موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 2:59 دقيقة • August 31st, 2026
خذ نبتة بطاطس منمّاة في المختبر (in vitro).
بعد ذلك، استخدم بكتيريا Agrobacterium مأشوبة، وهي ممرض نباتي يحتوي على حمض نووي ناقل (T-DNA).
يحمل الـ T-DNA جينوم فيروس البطاطس X كامل الطول، والذي تم هندسته لترميز RNA غير مشفر لعزل جزيئات microRNA نباتية محددة.
قم بتلقيح الأوراق بالبكتيريا وخدش الساق باستخدام عود أسنان مغطى بالبكتيريا.
في موقع التلقيح، تقوم البكتيريا بقطع T-DNA ونقله كحمض نووي DNA أحادي السلسلة إلى الخلايا النباتية.
باستخدام آليات المضيف، ينتج T-DNA الحمض النووي الريبي الجينومي الفيروسي، الذي يتضاعف ويعبر عن الأحماض النووية الريبية غير المشفرة والبروتينات الفيروسية.
يرتبط الحمض النووي الريبي غير المشفر بـ microRNAs المستهدفة في النبات، مما يمنعها من الارتباط بـ mRNAs المستهدفة ويؤدي إلى حدوث عيوب نمائية.
وفي هذه الأثناء، تشكل الحموض النووية الريبوزية الجينومية الفيروسية معقدات بروتينية نووية ريبوزية تنتشر جهازياً عبر الروابط الهيولية لتمكين إسكات microRNA في جميع أنحاء النبات.
تشير التشوهات الورقية، بما في ذلك النموات الخارجية غير الطبيعية والأوراق التي تتخذ شكل البوق، إلى الدور التطويري لجزيئات الـ microRNAs التي تم إسكاتها.
عندما تصل الكثافة الضوئية عند ستمئة نانومتر إلى 1.0، يتم جمع المزرعة السائلة من Agrobacterium عن طريق الطرد المركزي، ثم يُعاد تعليق الراسب في حجم كافٍ من
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية