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Visualizing Cells, Tissues, and Molecules

Sharper Cell Images with Fluorescence Microscopy

Description

Super-resolution fluorescence microscopy gives sharper images than standard fluorescence microscopy by reducing the point spread function, or PSF. The PSF is the light pattern from a point source that makes it look blurred. Because of this blur, each fluorescent spot appears larger than it really is. Nearby fluorophores can ...

Transcript

传统的荧光显微镜只能分辨相距超过200 nm的结构。这是因为在显微镜下,光的衍射使得荧光分子呈现为模糊的光斑,而非清晰的点状结构。因此,当物体彼此非常接近时,它们的图像会发生重叠。

因此,科学家们开发了超分辨率技术,能够提供更高的分辨率,以对更小的亚细胞结构进行成像。这些技术通过使用特定模式的光来激发样本中的荧光基团,从而突破衍射极限。

例如,结构光照明显微镜采用条纹图案,然后旋转该图案以捕获多幅图像。这些图像被合并,形成干涉图样,并通过计算处理生成最终图像。

受激发射损耗显微镜利用两束激光生成图像。一束主激光激发样品,同时一束环形光束抑制其周围的荧光,从而使荧光点显得更小。

其他技术通过使用可逆开关的荧光探针来避免信号重叠。每幅...

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