Name: للسماح المستهدفة نموذج الفئران من تعطيل حاجز الدم في الدماغ التداوي عائي عصبي (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-11-30T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 43 s
Description: تعلم كيفية تعطيل حاجز الدم في الدماغ في نموذج الفئران باستخدام المانيتول عن طريق القسطرة الشريانية. تُحسّن هذه الطريقة من توصيل الأدوية العلاجية إلى الدماغ وتُسهّل اختبار العلاجات الجديدة.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

وأيد هذا العمل من قبل مؤسسة مارشال JB.

1. إعداد الحيوانية والمعدات اللازمة لإجراء <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قبل البدء في الجراحة، واعداد منطقة الجراحية والحيوان. جعل القسطرة السباتي عن طريق إدخال إبرة قياس 23-حادة في واحدة من نهاية 12 &quot;من PE50 الأنابيب. قص شطبة ° 45 تقريبا في الطرف الآخر من القسطرة. تعقيم المعدات قبل الإجراء. ارتداء غطاء الشعر، قناع جراحي ، وقفازات معقمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع وسادة التدفئة على السطح حيث سيتم إجراء الجراحة. تفعيلها والسماح لها لتدفئة. تغطية المنطقة مع وسادة مقعد ماصة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحقق من أن لديك مانيتول 25٪ في حل من دون البلورات. إذا بلورات موجودة، ويحل لهم عن طريق وضع القارورة في حمام الماء الساخن في C ° 80 و تهييج دوري. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تسجيل الشامل للحيوان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل تخفيف البروبوفول للتسليم بنسبة 0.8 مغ / كغ / دقيقة بمعدل 0.1 مل / دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الفئران في المربع التعريفي لمدة 3 دقائق. الإعدادات: 5٪ isoflurane، 2 لتر / دقيقةمعدل التدفق على التنفس الصناعي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> على رأس منشفة واحدة، يحلق الرقبة والفخذين الداخلية على حد سواء. </li></ol> 2. ينبب الفأر <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الحيوان مرة أخرى في المربع التعريفي لمدة 3 دقائق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد أنبوب القصبة الهوائية الخاصة بك مع قسطرة IV. لهذا الحجم وسلالة من الفئران، ونحن استخدام القسطرة GA 18. يجب أن يكون الأنبوب كبيرة بما يكفي لتسمح بتدفق الهواء كافية، ولكن صغيرة بما يكفي لتناسب في القصبة الهوائية دون التسبب في اضرار. سحب الإبرة خارج للقسطرة بلاستيكية وكسر تقريبا بعناية الإبرة. 1 سم من طرفها الحاد. سوف تكون الإبرة bunted القلم الخاص بك. وضع إبرة في الظهر القسطرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> شنق الفئران من أنيابها على سطح الزاوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تسليط الضوء مباشرة ضد رقبة الحيوان واصطف بين أذنيه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اضافة الى وجود حوالي ملعقة صغيرة. 3 سم في البلعوم. رفع إلى أعلى في حين سحب اللسان برفق من الفم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تصور افتتاح القصبة الهوائية. سوف تقوم SEعصام ثقب صغير فتح وإغلاق مع كل نفس. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج القسطرة برفق في الحفرة. يمكنك أن تشعر في بعض الأحيان البلاستيك أدخل غضروف القصبة الهوائية. القصبة الهوائية حساسة. لا قوة القسطرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعيين التنفس الصناعي إلى 1 لتر / دقيقة وBPM 60 وisoflurane إلى 2٪. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> توصيل القسطرة إلى التنفس الصناعي والشريط الأنبوب على سطح التشغيل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التحقق من الحيوان للتخدير عن طريق إجراء قرصة أخمص قدميه. </li></ol> 3. إنشاء البروبوفول IV التخدير <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تأمين الفئران عن طريق تسجيل جميع أطرافه الأربعة وذيل إلى السطح التشغيل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فرك الرقبة حلق والمواقع الفخذ مع الصابون الكلورهيكسيدين ثلاث مرات. ثم فرك مع الكلورهيكسيدين شطف ثلاث مرات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نعلق حقنة من البروبوفول لمجموعة التمديد الرابع. تحميل الحقنة على مضخة التسريب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام مشرط، وقطع من خلال الجلد من الفخذ حلق. تجنب قطع العضلات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فتح شق بقوةPS لتصور الوريد الفخذي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> سحب بعيدا الأنسجة على الشريان لفضح السفينة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج في 26 GA monoject قسطرة IV البيطرية في الوريد. عندما الإبرة ثقوب جدار الوريد سوف تشعر أنها تصبح أسهل لدفع. سحب الإبرة ودفع القسطرة في الإناء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدء ضخ البروبوفول عند 0.1 مل / دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 3-5 دقيقة بعد بدء التسريب البروبوفول، والتحول إلى الغاز التخدير خليط من 50٪ O 2 و 50٪ N O 2 واغلاق isoflurane. </li></ol> 4. كشف والتشعب من الشريان السباتي المشترك <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجراء شق خط الوسط في الرقبة مع شفرة المشرط. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع ما بين الغدد اللعابية كبيرة مع 2 مقص أو مشرط. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تشريح الأنسجة الجانبي بعيدا إلى خط الوسط لفضح الشريان السباتي. استخدام ملقط لفتح طبقات من الأنسجة. يمكنك استخدام مقص لإزالة القطع التي تعرض مع ملقط وتحديد أن تكون minimallذ الأوعية الدموية. السيطرة على النزيف بشاش، ومسحات القطن، والكي إذا لزم الأمر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 3 مل حقن IP المالحة إذا كان هناك نزيف حاد معتدلة إلى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام الكامشات لسحب الأنسجة بعيدا عن السباتي. العثور على التشعب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فضح الشريان القذالي البعيدة لمجرد والتشعب. كوى من بين ملقط وفصلها مع كاو كهربي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام ملقط للكشف تماما عن التشعب السباتي وأكبر قدر من اللجنة الاقتصادية لأفريقيا ممكن. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فضح الشريان متفوقة الغدة الدرقية المتفرعة من اللجنة الاقتصادية لأفريقيا البعيدة إلى الشريان القذالي. كوى من بين ملقط وفصلها مع كاو كهربي. </li></ol> 5. يقثطر في الشريان السباتي الخارجي <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مكان 2 أطوال 4/0 في إطار اللجنة الاقتصادية لأفريقيا الحرير. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الاستيلاء 1 طول الخيط مع مرقئ من الخاص والتراجع عن اللجنة الاقتصادية لأفريقيا نحو caudally الظهر (نحو قدم في الجرذ). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اتخاذ خياطة الأخرى وربط بقدر cranially (نحو فم فأر) كما ث ممكنإيث الجراح عقدة. هذا يشكل ربطة دائم للتضحية اللجنة الاقتصادية لأفريقيا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة مرقئ الأول (الذي تم تطبيق التوتر الذيلية) والاستيلاء على خياطة أخرى (واحد هو معقود حول ECA) وتطبيق التوتر طيف cranially مع مرقئ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ربط عقدة أخرى فضفاضة الجراح (لا تأمين - ترك تعادل بالكاد) البعيدة إلى التشعب والأقرب إلى ربطة دائمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ري مع 1٪ ليدوكائين لتخفيف الشريان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ملء الخاص بك مع القسطرة المالحة heparinized. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع مقطع سفينة مؤقتة في أقرب وقت ممكن إلى التشعب. المكان كليب السفينة بزاوية لزيادة المساحة للقسطرة. حرك عقدة فضفاضة نحو كليب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل بضع الشريان صغيرة (قطع) في اللجنة الاقتصادية لأفريقيا القريبة عادل للرباط باستخدام microscissors. ينبغي ألا يكون هناك نزيف وإذا ضمد مقطع آمنة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام ملقط للسيطرة على جدران اللجنة الاقتصادية لأفريقيا، وإطعام نهاية مشطوف للقسطرة في الإناء. </lط&gt; <li style=";text-align:right;direction:rtl"> تأمين القسطرة مع عقدة خياطة فضفاضة. ربط الشريان حول القسطرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة مقطع وتنظيف المنطقة مع مسحة القطن. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> دفع القسطرة إلى حوالي 1 مم القاصي إلى التشعب. عقد الشريان مع ملقط الأقرب إلى عقدة لضمان يجمد السفينة. </li></ol> 6. إدارة المانيتول <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ملء 8 التمديد الرابع &quot;مجموعة وحقنة 6 مل مع مانيتول دون خلق أي فقاعات الهواء تخزين هذه في الحاضنة في 37 ° C. ملاحظة: العمل بسرعة مع مانيتول - سوف يعجل من حل بسهولة في درجة حرارة الغرفة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> من أجل رؤية BBBD، قد صبغ إدارة ايفانز الأزرق ومشاهدته دخول مناطق الدماغ حيث تعطلت الجدار. للقيام بذلك، وإعطاء الحيوان 2 مل / كجم من الأزرق ايفانز 2٪ من خلال موقع IV جديدة على الساق المقابل إلى ضخ البروبوفول. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إرفاق تمديد تعيين إلى 5 ميكرومترات تصفية وملء مع مانيتول لإزالة الهواء بوبBLES. ثم، تعلق ذلك إلى محبس دون خلق الفقاعات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدارة مانيتول في ثوانى مل / ثانية لمدة 25 0.09. لمشاهدة مانيتول للوصول إلى التوازن مع تدفق في الشريان السباتي المشترك في نقطة القريبة عادل لICA. يجب أن يبدو كأنه ينبض مع معدل ضربات القلب في الجرذ. إذا كانت تدفقات مانيتول ببساطة أسفل نحو القلب والتغلب على ضغط الفئران كنت في الدم. هذا يمكن أن يسبب مضاعفات تهدد الحياة وBBBD الفقراء. </li></ol>

<ol><li>Abbott, N. J., Patabendige, A. A. K., Dolman, D. E. M., Yusof, S. R., Begley, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+function+of+the+blood-brain+barrier%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiology+of+disease%22%5BJournal%5D)">Structure and function of the blood-brain barrier.</a> Neurobiology of disease. 37, 13-25 (2010).</li>
<li>Smith, Q. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Blood-Brain+Barrier%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">The Blood-Brain Barrier.</a> 89, 193-208 (2003).</li>
<li>Kroll, R. A., Neuwelt, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outwitting+the+blood-brain+barrier+for+therapeutic+purposes%3A+osmotic+opening+and+other+means%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Outwitting the blood-brain barrier for therapeutic purposes: osmotic opening and other means.</a> Neurosurgery. 42, 1083(1998).</li>
<li>Kroll, R. A., Pagel, M. A., Muldoon, L. L., Roman-Goldstein, S., Neuwelt, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increasing+volume+of+distribution+to+the+brain+with+interstitial+infusion%3A+dose%2C+rather+than+convection%2C+might+be+the+most+important+factor%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Increasing volume of distribution to the brain with interstitial infusion: dose, rather than convection, might be the most important factor.</a> Neurosurgery. 38, 746-754 (1996).</li>
<li>Butt, A. M., Jones, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+histamine+and+antagonists+on+electrical+resistance+across+the+blood-brain+barrier+in+rat+brain-surface+microvessels%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+research%22%5BJournal%5D)">Effect of histamine and antagonists on electrical resistance across the blood-brain barrier in rat brain-surface microvessels.</a> Brain research. 569, 100-105 (1992).</li>
<li>Inamura, T., Black, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bradykinin+selectively+opens+blood-tumor+barrier+in+experimental+brain+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Bradykinin selectively opens blood-tumor barrier in experimental brain tumors.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 14, 862-870 (1994).</li>
<li>Matsukado, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+tumor+uptake+of+carboplatin+and+survival+in+glioma-bearing+rats+by+intracarotid+infusion+of+bradykinin+analog%2C+RMP-7%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Enhanced tumor uptake of carboplatin and survival in glioma-bearing rats by intracarotid infusion of bradykinin analog, RMP-7.</a> Neurosurgery. 39, 125(1996).</li>
<li>Kroll, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+drug+delivery+to+intracerebral+tumor+and+surrounding+brain+in+a+rodent+model%3A+a+comparison+of+osmotic+versus+bradykinin+modification+of+the+blood-brain+and%2For+blood-tumor+barriers%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Improving drug delivery to intracerebral tumor and surrounding brain in a rodent model: a comparison of osmotic versus bradykinin modification of the blood-brain and/or blood-tumor barriers.</a> Neurosurgery. 43, 879(1998).</li>
<li>Kinoshita, M., McDannold, N., Jolesz, F. A., Hynynen, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+localized+delivery+of+Herceptin+to+the+mouse+brain+by+MRI-guided+focused+ultrasound-induced+blood-brain+barrier+disruption%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Noninvasive localized delivery of Herceptin to the mouse brain by MRI-guided focused ultrasound-induced blood-brain barrier disruption.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 103, 11719-11723 (2006).</li>
<li>Neuwelt, E. A., Dahlborg, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemotherapy+administered+in+conjunction+with+osmotic+blood-brain+barrier+modification+in+patients+with+brain+metastases%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+neuro-oncology%22%5BJournal%5D)">Chemotherapy administered in conjunction with osmotic blood-brain barrier modification in patients with brain metastases.</a> Journal of neuro-oncology. 4, 195-207 (1987).</li>
<li>Doolittle, N. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+and+efficacy+of+a+multicenter+study+using+intraarterial+chemotherapy+in+conjunction+with+osmotic+opening+of+the+blood-brain+barrier+for+the+treatment+of+patients+with+malignant+brain+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Safety and efficacy of a multicenter study using intraarterial chemotherapy in conjunction with osmotic opening of the blood-brain barrier for the treatment of patients with malignant brain tumors.</a> Cancer. 88, 637-647 (2000).</li>
<li>Guillaume, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intra-arterial+chemotherapy+with+osmotic+blood-brain+barrier+disruption+for+aggressive+oligodendroglial+tumors%3A+results+of+a+phase+I+study%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Intra-arterial chemotherapy with osmotic blood-brain barrier disruption for aggressive oligodendroglial tumors: results of a phase I study.</a> Neurosurgery. 66, 48(2010).</li>
<li>Remsen, L. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+anesthetic+choice%2C+PaCO2%2C+and+other+factors+on+osmotic+blood-brain+barrier+disruption+in+rats+with+brain+tumor+xenografts%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesia+%26+Analgesia%22%5BJournal%5D)">The influence of anesthetic choice, PaCO2, and other factors on osmotic blood-brain barrier disruption in rats with brain tumor xenografts.</a> Anesthesia & Analgesia. 88, 559-559 (1999).</li>
<li>Nilaver, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delivery+of+herpesvirus+and+adenovirus+to+nude+rat+intracerebral+tumors+after+osmotic+blood-brain+barrier+disruption%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Delivery of herpesvirus and adenovirus to nude rat intracerebral tumors after osmotic blood-brain barrier disruption.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 92, 9829(1995).</li>
<li>Fortin, D., McCormick, C. I., Remsen, L. G., Nixon, R., Neuwelt, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unexpected+neurotoxicity+of+etoposide+phosphate+administered+in+combination+with+other+chemotherapeutic+agents+after+blood-brain+barrier+modification+to+enhance+delivery%2C+using+propofol+for+general+anesthesia%2C+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Unexpected neurotoxicity of etoposide phosphate administered in combination with other chemotherapeutic agents after blood-brain barrier modification to enhance delivery, using propofol for general anesthesia, in a rat model.</a> Neurosurgery. 47, 199(2000).</li>
<li>Neuwelt, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primary+CNS+lymphoma+treated+with+osmotic+blood-brain+barrier+disruption%3A+prolonged+survival+and+preservation+of+cognitive+function%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+clinical+oncology%22%5BJournal%5D)">Primary CNS lymphoma treated with osmotic blood-brain barrier disruption: prolonged survival and preservation of cognitive function.</a> Journal of clinical oncology. 9, 1580(1991).</li>
<li>Remsen, L. G., Trail, P. A., Hellström, I., Hellström, K. E., Neuwelt, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+delivery+improves+the+efficacy+of+a+tumor-specific+doxorubicin+immunoconjugate+in+a+human+brain+tumor+xenograft+model%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Enhanced delivery improves the efficacy of a tumor-specific doxorubicin immunoconjugate in a human brain tumor xenograft model.</a> Neurosurgery. 46, 704(2000).</li>
<li>Neuwelt, E. A., Pagel, M. A., Kraemer, D. F., Peterson, D. R., Muldoon, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+marrow+chemoprotection+without+compromise+of+chemotherapy+efficacy+in+a+rat+brain+tumor+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacology+and+Experimental+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Bone marrow chemoprotection without compromise of chemotherapy efficacy in a rat brain tumor model.</a> Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 309, 594-599 (2004).</li>
</ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

هناك عدد قليل من وسائل تعظيم فعالية BBBD. من المهم للحد من النزيف أثناء مرحلة قطع أسفل. يمكن أن تتأثر ضغط الدم ومعدل ضربات القلب من نزيف كبير وتعرف هذه العوامل تؤثر على درجة BBBD 13. ويمكن تخفيض النزيف باستخدام الخيوط الجراحية لligate السفن الكبرى، مثل الغدة الدرقية متفوقة والشرايين القذالي، الذي يجب أن تقسم. بالإضافة إلى ذلك، يمكن استخدام كاو كهربي لتقسيم السفن وتشريح المناطق التي لديها إمدادات الدم الغني. من المهم أيضا للحفاظ على الهواء والمواد الصلبة من كل الخطوط وضع...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم المادة </td><td> شركة </td><td> كتالوج رقم </td><td> تعليق </td></tr><tr><td> ايفانز طويلة الفئران </td><td> هارلان المختبرات </td><td></td><td> 210-250 غرام، ذكر </td></tr><tr><td> PE 50 أنابيب </td><td> بيكتون ديكنسون </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 18 مقياس × 2.5 &quot;رابعا القسطرة </td><td> تيرومو </td><td></td><td> لأنبوب ET </td></tr><tr><td> 30 ملحق IV &quot;يحدد </td><td> ابوت </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 26 قسطرة قياس IV البيطرية </td><td> Monoject </td><td></td><td></td></tr><tr><td> ايفانز الأزرق صبغ </td><td> سيجما </td><td> E2129 </td><td></td></tr><tr><td> ثنائي القطب </td><td> كودمان </td><td></td><td></td></tr><tr><td> التصفية، 5 ميكرون </td><td> براون </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

للسماح المستهدفة نموذج الفئران من تعطيل حاجز الدم في الدماغ التداوي عائي عصبي

Rat Model of Blood-brain Barrier Disruption to Allow Targeted Neurovascular Therapeutics

