجريبية لإثبات أن النظام يحفز تغييرات قابلة للتكرار في الخواص الميكانيكية على مدى مجموعة من دورات التحميل. يتيح هذا النظام الحركة والتحميل المناسبين من الناحية الفسيولوجية للحث على الإفراط في الاستخدام مع تحديد وقياس القوى المطبقة على الوتر وتجربتها أثناء نظام التحميل في نفس الوقت.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

أجريت هذه الدراسة وفقا لموافقة اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام (IACUC) في مركز بيث إسرائيل ديكونيس الطبي. تم تخدير باستخدام 5٪ إيزوفلوران للتحريض و 2.5٪ للصيانة ، وتم توخي الحذر لتجنب انخفاض حرارة الجسم.

1. إعداد نظام الاختبار

  1. تحكم في دوران الكاحل السلبي بواسطة محرك متدرج لتطبيق دوران وعزم دوران متسقين. السيطرة على محرك السائر مع متحكم دقيق. استخدم المدخلات من موضع 3D ونظام التوجيه لتحديد درجات الدوران. استخدم المخرجات من مستشعر عزم الدوران لتوفير التحكم في التغذية المرتدة لزيادة زاوية الانثناء الظهري إذا لم يتم الوصول إلى الحد الأقصى للعتبة.
  2. للبدء ، قم بتوصيل المتحكم الدقيق ، ومستشعر عزم الدوران ، وتحديد المواقع الكهرومغناطيسية 3D ، ونظام التوجيه بجهاز كمبيوتر ومصدر طاقة. تحكم في النظام المصمم خصيصا باستخدام رمز MATLAB المطور داخليا (الشكل 1). قم بتنزيل ملفات التعليمات البرمجية ل MATLAB من GitHub واتبع إرشادات محددة حول تشغيل التعليمات البرمجية من إرشادات صفحة GitHub (https://github.com/Nazarian-Lab/PassiveAnkleDorsiflexionSystem).
  3. افتح MATLAB مع ملفات التعليمات البرمجية. افتح برنامج PDImfc لتوصيل نظام تحديد المواقع والتوجيه الكهرومغناطيسي 3D ببرنامج MATLAB. انقر فوق اتصال | P&O المستمر | ستارت سوك إكسبورت (). أبق التطبيق مفتوحا في الخلفية.

