مقالة منهجية

نموذج حيواني لالتهاب اللبص يعتمد على سلالة فئران متخرجة وتحليلها النسيجي

258 مشاهدات

⸱

DOI:

10.3791/69786

⸱

فبراير 27, 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Operative Dentistry, Dow Dental College, Dow University of Health Sciences, 2Dow Institute of Advanced Biological and Animal Research, Dow University of Health Sciences, 3Department of Pathology, Dow International Medical College, Dow University of Health Sciences, 4Department of Oral Pathology, Dow Dental College, Dow University of Health Sciences, 5Qatar University

* These authors contributed equally

في هذه المقالة

ملخص

هنا، نقدم بروتوكولا لإنشاء نموذج التهاب اللب في فئران NMRI (معهد البحوث الطبية البحرية). بالإضافة إلى ذلك، تم وصف خطوات صنع مشبك سحب الفك وتحضير شرائح لتحليل الأنسجة من فك الحيوان. باتباع بروتوكول معياري، يمكن تجنب الاختلافات في المنهجية والنتائج.

الملخص

لم يتم الإبلاغ سابقا عن فئران معهد البحوث الطبية البحرية (NMRI) لصنع نموذج لالتهاب لب الأسنان. في هذا البروتوكول، نقدم نموذجا حيوانيا يستخدم فئران NMRI ونوفر إجراءات نسيجية مفصلة لنموذج التهاب اللب لضمان قابلية التكرار. شملنا 70 فأرا من التصوير بالرنين المغناطيسي النووي تم تصنيفها عشوائيا إلى مجموعتين: المجموعة أ (n=35)، حيث كان التهاب اللب ناتج عن التعرض لللب وحده، والمجموعة ب (n=35)، التي تلقت التعرض لللب تلتها تطبيق زيموزان. بعد تعرض ضرس الفك العلوي الأيمن لللب العصبي، تم التضحية بالحيوانات على فترات زمنية محددة (0، 6، 9، 12، 24، 48، و72 ساعة). تم الحصول على الفك العلوي للتحليل النسيجي والتحليل الكمي للنسيج. لوحظ زيادة تدريجية تعتمد على الوقت في الالتهاب في التحليل الأنسجي لكلا المجموعتين. سمح كلا النموذجين الحيوانيين بدراسة الالتهاب حتى 72 ساعة. التقنية المقدمة في هذه الورقة قابلة للتكرار وستساعد في توحيد الدراسة النسيجة لالتهاب اللب.

المقدمة

تم استخدام نماذج حيوانية مختلفة لدراسة التهاب اللبن 1,2,3,4. من بين هذه النماذج المعتمدة على C57BL/6 وBALB/c تم الإبلاغ عنها حصريا في أبحاث التهاب اللبص 5,6,7,8. كلاهما من نوع التزاوج الداخلي ولديهما متطلبات صارمة للتربية 7.9. فئران NMRI المستخدمة في البروتوكول الحالي هي سلالة خارجة عن الجنس، وتوفر مزايا متعددة على السلالات المتزاوجة داخليا. تكاليف الإعداد والصيانة منخفضة. التكاثر العالي، والمناعة الأفضل، وانخفاض الوفاة يؤدي إلى دوران أسرع وأكبر للمستعمرات10. لذلك، فهي أكثر قابلية للتنفيذ من الناحية اللوجستيةوالمالية. علاوة على ذلك، تشير نتائجنا إلى أن ملف المرض الناتج عن التهاب اللب الناتج في هذا النموذج مشابه للنماذج السابقة المبلغ عنها على الفئران المتزاوجة من الأقارب 5,6,8. علاوة على ذلك، يمكن لفئران NMRI تحمل تعرض اللب لزيموسان لمدة تصل إلى 72 ساعة، مما يطور ملف مرض قابل للملاحظة. هذا بديل عملي لسلالات أخرى متزاوجة داخليا لدراسة التهاب اللب12.