الخلايا البطانية مع منعطفات ضيقة على طول الغشاء القاعدي مع والقدمين نهاية نجمية تحيط الأوعية الدموية الدماغية لتشكيل حاجز الدم في الدماغ 1. حاجز انتقائي يستثني جزيئات من عبور بين الدم والدماغ على أساس حجمها والاتهام. وهذا يمكن أن تعرقل وظيفة تقديم العلاج للاضطرابات العصبية. وهناك عدد من الأدوية العلاج الكيميائي، على سبيل المثال، لن يعبر بشكل فعال حاجز الدم في الدماغ لتصل إلى الخلايا السرطانية 2. وهكذا، تحسين تقديم المخدرات عبر حاجز الدم في الدماغ هي منطقة ذات أهمية. الأساليب الأكثر انتشارا لتعزيز إيصال الأدوية إلى الدماغ هي ضخ الدماغي المباشرة وحاجز الدم في الدماغ تعطل 3. ضمانات مباشرة داخل المخ التي التسريب العلاجات تصل إلى المخ، ولكن هذا الأسلوب لديه قدرة محدودة لتفريق المخدرات 4. انقطاع الدم في الدماغ حاجز (BBBD) سورةأدنى مستوى لتدفق المخدرات مباشرة من نظام الدورة الدموية في الدماغ، وبالتالي أكثر فعالية إلى الخلايا السرطانية المشرد. ثلاث وسائل للتعطيل حاجز تشمل التناضحي تعطيل الحاجز، حاجز تعطيل الدوائية، والموجات فوق الصوتية المركزة مع microbubbles. تعطل التناضحي، رائدها Neuwelt، ويستخدم حل مفرط التوتر من مانيتول 25٪ أن يجفف خلايا حاجز الدم في الدماغ مما يسبب لهم يتقلص وتعطيل تقاطعات ضيقة بهم. ويمكن أيضا أن يتحقق تعطيل حاجز دواء فعال في الأوعية مع مركبات مثل الهستامين 5 و 6 براديكينين. هذا الأسلوب، ومع ذلك، هو انتقائية في المقام الأول لحاجز الدماغ للورم 7. بالإضافة إلى ذلك، تم العثور على RMP-7، وهو التناظرية من الببتيد براديكينين، ليكون أدنى بالمقارنة رأسا لرأس مع BBBD التناضحي مع مانيتول 25٪ 8. كما تم طريقة أخرى، تركز الموجات فوق الصوتية (FUS) جنبا إلى جنب مع عوامل التباين microbubble الموجات فوق الصوتية، أظهرتلفتح عكسية حاجز الدم في الدماغ 9. بالمقارنة مع الفتح الرباطي، على الرغم من مانيتول 25٪ لديها أطول تاريخ في سلامة المرضى من البشر التي تجعل منه أداة ثبت للبحوث متعدية 10-12. من أجل إنجاز BBBD، يجب أن يتم تسليم مانيتول بمعدل مرتفع للتداول مباشرة في الدماغ الشرايين. في البشر، ويسترشد قسطرة واللف إلى الدماغ حيث يمكن تحقيق سريع، وتدفق المباشر. BBBD هذه النماذج بروتوكول الإنسان عن كثب وقت ممكن. بعد قطع لأسفل والتشعب من الشريان السباتي المشترك، يتم إدراج قسطرة الوراء في اللجنة الاقتصادية لأفريقيا والتي استخدمت في نقل مانيتول مباشرة في الشريان السباتي الداخلي (ICA) الدورة الدموية. وتستخدم البروبوفول والتخدير N O 2 لقدرتها على تحقيق أقصى قدر من الفعالية من التعطيل حاجز 13. إذا نفذت بشكل صحيح، هذا الإجراء لديه القدرة على بأمان وفعالية، وفتح عكسية حاجز الدم في الدماغ ويمبروفه إيصال الأدوية التي لا تصل عادة الدماغ 8،13،14.

<img alt="الشكل 1" src="/files/ftp_upload/50019/50019fig1.jpg" /> الشكل 1. تصور الدم في الدماغ تعطل حاجز التسرب عبر ايفانز صبغة زرقاء. ايفانز الأزرق هو صبغة صبغ التي تربط لالزلال ولم يتم extravasated في الدماغ تحت الظروف الفسيولوجية. تعطيل حاجز الدم في الدماغ على جانب واحد من الدماغ يسمح ايفانز الأزرق للدخول وصمة عار في نصف الكرة الزرقاء تعطلت في حين أن نصف الكرة غير تعطلت لم يتغير. وبالتالي، فمن علامة مفيدة لتعطيل حاجز ا...

انقطاع الدم في الدماغ الحاجز يساعد على إيصال بعض الأدوية إلى الدماغ. سلمت مانيتول داخل الخلايا تنكمش arterially المحيطة الأوعية الدموية من أجل تعطيل جسديا الجدار.

Endothelial cells with tight junctions along with the basement membrane and astrocyte end feet surround cerebral blood vessels to form the blood-brain ...

