مقالة منهجية

رسم خرائط بصرية للاضطرابات الكهربائية الأذينية والتعامل مع الكالسيوم في نموذج جرذان لالتهاب التامور المعقم

DOI:

10.3791/69767

⸱

يناير 27, 2026

 ,  ,  , 
1Department of Cardiology, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, 2Research Center of Ion Channelopathy, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, 3Institute of Cardiology, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, 4Key Lab for Biological Targeted Therapy of Education Ministry, 5Hubei Provincial Engineering Research Center of Immunological Diagnosis and Therapy for Cardiovascular Diseases, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, 6Department of Cardiology, Xuzhou Central Hospital, 7Institute of Cardiovascular Diseases & Department of Cardiology, Sichuan Provincial People's Hospital, School of Medicine, University of Electronic Science and Technology of China

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يصف هذا البروتوكول رسم الخرائط البصرية المزدوجة لانتقالات الجهد والكالسيوم في قلوب التهاب التامور المعقم لدى الفئران لتقييم إعادة تشكيل الأذين الناتجة عن الالتهاب الكامن وراء الرجفان الأذيني بعد العملية.

الملخص

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

غالبا ما ينشأ الرجفان الأذيني بعد العملية (POAF) بعد جراحة القلب ويرتبط بالتهاب الأذين وإعادة التهيئة (التكوين). يعيد نموذج التهاب التامور المعقم (SP) إنتاج هذه الحالة في الفئران، مما يوفر منصة قيمة للتحقيق في فيزيولوجيا الأذينين الناتجة عن الالتهاب. يصف هذا البروتوكول تحضير قلوب الفئران المثقوبة ب لانغندورف بعد تحفيز SP واستخدام الخرائط البصرية المزدوجة المتزامنة لتسجيل جهد الأغشية العابرة للكالسيوم. تصبغ القلوب بصبغة حساسة للجهد RH237 ومؤشر الكالسيوم رود-2 AM، بينما يتم تقليل الانقباض باستخدام بليبيستاتين لتقليل التشوهات الحركية. يتيح التصوير عالي السرعة رسم الخرائط المكانية والزمانية لجهود عمل الأذين وديناميكيات الكالسيوم أثناء بروتوكولات الإيقاع المسيطر عليها. تشمل المعاملات الكمية مدة جهد الفعل، سرعة التوصيل، مدة الكالسيوم العابرة، الوقت للوصول إلى الذروة، ومقدار الألترنان. تسمح الطريقة بتقييم دقيق لتغاين التوصيل الأذيني، والترابط بين الكهرباء-الكالسيوم، وقابلية اضطراب نظم القلب تحت ضغط الالتهاب. يوفر هذا النهج المرئي منصة قابلة للتكرار ومتعددة الاستخدامات لدراسة آليات POAF واختبار التدخلات الدوائية أو الجينية التي تستهدف إعادة تشكيل الأذين.

المقدمة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الرجفان الأذريني بعد العملية (POAF) هو مضاعفات شائعة بعد جراحة القلب والصدر، وتتميز بنوبات عابرة من الرجفان الأذيني (AF) التي تبلغ ذروتها عادة خلال 2-4 أيام بعد الجراحة. بينما غالبا ما يكون المرض محدودا ذاتيا، إلا أنه مرتبط بزيادة خطر السكتة الدماغية، وفترات إقامة أطول في المستشفى، وارتفاع تكاليف الرعاية الصحية1. يعتبر الإجهاد الالتهابي في عضلة القلب الأذينية مساهما رئيسيا في مسببه2.

نموذج التهاب التامور المعقم (SP) هو نموذج راسخ للحيوانات الصغيرة لدراسة POAF 3,4. في هذا النموذج، يؤدي تطبيق التلك فوق القلب إلى تحفيز التهاب تاموري موضعي يحاكي التغيرات بعد العملية. أظهرت الدراسات السابقة التي استخدمت هذا النموذج إعادة تشكيل هيكلية، وتغيير تعبير وصلات الفجوات، وتشوهات التعامل مع الكالسيوم التي تهيئ على عدم انتظام نظم 5,6,7. ومع ذلك، توفر التقنيات الكهربفيزيولوجية التقليدية معلومات محدودة عن المكان-الزمان، مما يصعب التقاط تباين التوصيل وديناميكيات الاقتران الكهرو-كالسيوم عبر سطح الأذين السليم.

يتيح الخرائط البصرية التصوير عالي الدقة المتزامن لجهد الأغشية العابرة للغشاء والعابرات الكالسيوم (CaT) عبر سطح الأذين، مما يتيح رؤية دقيقة لتوصيل الأذين، وإعادة الاستقطاب، وإشارات الكالسيوم8. في هذا البروتوكول، نصف رسم الخرائط البصرية المزدوجة في قلوب الفئران البيضاء المثقوبة ب لانغندورف. تسمح هذه الطريقة بقياس سرعة التوصيل، ومدة الجهد المحتمل، وخصائص التقاليد الثلاثية، والبدائل تحت بروتوكولات تنظيم منظم منظمة. من خلال دمج تقييم الكهرباء وتقييم التعامل مع الكالسيوم في تحضير أذيني ملتهب، توفر الطريقة أداة قوية لدراسة الأساس الميكانيكي لالتهاب الأذين الصناعي واختبار التدخلات العلاجية المستهدفة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

تمت الموافقة على جميع إجراءات من قبل لجنة رعاية واستخدام المؤسسية (IACUC) بموجب الرقم المعتمد [2024] رقم IACUC 4241 وتم تنفيذها وفقا للإرشادات المؤسسية والوطنية. طوال الدراسة، تم الالتزام الصارم بإرشادات رفاهية، مع أهداف إنسانية محددة بوضوح: تم إعدام الفئران التي تظهر خسلا مستمرا، فقدان مفاجئ في الوزن يتجاوز 20٪، ضيق تنفسي، عدم القدرة على الأكل أو الشرب بشكل طبيعي، أو مضاعفات شديدة بعد العملية باستخدام جرعة زائدة من الإيزوفلوران (5٪ مع تدفق أكسجين 1 لتر/دقيقة) لتقليل المعاناة.

1. تحضير المحاليل والكواشف

  1. تحضير محلول تايرود المعدل (بالملي مول): 128.2 NaCl، 4.7 KCl، 1.3 CaCl2، 1.05 MgCl2، 1.19 NaH2PO4، 20 NaHCO3، 11.1 جلوكوز. فقاعة تحتوي على 95٪ O2/5٪ ثاني أكسيد الكربون، ثم اضبط الرقم الهيدروجيني إلى 7.38-7.42، ودفأ إلى 37 ± 1 °C.
  2. بليبيستاتين: يذوب في DMSO (5 ملغ/مل)، يخزن عند -20°C، محمي من الضوء. استخدم عند تركيز نهائي 10 ميكرومتر.
  3. RH237 (صبغة حساسة للجهد): تذوب في DMSO (2 ملغ/مل)، تخزن عند −20 درجة مئوية، محمية من الضوء. استخدم عند تركيز نهائي 2 ميكرومتر.
  4. رود-2 صباحا (مؤشر الكالسيوم): يذوب في DMSO (1 ملغ/مل); تخزين الحرارة عند −20 درجة مئوية، محمية بالضوء. استخدم عند تركيز نهائي 0.89 ميكرومول.
  5. البلورونيك F-127 (مادة السطح): محلول بنسبة 20٪ في DMSO (الكواشف المتوفرة تجاريا).
  6. الصوديوم بنتوباربيتال (1٪): إذابة 0.1 جرام في 10 مل من المحلول الملحي للتخدير (40 ملغ/كغ، التخدير).
    ملاحظة: التعامل مع الأصباغ ومخزون DMSO باستخدام معدات الحماية الشخصية المناسبة؛ حماية البليبستاتين والأصباغ من الضوء. اتبع قواعد السلامة البيولوجية والسلامة الكيميائية.

2. المعدات

  1. نظام لانغندورف مع تحكم في درجة الحرارة (37 ± 1 درجة مئوية)، وخزان، وعمود فقاعات، ومضخة بيريستالتية (تدفق 10-12 مل/دقيقة).
  2. التصوير: كاميرا CMOS عالية السرعة (معدل إطارات 1 كيلوهرتز ≥؛ ≥ مجال رؤية 80 × 80 بكسل للباح)، مصدر إثارة LED (530 ± 25 نانومتر)، مقسم شعاع ثنائي اللون (~630 نانومتر)، مرشحات انبعاث (رود-2 ~590 نانومتر؛ RH237 >700 نانومتر)، عدسة بفتحة قابلة للتعديل، وطاولة بصرية مع عزل الاهتزازات. مصدر ضوء الإثارة: ليزر LED بتيار أقصى 5 أمبير، ضوء أخضر بقوة قصوى 2.2 واط.
  3. التحفيز: محفز جهد ثابت، وأقطاب ثنائية القطب.
  4. الفسيولوجيا: أقطاب كهربائية غاطسة للتخطيط الكهربائي؛ مسبار حراري؛ ركيزة خلفية سوداء (مطاط) لتقليل تلوث الضوء البطيني؛ أدوات جراحية دقيقة؛ جهاز تنفس صناعي للفئران. الجرد التفصيلي متوفر في جدول المواد.

3. تحفيز التهاب التامور المعقم (SP) في الفئران

  1. قم بتخدير ذكور فئران سبريغ-داولي (200-220 جرام) ب 1٪ صوديوم بنتوباربيتال (40 ملغ/كغ، i.p.). أكد عمق التخدير (فقدان رد فعل الدواسة).
  2. قم بتنيب الفأر باستخدام بولي إيثيلين أو كانيولا معدنية تحت الرؤية المباشرة. تقدم الأنبوب بحذر إلى داخل القصبة الهوائية، موضعه فوق الكارينا مباشرة، وثبته لمنع الإزاحة. اتصل بجهاز تنفس صناعي مضبوط على حجم مد 2 مل/100 جم، 55 نفسا/دقيقة، I:E = 1:1. تأكد من التهوية الفعالة من خلال ملاحظة تمدد الصدر المتماثل والتنفس المستقر.
    ملاحظة: تجنب وضعها العميق أو الضحل لمنع التنبيب أو الاستئصال العرضي.
  3. جهز المجال الجراحي. قم بإجراء عملية فتح صدر فوق عظم القص (المساحة بين الأضلاع الثانية بالقرب من عظمة القص). اكشف القلب بلطف.
  4. ارفع الغدة الزعترية لرؤية كلتا الأذينين. افتح التامور بعناية فوق الأسطح الأذينية باستخدام ملقط دقيق.
  5. ضع التلك المعقم بشكل منتظم على سطح الأذين الأيسر والأيمن باستخدام ملعقة دقيقة (جرعة مسحوق التلك: 50 ملغ/100 جرام وزن جسم الجرذ). تجنب انسكابه على الأوعية الدموية أو البطينات الكبيرة. استبدل الغدة الزعترية فوق الأذرين للحد من هجرة التالك.
  6. أعد وضع عضلات الصدر لتغطية الجرح الجراحي بين الأضلاع الوربي. بعد التعقيم ببوفيدون-يود بنسبة 0.5٪، قم بخياطة العضلات والجلد لإغلاق التجويف الصدري، وإعطاء البنسلين (160,000 وحدة وحدة لكل 100 جم، i.p.) بعد العملية.
  7. الصورة: قطع الصدر بدون عملية فتح التامور أو تطبيق التلك.
    ملاحظة: ضع طبقة رقيقة وموحدة من التلك فقط على الفوق الأذيني؛ التلوث المفرط في التلك أو البطين يزيد من الوفيات وقد يربك القراءات الخاصة بالأذينيات. أكدت دراسات سابقة أن جراحة التامور المعقم في الفئران تسبب التهاب عضلة القلب الأذيني الشديد مع تليف واضح وعوامل التهابية مرتفعة، بما في ذلك IL-6 وIL-1β وTGF-β1 3,9.

4. عزل القلب وتروية لانغندورف

  1. في اليوم الثالث بعد الجراحة، تخدير الفئران بالإيزوفلوران (2-3٪) عبر مخروط أنف وأعط الهيبارين الجهازي (250 وحدة لكل كجم، i.p.) لمنع تكون الجلطات داخل الأوعية الدموية التي قد تعيق الدورة الدموية التاجية وتؤثر على تروية لانغندورف. تم اختيار هذه النقطة الزمنية بناء على نتائجنا السابقة في الجسم الحي التي أفادت بأن تحفيز الرجفان الأذيني يبلغ ذروته بعد 3-4 أيام من SP3، مما يمكن من التقاط الطور الحاد المدفوع بالالتهاب مع تجنب الالتصاقات اللاحقة التي تتداخل مع تحميل الصبغة والتسجيلات البصرية.
    ملاحظة: قبل أن تبدأ، حضر طعاما طازجا؛ توازن الغاز ودرجة الحرارة. محاذاة البصريات وتأكد من الفلاتر/الثنائية اللون. قم بتكوين برامج الاستحواذ (1-2 كيلوهرتز، تعريض 1 مللي ثانية)، وإجراء المعايرة باستخدام بطاقة فلورية.
  2. قم بإجراء عملية فتح الصدر المتوسطة بسرعة لكشف التجويف الصدري. قم باستئصال القلب في كتلة واحدة بجزء من قوس الشريان الأبهري، وغمره فورا في محلول تايرود البارد والأكسجين لإيقاف الأيض والحفاظ على بقاء الأنسجة. قم بتشريح الأنسجة الضامة المحيطة بعناية مع الحفاظ على طول الأبهر 0.5 مم أثناء التقنين. ثبت الشريان الأبهر على قناة لانغندورف باستخدام غرز حرير 4-0، لضمان إغلاق محكم وأن الحافة السفلية للقسطرة تصطف مع الحافة العلوية للبذين. ابدأ التروية الرجعية باستخدام تايرود المؤكسجة بمعدل تدفق ثابت بين 10-12 مل/دقيقة، مع الحفاظ على درجة حرارة البرفوسات عند 37 ± 1 درجة مئوية. لإعادة الإنتاج، مواصفات قنية الأبهر للجرذان هي كما يلي: القطر الخارجي: 1.4 مم؛ القطر الداخلي: 1.0 مم; الطول الكلي: 3-4 سم؛ عمق الإدخال: حوالي 0.5-1.0 سم داخل جذر الأبهر؛ شكل الطرف: مدبب قليلا؛ المادة: الفولاذ المقاوم للصدأ أو أنابيب معدنية مخفية. يجب أن تكون القنية صلبة بما يكفي لتحمل ضغوط التروية (عادة 60-80 ملم زئبق) دون الانحناء، ويجب أن يتجنب الطرف انسداد عظم التاجي.
  3. راقب القلب لتأثيرات إعادة التروية الفورية. يشير نجاح التروية إلى الغسل السريع والسريع للدم المتبقي من الأوعية التاجية، واستعادة لون عضلة القلب الوردي الموحد، واستئناف الانقباضات الإيقاعية التلقائية. يتطلب الأمر وذمة عضلة القلب طفيفة ومعدل ضربات قلب مستقر (عادة بين 300-400 نبضة في الدقيقة) قبل إجراء المزيد من التجارب. سجل في نفس الوقت تخطيط القلب الكهربائي. اترك القلب يتوازن لمدة لا تقل عن 20 دقيقة تحت تدفق مستمر قبل بدء بروتوكولات رسم الخرائط البصرية.

5. كبح الحركة والتهوية

  1. أضف بليبيستاتين إلى البرفوسات (آخر 10 ميكرومول). ابدأ التدفق لمدة ~10 دقائق حتى تتوقف الانقباضات.
  2. إدخال قسطرة انخفاض ضغط الدم في البطين الأيسر عبر الوريد الرئوي عبر الصمام الميترالي لتخفيف ضغط البطين، وبالتالي تقليل الضغط داخل التجويف مع الحفاظ على شكل الأذين وسلامة الإشارة. لإعادة الإنتاج، مواصفات القسطرة هي: القطر الخارجي: 1.4 مم؛ القطر الداخلي: 1.0 مم; الطول الكلي: 1.5 سم؛ عمق الإدخال في القلب: 1.0 سم. لا تفتح الأذينات للحفاظ على هندسة الأذين والإشارات.

6. تحميل الصبغة

  1. تروية القلب: بعد توقف القلب، يتم تدخيم القلب في درجة حرارة الغرفة بمعدل تدفق ثابت بين 10-12 مل/دقيقة.
  2. صبغة مؤشر الكالسيوم: أضف رود-2 AM (تركيز نهائي 0.89 ميكرومول) و20 ميكرولتر من محلول F-127 بلورونيك 20٪ إلى 100 مل من محلول التروية. احقن القلب بهذا المحلول لمدة تقارب 30 دقيقة حتى تظهر الأذرينات والبطينات فلورة حمراء موحدة.
  3. صبغة صبغة حساسة للجهد: أضف RH237 (تركيز نهائي 2 ميكرومول) إلى 100 مل من محلول التروية. اعمل في القلب لمدة ~5 دقائق حتى تظهر الأعينات والبطينات وردية.
  4. إعادة التسخين والغسل: انقل القلب إلى نظام التروية الأصلي. أعد تسخينها إلى درجة حرارة فسيولوجية وقم بالتبريد لمدة 5-10 دقائق لغسل الصبغة غير الممتصة.
    ملاحظة: غالبا ما تعكس إشارات CaT الضعيفة تحميل رود-2 غير كاف؛ قم بتمديد فترة التحميل بمقدار 10-15 دقيقة وتأكد من أن بلورونيك طازج. إذا استمر الحركة، تأكد من فعالية البليبيستاتين والحماية من الضوء.

7. هندسة التصوير وعزل الإشارة

  1. ضع القلب في حمام تصوير بدرجة حرارة 37 درجة مئوية. وجه البهو الأيسر (لوس أنجلوس) نحو الكاميرا. قم بمحاذاة مصادر إضاءة LED الأساسية والثانوية نحو LA.
  2. دعم القلب لمنع الانجراف؛ افرد الأذين بلطف وتثبيته بإبر الوخز بالإبر لرؤية مثالية. غط البطينين بألواح مطاطية سوداء لتقليل تلوث الضوء البطيني.
  3. ضع أقطاب التوازن ثنائي القطب على الأذين الأيمن (RA). ضع أقطاب تخطيط القلب بالقرب من الأذين لالتقاط موجات P الكبيرة.

8. بروتوكولات الاستحواذ والإيقاع

  1. شغل برنامج الخرائط (برنامج OMapRecord4.0). اضبط معدل الإطارات على 1-2 كيلوهرتز؛ ضبط حمل LED إلى 3-4 أمبير؛ مجال رؤية يشمل كامل لوس أنجلوس. اضبط الكسب/التعريض لتجنب التشبع في أي من القناتين. تحسين كسب الكاميرا والتعريض لتجنب التشبع مع تعظيم نسبة الإشارة إلى الضوضاء. معلمات التصوير: تعريض 1 مللي ثانية؛ أقصى تردد للكاميرا 30 كيلوهرتز؛ معدل أخذ العينات: 12.5 كيلوهرتز؛ الدقة 2048 × 2048 بكسل؛ معدل الإطارات على العائد على الإيرادات يصل إلى 3.5 كيلوهرتز؛ الدقة المكانية 70 ميكرومتر. تضمن هذه الإعدادات تسجيلات AP وCaT عالية الدقة.
  2. إيقاع S1S1 (خط الأساس): تصحيح الإيقاع الروماتويدي عند 7 هرتز (عرض النبضة 2-4 مللي ثانية؛ عتبة انبساطية مرتين). احصل على ≥ أفلام 5 ثوان من حيث مدة APD/CaT (CaD)، ووقت الذروة، وسرعة التوصيل.
  3. بروتوكول S1S2 (المقاومة للكحول/التركيز التلقائي): يرسل 30 نبضة S1 عند 7 هرتز، ثم S2 واحد؛ تقليل الفترة من 140 مللي ثانية بخطوات (10/5/1 مللي ثانية) إلى الانكسار السريع. سجل استرداد الكتلين التكتليني (A2/A1)، فترة مقاومة فعالة (ERP)، قابلية تحفيز/مدة الرجفان الأطياني.
  4. الإيقاع التدريجي (alternans): زد سرعة RA من 8 إلى 18 هرتز في خطوات 1-2 هرتز. سجل ≥ 5 ثوان على كل معدل لقياس Ca-ALT، APD-ALT، وDIS-ALT. احتفظ بأفلام ثنائية القناة ومسارات تخطيط القلب المتزامن/التحفيز للتحليل.
    ملاحظة: حافظ على درجة حرارة وتدفق مستمر طوال الإيقاع؛ انخفاض حرارة الجسم يقلل من التوصيل ويبالغ في ظهور القطع الأثرية الآلترنا.

9. معالجة البيانات وقياسها

  1. تحليل الإشارات البصرية باستخدام برنامج OMapScope 4.0. تم تطبيق مرشح مكاني غاوسي 3×3 لتقليل الضوضاء مع الحفاظ على شكل الإشارة عن طريق متوسط كل بكسل مع جيرانه. تعرف أوقات التنشيط بأنها نقطة أقصى dF/dt خلال الشوط الصاعد، حيث يتم حساب سرعة التوصيل بقسمة المسافة الخطية بين مواقع التنشيط الأولى والأحدث على فرق وقت التفعيل المقابل. تم تعريف APD70/90 بأنه الوقت من أقصى dF/dT لجهد الفعل إلى إعادة استقطاب 70٪ أو 90٪ لسعة AP. تم تعريف CaD70/90 بأنه الوقت من ذروة الكالسيوم العابر (Ca²⁺) إلى 70٪ أو 90٪ تحلل. تم قياس البدلات كما يلي: تم حساب Ca-ALT كنسبة 1 ناقص متوسط سعة CaT الأصغر إلى الأكبر، APD-ALT كفرق بين قيم APD80 الأطول والأقصر، وDIS-ALT كبدائل خارج الطور مكانيا مفصولة بخطوط عقدية. تم حساب نسبة استرداد RyR كنسبة قمتين متتاليتين من CaT (أصغر/أكبر).

10. المعايير الحرجة ومعايير القبول

  1. تسريب: 10-12 مل/دقيقة، 37 ± 1 درجة مئوية؛ جيوب أنفية مستقرة أو إيقاع منتظم؛ لوس أنجلوس مليء بالدخول.
  2. SNR: Upstroke dF/F ≥ 3 لكلا القناتين؛ تبييض ضوئي بسيط فوق نافذة الاستحواذ.
  3. الاقتراح: حركة متبقية ضئيلة بعد البلبيستاتين؛ تسجيل صورة مستقر عبر الإطارات.
  4. درجة الحرارة: مراقبة مستمرة؛ استبعد مجموعات البيانات التي < الحمام 36 درجة مئوية أو > 38 درجة مئوية أثناء الاستحواذ.

11. التحليلات الإحصائية

  1. تم إجراء جميع التحليلات الإحصائية باستخدام GraphPad Prism 9. تعرض البيانات كمتوسط ± SEM. تم تقييم معدل توزيع البيانات باستخدام اختبار شابيرو-ويلك. بالنسبة للبيانات ذات التوزيع الطبيعي، تم تحليل الفروق بين المجموعتين باستخدام اختبار t طالب ذو ذيلين غير مقترنين؛ بالنسبة للبيانات غير الموزعة بشكل طبيعي، تم تطبيق اختبار مان-ويتني U. تم تحليل المتغيرات الفئوية باستخدام اختبار χ2 . اعتبر النسبة الموزعة < 0.05 ذات دلالة إحصائية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

التحفيز الفوضوي
النشاط خارج الرحم وإعادة الدخول هما آليان أساسيتان تساهم في بدء واستمرار POAF2، يتم تحديد طول موجة العودة (λ) بواسطة حاصل ضرب ERP وسرعة التوصيل (CV)، أي λ = ERP × CV. في القلوب التي أجريت بالوهم، أثار التتابع في S1S2 استجابات أذينية مستقرة دون اضطراب في نظم القلب (الشكل 2A). على النقيض من ذلك، غالبا ما أظهرت القلوب المعالجة بشلل الشليل استجابات غير طبيعية، بما في ذلك استئصال الأذين (الشكل 2B) وإعادة الد...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

يصف هذا البروتوكول رسم الخرائط البصرية المزدوجة لأنواع AP وCaTs في قلوب الفئران المعزولة بعد SP، وهو نموذج مدفوع بالالتهاب لزيت POAF. يسمح التسجيل عالي الدقة المتزامن لإشارات Vm وCa2+ عبر سطح الأذين السليم تحت التسارع القابل للبرمجة بتقييم APD، ووقت الوصول إلى الذروة، وسرعة التوصيل، والتباينات المكانية لإعادة الاستقطاب، وCaD، وسعة CaT، ووقت الوصول إلى الذروة، وتقلب التحكم الإقليمي في التعامل مع الكالسيوم. كما يتيح الكشف وقياس الأنواع المعتمدة على التردد، بما في ذلك APD-ALT، Ca...

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

لا يوجد لدى المؤلفين تضارب مصالح للكشف عنها.

شكر وتقدير

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

وقد دعم هذا العمل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم 82470328، 82170326 إلى ي.د.؛ رقم 82300350 إلى J.L.). نود أن نعبر عن امتناننا للدكتورة قووليانغ هاو وغونغشين وانغ (معهد الفيزيولوجيا الكهربائية، أكاديمية خنان للعلوم الطبية، تشنغتشو، الصين) على مساعدتهما المتميزة في رسم الخرائط البصرية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
بليبيستاتينأبكامab120425
CaCl2سيغما-ألدرتش10043-52-4
كاميرا CMOSMappingLabOMS-PCIE-2002
نظام تخطيط القلبتشنغدو تكمانBL-420F
FE32 - مترميتلر توليدو30254108
المرشحات/المرايا ثنائية اللونMappingLabRH237 >700 ميل بحري؛
CaT 590 نانومتر
الجلوكوزسيغما-ألدرتش921-60-8
حمام الإيمغايMappingLabلا يوجد
KClسيغما-ألدرتش7447-40-7
نظام التروية لانغندورفرادنوتي / كستوملا يوجد
مصدر LED (530 & أكثر؛ 25 نانومتر)MappingLabلا يوجد
MgCl2سيغما-ألدرتش7786-30-3
NaClسيغما-ألدرتش7647-14-5
NaH2PO4سيغما-ألدرتش10049-21-5
NaHCO3سيغما-ألدرتش144-55-8
برنامج OMapRecord 4.0MappingLabلا يوجد
برنامج OMapScope4.0MappingLabلا يوجد
مضخة بريستالتيةكول-بارمرماسترفليكس وريج؛ L/S®
بلورونيك F-127إنفيتروجينP3000MP
RH237 (صبغة الجهد)ثيرمو فيشر / إنفيتروجينS1109
رود-2 صباحا (مؤشر Ca)ثيرمو فيشر / إنفيتروجينR1245MP
أجهزة التنفس الصناعي للحيوانات الصغيرةيويانبيوV-100
الصوديوم بنتوباربيتالسيغما-ألدرتشP3761
فئران سبراج-داولي (200&00; 220 جرام، ذكر)المورد المحلي المعتمدلا يوجد
مسحوق التلك المعقمسيغما-ألدرتشT1586
المنشطMappingLabLEDC-2002
حمام الماء (يتم التحكم فيه بدرجة الحرارة)نينغبو شينتشيSC-15

المراجع

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Gaudino, M., et al. Postoperative atrial fibrillation: From mechanisms to treatment. Eur Heart J. 44 (12), 1020-1039 (2023).
  2. Dobrev, D., Aguilar, M., Heijman, J., Guichard, J. B., Nattel, S. Postoperative atrial fibrillation: Mechanisms, manifestations and management. Nat Rev Cardiol. 16 (7), 417-436 (2019).
  3. Fu, X. X., et al. Interleukin-17A contributes to the development of postoperative atrial fibrillation by regulating inflammation and fibrosis in rats with sterile pericarditis. Int J Mol Med. 36 (1), 83-92 (2015).
  4. Liao, J., et al. TRPV4 blockade suppresses atrial fibrillation in sterile pericarditis rats. JCI Insight. 5 (23), e137528(2020).
  5. Huang, Z., et al. Signal transducer and activator of transcription 3/microRNA-21 feedback loop contributes to atrial fibrillation by promoting atrial fibrosis in a rat sterile pericarditis model. Circ Arrhythm Electrophysiol. 9 (7), e003396(2016).
  6. Liao, J., et al. Oral administration of TRPV4 inhibitor improves atrial calcium handling abnormalities in sterile pericarditis rats. Sheng Li Xue Bao. 74 (2), 188-200 (2022).
  7. Rossman, E. I., et al. The gap junction modifier GAP-134 improves conduction and reduces atrial fibrillation/flutter in the canine sterile pericarditis model. J Pharmacol Exp Ther. 329 (3), 1127-1133 (2009).
  8. Baines, O., et al. Optical mapping and optogenetics in cardiac electrophysiology research and therapy: A state-of-the-art review. Europace. 26 (2), euae017(2024).
  9. Wu, Q., et al. Colchicine prevents atrial fibrillation promotion by inhibiting IL1βinduced IL6 release and atrial fibrosis in the rat sterile pericarditis model. Biomed Pharmacother. 129, 110384(2020).
  10. Qu, Z., Weiss, J. N. Cardiac alternans: From bedside to bench and back. Circ Res. 132 (1), 127-149 (2023).
  11. Wang, L., et al. Optical mapping of sarcoplasmic reticulum Ca2+ in the intact heart: Ryanodine receptor refractoriness during alternans and fibrillation. Circ Res. 114 (9), 1410-1421 (2014).
  12. Liu, T., et al. Altered calcium handling produces reentrypromoting action potential alternans in atrial fibrillationremodeled hearts. JCI Insight. 5 (8), e133754(2020).
  13. Liao, J., et al. Interleukin6mediated Ca2+ handling abnormalities contribute to atrial fibrillation in sterile pericarditis rats. Front Immunol. 12, 758157(2021).
  14. Baines, O., et al. Optical mapping and optogenetics in cardiac electrophysiology research and therapy: A stateoftheart review. Europace. 26 (2), euae017(2024).
  15. Kanaporis, G., Blatter, L. A. Alternans in atria: Mechanisms and clinical relevance. Medicina (Kaunas). 53 (3), 139-149 (2017).
  16. Boukens, B. J., Efimov, I. R. A century of optocardiography. IEEE Rev Biomed Eng. 7, 115-125 (2014).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

الفيديو قريباً

مقالات ذات صلة