تقييم على أساس النشاط فقدان الشهية في الفئران

الهدف العام من هذه التجربة هو فحص البيولوجيا العصبية والسلوك الكامن وراء فقدان الشهية العصبي. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال الطب النفسي المتعلقة باضطرابات الأكل مثل الأسس العصبية لفقدان الشهية العصبي ، وما هي دوائر الدماغ المعنية. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكن استخدامها لدراسة بعض الآليات الأساسية لفقدان الشهية ، والتي لا يمكن تقييمها في البشر.

قم بإعداد منطقة تجريبية عن طريق اختيار رف قفص بالقرب من الكمبيوتر المحمول ومحاور العجلات. سيؤدي ذلك إلى الحد من المشكلات المتعلقة بنقل البيانات. الآن قم بتنشيط الاتصال بين محاور العجلات والبرنامج.

افتح أولا برنامج إدارة العجلات للتأكد من أن كلا المحورين اللاسلكيين نشطان. من البرنامج إعادة تعيين توصيلات العجلات الافتراضية. افتح الأدوات وحدد حذف العجلات.

كرر هذه الخطوة خمس مرات ثم أغلق البرنامج وأعد فتحه. بعد ذلك ، قم بتوفير الطاقة للعجلات. قم بتوصيل أسلاك حزمة البطارية بأجهزة العجلة وأدخل البطاريات في قاعدة العجلات.

ثم ألق نظرة على البرنامج. يجب إدراج قاعدة العجلات مع معرف واحد أسفل المحور اللاسلكي المناسب. إذا لم يكن الأمر كذلك ، فقم بفك حزمة البطارية ، واحذف العجلة في البرنامج ، وحاول مرة أخرى.

إذا تم التعرف على العجلة ، فاستبدل المعرف بمعرف المناسب.بعد ذلك ، قم بلصق قاعدة عجلة الجري في الجزء السفلي من القفص بشريط لاصق لضمان الاستقرار. لا تسمح لأي شريط لاصق بالخروج لأن الفئران ستمضغ الشريط المكشوف. بعد ذلك ، ضع قرصا لعجلة الجري بدون مغناطيسي متآكل على القاعدة وقم بتدوير العجلة للتحقق من الخلوص من جدران القفص والشبكة.

قم بتدوير القرص وتحقق من تسجيل كل ثورة بشكل صحيح مع البرنامج. بعد ذلك ، استخدم شريطا لاصقا لتثبيت جرة الطعام في القفص. ضعه بعيدا عن عجلة التشغيل وزجاجة الماء.

ثم ضع قطعتين من الطعام في البرطمان ، وقم بتوصيل زجاجة ماء كاملة بالقفص ، وأضف الفراش إلى قاع القفص. بعد تحضير جميع الأقفاص بهذه الطريقة ، ضع الفئران بشكل فردي في أقفاصها المناسبة. بمجرد أن تكون جميع الفئران في أقفاصها ، انتقل إلى البرنامج وانقر على ملف ، ثم ابدأ الاستحواذ.

خلال التجربة ، ابدأ عمليات استحواذ جديدة لتفكيك مراحل التجربة. الآن دع الفئران تتأقلم مع ظروف السكن لمدة يومين كاملين. خلال هذه المرحلة ، حدد ما إذا كان كل فأر يتمتع بصحة جيدة بما يكفي للتعامل مع تجربة ABA.

في اليوم الثالث من التجربة ، قم بقياس حوالي تسعة جرامات من الطعام وسجل الوزن إلى 1/1000 جرام. بعد ذلك ، قم بإزالة الماوس بعناية من القفص ووزنه في دورق بلاستيكي كبير إلى وأقرب عشر جرام. افعل ذلك بأقل قدر من الضغط على الماوس.

مع إخراج الماوس من القفص ، ابحث عن كل الطعام في القفص وقم بإزالته. إلى جانب إزالة الطعام في البرطمان ، ابحث من خلال الفراش عن طعام متناثر. بعد ذلك ، إذا لزم الأمر ، قم بتنظيف عجلة الجري باستخدام 70٪ من الأيزوبروبانول والمناشف الورقية.

قبل إعادة الفأر إلى قفصه ، تأكد من جفاف الأيزوبروبانول. ثم قم بتحميل الماوس وتسعة جرامات من الطعام في القفص. في اليوم التالي ، عد إلى منشأة في غضون 10 دقائق من الزيارة الأخيرة.