الهدف العام من هذا الإجراء هو تعطيل الحاجز الدموي الدماغي. يتم تحقيق ذلك عن طريق وضع أولا على التخدير الوريدي باستخدام مجرى الهواء الرغامي. بعد ذلك ، يتم الكشف عن تشعب الشريان السباتي المشترك.ثم يتم إدخال قسطرة في الشريان السباتي الخارجي. أخيرا ، يتم إعطاء المانيتول. في النهاية ، يمكن الحصول على نتائج تظهر اضطراب الحاجز الدموي الدماغي من خلال إسقاط صبغة إيفان الزرقاء.الميزة الرئيسية لهذه التقنية على الطرق الحالية للعلاج داخل الشرايين هي أنها تسمح للأدوية بدخول الدماغ ، والتي لا تعبر عادة الحاجز الدموي الدماغي في ظل الظروف الفسيولوجية. هذا له آثار في مجال علم الأعصاب لأنه يسمح لنا باختبار علاجات جديدة لديها قدرة ضعيفة على عبور الحاجز الدموي الدماغي. تمتد الآثار المترتبة على هذه التقنية إلى علم الأورام العصبية لأن العديد من عوامل العلاج الكيميائي لا تعبر الحاجز الدموي الدماغي.حسنا ، على الرغم من أن هذه الطريقة توفر لنا نظرة ثاقبة على علم الأورام الجديد ، إلا أنها يمكن أن توفر لنا أيضا معلومات عن الاضطرابات العصبية الأخرى التي تعالج بالأدوية ذات نفاذية الحاجز الدموي الدماغي الضعيفة. نأمل أن يسمح العرض المرئي لهذه الطريقة للباحثين والمطلعين على جراحة باستخدام هذه التقنية في مختبراتهم. للبدء ، قم بإعداد محلول 25٪ مانيتول وتحقق من عدم وجود بلورات.في حالة وجود بلورات ، قم بإذابتها عن طريق وضع القارورة في حمام مائي 80 درجة مئوية وتحريكها. سجل بشكل دوري كتلة وقم بإعداد حقنتين 12 سم مكعب من البروبوفول ليتم تسليمهما بمعدل 0.1 مل في الدقيقة. بعد تخدير في غرفة الحث ، ضعه على منشفة يمكن التخلص منها وحلق رقبته وفخذيه الداخليين.ضع مرة أخرى في غرفة الحث لمدة ثلاث دقائق. للتحضير للتنبيب لتنبيب الفئران ، ابدأ بإعداد أنبوب بطاني قصيري بقسطرة وريدية. يجب أن يكون الأنبوب كبيرا بما يكفي للسماح بتدفق الهواء الكافي ، ولكنه صغير بما يكفي ليتناسب مع القصبة الهوائية دون التسبب في ضرر.لعمل قلم ، اسحب الإبرة من القسطرة البلاستيكية وكسر الإبرة بعناية. على بعد سنتيمتر واحد تقريبا من طرفها الحاد ، ضع الإبرة مرة أخرى في القسطرة. بعد ذلك ، قم بتعليق الجرذ من أسنانه على سطح بزاوية ، وسلط ضوءا مباشرة على رقبة المصطفة بين أذنيه.بعد ذلك ، أدخل ملعقة صغيرة في البلعوم الفموي. حوالي ثلاثة سنتيمترات. ارفع لأعلى مع سحب اللسان برفق من الفم.تخيل فتحة القصبة الهوائية على أنها ثقب صغير يفتح ويغلق. مع كل نفس ، أدخل القسطرة برفق في الحفرة ، مع التأكد من عدم إجبارها على الدخول في غضروف القصبة الهوائية الحساسة. اضبط جهاز التنفس الصناعي على لتر واحد في الدقيقة و 60 نبضة في الدقيقة ثم الفلور على 2٪ ثم قم بتوصيل القسطرة بجهاز التنفس الصناعي وقم بربط الأنبوب بسطح التشغيل.تحقق من تخدير عن طريق إجراء قرصة إصبع القدم. قم بتأمين المسار عن طريق لصق جميع الأطراف الأربعة في الذيل على سطح التشغيل. افرك حلق الرقبة ومواقع الفخذ بصابون الكلورهيكسيدين ثلاث مرات.ثم فرك مع الكلورهيكسيدين. اشطف ثلاث مرات. قم بتوصيل حقنة من البروبوفول بمجموعة تمديد IV وقم بتركيب المحقنة على مضخة التسريب.بعد ذلك ، باستخدام مشرط يقطع جلد الفخذ المحلوق دون قطع العضلات. ثم استخدم الملقط لفتح الشق وتحديد موقع الوريد الفخذي وسحب الأنسجة فوق الشريان لكشف الوعاء. أدخل قسطرة بيطرية أحادية الإخراج 26 جم في الوريد.بمجرد أن تثقب الإبرة جدار الوريد ، سيصبح من الأسهل دفعها. اسحب الإبرة وادفع القسطرة إلى الوعاء لمدة ثلاث إلى خمس دقائق. بعد البدء في تسريب البروبوفول ، قم بتبديل غاز التخدير إلى خليط من 50٪ O2 و 50٪ N two O وأغلق الفلور.لفضح تشعب الشريان السباتي المشترك ، ابدأ باستخدام شفرة مشرط لعمل شق في خط الوسط في الرقبة. اقطع الوجه السطحي على طول خط الوسط للوصول إلى العضلة اللامية القصية فوق القصبة الهوائية. حرك الأنسجة بعيدا بشكل جانبي لتصور مجموعة من ثلاث عضلات ، اللامي القصي ، ثنائي المعدة ، والخشاء القصي الذي شكل مثلث الشريان السباتي للفئران بالملقط أو المقص.افصل اللفافة بين عضلات المثلث السباتي لفضح الشريان السباتي. استخدم الكي ثنائي القطب لتقسيم الأوعية الصغيرة جنبا إلى جنب مع الشاش ومسحات القطن للسيطرة على النزيف ، استخدم المباعدات لفصل العضلات بالملقط. حرك الأنسجة من الشريان السباتي وابحث عن التشعب.تعريض الشريان القذالي البعيد فقط عن التشعب. قم بالكي بين الملقط واستخدم الكي الكهربائي لفصله بالملقط. كشف التشعب السباتي بالكامل وأكبر قدر ممكن من الشريان السباتي الخارجي أو ECA.تعريض الشريان الغرقي العلوي المتفرع من ECA البعيد إلى الشريان القذالي. قم بالكي بين الملقط وفصله لقسطرة ECA. ضع طولين من أربعة حرير تحته.استخدم الإرقاء وامسك بطول واحد من الخيط وسحب المغنز الخلفي ECA بالخياطة الأخرى. اربطه بعقدة الجراح بأقصى قدر ممكن من الجمجمة ، بعيدا عن التشعب وقريبا من الرباط الدائم. اربط عقدة جراح آخر بشكل فضفاض لإرخاء الشريان.قم بريها ب 1٪ ليدوكائين ، املأ القسطرة بمحلول ملحي هيبارين. بعد ذلك ، ضع مشبك وعاء مؤقت بزاوية أقرب ما يمكن إلى التشعب. ثم حرك العقدة السائبة باتجاه المشبك باستخدام مقص صغير.قم بعمل قطع صغير في ECA بالقرب من الرباط. إذا كان المشبك والربط آمنا ، فلا ينبغي أن يكون هناك نزيف باستخدام الملقط. للتحكم في جدران ECA ، قم بتغذية الطرف المشطوف للقسطرة في الوعاء باستخدام عقدة الجراح السائبة.قم بتأمين القسطرة. اربط الشريان حول القسطرة ، ثم قم بإزالة المشبك واستخدم قطعة قطن لتنظيف المنطقة. تقدم القسطرة بحوالي ملليمتر واحد بعيدا عن التشعب.استخدم الملقط لتثبيت الشريان القريب من العقدة لضمان تثبيت الوعاء. لإدارة المانيتول. املأ مجموعة تمديد IV مقاس ثمانية بوصات وحقنة سعة ستة ملليلتر بالمانيتول دون إنشاء أي فقاعات هواء.قم بتخزينه عند 37 درجة مئوية لتصور اضطراب الحاجز الدموي الدماغي ، أو قم بإعطاء ملليغرامين لكل كيلوغرام من 2٪ إيفانز بلو من خلال موقع وريدي جديد على الساق مقابل ضخ البروبوفول. قم بتوصيل مجموعة الامتداد بمرشح خمسة ميكرون واملأها بالمينول لإزالة فقاعات الهواء. ثم قم بتثبيته على قضيب التوقف دون إنشاء فقاعات.قم بإدارة المانيتول بمعدل 0.09 مل في الثانية لمدة 25 ثانية ، راقب وصول المانيتول إلى التوازن مع التدفق في الشريان السباتي المشترك عند نقطة قريبة تماما من الشريان السباتي الداخلي ، يجب أن يبدو وكأنه ينبض مع معدل ضربات قلب الفئران. تأكد من أن المانيتول لا يتدفق نحو القلب ، مما يشير إلى أن التدفق قد تغلب على ضغط دم الفئران ويمكن أن يسبب مضاعفات خطيرة. يسمح اضطراب الحاجز الدموي الدماغي على جانب واحد من الدماغ للون إيفان الأزرق بالدخول وتلطيخ نصف الكرة الأرضية المعطل باللون الأزرق ، بينما يظل نصف الكرة غير التخريبي دون تغيير.يظهر هنا مثال على دماغ بدون اضطراب الحاجز الدموي الدماغي أو BBBD ، وهنا مثال على أدمغة ملطخة باللون الأزرق بعد BBBD التناضحي ، لاحظ أن نصف الكرة الأيمن ملطخ وأن بعض اللون الأزرق يدخل إلى نصف الكرة الأيسر بالقرب من الشق الطولي الإنسي نتيجة لاختلاط تدفق الدم في دائرة ويليس. تمهد هذه التقنية الطريق للباحثين لاستكشاف العلاجات التي لا تعبر الحاجز الدموي الدماغي في نموذج الفئران. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن تكون قادرا على تعطيل حاجز الدماغ غير الواضح عن طريق قسطرة الشريان السباتي وحقن محلول مانيتول مباشرة في الدماغ.

