يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

في الجسم الحي التصوير من الألياف البصرية النزاهة العصب عن طريق التصوير بالرنين المغناطيسي تعزيز التباين في الفئران

12.9K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/51274

⸱

يوليو 22, 2014

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Hans Berger Department of Neurology, Jena University Hospital, 2Immunology, Leibniz Institute for Age Research, Fritz Lipmann Institute, Jena, 3Institute of Diagnostic and Interventional Radiology, Medical Physics Group, Jena University Hospital

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

يوضح هذا الفيديو طريقة، وذلك باستخدام الماسح الضوئي السريرية 3 T، مقابل تعزيز النقيض MR التصوير من الفأرة البصرية والسذاجة الإسقاط لفي الدراسات المجراة المتكررة والطولي للانحطاط العصبية البصرية المرتبطة الحادة إصابة العصب البصري سحق والمزمنة الضمور في العصب البصري الفئران خروج المغلوب (P50 KO).

الملخص

النظام البصري القوارض يشمل خلايا الشبكية العقدة والمحاور العصبية الخاصة التي تشكل العصب البصري لدخول مراكز مهادي والدماغ المتوسط، والتوقعات بعد المشبكي إلى القشرة البصرية. بناء على بنيتها التشريحية متميزة ومريحة للمعاقين، فقد أصبح الهيكل المفضل للدراسات على بقاء الخلايا العصبية، وتجديد محور عصبي، واللدونة متشابك. وقد مكنت التطورات الأخيرة في MR التصوير والتصور في الجسم الحي من الجزء retino سقفي هذا الإسقاط باستخدام المنغنيز بوساطة تعزيز النقيض (ميمري). هنا، نقدم بروتوكول اورده من أجل التوضيح من الإسقاط البصرية في الفئران، الذي لا يمكن أن يتحقق قرارات (200 ميكرون) 3 3 المشتركة باستخدام الماسحات الضوئية تسلا. ونحن لشرح كيفية حقن intravitreal من جرعة واحدة من 15 نانومول MnCl 2 يؤدي إلى تعزيز المشبعة من الإسقاط سليمة في غضون 24 ساعة. مع استثناء من شبكية العين، وindepen التغيرات في كثافة إشارةدنت من التحفيز البصري وتزامن أو الشيخوخة الفسيولوجية. نحن مزيد من تطبيق هذه التقنية لرصد طوليا تنكس محور عصبي ردا على الحادة إصابة العصب البصري، وهو النموذج الذي المنغنيز 2 + النقل الاعتقالات تماما في موقع الآفة. على العكس، ونشط المنغنيز 2 + النقل يتناسب كميا لبقاء، العدد، والنشاط الكهربائي من الألياف محور عصبي. لمثل هذا التحليل، ونحن مثالا المنغنيز 2 + حركية النقل على طول المسار البصري في نموذج الفأر وراثيا (NF-P50 كيلوبايت KO) عرض ضمور عفوية من الحسية، بما في ذلك المرئية والتوقعات. في هذه الفئران، اورده يشير إلى انخفاض ولكن لا تتأخر المنغنيز 2 + النقل بالمقارنة مع الفئران نوع البرية، وبذلك تكشف علامات ضعف الهيكلية و / أو وظيفية عن طريق الطفرات NF كيلوبايت.

باختصار، اورده الجسور مريح في الجسم الحي المقايسات والأنسجة بعد الوفاة لcharacterizatiعلى النزاهة الألياف العصبية والنشاط. ومن المفيد للغاية لدراسات طولية على تنكس محور عصبي والتجديد، والتحقيقات في فئرانا معدلة وراثيا لالظواهر حقيقية أو محرض.

المقدمة

على أساس هيكلها العصبية التشريحية مواتية النظام البصري القوارض يقدم إمكانيات فريدة من نوعها لتقييم المركبات الدوائية وقدرتها على التوسط العصبية 1 أو الآثار المؤيدة لل2،3 التجدد. وعلاوة على ذلك، فإنه يسمح دراسات عن الخصائص الوظيفية والعصبية التشريحية للالمسوخ الماوس، كما يتضح في الآونة الأخيرة لالفئران التي تفتقر إلى البروتين السقالات قبل المشبكي الباسون 4. علاوة على ذلك، مجموعة واسعة من الأدوات التكميلية يتيح إضافية يضم من الشبكية العقدة الخلية (RGC) وأرقام محوار RGC وكذلك النشاط RGC، على سبيل المثال، من خلال تخطيط كهربية الشبكية والاختبارات السلوكية، وتحديد إعادة ترتيب القشرية عن طريق التصوير الضوئي الإشارات الجوهرية. أحدث التطورات التقنية في الفحص المجهري ليزر تمكين التصور الموضع من RGC التجديد في الأنسجة العميقة عن طريق التصوير مضان في عينات جبل بأكمله من العصب البصري (ON) والدماغ. في هذا histologنهج كال، رباعي هيدرو الفوران أساس المقاصة الأنسجة في تركيبة مع ضوء مضان المجهري ورقة يسمح القرار من الألياف واحد أن إعادة إدخال في ON deafferented والجهاز البصري 5. بينما مثل هذه التقنيات قد تكون متفوقة في القرار وتحديد أنماط النمو، فإنها لا تمكن التحليلات المتكررة وطولية من الأحداث نمو الفرد، والتي يتم المطلوب وخاصة لتقييم عملية التجديد على المدى الطويل.

واستخدمت تعزيز التباين التصوير بالرنين المغناطيسي لتصور الغازية الحد الأدنى من إسقاط retino سقفي في الفئران والجرذان 6،7. ويمكن تحقيق هذا عن طريق التسليم المباشر العين أيونات ممغطس (على سبيل المثال، المنغنيز 2 +) إلى خلايا الشبكية. كما التناظرية الكالسيوم، وهو مدرج المنغنيز 2 + في RGC somata عبر قنوات الكالسيوم الجهد بوابات ونقلها بنشاط على طول محور عصبي الهيكل الخلوي للON سليمة والجهاز البصري. في حين أنه يتراكم في الدماغ نوىمن الإسقاط المرئي، أي في النواة الركبية الجانبية (LGN) وأكيمة متفوقة (SC)، ونشر عبر التشابك في القشرة البصرية الأولية تظهر ضئيلة 8،9، على الرغم من أنه قد تحدث 10،11. تحت MR التسلسل، ممغطس المنغنيز 2 + تقوي MR النقيض أساسا بتقصير T-1 تدور شعرية وقت الاسترخاء 12. مثل المنغنيز 2 + تعزيز التصوير بالرنين المغناطيسي (ميمري) قد تم تطبيقها بنجاح في مختلف الدراسات العصبية التشريحية والوظيفية من الفئران، بما في ذلك تقييم تجدد المحاور والضمور بعد الإصابة ON 13،14، ورسم الخرائط التشريحية الدقيقة لإسقاط 15 retino سقفي ، فضلا عن تحديد خصائص النقل محور عصبي بعد العلاج الدوائي 16. قمنا بمد التحسينات الأخيرة في الجرعة والسمية، وحركية العصبية المنغنيز 2 + امتصاص والنقل، فضلا عن تحسين بروتوكولات التصوير بالرنين المغناطيسي تطبيقه على الدراسات المتعلقة المعدلة وراثيا9 الفئران باستخدام الماسحات الضوئية 3 تسلا التي يشيع استخدامها في الممارسة السريرية 17.