2. خارج الجسم الحي وبعد الوفاة

  1. القتل الرحيم لستة فئران Sprague-Dawley البالغة من العمر 13 أسبوعا عن طريق استنشاق CO2 وطريقة ثانوية للقتل الرحيم عن طريق بضع الصدر. تشريح وتر العرقوب الأيمن مع العقبي والوصلة العضلية سليمة. تجمد عند -20 درجة مئوية لإجراء الاختبارات الميكانيكية في وقت لاحق. بعد إذابة الوتر ، وتشريحه بدقة ، وإعداده للاختبار الميكانيكي ، قم بإجراء تحميل الشد إلى الفشل في الحصول على قوة الشد القصوى (UTS) للوتر (التحميل المسبق إلى 0.1 نيوتن ، التكييف المسبق لمدة 10 دورات من 0.1 - 1 نيوتن ، المنحدر إلى الفشل عند إزاحة ثابتة تبلغ 0.1 مم / ثانية). استخدم 15٪ من UTS كمدخل للنظام لإجراء التهيئة المسبقة لخطوة لاحقة، كما هو موضح في الخطوة 3.4.
  2. القتل الرحيم لمجموعة أخرى من خمسة بنفس الإجراء لقياسات الذراع والإجهاد اللحظي. قم بإجراء أشعة سينية للساق اليسرى مع الكاحل في انثناء ظهري 90 درجة بجوار المسطرة كمرجع. افتح صورة الأشعة السينية في فيجي ، باستخدام المسطرة في الصورة كمرجع ، وقم بقياس ذراع لحظة الوتر من مركز دوران مفصل الكاحل إلى الجزء الخلفي من الكاحل لاستخدامه كمدخل في كود MATLAB لتحويل قوة الإدخال للتكييف المسبق الموضح في الخطوة 2.1 إلى قيمة عزم الدوران المقابلة وكذلك التحويل بين عزم الدوران الناتج والقوة لتحليل البيانات.
  3. شل حركة الطرف الخلفي الأيسر عن طريق لصق جبيرتين لوضع الركبة في التمديد الكامل. قم بثني الكاحل برفق عن طريق الضغط على أصابع القدم للتأكد من أن دوران الكاحل يحدث بسبب الوتر المعزول بدلا من إشراك الأنسجة الرخوة المحيطة والتوتر. إذا لم يكن في حالة توتر أو إذا كانت هناك حركة في الركبة ، فأعد لصق الجبيرة.
  4. كشف الوتر عن طريق إزالة الجلد حول وتر العرقوب. ضع الغراء على حبة ألومنيوم مقاس 1/32 بوصة ، وضعها على الوتر الحر الأقرب إلى الوصلة العضلية لوتر العرقوب ، واستخدم قطعة قطن بمحلول ملحي لإزالة الغراء الزائد. ضع محلول ملحي بشكل متكرر على وتر العرقوب طوال الإجراء المتبقي لضمان رطوبة الأنسجة.
  5. قم بقياس مساحة المقطع العرضي للوتر باستخدام الفرجار الرقمي قبل تطبيق أي حمل. افترض أن الوتر عبارة عن قطع ناقص وقم بقياس العرض والسمك في ثلاث نسخ.
  6. ضع الجرذ على منصة الجسم بالكامل في وضعية الانبطاح. ثبت الكاحل على مشغل المفصل برباط بسحاب حول الكاحل وآخر حول أصابع القدم ، وقم بتثبيت تقسيم الركبة برباطين بسحاب. قم بتدوير المحور بحيث يكون الكاحل في حالة انثناء أخمصي كامل.
  7. قم بتوصيل قلم الرقمنة للموضع الكهرومغناطيسي 3D ونظام التوجيه بالكمبيوتر وقم بتشغيل مصدر الطاقة.
  8. قم بتشغيل رمز النظام (الموضح بمزيد من التفصيل في الخطوة 3) لعدد محدد من الدورات (في هذه الدراسة ، تلقت ستة فئران قتل رحيم 7200 دورة).
  9. عند 0 و 500 و 1000 و 2000 و 3600 و 7200 دورة لقياسات الإجهاد خارج الجسم الحي ، قم بإيقاف نظام التحميل الدوري مؤقتا وقياس طول الوتر من العقبي إلى حبة الألومنيوم بزيادات قدرها 5 درجات من 0 إلى 40 درجة من الانثناء الظهري (حد التشغيل بسبب القيود المادية للنظام) باستخدام قلم رقمنة ثلاثي الأبعاد في ثلاث نسخ بطريقة متناوبة.
  10. احسب إجهاد الوتر بزوايا مختلفة باستخدام الأطوال التي تم الحصول عليها من الخطوة 2.9 ، حيث يكون الطول الأولي عند 0 درجة انثناء ظهري لكل رقم دورة. قم بإجراء ملاءمة خطية للحصول على العلاقة بين زاوية الانثناء الظهري والإجهاد عند كل رقم دورة. استخدم هذه العلاقة لتحويل بيانات الزاوية الأولية إلى إجهاد لتحليل البيانات.
  11. احسب مساحة المقطع العرضي للوتر باستخدام الفرجار الرقمي عند انثناء الظهر 40 درجة بافتراض عدم الانضغاط (حجم ثابت) مع قياسات طول الوتر عند 0 درجة و 40 درجة ومنطقة المقطع العرضي المقاسة عند 0 درجة. استخدم مساحة المقطع العرضي هذه في كل عدد من الدورات لتحويل القوة إلى إجهاد لتحليل البيانات (الإجهاد = القوة / مساحة المقطع العرضي).