rat-model-blood-brain-barrier-disruption-to-allow-targeted

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

Microbubble بوساطة انقطاع الموجات فوق الصوتية وركزت على حاجز الدم في الدماغ (بي بي بي) هي تقنية واعدة لغير الغازية لتقديم الأدوية المستهدفة في...

التصوير بالرنين المغناطيسي موجهة تعطيل حاجز الدم في الدماغ باستخدام الموجات فوق الصوتية المركزة عبر الجمجمة في نموذج الفئران

في هذا الفيديو ، نصف بروتوكولا شاملا لإنشاء نموذج في المختبر يحاكي حاجز الورم الدموي في الدماغ. يبشر النموذج بفهم تقديم العوامل العلاجية لعلاج أورام الدماغ.

حاجز الورم الدموي في الدماغ أو نموذج BBTB: تكيف الحاجز الدموي الدماغي أو نموذج BBB لتقييم توصيل العلاجات للورم

إنشاء نماذج الإنسان من حاجز الدم في الدماغ (BBB) ​​يمكن أن تستفيد من البحث في الظروف الدماغ المرتبطة فشل BBB. نحن هنا وصف تقنية محسنة لإعداد نموذج BBB الاتصال، والذي يسمح coculturing من الخلايا النجمية والخلايا البطانية الإنسان الدماغ على طرفي نقيض من غشاء يسهل اختراقها.

