تحريض التهاب الأمعاء والقولون الناخر في نموذج الأمعاء الظهارية البشري

احصل على الخبايا المشتقة من أنسجة الأمعاء الدقيقة البشرية — الغزوات الأنبوبية التي تحتوي على الخلايا الجذعية وأنواع مختلفة من الخلايا الظهارية.

أضف الخبايا المعوية إلى مصفوفة الطابق السفلي المبردة.

انقل هذا الخليط إلى صفيحة متعددة الآبار ، مما يخلق قبة ثلاثية الأبعاد.

أضف وسط النمو واحتضن.

تنظم الخلايا الجذعية ذاتيا وتتكاثر وتتمايز إلى أنواع متعددة من الخلايا المعوية ، وتشكل الغلاف المعوي.

بمرور الوقت ، تنضج الأمعاء إلى الأمعاء - هياكل ثلاثية الأبعاد ذاتية التجديد ، تشبه الخبايا المعوية.

أضف عديدات السكاريد الدهنية ، أو LPS ، وهو سم داخلي بكتيري ، إلى البئر المحتوي على الأمعاء واحتضنها.

ترتبط جزيئات LPS بالمستقبلات الشبيهة بالحصيلة في الأمعاء ، مما يؤدي إلى استجابة مؤيدة للالتهابات ، مما يؤدي إلى تراكم أنواع الأكسجين التفاعلية. يؤدي هذا إلى سلسلة من الأحداث التي تؤدي إلى موت الخلايا المبرمج.

وبالتالي ، تتعرض سلامة الأمعاء للخطر ، مما يؤدي إلى تغلغل LPS في التجويف ، مما يزيد من تكثيف الاستجابة الالتهابية.

هذا يحاكي تطور التهاب الأمعاء والقولون الناخر ، وهو التهاب حاد في أمعاء الأطفال الخدج.

في وقت التجميع في جناح العمليات ، ضع عينة الأنسجة المعوية الدقيقة البشرية في DPBS الباردة. اغسل العينة في DPBS البارد حتى تصبح خالية من الدم والبراز.

قم بتخزين العينة في وسط RPMI 1640 عند أربع در