3. بروتوكول التحميل الميكانيكي

  1. في هذا القسم من الدراسة ، استخدمنا 25 أنثى فأر Sprague-Dawley البالغة من العمر 11 أسبوعا ، مع تخصيص 5 فئران بشكل عشوائي لتلقي 500 أو 1,000 أو 2,000 أو 3,600 أو 7,200 دورة من تحميل التعب.
    ملاحظة: يستغرق التكييف المسبق والمعايرة الأولية والقياس المسبق واللاحق حوالي 15 دقيقة للتشغيل ، ويستغرق نظام تحميل التعب الدوري ثانية واحدة لكل دورة. وبالتالي ، فإن أطول وقت يكون فيه الجرذ تحت التخدير هو حوالي 2 ساعة ، والذي تم إجراؤه بموجب البروتوكولات المعتمدة من IACUC.
  2. قم بتوصيل المتحكم الدقيق ومستشعر عزم الدوران وتحديد المواقع الكهرومغناطيسية 3D ونظام التوجيه بجهاز كمبيوتر ومصدر طاقة. تحكم في النظام المصمم خصيصا باستخدام كود MATLAB المطور داخليا (الشكل 1).
  3. قم بتشغيل الكمبيوتر وافتح MATLAB باستخدام ملفات التعليمات البرمجية. افتح برنامج PDImfc لتوصيل نظام تحديد المواقع والتوجيه الكهرومغناطيسي 3D ببرنامج MATLAB. انقر فوق اتصال | P&O المستمر | ستارت سوك إكسبورت (). أبق التطبيق مفتوحا في الخلفية.
  4. حث التخدير مع 5 ٪ إيزوفلوران من خلال الاستنشاق في غرفة التعريفي. بعد الحث ، قم بتثبيت على منصة الجسم بالكامل باستخدام عنصر تسخين مائي متصل للحفاظ على درجة الحرارة والحفاظ على التخدير بنسبة 2.5٪ إيزوفلوران عبر ملحق مخروطي للأنف. استخدم مرهما رطبا على العينين لمنع الجفاف أثناء التخدير.
  5. ضع الجرذ على منصة الجسم بالكامل في وضعية الانبطاح. ثبت الكاحل على مشغل المفصل برباط بسحاب حول الكاحل وآخر حول أصابع القدم ، وقم بتثبيت تقسيم الركبة برباطين بسحاب. قم بتدوير المحور بحيث يكون الكاحل في حالة انثناء أخمصي كامل.
    ملاحظة: تأكد من أن أربطة السحاب لا تسبب انقباضا أو آفات ، واحرص على شدها ، وإذا لزم الأمر ، ضع الشاش بين ربطة العنق والجلد للحصول على طبقة من الحماية.
  6. بالنسبة للخطوات التالية التي تتضمن تشغيل التعليمات البرمجية للنظام ، انقر فوق تشغيل على MATLAB لكل قسم من التعليمات البرمجية المقابلة لاختبار التحميل المحدد.
  7. قم بتدوير الكاحل 50 مرة إلى 15٪ من إجهاد الشد النهائي بناء على قيمة إجهاد الشد النهائي لوتر العرقوب من اختبارات السحب خارج الجسم الحي إلى اختبارات الفشل كما تم قياسها بناء على الخطوة 2.1.
