تحضير مزرعة بكتيرية في التربة لعدوى العاثيات

ابدأ بلوحة زراعة تحتوي على مستعمرات معزولة لبكتيريا التربة.

قطف مستعمرة وتلقيح في قارورة ثقافة محشوشة تحتوي على وسط مغذي.

حضن الثقافة بالهز.

القارورة المحازرة تحتوي على نتلات داخلية تزيد من الاضطراب أثناء الاهتزاز، مما يعزز التهوية.

تضمن هذه العملية توزيع الأكسجين بشكل منتظم وتمنع تكتل الخلايا والترسيب، مما يسمح بتوزيع العناصر الغذائية بشكل متساو.

تتكاثر البكتيريا بسرعة، مكونة معلقا كثيفا مع خلايا تظهر خصائص فسيولوجية متجانسة.

على فترات منتظمة، اجمع عينة في الكوفيت.

باستخدام مقياس الطيف الضوئي، مرر الضوء عبر العينة. يتم قياس كمية الضوء المنقول لقياس نمو البكتيريا، المعروف بالكثافة البصرية أو الكثافة الزائدة (OD).

اختر المزارع البكتيرية في المرحلة الثابتة من الأس إلى المبكر، حيث تكون الخلايا في هذه المرحلة نشطة أيضيا عالية وبالتالي أكثر عرضة لعدوى العاثوم البكتيرية بكفاءة.

تزرع خلايا المفصليات من مستعمرات مخططة على صفيحة أجار LB، وتحضن عند درجة حرارة 30 درجة مئوية لمدة يومين إلى ثلاثة أيام.

استخدم حلقة معقمة لاختيار مستعمرة وأضفها إلى 50 ملليلتر من مرق LB في قارورة زراعة محبطة. حضن القارورة في حاضنة اهتزاز بسرعة 225 دورة في الدقيقة وعند 30 درجة مئوية لمدة تقارب 24 ساعة للحصول على خلايا الطور الأسي أو الثابت المبكر لتجارب عدوى الفاج.

راقب حالة نمو البكتيريا عن كثب لمنع دخول الخلايا إلى حالة النمو الثابت الوسطى إلى المتأخرة. الكمية المثالية_{من OD 600} لعزل الفاج تتراوح بين 0.5 و0.7.