مزمن انقباض في العصب الوركي والألم اختبار فرط الحساسية في الفئران

الهدف العام من هذا الإجراء هو إجراء الانقباض المزمن ، وإصابة العصب الوركي ، ونموذج القوارض شائع الاستخدام لألم الأعصاب ، والقياس الكمي لسلوكيات الألم الناتجة. يتم تحقيق ذلك عن طريق وضع أربعة أربطة أمعاء كرومية أولا حول العصب الوركي المكشوف عند مستوى منتصف الفخذ لإحداث إصابة انقباض في العصب الوركي. بعد ذلك ، راقب سلوكيات الألم في المخلب الخلفي في النقاط الزمنية المرغوبة عن طريق القياس الكمي لعتبة انسحاب المخلب إلى التحفيز الميكانيكي باستخدام von fray anthes وزمن انتقال انسحاب المخلب إلى التحفيز الحراري باستخدام مقياس تسكين الألم الأخمصي.

في النهاية يمكن الحصول على نتائج تظهر وجود ألم ميكانيكي وحراري ، وفرط حساسية المخلب الخلفي المصاب من خلال قياس استجابات الانسحاب المستحثة لكل من المحفزات الميكانيكية والحرارية. يمكن أن تساعدنا طريقة إصابة الأعصاب الطرفية التي طورها bene و Z لأول مرة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال الألم المزمن ، مثل الآليات المحيطية والمركزية التي يتم من خلالها إنشاء ألم الاعتلال العصبي. تمتد الآثار المترتبة على هذه التقنية إلى علاج آلام الاعتلال العصبي لأن هذا النموذج يوفر الأساس لفحص استراتيجيات جديدة لتقليل فرط حساسية الألم.

بشكل عام ، سيكافح الأفراد الجدد في هذه الطريقة لأن وضع خيوط الأمعاء القوية حول العصب الساكن والضيق المناسب لإحداث إصابة كافية للأعصاب ولكن ليس مفرطة يمثل تحديا خاصا. لبدء هذا الإجراء ، قم بتطهير سطح العمل الجراحي بنسبة 70٪ من الإيثانول وقم بإعداد الأدوات المعقمة ودبابيس الشاش والمسحات ، والتي تم تعقيمها مسبقا. بعد ذلك ، قم بتخدير الفئران في غرفة الحث باستخدام 5٪ فلور ISO.

قم بتوصيل 2٪ فلور ISO إليها من خلال قناع وجه مخصص أثناء الجراحة. بعد ذلك ، احلق الساق الخلفية اليسرى للفأر ، ثم ضع على حصيرة تسخين منظمة بالحرارة عند 37 درجة مئوية. ضع مرهم ترزيق للعيون على العينين.

ثم قم بإعداد خياطة الأمعاء الكرومية عن طريق تقطيعها إلى قطع صغيرة يبلغ طولها حوالي ثلاثة سنتيمترات ، واغمرها في محلول ملحي معقم. بعد ذلك ، قم بتعقيم المنطقة المحلوقة بثلاثة تطبيقات بديلة للكحول ومحلول اليود. مع استلقاء على صدره ، ارفع ساقه الخلفية اليسرى وامسك عظم الفخذ عند 90 درجة إلى العمود الفقري باستخدام شريط لاصق على القدم.

ثم قم بعمل شق في الجلد بحوالي ثلاثة إلى أربعة ملليمترات تحت عظم الفخذ. افصل الجلد عن العضلة المحيطة بالشق عن طريق قطع النسيج الضام. استخدم مقصا غير حاد لقطع النسيج الضام بين الألوية السطحية وعضلات العضلة ذات الرأسين.

بعد ذلك ، استخدم ضام لتوسيع الفجوة بين العضلتين للسماح بالتصور الواضح للعصب الوركي ، ثم استخدم الملقط والمقص الدقيق لتحرير ما يقرب من 10 ملليمترات من العصب الوركي برفق من النسيج الضام المحيط. اربط الرباط الأول القريب من التشعب الثلاثي للعصب الوركي لكل رباط ابدأ بحلقة واحدة فضفاضة.

ثم أمسك الطرفين بالقرب من الحلقة واسحبها حتى تصبح الحلقة بالكاد دافئة ولا ينزلق الرباط على طول العصب. ثم أمسك الحلقة في موضعها الصحيح وضع حلقة ثانية أعلى الحلقة الأولى لإكمال العقدة. بعد ذلك ، يجب أن يكون انقباض العصب ضئيلا ، حيث يجب أن يكون انقباض العصب ضئيلا.