  8. قم بإجراء معايرة أولية للوتر عن طريق ثنيه ظهريا ثلاث مرات إلى 12 درجة. استخدم ميل المنطقة الخطية لمنطقة التحميل لمنحنى التباطؤ لحساب المنطقة الأسية للمنحنى.
  9. قم بثني الكاحل بشكل تدريجي بزوايا متزايدة حتى يتم الحصول على المنطقة الأسية من المنحنى عن طريق حساب ميل ذروة منطقة التحميل للمنحنى (محسوبة باستخدام كود MATLAB المطور داخليا) أو حتى يتم تدويره إلى 40 درجة ، أيهما يحدث أولا.
  10. في الزاوية النهائية التي تم الحصول عليها ، قم بإجراء خمسة قياسات ميكانيكية دورية كخط أساس للتحميل المسبق.
  11. أداء نظام تحميل التعب الدوري لعدد محدد من الدورات (في هذه الدراسة ، إما ل 500 أو 1000 أو 2000 أو 3600 أو 7200 دورة).
  12. كل 50 دورة ، احسب ميل جزء التحميل من منحنى التباطؤ (محسوبا من خلال كود MATLAB المطور داخليا) للتأكد من أنه لا يزال في المنطقة الأسية. قم بزيادة زاوية الانثناء الظهري بمقدار 1 درجة ما لم تكن بالفعل عند 40 درجة حتى يتم تحقيق هذه المنطقة الأسية.
  13. بعد اكتمال نظام التحميل الدوري ، قم بإجراء خمسة قياسات ميكانيكية دورية كقياسات ما بعد التحميل بالزاوية المختارة في البداية لقياس الخواص الميكانيكية للوتر.
  14. قم بإزالة الأربطة المضغوطة والجبيرة. أعد إلى غرفة الإنعاش. لا يترك دون مراقبة حتى يستعيد وعيه الكافي ، ثم يعاد إلى قفصه. يجب مراقبة يوميا بحثا عن أي علامات سريرية ضارة، وفي حال وجودها، يجب تطبيق البوبرينورفين بجرعة 1.2 ملغ/كغ تحت الجلد مرة كل 72 ساعة أو إجراء القتل الرحيم المبكر. القتل الرحيم للحيوانات بعد 7 أيام من نشاط القفص عن طريق استنشاق CO2 ووسيلة ثانوية للقتل الرحيم عن طريق بضع الصدر.
    ملاحظة: تم الحصول على تطبيق التحميل الدوري والقياسات الميكانيكية من خلال رقصة مصنوعة خصيصا تتكون من مستشعر عزم الدوران ، ومشغل مفصل الكاحل المطبوع 3D وسرير الحيوان ، ونظام التوجيه والوضع الكهرومغناطيسي ثلاثي الأبعاد ، ومحرك متدرج يدور عمودا لتحقيق الانثناء الظهري ، كما ذكرت سابقا مجموعتنا17. يتم التحكم في هذا النظام بواسطة برنامج نصي MATLAB مذكور في الخطوة 1.2. يلتقط مستشعر عزم الدوران ونظام الموضع والتوجيه بيانات عزم الدوران والموضع عبر بروتوكول تحميل النظام.

