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Studying DNA and RNA

DNA Probe Labels for Detecting Targets

Description

DNA probes are short DNA fragments with a reporter tag attached so they can be detected or purified. They bind to matching nucleic acid sequences by complementary base-pairing. That binding helps researchers recover or identify specific regions of DNA.

Several reporter tags are commonly used to l...

Transcript

假设一个实验的目标是确定某种特定基因在细菌基因组中是否存在。如何在复杂的基因组DNA中检测到如此微小的核酸序列?

DNA探针可用于实现这一目的——这些探针是与目标核酸序列互补的单链DNA分子,并带有可检测的标记分子。

DNA探针最常用的标记物包括放射性同位素(如磷-32)、荧光素(如异硫氰酸荧光素)以及小分子结合伴侣(如生物素和地高辛)。

这些标记物可在DNA探针合成后通过化学方法引入,或在合成过程中通过以下两种方法之一进行掺入。

在末端标记法中,探针DNA序列5’或3’末端存在的核苷酸的羟基或磷酸基团会与目标化学基团或标记物发生共价结合。

对于内部标记,缺口平移法利用DNase酶在一条DNA链上产生一个小缺口,随后...

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