مظاهرة في الجرذان الدماغية الجلد الجرح نموذج

الهدف العام من هذا الإجراء هو إنشاء نموذج جرح إقفاري قابل للتكرار. يتم تحقيق ذلك من خلال استخدام أداة خزعة الثقب المعقمة أولا لإنشاء جرحين إقفاريين استئصاليين داخل خط السديلة المعين على ظهر الفئران. بعد ذلك ، يتم إنشاء رفرف ثنائي عنيق عن طريق عمل شقين على طول الخطوط المرسومة مسبقا بشكل جانبي للجرحين الإقفاريين.

ثم يتم رفع السديلة ثنائية العنق وتوضع ورقة سيليكون معقمة بين اللفافة والعضلات لدعم الجروح ومنع إعادة نمو الأوعية الدموية. أخيرا ، يتم إغلاق كلا الشقوق ويتم إنشاء جروحين للتحكم الاستئصالية غير الإقفارية بشكل جانبي لخطوط الخياطة. في النهاية ، يتم استخدام التصوير الرقمي لإظهار التغييرات في حجم الجرح بمرور الوقت.

يستخدم دوبلر الليزر لإظهار التغيرات في تدفق الدم ، وأخيرا ، يتم حصاد أنسجة الجرح لعلم الأنسجة والتحليل الجزيئي. الميزة الرئيسية لهذه التقنية على الطرق الحالية مثل رفرف ماكفارلاند ، هي أنها نموذج قابل للتكرار لنقص التروية المستمر مع الجروح المفتوحة التي يمكن أن تضيف عوامل موضعية ويمكن دراستها باستخدام كل من علم الأنسجة والتحليل الجزيئي. العرض المرئي لهذه الطريقة أمر بالغ الأهمية.

يصعب إلى حد ما تعلم خطوات استئصال الجرح ووضع الخيط. من السهل جعل الجروح عميقة جدا ويجب خياطة الشقة دون تشويه الجروح. لبدء شرائط مقطوعة مسبقا من غش سيليكون طبي غير مقوى بسمك 0.01 للأوتوكلاف لتعقيم وتنظيف وتعقيم الأدوات الجراحية المناسبة بما في ذلك المقص والملقط والستائر أو المناشف لإنشاء مجال معقم أثناء الجراحة.

بعد إحداث تخدير عام على فأر بالغ من الذكور أو الأنثى ، يزن 250 إلى 300 جرام وفقا لبروتوكول النص. قم بإجراء قرصة إصبع القدم للتحقق من عمق التخدير وتطبيق مخروط الأنف الذي يمد واحدا إلى 2٪ من الفلور بالأكسجين للحفاظ على التخدير ، ضع الجرذ في وضع الانبطاح واستخدم المقص لحلق الظهر من قاعدة الرقبة لأسفل حوالي 11 سم باستخدام استنسل علامة دائم. الخطوط العريضة للرفرف 3.0 سم × 10.5 سم.

انقل الجرذ إلى منطقة جراحية نظيفة ومجهزة بوسادة تدفئة معتمدة وستائر أو مناشف جراحية معقمة. حقن خمسة ملليغرام لكل كيلوغرام من الكيتوبروفين تحت الجلد قبل الشقوق الجراحية الأولى. لإدارة الألم.

استخدم كحول الأيزوبروبيل بنسبة 70٪ لمسح الجلد. ثم 0.2٪ كلورهيكسيدين ، ثم قم بتطبيق ستائر معقمة لإنشاء حقل معقم باستخدام أداة ثقب خزعة معقمة يمكن التخلص منها بحجم ستة ملليمترات. قم بإنشاء جرحين إقفاريين دائريين في وسط منطقة السديلة المخصصة التي تصل إلى اللفافة الأساسية لعضلة panus carno.

باستخدام الملقط ، ارفع الجلد في منتصف مخطط الجرح ثم استخدم مقص القزحية بأطراف منحنية لاستئصال القطعة الدائرية من الأنسجة ، بما في ذلك عضلة بانوس كارنو. ستكون النتيجة جرحا بسماكة كاملة مع اللفافة كقاعدة للجرح. بعد ذلك ، باستخدام مشرط معقم ، قم بإنشاء رفرف ثنائي عنيق عن طريق عمل شقوق على طول خطوط ترون بطول 10.5 سم ومسافة 3.0 سم ، وإلى عمق العضلات الطفيلية على كل جانب من الجروح الإقفارية.

ثم باستخدام مقص القزحية ، افصل اللفافة panus carno عن العضلات الطفيلية ، مع الحرص على الحفاظ على اللفافة سليمة كقاعدة لللكمات الستة ملليمترات. ضع ورقة سيليكون معقمة مقطوعة مسبقا بين اللفافة البانوس كارنو والعضلات الشبابية ، مع التأكد من عدم التواء الورقة أو طيها باستخدام خيوط سوداء غير قابلة للامتصاص 4.0. أغلق كلا الشقوق عن طريق تثبيت لوح السيليكون على الجلد بثماني غرز متقطعة على الأقل على كل جانب على طول السديلة.

ثم باستخدام أداة ثقب الخزعة المعقمة التي تستخدم لمرة واحدة ، قم بإنشاء جرحين غير إقفاريين للتحكم الداخلي ، سنتيمتر واحد جانبي للجروح الإقفارية على جانبي السديلة. ضع مسطرة أسفل الجروح والتقط صورا رقمية لأغراض قياس الجرح. استخدم دوبلر بالليزر لمراقبة تدفق الدم أو إجراء العلاجات الدوائية الموضعية حسب الرغبة.

ضع مادة لاصقة سائلة معتمدة ، سواء كانت في الجمجمة أو تدلل على الجروح وضمادة شفافة للحفاظ على بيئة الجرح رطبة ونظيفة. ضع ضمادة إضافية في نهاية الليلة من السديلة لمنع من إزالة الغرز الأكثر دللا. بعد الجراحة ، ضع بمفرده في قفص مجهز بوحدة تغذية ضحلة لمنع موقع الجراحة من الاحتكاك بوحدة التغذية.

ضع وسادة تدفئة تحت نصف القفص لمدة تصل إلى يومين أثناء التعافي. عندما يستعيد وعيه الكافي للحفاظ على الرقيق القصي ويظهر حركة هادفة ، أعده إلى صحبة الأخرى لإدارة الألم بعد الجراحة في صباح اليوم التالي للجراحة ، وإعطاء خمسة ملليغرام لكل كيلوغرام من الكيتوبروفين تحت الجلد والمتابعة مرة واحدة يوميا لمدة تصل إلى 48 ساعة بعد الجراحة. يجب أيضا مراقبة يوميا بحثا عن علامات الألم لفترات طويلة أو فقدان الوزن أو التهابات الموقع لقياس الجروح الإقفارية وغير الإقفارية.

بعد تخدير كما هو موضح سابقا في الفيديو ، قم بإزالة الضمادة برفق حتى لا تسحب المادة اللاصقة من الجلد. التقط صورا رقمية لقياسات الجروح وقم بإجراء تصوير دوبلر بالليزر. إذا رغبت في ذلك ، فأعد تطبيق العلاجات الموضعية بما في ذلك الضمادات اللاصقة والنظيفة ، واسمح للحيوان بالتعافي كما كان من قبل لحصاد الجروح الإقفارية وغير الإقفارية.

بعد تخدير ، استخدم مشرطا لعمل شق مربع الشكل حول الجرح ليشمل بعض الأنسجة السليمة ، واستئصال الجرح والأنسجة السليمة ، ووضع الاستئصال في أنبوب غطاء مفاجئ سعة 1.5 مل وقم بالتجميد في النيتروجين السائل للتحليل الجزيئي في المستقبل أو نقله إلى فورمين مخزن بنسبة 10٪ واحتضانه طوال الليل في درجة حرارة الغرفة للمعالجة النسيجية. منذ تطوير هذا النموذج ، تم استخدام التصوير بالليزر دوبلر بشكل متزايد لقياس نضح الدم ، وستوفر هذه التقنية معلومات كافية حول الحالة الإقفارية للسديلة ثنائية العنق. يوضح هذا الشكل صورة دوبلر للرفرف الظهري ثنائي العنق يظهر كلا من المنطقة المنفوخة والمنطقة غير المنفوخة.

لأغراض هذا العرض التوضيحي ، يتم تمثيل تقدم إغلاق الجرح كنسبة مئوية من مساحة الجرح الأولية على مدار زمني مدته 28 يوما. كما هو موضح هنا في الصورة J ، تم فتح صورة رقمية وتم ضبط المقياس على 10 ملليمترات. على المسطرة ، يعادل الخط المرسوم بطول 10 ملليمترات عدد البكسل ، والذي يمكن تحويله إلى وحدة اختيار في هذه الحالة المليمترات.

ثم يتم تتبع محيط الجرح ، ومن خلال إعطاء أمر القياس ، يتم تقديم المنطقة بالمليمترات كما هو موضح. في هذا الرسم البياني ، يمكن تقديم البيانات كنسبة مئوية من مساحة الجرح الأولي على المحور Y والأيام على المحور x. بمجرد إتقانها ، يمكن تنفيذ هذه التقنية في حوالي 20 دقيقة إذا كانت بشكل صحيح. منجز.

أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر مرة أخرى خياطة السديلة دون شد الجروح. إذا تم تشويه الجروح إلى شكل بيضاوي ، فسوف تلتئم بسرعة أكبر من الجروح المستديرة مما يؤدي إلى تباين في نتائج الشفاء.