4. تحليل البيانات

  1. قم بتحميل بيانات القياس المسبق واللاحق بشكل منفصل في MATLAB.
  2. حول عزم الدوران إلى إجهاد بناء على ذراع العزم المقاس من الخطوة 2.2 ومنطقة المقطع العرضي المقاسة بالعدد المحدد من الأحمال المطبقة التي تم الحصول عليها من الخطوة 2.11 باستخدام المعادلتين (1) و (2):
    Equation 1(1)
    Equation 2(2)
  3. قم بتحويل الزاوية إلى إجهاد بناء على التحويل الذي تم الحصول عليه من الخطوة 2.10.
  4. احسب متوسط التباطؤ (المنطقة الواقعة بين منحنيات التحميل والتفريغ) ، وإجهاد الذروة (قيمة الإجهاد القصوى للدورة) ووحدات التحميل والتفريغ (الملاءمة الخطية لآخر 50٪ من التحميل وأول 60٪ من منحنيات التفريغ) لدورات القياس قبل وبعد القياس.
  5. احسب النسبة المئوية للتغير في الخواص الميكانيكية من الخطوة 4.4 بين دورات القياس القبلية والبعدية.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

مع زيادة عدد الدورات المطبقة ، كان هناك انخفاض أكبر في الخواص الميكانيكية للوتر في الجسم الحي . كان هناك انخفاض أقل بكثير في التباطؤ ووحدات التحميل والتفريغ لمجموعة 500 دورة مقارنة بمجموعات الدورة 3600 و 7200 (p < 0.05) (الشكل 2). في حين كان هناك انخفاض كبير في ذروة الإجهاد لكل دورة من دورة 500 إلى مجموعة دورة 3,600 ، لم يكن هناك انخفاض كبير بين مجموعات الدورة 500 و 7,200. كان هناك انخفاض ثابت في النسبة المئوية في التباطؤ ، وإجهاد الذروة ، ووحدات التحميل والتفريغ لمجموعات الدورة 3,600 و 7,200. تحققت صور الهيماتوكسيلين وإيزين وماسون الملطخة بثلاثية الألوان لعينات الأوتار من مستويات أعلى من الضرر الهيكلي المجهري مع دورات أعلى من الانثناء الظهري مع خلايا أكثر استدارة ، وفرط الخلية ، واضطراب الألياف ، وعقص الألياف (الشكل 3). تظهر النتائج في هذه الورقة أن الدورات العالية من الانثناء الظهري تسبب مستويات متزايدة من الضرر في وتر العرقوب.

Figure 1
الشكل 1: نظام اختبار الانثناء الظهري السلبي للكاحل. (أ) مزود الطاقة ، (ب) متحكم دقيق ، (ج) محرك متدرج ، (د) مستشعر عزم الدوران ، (ه) مستشعر تحديد المواقع الكهرومغناطيسي ثلاثي الأبعاد والتوجيه ، (F) حامل الكاحل المطبوع ثلاثي الأبعاد ، (G) سرير مطبوع ثلاثي الأبعاد ، (H) حامل مخروط الأنف المطبوع ثلاثي الأبعاد. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Figure 2
الشكل 2: منحنيات إجهاد التحميل الدوري التمثيلي. منحنيات التباطؤ عند 0 و 500 و 1000 و 2000 و 3600 و 7200 دورة. يشير السهم إلى انخفاض إجهاد الذروة مع زيادة عدد الدورات. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Figure 3
الشكل 3: صور تمثيلية ملطخة نسيجيا لعينات الأوتار. أظهرت صور الهيماتوكسيلين و Eosin (يسار) و Trichrome لماسون (يمين) للأوتار ل 500 و 1000 و 2000 و 3600 و 7200 مجموعة دورة لهذه الدراسة أن زيادة عدد الدورات المطبقة تؤدي إلى خلايا أكثر تقريبا ، وفرط الخلية (النجوم) ، واضطراب الألياف ، وعقص الألياف (الأسهم). يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

تقدم هذه الدراسة طريقة لتحميل وتر أخيل الفئران دوريا بنظام انثناء ظهر الكاحل السلبي لنموذج اعتلال الأوتار الناجم عن الإفراط في الاستخدام في الجسم الحي . تكمن أهمية النظام في قدرته على عزل وتر العرقوب ، وتطبيق أحمال قابلة للقياس الكمي دون الوصول جراحيا إلى الوتر ، وقياس خصائص الوتر في الجسم الحي .

في عام 2010 ، قدم Fung et al. نموذجا لإجهاد وتر الرضفة للفئران مع نظام اختبار مصمم خصيصا14. قدمت دراستهم طريقة لتحميل الوتر الرضفي مباشرة عن طريق تعريض الوتر. في حين أن هذه الطريقة طبقت أيضا أحمال التعب القابلة للقياس الكمي على الوتر ، فإن التطبيق المباشر للأحمال قد يؤدي إلى استجابة إضافية لالتئام الجروح الالتهابية لشق الجلد والإغلاق اللاحق. من خلال طريقتنا ، تضمن الأحمال المطبقة غير الغازية أن أي استجابة بيولوجية مقاسة ترجع بالكامل إلى بروتوكول التحميل بدلا من أي عوامل خارجية.

أحد المكونات المهمة لبروتوكول التحميل هذا هو حلقة التحكم في التغذية الراجعة. من خلال التحقق من منحدر منحنى تحميل التباطؤ وزيادة زاوية الانثناء الظهري ، إذا لزم الأمر ، يقوم النظام باستمرار بإرهاق وتر العرقوب. يعد تجبير الركبة خطوة حاسمة لأنه يضمن أن الانثناء الظهري يجهد الوتر فقط بدلا من تحريك الركبة والأنسجة الرخوة الأخرى المحيطة. للتحقق مما إذا كان التجبير قد تم بشكل صحيح ، قم بتحريك الكاحل يدويا بعد التجبير لتحسس الوتر المتصلب ومراقبة منحنيات التباطؤ الناتجة قبل خطوة التحميل الدورية.

أحد قيود هذه الدراسة هو أن قيم الإجهاد كبيرة نسبيا. ومع ذلك ، فهي قابلة للمقارنة مع الانثناء الظهري السلبي لأوتار العرقوب البشرية ويمكن أن يكون سببها استطالة وتر العرقوبوعضلة الساق 18. هناك قيد آخر يتمثل في أن التحويلات بين عزم الدوران والإجهاد تقتصر على متوسط مساحة المقطع العرضي للوتر خارج الجسم الحي والذراع اللحظي حول مفصل الكاحل ، والتي قد تختلف بين.

لم يتم بعد توضيح علم الأمراض والمراحل المبكرة من اعتلال الأوتار المزمن. جنبا إلى جنب مع العمر وعوامل الخطر الأخرى ، يعد الإفراط في الاستخدام عاملا رئيسيا يساهم في تطور اعتلال الأوتار المزمن. يمكن محاكاة إصابات الإفراط في الاستخدام القابلة للتكرار من خلال تطبيقات متعددة لنوبات التحميل الدورية للإجهاد من خلال نظامنا. علاوة على ذلك ، فإن عدم التدخل الجراحي لهذا النظام يسمح بتقييم التغيرات البيولوجية والهيكلية في تلف الأوتار واستجابات الشفاء على مدى فترات طويلة لفهم المؤشرات الحيوية الحرجة في اعتلال الأوتار.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإعلان عنه.

Acknowledgments

نود أن نعترف بدعمنا التمويلي: صندوق أبحاث جو فالون ، وصندوق أبحاث الدكتور لويس ميكس BIDMC للطب الرياضي ، ومنحة داخلية (AN) ، وكلها من BIDMC Orthopaedics ، إلى جانب دعم من المعاهد الوطنية للصحة (2T32AR055885 (PMW)).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
1/32'' Aluminum beads
2.5% isoflurane
3D digitizing pen Polhemus, Vermont, NH, USA
3D electromagnetic positioning and orientation sensor Polhemus, Vermont, NH, USA
5% isoflurane
Customized device: 1) Assembly, sensors, 3D printed animal bed and ankle mount actuator Assembled as described in manuscript
MATLAB code MATLAB, Natick, MA, USA
Microcontroller Ivrea, Italy Arduino UNO, Rev3 
Nose cone
Scalpel and scalpel holder No. 11 scalpel
Sprague-Dawley rats Charles River Laboratories, Wilmington, MA, USA 11-13 weeks old
Stepper driver SparkFun Electronics, Niwot, CO 80503 DM542T
Stepper motor SparkFun Electronics, Niwot, CO 80503 23HE30-2804S
Straight forceps
Torque sensor assembly Futek Inc., Irvine, CA, USA  FSH03985, FSH04473, FSH03927
Water heating pad