زيموسان هو مستخلص من جدار خلية ساكارومايسيس سيريفيسيا، ويتكون بشكل رئيسي من الكيتين، والمانان، والمانوبروتينات، وß-glucans13. تشترك زيموسان وكانديدا ألبيكانس في بنية جدار خلوية مشابهة ويتم اكتشافها بواسطة المناعة الفطرية للمضيف عبر ليكتين من النوع C، وهو مستقبل للتعرف على الممرض، Dectin-114. يعبر عن ديكتين-1 بشكل رئيسي بواسطة الخلايا التغصنية والبلاعميات. يكتشف التحليل ß-جلوكان في مسببات الأمراض الفطرية ويستخدم مسار Syk/CARD9 لتكوين الوسطاء الالتهابيين15. لذلك، يعد زيموزان بديلا مناسبا لدراسة تأثير تعرض C. albicans على مرض اللب بدلا من استخدام الكائن الحي16. يدعم ذلك نتائجنا المنشورة سابقا، والتي تظهر اكتشافا مبكرا لنصوص Dectin-1 في لب الزيموزان. وبالمثل، لوحظت أيضا بلاعم Dectin-1 التي تعبر عن CD68+ve12.

غالبا ما تكون التقنيات الأنسجة الموصوفة في المنشورات السابقة غير كافية للباحثين المبتدئين لإعادة إنتاجها بثقة. وبالتالي، تحدث تجارب وأخطاء مكثفة، مما يؤدي إلى فقدان حيوانات غير ضروري أثناء تحسين الإجراءات النسيجة. البروتوكول الحالي يوحيد تقنية تحضير الشرائح وقد تم تطبيقه بنجاح على الفئرانأيضا. هنا، توصف جميع الخطوات الأساسية لنموذج التهاب اللبوب بالتفصيل، بما في ذلك طريقة قابلة للتكرار لسحب الفك، وتحفيز التهاب اللب عن طريق التعرض للب، وتحفيز التهاب اللب باستخدام زيموزان، والتحليل النسيجي اللاحق.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

البروتوكول

تم تصميم دراسة الحيوانات الحالية وفقا لإرشادات ARRIVE. وافقت لجنة المراجعة المؤسسية لأبحاث وأخلاقيات الحيوان في جامعة داو للعلوم الصحية على هذه الدراسة على الحيوانات (الرسالة رقم AR. IRB-06/DUHS/الموافقة/2016/05). شمل البروتوكول ما مجموعه 70 فأرا بالرنين المغناطيسي النووي. تم الحصول على الحيوانات من منشأة بيت الحيوانات المركزي التابع لمعهد داو للأبحاث البيولوجية والحيوانية المتقدمة. حجم عينة هذا البروتوكول يعتمد على دراسة سابقة8.

1. الحيوانات

ملاحظة: كانت الحيوانات المختارة للدراسة تزن 26-30 جراما وتم الاحتفاظ بها في أقفاص قياسية تحت الشروط التالية: درجة حرارة ±21 درجة مئوية، رطوبة نسبية ±55٪، ونسبة ضوء إلى ظلام 12 ساعة مع توفر مياه مفلترة مجانا وعلف عادي (نظام غذائي عادي). كان هناك مراقبة منتظمة لأي علامة على العدوانية أو الانزعاج أو التهيج. تم استخدام ديكلوفيناك الصوديوم (200 ميكرولتر تحت الجلد، 25 ملغ/مل) في حالة الألم أو الانزعاج. سمح لهم بالتأقلم لمدة أسبوعين قبل أي تجربة. تم الاحتفاظ بعشرة حيوانات لكل منها في أقفاص تحمل علامات مناسبة. لتحديد هوية الحيوان، وضع علامة على ذيله.

  1. قسم الحيوانات (n=70) عشوائيا إلى مجموعتين: المجموعة A (n=35)، المجموعة B (n=35).
  2. في المجموعة أ، تحفز التهاب اللب فقط عن طريق تعريض اللب (انظر الخطوة 4.1.1 إلى الخطوة 4.1.9).
  3. بالنسبة للحيوانات من المجموعة ب، ضع محلول زيموزان فوق اللب المكشوف (انظر الخطوة 4.2.1 إلى الخطوة 4.2.3).

2. محلول زيموزان

  1. اتبع طريقة منشورة سابقا لتحضير محلول زيموزان كما هو موضح أدناه18.
  2. استخدم محلول ملحي مخزن بالفوسفات (PBS) لصنع محلول بمقدار 1 ملغ/مل من 1 مل من زيموزان.
  3. استخدم المحلول على حرارة 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة.
  4. اترك المحلول يبرد إلى درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة.
  5. قم بالطرد المركزي بالمحلول عند 4 درجات مئوية و300 × g لمدة 10 دقائق.
  6. تخلص من المادة الفائقة واغسل الحبيبة ثلاث مرات عن طريق إعادة الطرد المركزي باستخدام PBS المعقمة الباردة.
  7. تخزين المحلول عند 4 درجات مئوية حتى الاستخدام مرة أخرى.
    ملاحظة: يجب استخدام المحلول خلال 30 يوما، وبعدها يمكن التخلص منه.