تحسين طريقة لإعداد القائم على الخليوي، الاتصال نموذج الإنسان من حاجز الدم في الدماغ

كان الهدف من هذه الدراسة للتحقق من صحة استنساخ لنموذج BBB في المختبر تنطوي على الفئران مسانج شارك في ثقافة من الخلايا البطانية والخلايا النجمية. أحادي الطبقة الخلية البطانية قدم عالية ومنخفضة النفاذية طير LY. التعبير عن البروتينات TJ محددة، تم تقييم الاستجابات الوظيفية للالتهاب وظائف النقل والمستقبلات.

وضع ما يصل إلى<em&gt; في المختبر</em&gt; نموذج من الفئران حاجز الدم في الدماغ (BBB): التركيز على BBB عدم النفاذ والنقل مستقبلات بوساطة

نقدم هنا مقايسة نفاذية الأوعية الدموية الدماغ ماوس استخدام الحقن داخل لتتبع الفلورسنت تليها التروية التي تنطبق على نماذج حيوانية من اختلال وظيفي في حاجز الدم في الدماغ. يتم استخدام أحد نصفي الدماغ لتقييم نفاذية كمياً، وأخرى للتتبع التصور/إيمونوستينينج. يستغرق الإجراء 5-6 ح للفئران 10.

في فيفو حاجز الدم في الدماغ نفاذية مقايسة في الفئران باستخدام المسمى فلوريسسينتلي تتبع

والهدف العام من هذا الإجراء توفير تقنية عالية استنساخه في فيفو التقييم لتعطيل حاجز الدم في الدماغ في نماذج الفئران من السكتة الدماغية.

تقييم في فيفو لتعطيل حاجز الدم في الدماغ في نموذج الفئران من السكتة الدماغية

نقدم هنا بروتوكول وصف الإعداد سيلولو في بي بي بي (حاجز الدم في الدماغ)-إدراج الثقافة البوليستر مسامية الغشاء مينيبرين النظام بغية تقييم نقل الجزيئات الحيوية أو العوامل المعدية عبر BBB بشرية وعلى فسيولوجية تؤثر على خلايا المخ المجاورة.

نموذج واجهة دماغ دم البشري لدراسة نقاط عبور الحاجز بمسببات الأمراض أو الأدوية وتفاعلاتها مع الدماغ

المخدرات تستهدف لاورام الجهاز العصبي المركزي يشكل تحديا رئيسيا. هنا يصف لنا وضع بروتوكول لتنتج تقليد في المختبر الدم في الدماغ الورم-الحاجز باستخدام خلايا موريني و/أو البشرية ومناقشة أهميتها بالنسبة للقدرة على التنبؤ بورم في استهداف المجراة في الجهاز العصبي المركزي.

التنبؤ في فيفو حمولات التسليم استخدام ورم-حاجز دم في الدماغ في صحن

حاجز الدم في الدماغ (BBB) هو وحدة متعددة الخلايا العصبية الوعائية تنظم بإحكام التوازن الدماغي. من خلال الجمع بين iPSCs الإنسان والتكنولوجيات الجهاز على رقاقة، قمنا بتوليد رقاقة BBB شخصية، ومناسبة لنمذجة المرض وCNS التنبؤات اختراق المخدرات. يتم وصف بروتوكول مفصل لتوليد وتشغيل رقاقة BBB.

جيل من iPSC الإنسان القائم على الدم في الدماغ حاجز رقاقة

يصف هذا البروتوكول طريقة لإنشاء حاجز دموي دماغي بشري (BBB) في نموذج المختبر . يتم زرع الخلايا البطانية والخلايا المحيطة على كل جانب من جوانب مرشح الإدراج (حجرة الدم) ، ويتم زرع الخلايا النجمية في البئر السفلي (حجرة الدماغ). تم استخدام النموذج المميز لتجارب نقل الجسيمات النانوية.

نظام خلايا ثلاثي الثقافة نمذجة حاجز الدم والدماغ البشري

يلعب الحاجز الدموي الدماغي (BBB) دورا حاسما في الحفاظ على بيئة دماغية مستقرة وصحية. يرتبط خلل BBB بالعديد من الأمراض العصبية. لقد قمنا بتطوير نموذج 3D ، مشتق من الخلايا الجذعية من BBB للتحقيق في أمراض الأوعية الدموية الدماغية ، وسلامة BBB ، وكيف يتم تغيير BBB عن طريق علم الوراثة والمرض.

إعادة بناء الحاجز الدموي الدماغي في المختبر لنمذجة الأمراض العصبية واستهدافها علاجيا

تعلم كيفية تعطيل حاجز الدم في الدماغ في نموذج الفئران باستخدام المانيتول عن طريق القسطرة الشريانية. تُحسّن هذه الطريقة من توصيل الأدوية العلاجية إلى الدماغ وتُسهّل اختبار العلاجات الجديدة.

للسماح المستهدفة نموذج الفئران من تعطيل حاجز الدم في الدماغ التداوي عائي عصبي

استكشف المزيد من الفيديوهات