مرة أخرى قم بتحميل تسعة جرامات من الطعام في دورق بلاستيكي صغير وسجل الوزن الدقيق. مرة أخرى ، قم بإزالة الماوس برفق ووزنه بأقل ضغط على الماوس. الآن أخرج جرة الطعام من القفص وتحقق منها.

قم بإزالة أي براز بالملاقط واستخدم مصفاة فوق الدورق لإزالة الفراش. قم بتفتيت قطع الطعام الكبيرة حتى تمر عبر الفلتر مع ترك الفراش فقط في المصفاة. ثم ابحث في فراش القفص عن بقايا الطعام وأضفها إلى الدورق

ثم سجل كتلة الطعام المتبقي في القفص. بعد ذلك ، امسح البرطمان نظيفا وأعده إلى القفص فارغا. ضع شريطا جديدا إذا لزم الأمر.

ثم قم بتحميل البرطمان بالحصة الغذائية المحضرة من تسعة جرام. كما كان من قبل ، قم بتنظيف أي عجلات تشغيل متسخة وإعادتها إلى الأقفاص. أعد ضبط جميع الأقفاص بهذه الطريقة كل يوم.

في الأيام الخامسة والسابعة والتاسع ، أعد تشغيل الحصول على بيانات الكمبيوتر في برنامج تشغيل العجلة. بعد جمع بيانات خط الأساس، في اليوم 11، أعد تشغيل الحصول على البيانات وابدأ مرحلة التقييد. في الأساس ، اتبع بروتوكول خط الأساس مع بعض التغييرات.

أولا ، لا تقم بمسح عجلات التشغيل عند تغيير الطعام. ثانيا ، قلل من وصول إلى حصتها الغذائية التي تبلغ تسعة جرامات إلى ست ساعات فقط. يمكن أن تكون فترة التغذية نهارية أو ليلية.

كلا الخيارين لهما ميزة. بعد ست ساعات ، قم بوزن الطعام المتبقي في البرطمان والقفص. في هذه المرحلة ، إذا لزم الأمر ، قم بتنظيف العجلة ، ولكن افعل ذلك بسرعة حتى يمكن الاهتمام بالقفص التالي بسرعة.

في كل يوم من مراحل التقييد ، كرر هذا الإجراء. الآن أصبح من المهم جدا مراقبة فقدان وزن. إذا انخفض الفأر إلى 75٪ من وزن جسمه الأساسي ، فقم بإزالته من التجربة.

قدم لهذه الفئران طعاما غير محدود من أرضية القفص ولا يمكن الوصول إلى عجلة الجري. بعد تقييم جميع الأقفاص ، قم بالقتل الرحيم للفئران التي تم إسقاطها ما لم تتم دراسة تعافيها. باستخدام التجربة الموصوفة ، تم تقييم مجموعة من الفئران المصابة بفقدان الشهية القائمة على النشاط جنبا إلى جنب مع ثلاث مجموعات تحكم.

بعد الإجراء الموصوف ، اقتصر الطعام على ست ساعات نهارية. عندما تم إسقاط فأر من الدراسة بسبب فقدان الوزن المفرط ، كان فأر التحكم الذي تم اختياره عشوائيا أيضا. تم تقليل وزن الجسم في الأيام من الأول إلى الخامس في كلتا المجموعتين المعرضتين للتغذية المجدولة ، وهذا يرتبط منطقيا بانخفاض تناول الطعام.

من الغريب أن فقدان الوزن لم يكن له أي تأثير على نشاط تشغيل العجلة. بعد دراسة السلوك ، تم حصاد الأدمغة وتجميدها للتحليل الكيميائي الحيوي. أظهر أحد التحليلات للأنسجة من المنطقة السقيفية البطنية أن العجلة التي تعمل تزيد بشكل كبير من تعبير BDNF بينما أدى تقييد الطعام إلى زيادة تعبير NCAM1 MRNA ولكنه لم يغير تعبير BDNF MRNA.

أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر الحد من الضغط على الفئران ، وأن تكون متسقا في توقيت قياساتك ، والتحلي بالصبر حتى تحصل على قراءات دقيقة ، وتحقق باستمرار من برنامج تشغيل العجلة بحثا عن أي مشكلات فنية. باتباع هذا الإجراء ، يمكن إجراء طرق أخرى مثل الكيمياء المناعية والربط الإشعاعي على أدمغة الفئران من أجل الإجابة على أسئلة إضافية تتعلق بوظيفة الفيروس في نموذج فقدان الشهية.