مقالة منهجية

بروتوكول لتطوير نموذج قطع عظم الفخذ في فئران ويستار ألبينو

2.9K مشاهدات

DOI:

10.3791/63712

أغسطس 31, 2022

في هذه المقالة

ملخص

هنا ، نقدم بروتوكولا لكسر عمود عظم الفخذ من فئران Wistar albino ومتابعة تطور الكالس. يمكن أن يساعد نموذج قطع عظم الفخذ هذا الباحثين في تقييم عملية التئام الكسور ودراسة كيفية تأثير الدواء على التئام الكسور.

الملخص

التئام الكسور هو عملية فسيولوجية تؤدي إلى تجديد عيوب العظام من خلال العمل المنسق لبانيات العظم والخلايا الآكلة للعظم. الأدوية الابتنائية العظمية لديها القدرة على زيادة إصلاح الكسور ولكن لها قيود مثل التكاليف المرتفعة أو الآثار الجانبية غير المرغوب فيها. يمكن تحديد إمكانات شفاء العظام للدواء في البداية من خلال الدراسات المختبرية ، ولكن هناك حاجة إلى دراسات في الجسم الحي للإثبات النهائي للمفهوم. كان هدفنا هو تطوير نموذج للقوارض العظمية لعظم الفخذ يمكن أن يساعد الباحثين على فهم تطور تكوين الكالس بعد كسر عمود عظم الفخذ ويمكن أن يساعد في تحديد ما إذا كان الدواء المحتمل له خصائص شفاء العظام. تم استخدام ذكور الفئران البيضاء Wistar albino البالغة بعد تصريح لجنة أخلاقيات الحيوان المؤسسية. تم تخدير القوارض ، وفي ظل ظروف معقمة ، تم إنشاء كسور عرضية كاملة في الثلث الأوسط من مهاوي عظم الفخذ باستخدام قطع العظم المفتوح. تم تقليل الكسور وإصلاحها داخليا باستخدام أسلاك K داخل النخاع ، وسمح بحدوث التئام الكسور الثانوية. بعد الجراحة ، تم إعطاء المسكنات داخل الصفاق والمضادات الحيوية لمدة 5 أيام. الأشعة السينية الأسبوعية المتسلسلة تقييم تشكيل الكالس. تم التضحية بالفئران بناء على نقاط زمنية محددة إشعاعيا مسبقا ، وتم تحليل تطور الكالس المكسور إشعاعيا وباستخدام الكيمياء المناعية.

المقدمة

العظم هو نسيج ضام كثيف يتكون من الخلايا المكونة للعظام ، وبانيات العظم ، والخلايا الممتصة للعظام ، ناقضات العظم. التئام الكسور هو عملية فسيولوجية تؤدي إلى تجديد عيوب العظام من خلال العمل المنسق لبانيات العظم والخلايا الآكلة للعظم1. عندما يكون هناك كسر ، فإن نشاط العظم العظمي والعظم العظمي في موقع الكسر هي بعض العوامل المهمة التي تحدد شفاء العظام2. عندما ينحرف التئام الكسر عن مساره الطبيعي ، فإنه يؤدي إلى تأخر الاتحاد أو سوء الاتحاد أو عدم الاتحاد. يقال إن الكسر يكون في حالة عدم الاتحاد عندما يكون هناك فشل في اتحاد الكسر لمدة 9 أشهر ، مع عدم وجود تقدم في الإصلاح في آخر 3 أشهر3. ما يقرب من 10٪ -15٪ ....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تم إجراء التجارب على الحيوانات بعد الحصول على الموافقة الأخلاقية من لجنة أخلاقيات الحيوان المؤسسية (IAEC) ، AIIMS ، نيودلهي ، الهند (286 / IAEC-1/2021).

1. إجراء ما قبل الجراحة

  1. منزل ذكور فئران Wistar albino من 6-8 أسابيع من العمر ، ويزن كل منها ما بين 150-200 غرام ، في مرفق الحيوانات المركزي (CAF) في أقفاص فردية منفصلة. هذا يضمن عدم وجود إصابة جراحية / كسر في الموقع عندما تشترك الفئران المتعددة في الأقفاص.
  2. حافظ على الفئران عند درجة حرارة 23 درجة مئوية ± 2 درجة مئوية في بيئة يتم التحكم فيها بالرطوبة مع رطوبة نسبية تبلغ 50٪ ± 5٪ ، وتعريضها لدورة مظلمة / خفيفة لمدة 12 ساعة ، وإعطاء ad libitum إمكان....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

أجريت هذه الدراسة لتطوير نموذج قطع عظم الفخذ في فئران Wistar albino. يمكن استخدام هذا النموذج لتقييم التئام العظام ، وكذلك التأثير العظمي لدواء ابتنائي عظمي واعد في التئام العظام. تم اتباع الاحتياطات والبروتوكولات الجراحية القياسية. تم استخدام العباءات المعقمة والستائر والمعدات الجراحية لهذا الإجراء (الشكل 1). تم تعقيم المعدات (الجدول 1) قبل 48 ساعة من الجراحة. تم استخدام التخدير والمسكنات والمضادات الحيوية وفقا للبروتوكول لضمان إبقاء الحيوانات خالية من الألم والعدوى في جميع.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

تصف هذه الطريقة بوضوح التفاصيل اللازمة لتطوير نموذج قطع العظم للكسر في فئران Wistar albino. يمكن استخدام هذا النموذج لتقييم التأثير العظمي لدواء ابتنائية عظمي واعد في التئام الكسور ، وكذلك فهم تعقيدات التئام العظام. الميزة البارزة لهذه الطريقة هي أنها بسيطة ولا تحتاج إلى الكثير من الوقت أو المعدات المتطورة. في هذه الطريقة ، تم اختيار ذكور الفئران البيضاء Wistar البالغة كنموذج للقوارض للتجارب. تم اختيار الجنس الموحد لإزالة أي عامل مربك على شفاء العظام المتعلق بالهرمونات الجنسية.

اتبعت هذه الدرا.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

ليس لدى أي من المؤلفين أي تضارب في المصالح أو أي إفصاحات مالية أخرى.

شكر وتقدير

يود المؤلفون أن يشكروا المجلس المركزي للبحوث في المعالجة المثلية (CCRH) ، وزارة AYUSH ، حكومة الهند ، على تمويل البحوث. يعرب المؤلفون عن امتنانهم لمساعدة ودعم مرفق الحيوان المركزي ، AIIMS ، نيودلهي ، لمساعدتهم ودعمهم في التجارب على الحيوانات و CMET ، AIIMS ، نيودلهي ، لمساعدتهم ودعمهم في التصوير الفوتوغرافي والفيديو.

....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
الكحولرامان & أمبير Weil Pvt. Ltd ، مومباي ، ماهاراشترا ، الهندMFG / MD / 2019 / 000189المطهر لليدين الستيريليوم
  ؛السديم الجراحي ، غوجارات ، الهندG.105.05S5 "، مقبض
مستقيم Bard-Parker السديم الجراحي ، غوجارات ، الهندG.103.03الحجم رقم 3
حل البيتادينWin-medicare نيودلهي ، الهندUP1425000000110٪ وزن / فول محلول اليود بوفيدون
ضام جلد مخلب القط   ؛السديم الجراحي ، غوجارات ، الهند908.Sمختبرات أبحاث
EDTASisco الصغيرة Pvt. المحدودة ، ماهاراشترا ، الهند43272ملح ثنائي الصوديوم
EosinSigma Aldrich ، Merck Life Sciences Pvt Ltd ، مومباي ، ماهاراشترا ، الهند115935لتحضير محلول التلوين   ؛
ملقط (عادي)السديم الجراحي ، غوجارات ، الهند115.066 "،
ملقط عادي (مسنن)السديم الجراحي ، غوجارات ، الهند117.066 "، مختبرات
الفورمالديهايدالمسننة سيسكو Pvt. المحدودة ، ماهاراشترا ، الهند84439لإعداد الفورمالين المحايد المخزن   ؛
HaematoxylinSigma Aldrich ، Merck Life Sciences Pvt Ltd ، مومباي ، ماهاراشترا ، الهند104302لتحضير محلول التلوين   ؛
سديم المطرقةالجراحية ، غوجارات ، الهند401.M
حقن سيفوروكسيمأكومنتيس للرعاية الصحية المحدودة ، ثين ، ماهاراشترا ، الهند48 / UA / SC / P-2013سيفوروكسيم الصوديوم IP ، 1.5 جم / قارورة   ؛
حقن الكيتامينباكستر المستحضرات الصيدلانية الهند الخاصة المحدودة ، غوجارات ، الهندG / 28-B / 6هيدروكلوريد الكيتامين IP ، 50 مجم / مل & nbsp ؛
حقن زيلازينالهندية المناعية المحدودة ، حيدر أباد ، تيلانجانا ، الهند28 / RR / AP / 2009 / F / Gزيلازين هيدروكلوريد USP ، 20 مجم / مل
حقن مختبرات ليجنوكائينجاكسون Pvt Limited ، البنجاب ، الهند & nbsp ؛1308-B2٪ ليجنوكائين هيدروكلوريد IP ، 21.3 مجم / مل
حقن ترامادول   ؛إنتاس للمستحضرات الصيدلانية المحدودة ، أحمد أباد ، غوجارات ، الهندMB / 07/500ترامادول هيدروكلوريد IP ، 50 مجم / مل
K-wire   ؛السديم الجراحي ، غوجارات ، الهند166 (1 مم)12 بوصة ،
مثقاب ميكانيكي مزدوج النهاية لإدخال K-wire& lrm ؛ Bosch, Germany 06019F70K4GSR 120-LI مقص قطع
Metzenbaum المهنية السديم الجراحي ، غوجارات ، الهندG.121.06S6 "، مستقيم
حامل إبرةالسديم الجراحي ، غوجارات ، الهندG.108.066 "، مرهم العيون المستقيم
  ؛GlaxoSmithKline Pharmaceutical Limited ، بنغالورو ، كارناتاكا ، الهندKTK / 28a / 467/2001نيومايسين ، كبريتات البولي ميكسين ب والباسيتراسين مرهم الزنك للعين USP
Osteotome (إزميل)السديم الجراجيكي ، غوجارات ، الهند1001.S.1010 مم ، مصعد السمحاق المستقيم
  ؛السديم الجراحي ، غوجارات ، الهند918.10.S10 مم ، كماشة مستقيمة
نائب الرئيس قاطع الأسلاكالسديم الجراحي ، غوجارات ، الهند604.65
رينولد s مقصالسديم الجراحي ، غوجارات ، الهندG.110.06S6 "، النظام
الغذائي شبه الاصطناعي القياسي المستقيم   ؛صناعات أشيرفاد ، شانديغار ، الهندلا يوجد رقم كتالوج متاحالتركيب التفصيلي المقدم في المواد المستخدمة
كوب فولاذي لحفظ البيتادين للتطبيقالشراء المحليلا يوجد رقم كتالوج متاح
صينية فولاذية مع غطاء لأدوات التعقيمالشراء المحليلا يوجد رقم كتالوج متاح
شاش معقمIdeal Healthcare Industries ، دلهي ، الهند & نب سب.E(0047)/14/MNB/7951معقم، 5 سم × 5 سم، 12 رقائق
كتلة رخامية معقمة لدعمالشراء المحليلا يوجد رقم كتالوج متاحمصنع محليا؛
حقنة وإبرة قابلة للتعقيم (1 مل) Becton Dickinson India Pvt. Ltd., Haryana, IndiaREF 3030601 مل حقنة معقمة مع 26 جم × 1/2 (0.45 مم × 13 مم)
حقنة وإبرة إبرة (2 مل)  Becton Dickinson India Pvt. Ltd. ، هاريانا ، الهندREF 307749مل حقنة معقمة مع 24 جم × 1 بوصة (0.55 مم × 25 مم)
حقنة وإبرة إبرة (10 مل)   ؛محاقن هندوستان & الأجهزة الطبية المحدودة فريد أباد, الهند 334-B (H)10 مل حقنة معقمة مع 21 جم × 1.5 بوصة (0.80 مم × 38 مم)
شفرات جراحية (مقاس رقم 15)باراماونت سورجيميد المحدودة ، نيودلهي ، الهند لشركة Medline Industries Inc ، IL ، الولايات المتحدة الأمريكيةالمرجعمعقمة تستخدم لمرة واحدة
(حجم رقم 24)Paramount Surgimed Ltd ، نيودلهي ، الهند لشركة Medline Industries Inc ، IL ، الولايات المتحدة الأمريكيةالمرجعمعقمة ،
الفردي Healthium Medtech Pvt Ltd ، بنغالور ، كارناتاكا ، الهندSN 33184-0 ، 16 مم ، 3/8 إبرة قطع دائرية ، خياطة أحادية الشعيرات البولي أميد   ؛
كتلة الشمع في صينية الألومنيوم  مصنع محليالا يوجد رقم كتالوج متاح30 سم × 30 سم × 4 سم صينية ألومنيوم تحتوي على شمع (لمنع من الانزلاق)
آلة الأشعةالسينية Philips India Ltd ، Gurugram ، هارياناSN19861013الموديل: Philips Digital Diagnost R 4.2 & nbsp ؛
ملقط الشريان أبحاث 2 MDS15115E شفرات جراحية MDS15124E خيوط الاستخدام

المراجع

  1. Wang, T., Zhang, X., Bikle, D. D. Osteogenic differentiation of periosteal cells during fracture healing. Journal of Cellular Physiology. 232 (5), 913-921 (2017).
  2. Fakhry, M., Hamade, E., Badran, B., Buchet, R., Magne, D. Molecular me....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

مقالات ذات صلة