3. مشبك سحب الفك

  1. استخدم سلك تقويم الأسنان من الفولاذ المقاوم للصدأ بقطر 0.7 مم لصنع مشبك سحب للفك.
  2. خذ سلكا طوله 100 مم واصنع حلقة قطرها 5 مم في مركزه.
  3. قم بتدوير كلا جزئي السلك على بعد 5 مم من الحلقة و15 مم إجمالا بزوايا قائمة دون انحناءات حادة.
  4. على بعد 25 مم من الدوران، قم بعمل شق وادير الطرف المتبقي للخارج. استخدم الشكل 1A للإرشاد.

4. نموذج الحيوان

  1. المجموعة أ (n = 35)
    1. تخدير الحيوانات بحقن داخل الصفاق بكمية 0.1 مل/20 جرام من كوكتيل الكيتامين-زيلازين (87.5 ملغ/كجم كيتامين + 12.5 ملغ/كغ زيلازين).
    2. استخدم ميكروسكوب ستيريو طويل الذراع مائل بعشر مرات لجميع الإجراءات (الشكل 1B). اضبط الذراع المائلة بحيث يكون هناك رؤية مباشرة لأسنان الحيوان الفكي المنسحبة. (الشكل 1C)
    3. اضغط على المشبك وضع الجزء المشقوق بين القواطع الفكي والسفك السفلي على جانبي المشبك.
    4. بعد تحرير المشبك، ثبت أطرافه بمساعدة شريط لاصق (الشكل 1C).
    5. استخدم ملقط الأسنان لتوسيع وجنتي الحيوان بيدك غير النشطة. (الشكل 1D,E).
      ملاحظة: تجنب الضغط الزائد. يمكن أن تسبب الإصابة الناتجة عن الملقط نزيفا قاتلا ووفاة الحيوان.
    6. استخدم بور كربيد دائري #1/4 مع قطعة يد بطيئة السرعة من النوع E في محرك كهربائي صغير أقل من تكبير 10 أضعاف إلى نصف عمقه في مركز الضرس الأول للفك العلوي الأيمن لتكوين تجويف من الفئة الأولى. قد يكون ظل اللب مرئيا في هذه اللحظة (الشكل 1D,E).
    7. قم بتشغيل البر بلطف بسرعات بطيئة بحركة متحركة. استخدم محركا كهربائيا للتحكم في عدد دورات المحرك في الدقيقة.
    8. استخدم مبرد جذور من النوع K رقم 15 لتعريض اللب (الشكل 2B).
      ملاحظة: يجب أن يكون استخدام أداة يد جذور الأسنان #15 لطيفا للغاية، وإلا سيحدث ثقب انحكامي، والذي لن يظهر إلا بعد تحضير شرائح الأنسجة. قطر الرافعة الكربيد الدائري #1/4 هو 0.25 مم، وملف النوع #15K عرضه 0.15 مم. لذلك، سيكون حجم التعريض 0.15 مم لللب (الشكل 2C).
    9. اترك اللب المكشوف مفتوحا لتحفيز التهاب اللب.
  2. المجموعة ب (n = 35)
    1. كرر جميع الخطوات المعطاة في الخطوة 4.1 مع إضافة الخطوات التالية.
    2. استخدم ميكروبايبت (0.2-2 ميكرولتر) لوضع 0.2 ميكرولتر من محلول زيموزان المحضر مسبقا فوق اللب المكشوف.
      ملاحظة: يجب توخي الحذر عند صرف محلول زيموزان. انسكب المحلول عن غير قصد في تجويف الفم يمكن أن يسبب وفاة الحيوان. لذلك، يستخدم الشاش لتغطية السن بحيث يتم امتصاص محلول زيموزان الزائد بواسطة الشاش (الشكل 2D).
    3. اترك اللب المعالج مفتوحا لتحفيز التهاب اللبوب بواسطة محلول زيموزان.

