يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

في المختبر هضم المستحلبات في قطرة واحدة عن طريق تبادل متعدد الأطوار الفرعية لسوائل الجهاز الهضمي المحاكاة

3.3K مشاهدة

DOI:

10.3791/64158

نوفمبر 18, 2022

في هذه المقالة

ملخص

يسمح توازن فيلم سطح الإسقاط المعلق الذي يتم تنفيذه بتبادل متعدد الأطوار ، يطلق عليه اسم الأخطبوط ، بمحاكاة ظروف الجهاز الهضمي من خلال تبادل الطور الفرعي المتسلسل للمحلول السائب الأصلي مع سوائل الجهاز الهضمي المحاكاة. تتم مراقبة محاكاة الهضم في المختبر عن طريق تسجيل التوتر السطحي للطبقة البينية المهضومة في الموقع.

الملخص

يتم استخدام المستحلبات حاليا لتغليف وتوصيل العناصر الغذائية والأدوية لمعالجة أمراض الجهاز الهضمي المختلفة مثل السمنة وإغناء المغذيات والحساسية الغذائية وأمراض الجهاز الهضمي. تعتمد قدرة المستحلب على توفير الوظيفة المطلوبة ، أي الوصول إلى موقع معين داخل الجهاز الهضمي ، أو تثبيط / تأخير تحلل الدهون ، أو تسهيل الهضم ، في النهاية على قابليته للتدهور الأنزيمي في الجهاز الهضمي. في مستحلبات الزيت في الماء ، تكون قطرات الدهون محاطة بطبقات بينية ، حيث تعمل المستحلبات على تثبيت المستحلب وحماية المركب المغلف. يعتمد تحقيق هضم مخصص للمستحلبات على تركيبتها الأولية ولكنه يتطلب أيضا مراقبة تطور تلك الطبقات البينية لأنها تخضع لمراحل مختلفة من الهضم المعدي المعوي. يسمح توازن فيلم سطح الإسقاط المعلق الذي يتم تنفيذه بتبادل متعدد الأطوار الفرعية بمحاكاة الهضم في المختبر للمستحلبات في قطرة مائية واحدة مغمورة في الزيت من خلال تطبيق نموذج هضم ثابت مخصص. يتم محاكاة العبور عبر الجهاز الهضمي من خلال تبادل الطور الفرعي للمحلول السائب الأصلي للقطرات مع الوسائط الاصطناعية ، مما يحاكي الظروف الفسيولوجية لكل حجرة / خطوة من الجهاز الهضمي. يتم تسجيل التطور الديناميكي للتوتر البيني في الموقع في جميع أنحاء الهضم المعدي المعوي المحاكي بأكمله. يتم قياس الخواص الميكانيكية للواجهات المهضومة ، مثل المرونة التوسعية واللزوجة ، بعد كل مرحلة هضم (عن طريق الفم ، المعدة ، الأمعاء الدقيقة). يمكن ضبط تكوين كل وسائط هضمية لمراعاة خصوصيات أمراض الجهاز الهضمي ، بما في ذلك أمراض الجهاز الهضمي ووسائط الجهاز الهضمي للرضع. يتم تحديد الآليات البينية المحددة التي تؤثر على التحلل البروتيني وتحلل الدهون ، مما يوفر أدوات لتعديل الهضم عن طريق الهندسة البينية للمستحلبات. يمكن التلاعب بالنتائج التي تم الحصول عليها لتصميم مصفوفات طعام جديدة بوظائف مخصصة مثل انخفاض الحساسية ، واستهلاك الطاقة المتحكم فيه ، وانخفاض قابلية الهضم.

المقدمة

يعد فهم كيفية هضم الدهون ، والتي تتضمن هضم المستحلب ، أمرا مهما لتصميم المنتجات بعقلانية بوظائف مخصصة1. الركيزة لهضم الدهون هي مستحلب حيث يتم استحلاب الدهون عند الاستهلاك عن طريق العمل الميكانيكي والاختلاط مع المواد الخافضة للتوتر السطحي في الفم والمعدة. أيضا ، فإن معظم الدهون التي يستهلكها البشر مستحلبة بالفعل (مثل منتجات الألبان) ، وفي حالة الرضع أو بعض كبار السن ، هذا هو الشكل الوحيد للاستهلاك. وبالتالي ، فإن تصميم المنتجات القائمة على المستحلب مع ملامح هضم محددة مهم جدا في التغذية1. علاوة على ذلك ، يمكن للمستحلبات تغليف وتقديم العناصر الغذائية أو الأدوية أو المواد الحيوية المحبة للدهون2 لمعالج....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

1. تسلسل التنظيف لجميع الأواني الزجاجية المستخدمة في تجارب علوم السطح

  1. افرك الأواني الزجاجية بمحلول تنظيف مركز (انظر جدول المواد) مخفف بالماء (10٪).
  2. اشطفه جيدا بسلسلة من ماء الصنبور والبروبانول والماء المقطر والماء عالي النقاء. تجف في المقصورة وتخزينها في خزانة مغلقة حتى الاستخدام.

2. إعداد عينة

  1. تحضير وسائط الجهاز الهضمي الاصطناعية وفقا لبروتوكولات INFOGEST الموحدة11،20 (انظر جدول المواد). لمزيد من التفاصيل ، انظر الجدول 1 وقم بتضمين تعديلات صغيرة لمتطلبات العمل البيني لمنع التلوث ....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

يعرض هذا القسم أمثلة مختلفة لملفات تعريف الهضم المقاسة باستخدام الأخطبوط. يظهر المظهر العام لمطابقات ملف الهضم المحاكي في الشكل 4 ب. عادة ما يتم تمثيل التوتر السطحي ضد الوقت في ملف الهضم. يتم تمثيل المراحل المختلفة / خطوات الهضم التي تم النظر فيها بألوان مختلفة. تشكل المرحلة الأولى الطبقة الأولية وتتوافق مع مرحلة الامتزاز للمستحلب أو البروتين / الفاعل بالسطح / البوليمر ، اعتمادا على كل حالة. بعد ذلك، تحقن السوائل الهضمية المختلفة عن طريق تبادل الطور الفرعي في محلول سائب يحتوي على الوسائط الج.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

توضح هذه المقالة بروتوكولا معمما لقياس الهضم في المختبر للطبقات البينية باستخدام معدات إسقاط قلادة. يمكن تعديل البروتوكول وفقا للمتطلبات المحددة للتجربة عن طريق ضبط تكوين المخازن الهضمية ، والتي تستند إلى بروتوكول INFOGEST11,20 المنسق لتسهيل المقارنة مع الأدبيات. يمكن إضافة الإنزيمات الهاضمة والمواد الخافضة للتوتر السطحي بشكل فردي أو بالتتابع أو معا. يجب إجراء هذا الخيار الأخير بعناية لأن تشبع الطبقة البينية من شأنه أن يعيق الظواهر المختلفة من خلال توفير.......

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

يعلن المؤلفون أنه ليس لديهم مصالح مالية متنافسة معروفة أو علاقات شخصية يمكن أن تؤثر على العمل المذكور في هذه الورقة.

شكر وتقدير

تم تمويل هذا البحث من قبل المشاريع RTI2018-101309-B-C21 و PID2020-631-116615RAI00 ، بتمويل من MCIN / AEI / 10.13039 / 501100011033 ومن قبل "ERDF طريقة لصنع أوروبا". تم دعم هذا العمل (جزئيا) من قبل مجموعة فيزياء الغروانية الحيوية والسوائل (المرجع PAI-FQM115) بجامعة غرناطة (إسبانيا).

....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
ألفا كيموتريبسين من البنكرياس البقريسيجما ألدريتشC4129إنزيم
بيتا لاكتوغلوبولينسيجما ألدريتشL0130مستحلب
مصل الأبقار الألبومينسيجما ألدريتش9048-46-8مستحلب
CaCl2< / sub>Sigma-Aldrich10043-52-4
جهاز طرد مركزيكرونتون أدواتCentrikon T-124لفصل الزيت والراتنجات بكتين
الحمضياتSigma-AldrichP9135Emulsfier
co-lipase FROM PORCINE PANCREASSigmaC3028Enzyme
CONTACTOجامعة غرناطة (UGR)https://core.ugr.es/dinaten/ ، آخر وصول: 07/18/2022
DINATENجامعة غرناطة (UGR)https://core.ugr.es/dinaten/ ، آخر وصول: 07/18/2022
ليباز المعدةLipolytechRGE15-1Gإنزيم
مصل بشري ألبومينسيجما-ألدريتش70024-90-7مستحلب
INFOGESThttp://www.proteomics.ch/IVD/
ليباز من بنكرياس الخنازير ، النوع الثانيسيجما ألدريتشL33126إنزيم
ميتاسيليكات المغنيسيوم راتنجاتFluka1343-88-0راتنجات لتنقية الزيت
Micro 90المنتجات الدوليةM-9051-04Cleaner
NaClSigma7647-14-5Electrolyte
NaH2< / sub>PO4< / sub>Scharlau10049-21-5لتحضير العازلة
OctopusProducciones Cient & iacute ؛ ficas y T & eacute; cnicas SL (G & oacute ؛ جرة ، إسبانيا)معدات إسقاط Pendandt المنفذة مع تبادل متعدد المراحل
الفرعية زيت الزيتونSigma-Aldrich1514
البنكرياس من البنكرياس الخنازيرSigmaP7545-25 جمإنزيم
البيبسينسيجما ألدريتشP6887إنزيم
بلورونيك F127سيجماP2443مستحلب
بلورونيك F68سيجماP1300مستحلب
الصوديوم ديوكسيكولاتسيجماأملاح صفراوية
الصوديوم glycodeoxycholateSigmaC9910أملاح الصفراء
الصوديوم taurocholateSigma86339أملاح الصفراء
مرشح حقنةMillex-DPSLGP033R  فلتر الحقنة 0.22 & مايكرو; م حجم المسام بولي إيثر سلفون
التربسينسيجما ألدريتشT1426إنزيم
إلكتروليت زيت

المراجع

  1. McClements, D. J. The biophysics of digestion: Lipids. Current Opinion in Food Science. 21, 1-6 (2018).
  2. McClements, D. J., Li, Y. Structured emulsion-based delivery systems: Controlling the digestion and release of lipo....

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

الوسوم