هنا، نقدم بروتوكول اورده مناسبة للطولية في الجسم الحي التصوير من إسقاط retino سقفي الماوس وتجسد تطبيقه من خلال تقييم المنغنيز 2 + تعتمد تعزيز إشارة في ظل ظروف تنكس عصبي السذاجة ومختلف. يضع بروتوكول لدينا التركيز بوجه خاص على الحصول على البيانات MR في 3 T المجال المغناطيسي المعتدلة التي هي عموما أكثر سهولة من الماسحات الضوئية الحيوان مخصص. في الفئران السذاجة، نحن لتوضيح كيف يمكن أن يكون المسالك محددة كثافة إشارة كبيرة وبتكاثر تصبح زادت بعد intravitreal (ivit) المنغنيز 2 + التطبيق. كميا، المنغنيز 2 + الانتشار على طول الإسقاط المرئي يحدث بشكل مستقل عن عملية الشيخوخة الطبيعية (قياس بين الفئران 3 و 26 شهرا من العمر) وزيادة غير الحرارية إلى التحفيز البصري والتكيف مع الظلام. في المقابل، المنغنيز 2 + تخصيب في مراكز مهادي والدماغ المتوسط ​​التالية الحاد على سحق اصابة 18 وكذلك في nfkb1 الفئران خروج المغلوب (P50 KO) يعاني من عفوية الموت RGC أفكارك وON الضمور 19. وهكذا، في التوسع إلى التحليل النسيجي التقليدية، وتحليل اورده طولية من الحيوانات الفردية تمكن من التنميط حركية فريدة من عمليات الاعصاب. وهذا ينبغي أن تكون مفيدة لدراسات عن العصبية وتجدد المحاور المرتبطة التدخلات الدوائية أو وراثية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

يتم تنفيذ جميع التدخلات الحيوانية وفقا للاتفاقية الأوروبية لرعاية الحيوان واستخدام الحيوانات المختبرية وبيان ARVO لاستخدام الحيوانات في العيون والبحوث الرؤية. تمت الموافقة على جميع التجارب من قبل لجنة الأخلاق المحلية. يوصف الإجراء الإصابة على الفئران في مكان آخر 9.

1. Intravitreal المنغنيز حقن

  1. أداء ساعة المنغنيز 2 + حقن 24 قبل MR مسح بمساعدة مساعد. تخدير الحيوانات عن طريق الحقن داخل الصفاق من 5٪ محلول الكلورال هيدرات (420-450 ملغ / كغ من وزن الجسم في برنامج تلفزيوني العقيمة). للتخدير الموضعي إضافية، وتطبيق قطرة واحدة من conjuncain السائل (0.4٪ oxybuprocaine هيدروكلوريد) إلى القرنية قبل ثقب العين. لحقن 15 نانومول المنغنيز 2 + في العين يعد 7.5 ملي MnCl 2 الحل، على سبيل المثال، عن طريق تمييع 1 لتر من 1 M MnCl حل 2 الأسهم في 132 LH 2 </ الفرعية> O. تحميل 5 ميكرولتر من الحل النهائي في حقنة 5 ميكرولتر هاميلتون متصلة G 34 مركزا الصغيرة القابلة للإزالة إبرة (إبرة RN).
  2. عندما بدءا من العين اليمنى، ضع الماوس جانب اليسار تحت المجهر مجهر ومفتوحة بلطف وإصلاح العين اليمنى بين الإبهام والسبابة من يدك اليسرى. التقط حقنة بيدك اليمنى واتخاذ اجراء من الإبرة على مقربة من الحافة. للثقب ارضحي لمبة العين، إدراج بعناية الإبرة في الجسم الزجاجي في محيط-infero الزمنية البعيدة حوالي 1 ملم إلى حوف، وبالتالي تجنيب السفن الصلبة.
  3. المقبل، مساعد ينطبق ببطء الحجم الكلي لل2 ميكرولتر في حين تسيطر على حجم حقنة هاميلتون. خلال هذا الإجراء، ومراقبة موضع إبرة تحت المجهر الأمثل وتجنب ثقب العدسة أو إراقة السائل. الحفاظ على إبرة تدخل بشكل ثابت لمدة 30 ثانية إضافية، ثم سحبها ببطء لتقليل السائلالتسرب من موقع الحقن.
  4. في جميع أنحاء الداخلي، ينبغي إيلاء عناية خاصة لتجنب الضغط على العين. وبالمثل، وتجنب محاولات عديدة لقاسية أو ثقب لمبة العين. منذ المنغنيز 2 + امتصاص في RGCs والنقل على طول ON مشبعة بالفعل في 15 نانومول MnCl 2، وهذا يقلل من الاختلافات إشارة من كميات الحقن غير دقيقة قليلا. لتعزيز إشارة الثنائية من الإسقاط المرئي، كرر إجراء الحقن للعين اليسرى.
  5. تنطبق-أوفلوكساسين تحتوي على (3 ملغ / مل) قطرات العين والتي تحتوي على مرهم بانثينول مرة واحدة بعد العملية لمنع التهابات العين وجفاف العين. العودة الفئران لأقفاصها تحت ظروف السكن العادي حتى بداية الفحص MR.

2. إعداد الحيوان للتصوير بالرنين المغناطيسي

  1. تخدير الماوس عن طريق الإدارة من خليط الغاز isoflurane و/ الأكسجين 2٪ / 98٪. جبل الماوس على حامل الماوس في موقف مبرومة أفقي تقريبا. الإضافيةERT عليه في لفائف MR، والتي يتم بعد ذلك تعديل داخل الماسح الضوئي MR. مراقبة التنفس ومعدل ضربات القلب من خلال النظم الملائمة. لمزيد من التفاصيل التقنية، انظر هيرمان وآخرون 20.
  2. خلال التصوير بالرنين المغناطيسي، التخدير إمدادات الطاقة عن طريق نفخ المستمر من البداية 1.5٪ / 98.5٪ خليط الغاز isoflurane و/ الأكسجين عن طريق جهاز تبخير متصلا صاحب الرأس الماوس عن طريق أنبوب المتكاملة. أثناء الفحص، وضبط عمق التخدير وفقا لمعلمات الحيوية المسجلة (أي تهدف لمعدل التنفس مستقرة من حوالي 40 نفسا في الدقيقة). باستخدام جهاز التدفئة حفاظ على درجة حرارة سطح الجسم مستقرة بين 35 و 37 درجة مئوية، كما تم قياسها عن طريق جهاز استشعار الحراري وضعه في موقع البطن من الفأرة. لمزيد من التفاصيل التقنية، انظر هيرمان وآخرون 17.
  3. بعد الفحص، وتحرير الماوس من حامل وتوريد مع الأكسجين النقي لتسريع الشفاء من التخدير. بالإضافة إلى ذلك، والحفاظ على درجة حرارة الجسم ثابتة باستخداممصدر التدفئة الضوء الأحمر.

3. بروتوكول التصوير بالرنين المغناطيسي

  1. يتم التحقق من صحة بروتوكول ل3 تسلا الماسح الضوئي مجهزة، SNR كفاءة، لفائف حيوان صغير مخصص (الاستقطاب خطيا يتز لفائف) مع حقل فعالة نظر 35 مم × 38 مم. تعمل لفائف في وضع الإرسال والاستقبال.
  2. مع الحيوان في موقفها النهائي، وضبط اللحن ومباراة لفائف مع المعونة من محلل تردد. ضبط يدويا الارسال إشارة الجهد والتيارات الرقائق لتحسين تجانس الصورة وجودتها.
  3. اكتساب T 1 المرجحة الصور 2D بورصة طوكيو مع قرار من 0.5 مم × 0.5 مم × 2 مم في ضوء السهمي ومستعرضة للتخطيط. باستخدام التخطيط بمسح MR، الحصول على الصور MEMR في اتجاه وقياس الاكليلية، استدارة لتكون موازية لرأس الحيوان مع ترميز المرحلة على طول اتجاه بين اليسار واليمين. لتقليل اكتساب الوقت، استخدم حقل مستطيل نظر تعديلها لأبعاد الرئيس الفعلي. توظيف مدلل تسلسل FLASH 3D (VIBE 3D) باستخدام المعلمات التالية: قاعدة المصفوفة 256، مجال الرؤية 54 مم × 50.65 مم × 14.08 مم، وذلك باستخدام الحقل مستطيلة 93.8٪ من رأي في المرحلة ترميز الاتجاه، و 128 شرائح من 0.11 ملم شريحة سمك لقرار تعيين شريحة إلى 61٪.
  4. تفعيل الاستيفاء في الطائرة لخلق صور النهائي مع 512 × 480 × 128، وتوفير حل فعال من 0.21 ملم × 0.21 ملم × 0.18 ملم (0.1 ملم × 0.1 ملم × 0.09 ملم محرف)، والوقت صدى تي E = 6.51 ميللي ثانية، الوقت التكرار T R = 16 ميللي ثانية، عرض النطاق الترددي = 160 هرتز / بكسل، وزاوية الوجه = 22 درجة. تطبيق متوسطين وثلاثة التكرار لتحقيق ما مجموعه اكتساب الوقت (T A) ما يقرب من 30 دقيقة.

4. تحليل البيانات التصوير بالرنين المغناطيسي

  1. تحليل البيانات باستخدام برنامج برنامج برنامج syngo. لتعزيز إشارة الكمي، حدد مناطق محددة سالفائدة و 2D في مستو تسجيلات التصوير بالرنين المغناطيسي وتحديد شدة إشارة (SI) لهيكل محسن (SI ميمري)، والخلفية الأنسجة (SI backgr)، والانحراف المعياري للضوضاء (SD N). حيثما كان ذلك ضروريا، واستخدام الماوس أطلس الدماغ لتسهيل التوجه العصبية التشريحية للLGN والهياكل SC. حساب نسبة التباين إلى الضوضاء (CNR) باستخدام الصيغة:
  2. لجنة المصالحة الوطنية = (SI اورده - SI backgr) / SD N
  3. تحديد ثلاث صور متتالية لحساب متوسط ​​لجنة المصالحة الوطنية لكل عينة. في الحيوانات حقن ثنائيا، وتحليل كل نصف الكرة بشكل مستقل.
  4. لتصوير الصور الأفقية، الاكليلية والسهمي، وحساب إعادة البناء من multiplanar الأصلي مجموعة البيانات 3D التصوير بالرنين المغناطيسي. لا ينصح هذه الصور المجهزة للتحليل الكمي. إعادة البناء لخلق 3D الرسوم المتحركة (إسقاطات كثافة الأقصى، خطط تنفيذ البعثات) من retino-سقفي الإسقاط، استخدم وظيفة تجهيز وحدة تصوير الأوعية البرمجيات.

5. المنغنيز 2 + Autometallography (TIMM تلطيخ)

  1. لTIMM تلطيخ من المنغنيز 2 هياكل الدماغ + تتبع التالية ميمري، وضخ جرعة من 15-150 نانومول المنغنيز 2 + ivit 24 ساعة قبل التصوير.
  2. بعد تفحص MR، يروي الحيوانات مع 30 مل من الجليد الباردة 0.325٪ نا 2 S في برنامج تلفزيوني (الرقم الهيدروجيني 7.4). تشريح الشبكية وتجميد العينات المجمدة في القسم.
  3. قطع، أقسام الاستوائية متتابعة من 15 ميكرون سمك على مبضع بردي.
  4. أداء TIMM تلطيخ 21 في غياب تثبيتي، وفقا لcryoprotection Angenstein وآخرون 22.

6. التحليل الإحصائي

أداء التحليلات الإحصائية باستخدام اختبار t للطالب للمقارنات واحدة، تليها آخر مخصص ANOVA. يتم عرض البيانات كما يعني ± الخطأ القياسي. أرقام N الفرديةنظرا منفصل لكل تجربة. وتعتبر النتائج التوصل P ≤ 0.05 ذات دلالة إحصائية (P ≤ 0.05، *؛ P ≤ 0.01، **؛ P ≤ 0.001، ***).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

قدرة هذه التقنية التصوير لتقييم دقيق حيوية وظيفة الإسقاط المرئي يعتمد على التطبيق الدقيق لغير سام المنغنيز 2 + الجرعة إلى الجسم الزجاجي وامتصاص من قبل RGCs. يتم اختبار هذا الافتراض الرئيسي في الشكل 1، حيث أظهرت طبقة معينة المنغنيز 2 + امتصاص autometallography (TIMM تلطيخ) 21. وقد تم تحليل أقسام شبكية العين في 24 ساعة بعد تطبيق ivit إما 15 أو 150 نانومول نانومول المنجنيز 2 +، أو برنامج تلفزيوني عن السيطرة. عند هذ...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

اورده من النظام البصري يمتد تقنيات العصبية الحيوية التقليدية لتقييم الأداء الوظيفي في ظل ظروف السذاجة والمرضية. وبصرف النظر عن تقديم نظرة فريدة من نوعها في سلامة معزولة CNS الألياف المسالك، اورده يمكن استكمال بسهولة مع اختبارات سلوكية، على سبيل المثال، البصريات والمهام المياه القائمة بصريا، للتحقيق في الآثار المباشرة لنموذج معين للإدراك البصري. كما يربط الكهربية والتحقيقات النسيجي مع توصيف وظيفي البصرية في الجسم الحي. والتقنية هي موثوق بها للغاية وقابلة للتكرار م...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

يعلن الكتاب أنه ليس لديهم مصالح مالية المتنافسة.

شكر وتقدير

ويدعم حزب العدالة والتنمية من قبل مؤسسة أوبنهايم وRH معتمد من قبل مؤسسة VELUX. نشكر أولا Krumbein لBuder التقنية وK. لدعم النسيجي، وJ. غولدشميت (معهد لايبنتز لبيولوجيا الأعصاب، ماغديبورغ، ألمانيا) للحصول على المشورة التقنية بشأن TIMM تلطيخ.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
محلول كلوريد المنغنيز (II) 1 MSigma Aldrich ، Taufkirchen ، ألمانياM1787كاشف تباين MEMRI
ConjuncainDr. Mann Pharma ، برلين ، ألمانياPZN 76176660.4٪ أوكسي بوبروكائين هيدروكلوريد
قطرات العين FloxalDr. Mann Pharma ، برلين ، ألمانياPZN 38209273 مجم / مل مرهم أوفلوكساسين
بانثينولجينافارم ، جينا ، ألمانياPZN 3524531
هيدرات الكلورال Sigma Aldrich ، Taufkirchen ، ألمانياC8383420-450 مجم / كجم من وزن
الجسم حقنة هاميلتون   ؛شركة هاميلتون ، رينو ، نيفادا ، الولايات المتحدة الأمريكية7634-01SYR 5 & micro ؛ ل ، 75 RN ، لا إبرة NDL
34 G (34/35 / pst4 / tapN)شركة هاميلتون ، رينو ، نيفادا ، الولايات المتحدة الأمريكية207434/00إبرة قابلة للإزالة RN ، 34 جم ، الطول 38.1 مم ، نمط النقطة 4
مجهر Stemi-2000Zeiss ، Oberkochen ، ألمانيا
3 T ماسح التصوير بالرنين المغناطيسي Magnetom TIM TrioSiemens Medical Solutions ، Erlangen ، ألمانيا
لفائف رأس الفئرانDoty Scientific Inc. ، كولومبيا ، ساوث كارولينا ، الولايات المتحدة الأمريكية
حاملمخصص مصباح
الضوء الأحمر
قسم مجمد متوسط NEG-50Thermo Fisher Scientific ، Schwerte ، ألمانيا6502تضمين الأنسجة للأقسام المبردة
أحادي هيدرات فوسفات ثنائي هيدروجين الصوديوم (NaH 2< / sub>PO4< / sub> & middot ؛ H2O)Merck, Darmstadt, Germany106346لتروية كبريتيد
كبريتيد nonahydrate (Na2S· 9H2O)Sigma Aldrich, Taufkirchen, Germany208043
Gum arabicRoth, Arlesheim, Switzerland4159for TIMM Bleaching
Hydroquinone (C6H6O2)Roth, Arlesheim, Switzerland3586
حامض الستريك (C6H8O7)Roth, Arlesheim, Switzerland6490
ثلاثي سيترات ثنائي هيدرات (C6H5Na3O7· 2H2O)Merck، دارمشتات، ألمانيا106448
نترات الفضة (AgNO3)Roth, Arlesheim, Switzerland7908
الماوس

المراجع

  1. Kretz, A., et al. Simvastatin promotes heat shock protein 27 expression and Akt activation in the rat retina and protects axotomized retinal ganglion cells in vivo. Neurobiol Dis. 21, 421-430 (2006).
  2. Lima, S., et al. Combinatorial therapy stimulates long-distance regeneration, target reinnervation, and partial recovery of vision after optic nerve injury in mice. Int Rev Neurobiol. 106, 153-172 (2012).
  3. Lima, S., et al. Full-length axon regeneration in the adult mouse optic nerve and partial recovery of simple visual behaviors. Proc Natl Acad Sci U S A. 109, 9149-9154 (2012).
  4. Goetze, B., et al. Vision and visual cortical maps in mice with a photoreceptor synaptopathy: reduced but robust visual capabilities in the absence of synaptic ribbons. Neuroimage. 49, 1622-1631 (2010).
  5. Luo, X., et al. Three-dimensional evaluation of retinal ganglion cell axon regeneration and pathfinding in whole mouse tissue after injury. Exp Neurol. 247, 653-662 (2013).
  6. Pautler, R. G., et al. In vivo neuronal tract tracing using manganese-enhanced magnetic resonance imaging. Magn Reson Med. 40, 740-748 (1998).
  7. Watanabe, T., et al. Mapping of retinal projections in the living rat using high-resolution 3D gradient-echo MRI with Mn2+-induced contrast. Magn Reson Med. 46, 424-429 (2001).
  8. Pautler, R. G. In vivo, trans-synaptic tract-tracing utilizing manganese-enhanced magnetic resonance imaging (MEMRI). NMR biomed. 17, 595-601 (2004).
  9. Haenold, R., et al. Magnetic resonance imaging of the mouse visual pathway for in vivo studies of degeneration and regeneration in the CNS. Neuroimage. 59, 363-376 (2012).
  10. Lindsey, J. D., et al. Magnetic resonance imaging of the visual system in vivo: transsynaptic illumination of V1 and V2 visual cortex. Neuroimage. 34, 1619-1626 (2007).
  11. Bearer, E. L., et al. Role of neuronal activity and kinesin on tract tracing by manganese-enhanced MRI (MEMRI). Neuroimage. 37, Suppl 1. S37-S46 (2007).
  12. Mendonca-Dias, M. H., et al. Paramagnetic contrast agents in nuclear magnetic resonance medical imaging. Semin Nucl Med. 13, 364-376 (1983).
  13. Thuen, M., et al. Manganese-enhanced MRI of the optic visual pathway and optic nerve injury in adult rats. J Magn Reson Imaging. 22, 492-500 (2005).
  14. Sandvig, I., et al. In vivo MRI of olfactory ensheathing cell grafts and regenerating axons in transplant mediated repair of the adult rat optic nerve. NMR biomed. 25, 620-631 (2012).
  15. Chan, K. C., et al. In vivo retinotopic mapping of superior colliculus using manganese-enhanced magnetic resonance imaging. Neuroimage. 54, 389-395 (2011).
  16. Chan, K. C., et al. In vivo chromium-enhanced MRI of the retina. Magn Reson Med. 68, 1202-1210 (2012).
  17. Herrmann, K. H., et al. Possibilities and limitations for high resolution small animal MRI on a clinical whole-body 3T scanner. Magma. 25, 233-244 (2012).