5. تحضير العينة

  1. التضحية بخمسة حيوانات من كل مجموعة عند 0، 6، 9، 12، 24، 48، و72 ساعة بواسطة استنشاق ثاني أكسيد الكربون19.
  2. استخدم غرفة قتل رحيم بسعة 7.25 لتر.
  3. لا تشحن الحجرة مسبقا بثاني أكسيد الكربون2.
  4. ضع الحيوانات مباشرة في الحجرة.
  5. أضف 100٪ ثاني أكسيد الكربون2 بمعدل تعبئة يتراوح بين 30 و70٪ من حجم الحجرة في الدقيقة.
  6. حافظ على معدل تدفق ثاني أكسيد الكربونعند 5 لتر/دقيقة.
  7. سخن ثاني أكسيد الكربونواتركه ليختلط مع الهواء الموجود في الحجرة.
  8. راقب الحيوانات بحثا عن علامات فقدان الوعي خلال 23 دقيقة.
  9. راقب الحيوانات لتتوقف التنفس وأن تتحول عينيك إلى رمادية.
  10. حافظ على تدفق ثاني أكسيد الكربونلمدة دقيقة واحدة على الأقل بعد توقف التنفس.
  11. أكد وفاة الحيوانات قبل إخراجها من الحجرة. تأكد من عدم وجود تنفس وأن العيون تبدو شاحبة.
  12. افصل رؤوس الحيوانات مباشرة بعد القتل الرحيم.
  13. استخدم الضرس الأول في الجانب الأيسر من الحيوان غير المعالج كدليل على التحكم.
  14. استخدم الفورمالين المخزن بنسبة 10٪ في أنابيب مخروطية بحجم 15 مل تحمل علامات مناسبة لتخزين الفك العلوي لمدة يومين.

6. علم الأنسجة

  1. قم بإزالة الكالسيف من الفك الثابت بحمض الفورميك بنسبة 10٪ لمدة 3 أيام.
    ملاحظة: بعد اليوم الثالث، تحقق مما إذا كان النصل الجراحي قادرا على قطع الفك. إذا لم يكن طريا بما فيه الكفاية، اغمسه مرة أخرى في حمض الفورميك 10٪ وتحقق يوميا حتى يمكن قطعه بشفرة جراحية.
  2. اقطع الفك بشفرة رقم 22. اجعل القطع موازيا لمستوى الإغلاق على طول المستوى السهمي، مع الحفاظ على الشفرة مباشرة على الجانب الحنكي من الحنك في الأضراس العلوية (الشكل 3A).
  3. ضع علامة على سطح الإغلاق لجميع الأسنان بحبر الهند.
    ملاحظة: سيساعد هذا الوضع في التعرف على السطح الإغلاقي أثناء التقسيم (الشكل 3B).
  4. قم بتثبيت الفك المقسم بشمع البارافين في غلاف قاعدة من الفولاذ المقاوم للصدأ عن طريق وضعه مسطحا مقابل قاعدة القالب مع مواجهة سطح القطع للقاعدة.
    ملاحظة: يضمن التضمين بهذه الطريقة أن السطح المقطوع يدخل الميكروتوم أولا، وأن اتجاه العينة صحيح، وأن المقاطع السهمية تنتج كما هو موضح في الشكل 3E.
  5. أزل شريط الكاسيت المدمج الذي يحتوي على الفك المدمج من القالب الأساسي وضعه في ميكروتوم.
  6. اصنع مقاطع سهمية بسماكة 3 ميكرومتر وضعها على شريحة مجهرية نظيفة ومشحونة (الشكل 3C).
  7. راقب الشرائح غير المصبوغة تحت المجهر المركب.
    ملاحظة: استمر في مراقبة المقاطع المقطوعة حتى يصبح التجويف مرئيا على سطح الانسداد الداخلي. إذا تم إنشاء المقاطع بشكل صحيح على طول مستوى السهمية على طول المحور الطويل للضرس الأول في الفك العلوي، سنلاحظ أن فضاء اللب بأكمله يظهر إما جذرا أو اثنين وغرفة لب (الشكل 3E). من هذه النقطة فصاعدا، يمكن نظريا صنع 50 شريحة من قسم واحد لأن حجم التعريض هو 0.15 مم. (3 ميكرومتر = 0.003 مم، 0.003 × 50 = 0.15)
  8. قم بخطوات قياسية من إجراءات تلوين الهيماتوكسيلين والإيوسين للشرائح المختارة التي تظهر جذرا واحدا أو جذرين، بالإضافة إلى غرفة اللب بالكامل.
  9. راقب الشرائق الملونة تحت المجهر المركب.
  10. اختر أفضل خمس شرائح في كل فترة زمنية تسمح بمراقبة أقصى مساحة للبب.

7. التحليل الإحصائي

  1. قم بإجراء تحليل إحصائي باستخدام برامج إحصائية قياسية.
    ملاحظة: في التحليل النسيجي الكمي، تم تقييم الشرائح المرصودة من كل فترة زمنية وفقا لمعيار منشور سابقا (الجدول 1)8. تم استخدام اختبار كروسكال-واليس H مع تصحيح بونفيروني عند p=0.0018 لمقارنة درجات الفترات الزمنية المختلفة. تم استخدام اختبار مان-ويتني U عند p ≤ 0.05 لمقارنة المجموعتين A و B. تم إجراء جميع المقارنات باستخدام برامج إحصائية قياسية.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

النتائج

في هذا البروتوكول، نقدم إجراء تفصيليا خطوة بخطوة لنموذجين حيوانيين لالتهاب لب الأسنان في فئران NMRI، إلى جانب طرقهما النسيجية المقابلة. استخدام المعدات المناسبة أمر أساسي لنجاح البروتوكول. في هذا الصدد، المجهر الستيريو ذو الذراع الطويل المائل بعشر مرات هو أهم قطعة من المعدات. تم إجراء تحضير التجويف من الفئة الأولى باستخدام محرك كهربائي بحوالي ثلث سرعته القصوى (35,000 دورة في الدقيقة)، مما جعل العملية قابلة للإدارة وألغى الحاجة إلى الهواء المضغوط.

توضح

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المناقشة

يقدم البروتوكول الحالي تطوير نموذج إصابة الأسنان من النوع الثالث (التهاب اللوب غير القابل للعكس) في فئران NMRI لأول مرة في الأدبيات المبلغ عنها. كما يفصل التحليل النسيجي لالتهاب اللب الناتج عن زيموزان ويوفر طريقة قابلة للتكرار لتحضير شرائح نسيجية من فكوك الحيوانات.

وفقا لهذا البروتوكول، تم إنتاج نموذج إصابة الأسنان من النوع الثالث في فئران NMRI. أجريت أبحاث سابقة على الفئران والأرانب والكلاب 1,2,3,4.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

الإفصاحات

المؤلفون لا يفرضون أي تضارب مصالح.

شكر وتقدير

كانت الدراسة ممولة ذاتيا. يعبر المؤلفون عن المساعدة من السيد محمد عادل من قسم الأنسجة بجامعة داو للعلوم الصحية في علم الأنسجة.

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

المواد

قائمة المواد المستخدمة في هذه المقالة
الاسمالشركةرقم فهرسيالتعليقات
قالب القاعدةمختبرات خط التاريخ، إيطالياR4166C2:D23لتضمين العينة في البارافين
كربيد بور #1/4 جولةالغرب الأوسط، ويتشيتا فولز، تكساس389101
المجهر المركب Motic BA310شركة موتيك المحدودة، هونغ كونغhttps://moticmicroscopes.com/products/ba310e
ديكلوفيناك الصوديوم 25 ملغ/ملإندوس فارما (DYCLO)https://sahar.ph/product/dyclo-diclofenac-sodium-25-mg-ml-im-iv/200 وميكرو؛ L تحت الجلد
قطعة يد بطيئة السرعة من النوع E Rose201-M4كون فوشان، الصينhttps://www.beingfoshan.com/en/h-pd-353.html
تضمين شريط كاسيت مختبرات خط التاريخ، إيطالياR4004
غرفة القتل الرحيمكوندكتساينس، إلينوي الولايات المتحدة الأمريكيةCS-EUTH2Aسعة 7.25 لتر، للفئران والجرذان [حتى 500 جرام]
أنابيب فالكون 15 ملالعش188271
فورمالين سيغما-ألدريتش، سانت لويس، ميزوري، الولايات المتحدة158127مخزن مؤقت  
حمض الفورميك مستلزمات مختبر BDH بول، إنجلترا 2842810%
Homogenizer أومني ميكسر هوموجينايزر، أومني إنترناشونال، جورجيا الولايات المتحدة الأمريكيةhttps://omni-inc.com/high-shear-lab-homogenizers/omni-th-0-2ml-100ml/omni-tissue-homogenizer-th
إنديا إنكسيغما-ألدريتش، سانت لويس، ميزوري، الولايات المتحدة198285
ملف جذور النوع K رقم 15ماني، اليابانhttps://www.mani.co.jp/en/product/dental_01.html
كوكتيل الكيتامين-زيلازينشركة بروكس فارما الخاصة المحدودة / ماي لاب (خاص) المحدودة.87.5 ملغ/كجم كيتامين + 12.5 ملغ/كغ زيلازين
ميكروتوم HM 315 Rميكروم، ألمانيا901100
ماراثون المحركات الدقيقة الثالثةBT-ماراثون، شركة سايانغ ميكروتك المحدودة، كورياhttps://www.saeyang.com/theme/basic/sub/product/view.php?it_id=1752202111الاستخدام عند ثلث السرعة القصوى
ميكروبايبت 0.2-2 وميكرو؛ L جيلسون، فرنساhttps://www.gilson.com/default/
pipetman-p2-0-2-2-micro-l-metal
-ejector.html?srsltid=AfmBOoobE
0iSWY_902ZHGZ7AoJ6wzN5PI
0H4V4vkxHQgK1mq7Wg2kkbS		0.2-2 وميكرو؛ L 
محلول ملحي مخزن الفوسفات&nb;سيغما-ألدريتش، سانت لويس، ميزوري، الولايات المتحدةP4417
الحزمة الإحصائية للعلوم الاجتماعيةآي بي إم، أرمونك، نيويوركSPSS لماك الإصدار 23.0   
المجهر المجسم BMK-3 LEDميجي تكنو، اليابانhttps://meijitechno.com/product/bmk-3-led-stereo-microscope/
شفرة جراحية رقم 22شفرة الريشة الجراحية، شركة فيذر سيفتي رايزر المحدودة، أوساكا، اليابانفيسبوك. 12
زيموسان أسيغما-ألدريتش، سانت لويس، ميزوري، الولايات المتحدةرقم الفئة Z42501 ملغ/مل من 1 ملليتر زيموزان

المراجع

  1. Haddad, M., Lefranc, G., Aftimos, G. Local application of IGF1 on dental pulp mechanically exposed; in vivo study on rabbit. Bull Group Int Rech Sci Stomatol Odontol. 45 (1), 12-17 (2003).
  2. Huang, J., et al. Dynamic Regulation of Delta-Opioid Receptor in Rat Trigeminal Ganglion Neurons by Lipopolysaccharide-induced Acute Pulpitis. J Endod. 41 (12), 2014-2020 (2015).
  3. Shahravan, A., Ghoddusi, J., Eslami, B., Rategar, A. F. A histopathological study of the pulp of dogs' teeth after induction of experimental pulp inflammation for different periods of time. J Microsc. 237 (2), 119-121 (2010).
  4. Siddiqui, Y. D., et al. Resolvin D2 Induces Resolution of Periapical Inflammation and Promotes Healing of Periapical Lesions in Rat Periapical Periodontitis. Front Immunol. 10, 307(2019).
  5. Mutoh, N., Tani-Ishii, N., Tsukinoki, K., Chieda, K., Watanabe, K. Expression of toll-like receptor 2 and 4 in dental pulp. J Endod. 33 (10), 1183-1186 (2007).
  6. Mutoh, N., Watabe, H., Chieda, K., Tani-Ishii, N. Expression of Toll-like receptor 2 and 4 in inflamed pulp in severe combined immunodeficiency mice. J Endod. 35 (7), 975-980 (2009).
  7. Sasaki, H., et al. Endodontic Infection-induced Inflammation Resembling Osteomyelitis of the Jaws in Toll-like Receptor 2/Interleukin 10 Double-knockout Mice. J Endod. 45 (2), 181-188 (2019).
  8. He, Y., et al. Pulpal Tissue Inflammatory Reactions after Experimental Pulpal Exposure in Mice. J Endod. 43 (1), 90-95 (2017).
  9. Patidar, A., et al. Barley beta-Glucan and Zymosan induce Dectin-1 and Toll-like receptor 2 co-localization and anti-leishmanial immune response in Leishmania donovani-infected BALB/c mice. Scand J Immunol. 92 (6), e12952(2020).
  10. Tuttle, A. H., Philip, V. M., Chesler, E. J., Mogil, J. S. Comparing phenotypic variation between inbred and outbred mice. Nat Methods. 15 (12), 994-996 (2018).
  11. Zhang, W., et al. Genome-Wide Association Mapping of Quantitative Traits in Outbred Mice. G3 Genes|Genomes|Genetics. 2 (2), 167-174 (2012).
  12. Hasan, A., et al. Expression of Toll-like receptor 2, Dectin-1, and Osteopontin in murine model of pulpitis. Clini Oral Investig. 27 (3), 1177-1192 (2023).
  13. Rogers, N. C., et al. Syk-dependent cytokine induction by Dectin-1 reveals a novel pattern recognition pathway for C-type lectins. Immun. 22 (4), 507-517 (2005).
  14. Ruiz-Herrera, J., Elorza, M. V., Valentin, E., Sentandreu, R. Molecular organization of the cell wall of Candida albicans and its relation to pathogenicity. FEMS Yeast Res. 6 (1), 14-29 (2006).
  15. Takeuchi, O., Akira, S. Pattern recognition receptors and inflammation. Cell. 140 (6), 805-820 (2010).
  16. Peters, B. M., Noverr, M. C. Candida albicans-Staphylococcus aureus Polymicrobial Peritonitis Modulates Host Innate Immunity. Infect Immun. 81 (6), 2178-2189 (2013).
  17. Niazi, F. H., et al. Dentin-Pulp Complex Response in Molars of Rats after Occlusal and Cervical Restorations with Conventional Glass Ionomer Cement and Nano-Hydroxyapatite Silica Glass Ionomer Cement. Appl Sci. 13 (5), 3156(2023).