كرر الخطوات الخاصة بالأربطة الثلاثة المتبقية عن طريق ربط كل رباط إضافي بمقدار ملليمتر أكثر من السابق. أيضا مع الحد الأدنى من الانقباض في نهاية الجراحة ، استخدم الغرز لإغلاق طبقة العضلات ودبابيس لربط الجلد. بعد ذلك ، استخدم محلول اليود لتعقيم الجرح.

راقب عن كثب خلال فترة التعافي من التخدير واتركه يتعافى في قفص منفصل مع فراش ورقي مسطح. قبل بدء التجربة. تعامل مع يوميا لعدة أيام.

ثم قبل الاختبار السلوكي ، اعتاد على الفئران في العلبة. يجب أن تظل بيئة الاختبار هادئة ومضبوطة جيدا مع مستويات ثابتة من درجة الحرارة والرطوبة ، ويجب إجراء كل جلسة اختبار في وقت مماثل من اليوم. لدراسة عتبة الانسحاب الميكانيكية في يوم الاختبار ، ضع الجرذ في قفص اختبار الأرضية الشبكية المرتفعة ، قبل 15 إلى 30 دقيقة من التجربة باستخدام أخمص أخمصية ديناميكية ، ضع وحدة محفز اللمس مع الفتيل مباشرة أسفل سطح الغراس الأوسط للمخلب الخلفي واضغط على مفتاح البدء.

هذا يرفع الفتيل لتحفيز سطح الغراس ميكانيكيا للمخلب الخلفي بقوة متزايدة. بعد ذلك ، سجل عتبة الانسحاب الميكانيكي من كل من الكفوف الخلفية المصابة وغير المصابة. يسجل هذا الجهاز تلقائيا ويعرض الحد الأقصى للرد الفعل المقدم عند الانسحاب.

كرر التحفيز الميكانيكي ثلاث مرات بفاصل زمني يبلغ حوالي خمس دقائق بين اختبار المنبهات والكفوف الخلفية غير المصابة بترتيب متوازن ، ثم احسب متوسط عتبات سحب المخلب. لدراسة زمن انتقال الانسحاب الحراري في يوم الاختبار ، ضع الفئران في الأرضية الزجاجية. اختبار القفص قبل 15 إلى 30 دقيقة من التجربة باستخدام أداة تسكين الغراس الحراري ، ضع مصدر الأشعة تحت الحمراء مباشرة أسفل سطح الغراس الأوسط للمخلب الخلفي واضغط على مفتاح البدء.

هذا يعرض سطح الغراس للمخلب الخلفي لشعاع من الحرارة المشعة من خلال سطح زجاجي شفاف. ثم سجل زمن انتقال الانسحاب من كل من الكفوف الخلفية المصابة وغير المصابة. يسجل هذا الجهاز تلقائيا الوقت المستغرق من بداية التحفيز الحراري إلى سحب المخلب من مصدر الحرارة.

كرر التحفيز الحراري ثلاث مرات على الأقل بفاصل زمني يبلغ حوالي خمس دقائق بين اختبار المحفزات للمخالب الخلفية المصابة وغير المصابة بترتيب متوازن ، ثم احسب متوسط انسحاب المخلب يوضح زمن الانتقال هنا عتبة الانسحاب الميكانيكي في كل من الكفوف المصابة وغير المصابة لفئران الوستار قبل وحتى 12 يوما بعد الانقباض المزمن للعصب الوركي. هناك انخفاض كبير في عتبة انسحاب المخلب إلى المحفزات الميكانيكية في المخلب الخلفي المماثل المصاب مقارنة بالمخلب الخلفي المقابل غير المصاب. يظهر هنا زمن انتقال الانسحاب الحراري في كل من الكفوف المصابة وغير المصابة قبل وحتى 12 يوما بعد الانقباض المزمن للعصب الوركي.

وبالمثل ، يتم تقليل زمن انتقال الانسحاب الحراري بشكل كبير في المخلب الخلفي المماثل المصاب مقارنة بالمخلب الخلفي المقابل غير المصاب. بمجرد إتقان جراحة CCI ، يمكن إجراؤها بشكل صحيح في أقل من 20 دقيقة لكل ، مما يؤدي إلى ألم طويل الأمد وفرط حساسية للمخلب الخلفي. أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر ربط الأربطة بشكل فضفاض لأنها الخنق الذاتي أسفل الأربطة بعد الوذمة ، مما يسبب انقباضا بعد تطوره.

هذه التقنية لإصابة الأعصاب الطرفية جنبا إلى جنب مع اختبار فرط حساسية الألم موجة P للباحثين في مجال آلام الأعصاب لاستكشاف الآليات الكامنة وراء الألم المزمن بسبب إصابة الأعصاب.