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Kaux, J. F., Forthomme, B., Goff, C. L., Crielaard, J. M., Croisier, J. L. Current opinions on tendinopathy. J Sports Sci Med. 10 (2), 238-253 (2011).
  2. Maffulli, N., Longo, U. G., Kadakia, A., Spiezia, F. Achilles tendinopathy. Foot Ankle Surg. 26 (3), 240-249 (2020).
  3. Teunis, T., Lubberts, B., Reilly, B. T., Ring, D. A systematic review and pooled analysis of the prevalence of rotator cuff disease with increasing age. J Shoulder Elbow Surg. 23 (12), 1913-1921 (2014).
  4. von Rickenbach, K. J., Borgstrom, H., Tenforde, A., Borg-Stein, J., McInnis, K. C. Achilles tendinopathy: evaluation, rehabilitation, and prevention. Curr Sports Med Rep. 20 (6), 327-334 (2021).
  5. Aicale, R., Oliviero, A., Maffulli, N. Management of Achilles and patellar tendinopathy: what we know, what we can do. J Foot Ankle Res. 13 (1), 59 (2020).
  6. Jarvinen, T. A., et al. Achilles tendon injuries. Curr Opin Rheumatol. 13 (2), 150-155 (2001).
  7. Silbernagel, K. G., Hanlon, S., Sprague, A. Current clinical concepts: conservative management of Achilles tendinopathy. J Athl Train. 55 (5), 438-447 (2020).
  8. Tayfur, A., et al. Are landing patterns in jumping athletes associated with patellar tendinopathy? A systematic review with evidence gap map and meta-analysis. Sports Med. 52 (1), 123-137 (2022).
  9. Malliaras, P., Cook, J. L., Kent, P. Reduced ankle dorsiflexion range may increase the risk of patellar tendon injury among volleyball players. J Sci Med Sport. 9 (4), 304-309 (2006).
  10. Backman, L. J., Danielson, P. Low range of ankle dorsiflexion predisposes for patellar tendinopathy in junior elite basketball players: a 1-year prospective study. Am J Sports Med. 39 (12), 2626-2633 (2011).
  11. Glazebrook, M. A., Wright, J. R. Jr, Langman, M., Stanish, W. D., Lee, J. M. Histological analysis of achilles tendons in an overuse rat model. J Orthop Res. 26 (6), 840-846 (2008).
  12. Carpenter, J. E., Flanagan, C. L., Thomopoulos, S., Yian, E. H., Soslowsky, L. J. The effects of overuse combined with intrinsic or extrinsic alterations in an animal model of rotator cuff tendinosis. Am J Sports Med. 26 (6), 801-807 (1998).
  13. Gao, H. G., et al. Increased serum and musculotendinous fibrogenic proteins following persistent low-grade inflammation in a rat model of long-term upper extremity overuse. PLoS One. 8 (8), e71875 (2013).
  14. Fung, D., et al. Early response to tendon fatigue damage accumulation in a novel in vivo model. J Biomech. 43 (2), 274-279 (2010).
  15. Ueda, Y., et al. Molecular changes to tendons after collagenase-induced acute tendon injury in a senescence-accelerated mouse model. BMC Musculoskelet Disord. 20 (1), 120 (2019).
  16. Bloom, E., et al. Overload in a rat in vivo model of synergist ablation induces tendon multi-scale structural and functional degeneration. J Biomech Eng. 145 (8), 081003 (2023).
  17. Williamson, P. M., et al. A passive ankle dorsiflexion testing system to assess mechanobiological and structural response to cyclic loading in rat Achilles tendon. J Biomech. 156, 111664 (2023).
  18. Oliveira, L. F., Peixinho, C. C., Silva, G. A., Menegaldo, L. L. In vivo passive mechanical properties estimation of Achilles tendon using ultrasound. J Biomech. 49 (4), 507-513 (2016).

Tags

هذا الشهر في JoVE ، العدد 205 ،
نظام اختبار انثناء ظهر الكاحل السلبي لنموذج <em>في الجسم الحي</em> لاعتلال الأوتار الناجم عن الإفراط في الاستخدام
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Chainani, P. H., Williamson, P. M.,More

Chainani, P. H., Williamson, P. M., Yeritsyan, D., Momenzadeh, K., Kheir, N., DeAngelis, J. P., Ramappa, A. J., Nazarian, A. A Passive Ankle Dorsiflexion Testing System for an In Vivo Model of Overuse-induced Tendinopathy. J. Vis. Exp. (205), e65803, doi:10.3791/65803 (2024).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter