decellularization التروية هو تقنية جديدة لإنتاج السقالات الكبد كله أن يحتفظ تكوين الجهاز في المصفوفة خارج الخلية والمعمارية المصغرة. هنا ، وصفت طريقة إعداد السقالات الجهاز بأكمله باستخدام decellularization نضح وإعادة تعمير لاحقة مع خلايا الكبد. يمكن أن تتولد ترقيع الكبد الوظيفية وزرع باستخدام هذه التقنية.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
وDecellularization Recellularization الأكباد من الجامعة
في هذه المقالة
إشعار تصحيح
Important: There has been an erratum issued for this article. View Erratum Notice
ملخص
الملخص
الكبد هو جهاز معقد الذي يتطلب نضح المستمر لتسليم المواد الغذائية والأوكسجين وإزالة النفايات من أجل البقاء على قيد الحياة 1. جهود لإعادة أو تقليد المجهرية الكبد مع أسس النهج حتى باستخدام هندسة الأنسجة وتقنيات التصنيع الدقيق لم تكن ناجحة حتى الآن لهذا التحدي بتصميم. بالإضافة إلى ذلك ، كانت محدودة الحيوية الاصطناعية المستخدمة لإنشاء السقالات لتطبيقات هندسة الأنسجة في الكبد إحداث تجديد وإصلاح الأنسجة في جزء كبير منه بسبب عدم وجود الحافز خلية محددة وملزمة من شأنها أن تحفز الخلايا السليمة وظائف 2. وقد وجدت الأم الأنسجة Decellularized الأوعية الدموية مثل 3 و 4 على الجلد من ناحية أخرى العديد من التطبيقات في هندسة الأنسجة ، وقدمت حلا عمليا لبعض التحديات. ميزة المصفوفة decellularized الأصلي هو أنه يحتفظ ، إلى حد ما ، وتكوين الأصلي ، والمجهرية ، وبالتالي تعزيز ارتباط الخلية واعادة التنظيم 5.
في هذا العمل الذي نقوم وصف الطرق لأداء نضح - decellularization في الكبد ، مثل أن حصلت على حالها bioscaffold الكبد الذي يحتفظ بنية الأوعية الدموية الرئيسية. علاوة على ذلك ، نحن تصف هذه الأساليب لrecellularize bioscaffolds مع خلايا الكبد الأولية الكبار ، وخلق طعم الكبد وظيفية في المختبر ، والوصول إلى السفينة اللازمة لزرعها في الجسم الحي.
البروتوكول
1. الكبد Decellularization
- حصاد كبد الفئران مع إقناء ؛ إدخال القنية الوريد البابي باستخدام القسطرة وعيار 18. مغادرة السفلي والوريد الأجوف العلوي مفتوحا. الحفاظ على جهاز رطب في الفوسفات مخزنة المالحة (PBS) في طبق بتري 10 سم.
- اقامة نظام الارواء التي تتكون من خزان 8 ليتر ، ومضخة تمعجية فخ الفقاعة.
- ملء نظام الارواء مع الفوسفات مخزنة المالحة وابقائه قيد التشغيل لمدة 10 دقيقة. شغل برنامج تلفزيوني في طبق بتري 10 سم ، وخفض معدل تدفق الفوسفات مخزنة ....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
الأسلوب decellularization نضح الموصوفة هنا تنتج كل سقالة الكبد يحتوي على نفس الهيكل الإجمالي والمعمارية المصغرة الأوعية الدموية للكبد الأم. السقالة لديه تكوين المصفوفة خارج الخلية مماثل للكبد الأم. الأسلوب recellularization يحقق إعادة تعمير السقالة مع الخلايا في الكفاءة العالية وخلايا وظيفية قابلة للحياة والبقاء خلال الفترة الثقافة في المختبر التي تم اختبارها. مع إضافة nonparenchymal خلايا الكبد في الكسب غير المشروع recellularized ، ونحن نتصور أنه يمكن استخدام والكسب غير .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الإعلان عن أي تضارب في المصالح.
شكر وتقدير
فإن الكتاب أود أن أشكر جاك Milwid للتصميم في غرفة نضح المختبر. وأيد هذا العمل من المنح المقدمة من المعاهد الوطنية للصحة الأميركية ، وR01DK59766 R01DK084053 لR00DK080942 ، MY إلى KU الأميركية ، وجبهة الخلاص الوطني CBET - 0853569 لجامعة الكويت ومستشفيات للأطفال لShriners بيو (منحة رقم 8503). ونحن نقر أيضا الدعم والمستشفيات Shriners للأطفال.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| صوديوم دوديسيل سلفات | Sigma-Aldrich | L4390 | |
| Triton X-100 | Sigma-Aldrich | T8787 | |
| محرك رقمي Masterflex L/S | Cole-Parmer | EW-07523-80 | |
| رأس مضخة قياسي Masterflex L/S | Cole-Parmer | EW- 07013-81 | |
| مصيدة فقاعات | Radnoti Glass Technology Inc. | 130149 |
المراجع
- Kulig, K. M., Vacanti, J. P. Hepatic tissue engineering. Transpl Immunol. 12, 303-310 (2004).
- Lutolf, M. P., Hubbell, J. A. Synthetic biomaterials as instructive extracellular microenvironments for morphogenesis in tissue engineering. Nature biotechnology. <....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
تصحيح
Formal Correction: Erratum: Decellularization and Recellularization of Whole Livers
Posted by JoVE Editors on 3/14/2011. Citeable Link.
A correction was made to Decellularization and Recellularization of Whole Livers. There was an error with an author's name. The author's last name had a typo and was corrected to:
Nima Saeidi
instead of:
Nima Saedi.