  18. Villegas-Perez, M. P., et al. Rapid and protracted phases of retinal ganglion cell loss follow axotomy in the optic nerve of adult rats. J Neurobiol. 24, 23-36 (1993).
  19. Takahashi, Y., et al. Development of spontaneous optic neuropathy in NF-κΒ50-deficient mice: requirement for NF-κΒp50 in ganglion cell survival. Neuropathol Appl Neurobiol. 33, 692-705 (2007).
  20. Herrmann, K. H. P., et al. MRI compatible small animal monitoring and triggering system for whole body scanners. Z Med Phys. 24, 55-64 (2013).
  21. Danscher, G., Zimmer, J. An improved Timm sulphide silver method for light and electron microscopic localization of heavy metals in biological tissues. Histochemistry. 55, 27-40 (1978).
  22. Angenstein, F., et al. Manganese-enhanced MRI reveals structural and functional changes in the cortex of Bassoon mutant mice. Cereb cortex. 17, 28-36 (2007).
  23. Thuen, M., et al. Manganese-enhanced MRI of the rat visual pathway: acute neural toxicity, contrast enhancement, axon resolution, axonal transport, and clearance of Mn(2). J Magn Reson Imaging. 28, 855-865 (2008).
  24. Lehmann, K., et al. Vision and visual plasticity in ageing mice. Restor Neurol Neurosci. 30, 161-178 (2012).
  25. Takeda, A., et al. Manganese transport in the neural circuit of rat CNS. Brain Res Bull. 45, 149-152 (1998).
  26. Nairismagi, J., et al. Manganese-enhanced magnetic resonance imaging of mossy fiber plasticity in vivo. Neuroimage. 30, 130-135 (2006).
  27. Smith, K. D., et al. In vivo axonal transport rates decrease in a mouse model of Alzheimer's disease. Neuroimage. 35, 1401-1408 (2007).
  28. Berkowitz, B. A., et al. Noninvasive and simultaneous imaging of layer-specific retinal functional adaptation by manganese-enhanced MRI. Invest Ophthalmol Vis Sci. 47, 2668-2674 (2006).
  29. Schnapf, J. L. B. D. A. How photoreceptor cells respond to light. Sci. Am. 256 (8), (1987).
  30. Yu, X., et al. In vivo auditory brain mapping in mice with Mn-enhanced MRI. Nat Neurosci. 8, 961-968 (2005).
  31. Sun, S. W., et al. Noninvasive topical loading for manganese-enhanced MRI of the mouse visual system. Invest Ophthalmol Vis Sci. 52, 3914-3920 (2011).
  32. Sun, S. W., et al. Impact of repeated topical-loaded manganese-enhanced MRI on the mouse visual system. Invest Ophthalmol Vis Sci. 53, 4699-4709 (2012).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

استكشف المزيد من المقالات

التصوير بالرنين المغناطيسي المعزز بالمنجنيزتصوير العصب البصريالحقن داخل الجسم الزجاجيالتنكس المحوريالمسار البصريبروتوكول MEMRIنموذج الفأرالأمراض التنكسية العصبيةتعزيز التباين
في الجسم الحي التصوير من الألياف البصرية النزاهة العصب عن طريق التصوير بالرنين المغناطيسي تعزيز التباين في الفئران
تواصل معنا
أوصِ به للمكتبة

الخصوصية

شروط الاستخدام

السياسات

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.