  18. Erdo, F., Torok, K., Aranyi, P., Szekely, J. I. A new assay for antiphlogistic activity: zymosan-induced mouse ear inflammation. Agents Actions. 39 (3-4), 137-142 (1993).
  19. Underwood, W., Raymond, A. AVMA guidelines for the euthanasia of animals. , 2020 edition, (2020).
  20. Bernardino, ÍdM., Farias, ÍdL., Cardoso, A., Xavier, A., Cavalcanti, A. Use of Animal models in Experimental Research in Dentistry in Brazil. Pesqui Bras Odontopediatria Clin Integr. 14 (1), 17-21 (2014).
  21. Alzarea, B. Selection of Animal Models in Dentistry: State of Art Review Article. J Anim Vet Adv. 13 (18), 1080-1085 (2014).
  22. Hasan, A., et al. A novel experimental model to investigate fungal involvement shows expression of Dectin-1 in periapical lesion pathogenesis. J Oral Rehab. 50 (10), 1043-1057 (2023).
  23. Song, M., et al. Development of a Direct Pulp-capping Model for the Evaluation of Pulpal Wound Healing and Reparative Dentin Formation in Mice. J Vis Exp. (119), e54973(2017).
  24. Balto, K., White, R., Mueller, R., Stashenko, P. A mouse model of inflammatory root resorption induced by pulpal infection. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 93 (4), 461-468 (2002).
  25. De Rossi, A., Rocha, L. B., Rossi, M. A. Interleukin-10, Intercellular adhesion molecule-1, and chemokine receptor 5, but not interleukin-4, attenuate the development of periapical lesions. J Endod. 34 (1), 31-38 (2008).
  26. da Silva, R. A., Ferreira, P. D., De Rossi, A., Nelson-Filho, P., Silva, L. A. Toll-like receptor 2 knockout mice showed increased periapical lesion size and osteoclast number. J Endod. 38 (6), 803-813 (2012).
  27. Kawashima, N., Stashenko, P. Expression of bone-resorptive and regulatory cytokines in murine periapical inflammation. Arch Oral Biol. 44 (1), 55-66 (1999).
  28. Balto, K., Müller, R., Carrington, D. C., Dobeck, J., Stashenko, P. Quantification of periapical bone destruction in mice by micro-computed tomography. J Dent Res. 79 (1), 35-40 (2000).
  29. Ramirez, I., et al. Is dental pulp inflammation capable of causing central inflammation, behavioral, and sensory alterations? A pre-clinical study. Arch Oral Biol. 177, 106320(2025).
  30. Li, J. G., et al. Melatonin attenuates inflammation of acute pulpitis subjected to dental pulp injury. Am J Transl Res. 7 (1), 66-78 (2015).
  31. Shi, X., Li, Z., He, Y., Jiang, Q., Yang, X. Effect of different dental burs for experimental induction of pulpitis in mice. Arch Oral Biol. 83, 252-257 (2017).
  32. Kim, S., Lee, S., Jung, H. S., Kim, S. Y., Kim, E. Development of a mouse model for pulp-dentin complex regeneration research: a preliminary study. Restor Dent Endod. 44 (2), e20(2019).
  33. Mohaved, S. B., et al. Apical periodontitis-induced mechanical allodynia: A mouse model to study infection-induced chronic pain conditions. Molecular Pain. 16, 1744806919900725(2020).
  34. Chung, M. K., Lee, J., Duraes, G., Ro, J. Y. Lipopolysaccharide-induced pulpitis up-regulates TRPV1 in trigeminal ganglia. J Dent Res. 90 (9), 1103-1107 (2011).
  35. Tang, Y., Yu, C., Li, F., Wang, H., Ye, L. Establishment of a Murine Pulp Exposure Model with a Novel Mouth-Gag for Pulpitis Research. J Vis Exp. (200), (2023).
  36. Xiao, Z., Xu, M., Lan, L., Xu, K., Zhang, Y. R. Activation of the P2X7 receptor in the dental pulp tissue contributes to the pain in rats with acute pulpitis. Mol Pain. 18, 17448069221106844(2022).
  37. Gantner, B. N., Simmons, R. M., Canavera, S. J., Akira, S., Underhill, D. M. Collaborative induction of inflammatory responses by dectin-1 and Toll-like receptor 2. J Exp Med. 197 (9), 1107-1117 (2003).
  38. Monroe, L. L., et al. Zymosan-Induced Peritonitis: Effects on Cardiac Function, Temperature Regulation, Translocation of Bacteria, and Role of Dectin-1. Shock. 46 (6), 723-730 (2016).
  39. Olynych, T. J., Jakeman, D. L., Marshall, J. S. Fungal zymosan induces leukotriene production by human mast cells through a dectin-1-dependent mechanism. J Allergy Clin Immunol. 118 (4), 837-843 (2006).
  40. Rosenzweig, H. L., Clowers, J. S., Nunez, G., Rosenbaum, J. T., Davey, M. P. Dectin-1 and NOD2 mediate cathepsin activation in zymosan-induced arthritis in mice. Inflamm Res. 60 (7), 705-714 (2011).
  41. Chattipakorn, S. C., Sigurdsson, A., Light, A. R., Narhi, M., Maixner, W. Trigeminal c-Fos expression and behavioral responses to pulpal inflammation in ferrets. Pain. 99 (1-2), 61-69 (2002).
  42. Kawanishi, H. N., Kawashima, N., Suzuki, N., Suda, H., Takagi, M. Effects of an inducible nitric oxide synthase inhibitor on experimentally induced rat pulpitis. Eur J Oral Sci. 112 (4), 332-337 (2004).
  43. Kawashima, N., Nakano-Kawanishi, H., Suzuki, N., Takagi, M., Suda, H. Effect of NOS inhibitor on cytokine and COX2 expression in rat pulpitis. J Dent Res. 84 (8), 762-767 (2005).
  44. Li, M., et al. Histology-based profile of inflammatory mediators in experimentally induced pulpitis in a rat model: screening for possible biomarkers. Int Endod J. 54 (8), 1328-1341 (2021).
  45. Rutherford, R. B., Gu, K. Treatment of inflamed ferret dental pulps with recombinant bone morphogenetic protein-7. Eur J Oral Sci. 108 (3), 202-206 (2000).
  46. Renard, E., et al. Immune Cells and Molecular Networks in Experimentally Induced Pulpitis. J Dent Res. 95 (2), 196-205 (2015).
  47. Cleaton-Jones, P., Duggal, M., Parak, R., Williams, S., Setzer, S. Pulpitis induction in baboon primary teeth using carious dentine or Streptococcus mutans. Sadj. 59 (3), 119-122 (2004).
  48. Eba, H., et al. The anti-inflammatory effects of matrix metalloproteinase-3 on irreversible pulpitis of mature erupted teeth. PLoS One. 7 (12), e52523(2012).
  49. Fuks, A. B., Jones, P. C., Michaeli, Y., Bimstein, E. Pulp response to collagen and glutaraldehyde in pulpotomized primary teeth of baboons. Pediatr Dent. 13 (3), 142-150 (1991).
  50. Oliveira, L. A., Barbosa, S. V. The reaction of dental pulp to Escherichia coli lipopolysaccharide and Enterococcus faecalis lipoteichoic acid. Braz J Microbiol. 34 (2), 179-181 (2003).

الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.

إعادة الطباعة والأذونات

طلب إذن لإعادة استخدام النص أو الأشكال في مقالة JoVE هذه

طلب إذن

الوسوم

NMRI
الفيديو قريباً

مقالات ذات صلة